CN105132147A - 一种用固定化磷脂酶c对大豆油脱胶的方法 - Google Patents

一种用固定化磷脂酶c对大豆油脱胶的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105132147A
CN105132147A CN201510393824.4A CN201510393824A CN105132147A CN 105132147 A CN105132147 A CN 105132147A CN 201510393824 A CN201510393824 A CN 201510393824A CN 105132147 A CN105132147 A CN 105132147A
Authority
CN
China
Prior art keywords
oil
certain amount
immobilized
unstuck
phospholipase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510393824.4A
Other languages
English (en)
Inventor
于殿宇
刘天一
刘丹怡
江连洲
王立琦
王文华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northeast Agricultural University
Original Assignee
Northeast Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northeast Agricultural University filed Critical Northeast Agricultural University
Priority to CN201510393824.4A priority Critical patent/CN105132147A/zh
Publication of CN105132147A publication Critical patent/CN105132147A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)

Abstract

本发明提供一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法。脱胶就是脱除大豆油中的磷脂，磷脂主要分为水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂具有亲水性，可通过水化方法脱除，而非水化磷脂具有明显的疏水性，是以磷脂酸(PA)和溶血磷脂酸的钙镁盐的形式存在的，较难除去。而磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分；用该方法得到大豆油磷含量约在15.61mg/kg、1,2-甘油二酯(DAG)增加率为1.25％。因此，采用磷脂酶C脱胶，既能实现物理精炼，又可减少毛油炼耗，提高精炼率。

Description

一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法
技术领域：
本发明涉及一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法。
背景技术：
油脂是人类生存不可缺少的食品，油脂加工业也备受关注，随着油脂工业的发展及人们对油脂加工原理的进一步认识，油脂加工技术有了新进展。在油脂加工工业中，油脂脱胶一直是人们关注的焦点之一，脱胶就是脱除油中的胶溶性杂质，主要成分是磷脂。磷脂主要分为水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂可通过传统的水化脱胶方法除去，但非水化磷脂具有显著的疏水性，很难脱除。而传统的脱胶方法主要有水化脱胶、酸炼脱胶、吸附脱胶、超滤脱胶和酶法脱胶。在这些脱胶工艺中，酶法脱胶以其良好的经济环保性能受到越来越多的重视。由于磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分；因此，采用磷脂酶C脱胶，既能实现物理精炼，又可减少毛油炼耗，提高精炼率。
发明内容
为了克服常规脱胶法生产脱胶油的缺陷，适应现代技术发展，满足市场的需求，我们提出了一种经过改进的脱胶工艺。
本发明的步骤如下：
步骤一：磷脂酶C的固定化；
步骤二：固定化磷脂酶C脱胶油相中起始pH值的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，pH在为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在一定的时间、温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定油相中起始pH值；
步骤三：脱胶时间的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶时间，0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，在一定的温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶时间；
步骤四：脱胶温度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶温度，40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃，在一定的搅拌速度下反应确定的时间，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶温度；
步骤五：固定化酶添加量的确定，取一定量的水化脱胶油，调至最适油相中起始pH值，固定化酶添加量为0.06g/Kg、0.08g/Kg、0.10g/Kg、0.12g/Kg、0.14g/Kg、0.16g/Kg，在确定的时间、确定的温度以及一定的搅拌速度下进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定固定化酶添加量；
步骤六：搅拌速度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入确定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的搅拌速度100r/min、150r/min、200r/min、250r/min、300r/min、350r/min，在确定的时间、确定的温度下行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定搅拌速度。
本发明的有益点是：
1、采用固定化方法处理磷脂酶，使其稳定性增强，提高其对反应环境的适应能力，同时解决了酶的一次性使用和产物分离纯化难等问题；
2、磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分，甘油二酯是一种生理活性物质，能影响细胞的代谢，是细胞信号传导途径上的第二信使。因此，采用磷脂酶C脱胶，既能实现物理精炼，又可减少毛油炼耗，提高精炼率。
本发明的关键是脱胶条件的确定，包括油相中起始pH值、脱胶时间、温度、固定化酶添加量及搅拌速度。按照最佳工艺参数试验，得到脱胶油，测其磷含量约在15.61mg/kg、1,2-甘油二酯(DAG)增加率为1.25％。
具体实施方式：
具体实施方式一：本实施方式的步骤如下：
步骤一：磷脂酶C的固定化；
称取一定量的海藻酸钠于40℃水浴保温溶解，同时称取一定量的壳聚糖于5％的醋酸溶液中，40℃水浴保温溶解,再向完全溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，充分混匀。称取一定量的磷脂酶C，加入到10mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180r/min转速搅拌，将其置于4℃环境固定化10h；
步骤二：固定化磷脂酶C脱胶油相中起始pH值的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，pH在为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在一定的时间、温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定油相中起始pH值；
步骤三：脱胶时间的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶时间，0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，在一定的温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶时间；
步骤四：脱胶温度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶温度，40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃，在一定的搅拌速度下反应确定的时间，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶温度；
步骤五：固定化酶添加量的确定，取一定量的水化脱胶油，调至最适油相中起始pH值，固定化酶添加量为0.06g/Kg、0.08g/Kg、0.10g/Kg、0.12g/Kg、0.14g/Kg、0.16g/Kg，在确定的时间、确定的温度以及一定的搅拌速度下进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定固定化酶添加量；
步骤六：搅拌速度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入确定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的搅拌速度100r/min、150r/min、200r/min、250r/min、300r/min、350r/min，在确定的时间、确定的温度下进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定搅拌速度；
具体实施方法二：本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤二中选择不同的油相中起始pH值6.5-7.5，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
具体实施方法三：本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤三中选择不同的脱胶时间2.0-3.0h，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
具体实施方法四：本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤四中选择不同的脱胶温度45℃-55℃，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
具体实施方法四：本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤五中选择不同的固定化酶添加量0.12-0.16g/Kg，其它组成和步骤与具体实施方法一相同；
具体实施方法五：本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤六中选择不同的搅拌速度200-300r/min，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。

Claims (6)

1.一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法，其特征在于它的步骤如下：
步骤一：磷脂酶C的固定化；
称取一定量的海藻酸钠于40℃水浴保温溶解，同时称取一定量的壳聚糖于5％的醋酸溶液中，40℃水浴保温溶解,再向完全溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，充分混匀；称取一定量的磷脂酶C，加入到10mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180r/min转速搅拌，将其置于4℃环境固定化10h；
步骤二：固定化磷脂酶C脱胶油相中起始pH值的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，pH在为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在一定的时间、温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定油相中起始pH值；
步骤三：脱胶时间的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶时间，0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，在一定的温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶时间；
步骤四：脱胶温度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶温度，40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃，在一定的搅拌速度下搅拌确定的时间进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶温度；
步骤五：固定化酶添加量的确定，取一定量的水化脱胶油，调至最适油相中起始pH值，固定化酶添加量为0.06g/Kg、0.08g/Kg、0.10g/Kg、0.12g/Kg、0.14g/Kg、0.16g/Kg，在确定的时间、确定的温度以及一定的搅拌速度下进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定固定化酶添加量；
步骤六：搅拌速度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入确定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的搅拌速度100r/min、150r/min、200r/min、250r/min、300r/min、350r/min，在确定的时间、确定的温度下行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2-甘油二酯(DAG)增加率，确定搅拌速度。
2.根据权利要求1所述的一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法的研究，其特征在于步骤二中选择油相中起始pH值为7.0。
3.根据权利要求1所述的一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法的研究，其特征在于步骤三中选择脱胶时间2.5h。
4.根据权利要求1所述的一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法的研究，其特征在于步骤四中选择脱胶温度50℃。
5.根据权利要求1所述的一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法的研究，其特征在于步骤五中选择固定化酶添加量0.14g/Kg。
6.根据权利要求1所述的一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法的研究，其特征在于步骤六中选择搅拌速度250r/min。
CN201510393824.4A 2015-07-07 2015-07-07 一种用固定化磷脂酶c对大豆油脱胶的方法 Pending CN105132147A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510393824.4A CN105132147A (zh) 2015-07-07 2015-07-07 一种用固定化磷脂酶c对大豆油脱胶的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510393824.4A CN105132147A (zh) 2015-07-07 2015-07-07 一种用固定化磷脂酶c对大豆油脱胶的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105132147A true CN105132147A (zh) 2015-12-09

Family

ID=54717726

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510393824.4A Pending CN105132147A (zh) 2015-07-07 2015-07-07 一种用固定化磷脂酶c对大豆油脱胶的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105132147A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109456837A (zh) * 2018-09-30 2019-03-12 东北农业大学 一种连续酯化米糠毛油中游离脂肪酸及脱除产物中水分的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102634411A (zh) * 2012-03-28 2012-08-15 江南大学 一种磷脂酶催化的大豆油脱胶方法
CN102807917A (zh) * 2012-07-18 2012-12-05 东北农业大学 一种用固定化磷脂酶c脱胶的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102634411A (zh) * 2012-03-28 2012-08-15 江南大学 一种磷脂酶催化的大豆油脱胶方法
CN102807917A (zh) * 2012-07-18 2012-12-05 东北农业大学 一种用固定化磷脂酶c脱胶的方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109456837A (zh) * 2018-09-30 2019-03-12 东北农业大学 一种连续酯化米糠毛油中游离脂肪酸及脱除产物中水分的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2676412C (en) Enzymatic degumming utilizing a mixture of pla and plc phospholipases
CN102807917A (zh) 一种用固定化磷脂酶c脱胶的方法
CN104194930A (zh) 一种用磁性固定化磷脂酶a2脱胶的方法
CN102586011B (zh) 一种利用磷脂酶a2进行植物油脂脱胶的方法
CN104560387A (zh) 一种固定化磷脂酶a1和固定化磷脂酶c联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法
CN104593145A (zh) 一种固定化磷脂酶c和固定化磷脂酶a1联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法
CN104629909B (zh) 一种植物油脱胶方法
CN104651040A (zh) 一种浓香菜籽油酶法脱胶的方法
CN102634411A (zh) 一种磷脂酶催化的大豆油脱胶方法
CN103773603A (zh) 酶法脱胶物理精炼大豆毛油同步制取大豆浓缩磷脂的方法
CN101485366A (zh) 一种用固定化磷脂酶a1精炼菜籽毛油的方法
CN102851115B (zh) 一种油脂脱胶的工艺方法
US20170058234A1 (en) Composition for the enzymatic degumming of oil
WO2017219964A1 (zh) 提取微生物油脂的方法
CN105154219A (zh) 一种米糠油精炼工艺
CN106318985A (zh) 微生物油脂
CN109694776A (zh) 植物油脱胶的方法
CN111349512B (zh) 一种高酸价米糠油酶法脱胶的方法
CN103734361B (zh) 一种由棉籽油分提产物改性制备的结构脂质及其制备方法
CN102776066A (zh) 一种用固定化磷脂酶a2脱胶的方法
CN109082345B (zh) 一种一步转化高磷脂毛油生产脂肪酸的方法
Dijkstra Enzymatic degumming
CN105400837B (zh) 一种酶催化甘油二酯的制备方法
CN105602718A (zh) 一种磁性固定化磷脂酶c和磁性固定化磷脂酶a1连用对大豆毛油进行脱胶的方法
CN102925288A (zh) 一种水飞蓟籽油的脱胶方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20151209