CN105103968B - 一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法 - Google Patents

一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105103968B
CN105103968B CN201510570474.4A CN201510570474A CN105103968B CN 105103968 B CN105103968 B CN 105103968B CN 201510570474 A CN201510570474 A CN 201510570474A CN 105103968 B CN105103968 B CN 105103968B
Authority
CN
China
Prior art keywords
stock
grafting
pears
tissue
scion
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201510570474.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105103968A (zh
Inventor
王然
杨英杰
宋健坤
黄曼娜
李志军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Agricultural University
Original Assignee
Qingdao Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Agricultural University filed Critical Qingdao Agricultural University
Priority to CN201510570474.4A priority Critical patent/CN105103968B/zh
Publication of CN105103968A publication Critical patent/CN105103968A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105103968B publication Critical patent/CN105103968B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G2/00—Vegetative propagation
    • A01G2/30—Grafting

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法，其包括以下步骤：于增殖培养基上培养高度、粗度、生长势达到嫁接要求的梨组培苗，选择高2厘米至3厘米、生长健壮一致的组培苗，在无菌条件下，于顶部斜切去头作为砧木；选择与砧木生长势相近的组培苗作为接穗，于基部斜切留梢；将砧木顶部斜切面和接穗基部斜切面紧密靠在一起，用塑料套管固定嫁接部位形成嫁接苗，再将嫁接苗接种于培养基中，在25℃±2℃，每天光照十二小时，黑暗十二小时条件下进行嫁接口愈合的同时也进行生根培养。避免了植物材料的木质化对筛选优质砧木、嫁接亲和砧穗组合的限制，具有材料一致性好，出苗量大，嫁接苗培养周期短，成活率高，占用空间少等优点。

Description

一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法
技术领域
本发明涉及微嫁接技术，尤其涉及一种提高梨微嫁接成活率、缩短嫁接苗培养周期的一步法完成梨微嫁接并生根的方法。
背景技术
嫁接具有改良作物品种生长表现等作用，以达到提早结果、调整生长势、增强适应性、回避病虫害、提高产量和品质、恢复树势等目的，因而被广泛应用于梨等果树作物中。但由于木本植物本身的特性，限制了对梨等果树优质多抗砧木品种及种质的规模化快速筛选，嫁接亲和性砧穗组合的快速筛选，以及嫁接愈合及砧穗互作机理的深入研究。
微嫁接是一种植物组织培养与嫁接相结合的技术，避免了植物材料的木质化对优质砧木、嫁接亲和砧穗组合的筛选，嫁接愈合及砧穗互作机制深入研究的限制，且具有材料一致性好，出苗量大，占用空间少等优点。但现有技术中的微嫁接技术操作繁琐，培养周期长，嫁接口愈合率低，造成梨嫁接苗木的成活率低。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明提供的一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法，在提高梨嫁接苗木成活率的基础上，缩短梨微嫁接成苗时间。
为解决上述技术问题，本发明技术方案包括：
一种提高梨微嫁接成活率的方法，其包括以下步骤：
A、选择高2厘米至3厘米、生长健壮一致的梨组培苗作为砧木，在无菌条件下，于顶部斜切去头，切面长度为0.3厘米至0.7厘米，留1.5厘米至2.5厘米茎段，摘除砧木底部侧芽；
B、选择与砧木生长势相近的组培苗作为接穗，于基部斜切，接穗顶部留2片-4片幼叶，切面长度为0.3厘米至0.7厘米，保证接穗基部与砧木顶部斜切面相吻合；
C、将砧木顶部斜切面和接穗基部斜切面靠在一起，然后用塑料管固定嫁接部位形成嫁接苗，再将嫁接苗接种在pH值为5.8-6的1/2MS+NAA 0.5mg·L-1+30g蔗糖+7-8g琼脂培养基上，在25℃±2℃的条件下培养，培养的光照强度为1500x-2000lx，每天光照条件下培养十二小时，然后在黑暗条件下培养十二小时，在嫁接口愈合的同时进行生根培养。
所述的方法，其中，上述步骤A之前还包括：
将梨组培苗培养在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+40g蔗糖+7-8g琼脂上，在pH值为5.8-6的条件下培养25天-30天，以备挑选砧木与接穗。
所述的方法，其中，该方法还包括步骤D：将步骤C中生根30天至40天的嫁接苗于驯化室驯化3天-4天后，移栽于育苗基质中培养，按常规栽培方式栽培。
本发明提供的一种提高梨微嫁接成活率的方法，通过生长素与细胞分裂素的合理添加、蔗糖浓度的适当提高可以对植株高度及茎干粗度有一定的促进作用，便于微嫁接操作；嫁接过程中使用‘套管微嫁接技术’，操作简单，固定效果好，可以及时观察到嫁接口的愈合情况和排除死嫁接苗；嫁接后通过生根培养基使植株生根的同时进行嫁接口愈合的诱导，诱导生根可以增强植株对营养物质吸收的能力，对嫁接口的愈合有促进作用；所有操作避免了植物材料的木质化对筛选优质砧木、嫁接亲和砧穗组合的限制，具有材料一致性好，出苗量大，嫁接苗培养周期短，成活率高，占用空间少等优点。
具体实施方式
本发明提供了一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供了一步法完成梨微嫁接并生根的方法，本方法嫁接成活率为95.27％，嫁接愈合与生根一步完成的效率为87.23％，分别高于传统嫁接中80％与56％的成活率，其包括以下步骤：
步骤101：选择生长健壮一致的梨组培苗，在无菌条件下，将该梨组培苗作为砧木并将该砧木去头，留1.5厘米至2.5厘米的茎段，摘除砧木底部侧芽，沿砧木顶部斜切，切面长度为0.3厘米至0.7厘米；
步骤102：选择长度为1.5厘米至2.5厘米的梨组培苗作为接穗，接穗的粗度与砧木相近，接穗的顶部留2片-4片幼叶，并将接穗基部斜切，切面长度为0.3厘米至0.7厘米，使接穗基部斜切与砧木顶部斜切相吻合；
步骤103：将砧木顶部斜切面和接穗基部斜切面靠在一起，然后用塑料管固定嫁接部位形成嫁接苗，再将嫁接苗接种在pH值为5.8-6的1/2MS+NAA 0.5mg·L-1+30g蔗糖+7-8g琼脂培养基中，在25℃±2℃的条件下培养，培养的光照强度为1500x-2000lx，每天光照条件下培养十二小时，然后在黑暗条件下培养十二小时，待培养20天-30天时转入下一步：
步骤104：将步骤103中培养的嫁接苗转移到生根用1/2MS+NAA 0.5mg·L-1+30g蔗糖+7-8g琼脂培养基上，在pH值为5.8-6条件下在该培养基上进行生根。
尤其是将梨组培苗培养在含不同浓度6-BA及IBA的MS培养基上，筛选最适的砧木、接穗诱导培养基。不同浓度的6-BA和IBA配比对山梨不定芽伸长增粗生长和增殖影响不同，在IBA浓度一定的情况下，随着6-BA浓度的增高，山梨不定芽的伸长量和增殖数都逐渐增大，当6-BA浓度达到1.5mg·L-1时伸长量达到最高，之后随着浓度的增高不定芽的伸长量减少；当6-BA浓度达到2.0mg·L-1时增殖数达到最高，之后随着浓度的增高不定芽的增殖数减少且试管苗有玻璃化现象。在6-BA浓度一定的情况下，随着IBA浓度的增加，山梨不定芽的伸长量和增殖数也逐渐增大，当IBA浓度为0.3mg·L-1时达伸长量到最高；当IBA浓度为0.2mg·L-1时不定芽增殖数最大。就微嫁接而言，当6-BA1.5mg·L-1，IBA0.3mg·L-1时，继代28d后试管苗的增高值最大，但从长势上看，试管苗的节间比较短；当6-BA1.0mg·L-1，IBA0.3mg·L-1时，试管苗平均增长高度相对较小，但是，从长势上看，试管苗节间正常，茎生长粗壮，叶平展，因此，6-BA1.0mg·L-1，IBA0.3mg·L-1培养的试管苗更适合用于嫁接，表1为不同浓度6-BA与IBA对山梨试管苗生长的影响。
表1
同时，嫁接后通过生根培养基使植株生根的同时进行嫁接口愈合的诱导，诱导生根可以增强植株对营养物质吸收的能力，对嫁接口的愈合有促进作用。因此，对不同的生根培养基进行生根及促进嫁接口愈合效率的筛选。将完成嫁接操作的嫁接体接种在分别添加不同浓度的IBA，NAA及IAA的1/2MS或1/4QL培养基上，观察嫁接体的愈合与生根效率。经观察，本专利提供的嫁接方法最高可以获得95.27％的嫁接愈合效率。1/2MS+0.5mg·L-1NAA可诱导最高的愈合且生根效率，为69.52％，嫁接体单株的平均生根数也表现出较高优势，为10.4，且生根嫁接体的愈合速度及生长势明显高于未生根的嫁接体。表2为不同生根培养基对梨嫁接体愈合生根效率的影响。
有报道表明，聚乙烯醇(PVA)可提高植物的生根效率，故在筛选出的1/2MS+0.5mg·L-1NAA愈合生根培养基中添加不同浓度的PVA，观察嫁接体的愈合及生根效率。经观察，在添加PVA的培养基上生长的嫁接体愈合效率没有明显的提升，但接种于1/2MS+0.5mg·L-1NAA+2.00mg·L-1PVA培养基上的嫁接体愈合且生根效率明显提升，最高可达87.23％，但生根数量没有明显提升。表3为添加不同浓度PVA对梨嫁接体愈合生根效率的影响。
表2
表3
更进一步的，上述步骤101之前还包括：
将梨组培苗培养在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+30g蔗糖+7-8g琼脂上，在pH值为5.8-6的条件下培养25天-30天，以备挑选砧木与接穗。
而且该方法还包括步骤105：将步骤D中生根20天至30天的嫁接苗于驯化室驯化3天-4天后，移栽于育苗基质中培养，按常规栽培方式栽培。
当然，以上说明仅仅为本发明的较佳实施例，本发明并不限于列举上述实施例，应当说明的是，任何熟悉本领域的技术人员在本说明书的教导下，所做出的所有等同替代、明显变形形式，均落在本说明书的实质范围之内，理应受到本发明的保护。

Claims (2)

1.一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法，其包括以下步骤：
将梨组培苗培养在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+40g蔗糖+7-8g琼脂上，在pH值为5.8-6的条件下培养25天-30天，以备挑选砧木与接穗；
A、选择高2厘米至3厘米、生长健壮一致的梨组培苗作为砧木，在无菌条件下，于顶部斜切去头，切面长度为0.3厘米至0.7厘米，留1.5厘米至2.5厘米茎段，摘除砧木底部侧芽；
B、选择与砧木生长势相近的组培苗作为接穗，于基部斜切，接穗顶部留2片-4片幼叶，切面长度为0.3厘米至0.7厘米，保证接穗基部与砧木顶部斜切面相吻合；
C、将砧木顶部斜切面和接穗基部斜切面靠在一起，然后用塑料管固定嫁接部位形成嫁接苗，再将嫁接苗接种在pH值为5.8-6的1/2 MS + NAA 0.5 mg•L-1+30g蔗糖+7-8g琼脂培养基上，在25℃±2 ℃的条件下培养，培养的光照强度为1500 lx -2000 lx ，每天光照条件下培养十二小时，然后在黑暗条件下培养十二小时，在嫁接口愈合的同时进行生根培养；
所述梨组培苗为山梨组 培苗。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法还包括步骤D：将步骤C中生根30天至40天的嫁接苗于驯化室驯化3天-4 天后，移栽于育苗基质中培养，按常规栽培方式栽培。
CN201510570474.4A 2015-09-09 2015-09-09 一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法 Active CN105103968B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510570474.4A CN105103968B (zh) 2015-09-09 2015-09-09 一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510570474.4A CN105103968B (zh) 2015-09-09 2015-09-09 一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105103968A CN105103968A (zh) 2015-12-02
CN105103968B true CN105103968B (zh) 2019-01-11

Family

ID=54652315

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510570474.4A Active CN105103968B (zh) 2015-09-09 2015-09-09 一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105103968B (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106718883A (zh) * 2016-11-28 2017-05-31 华中农业大学 一种滇楸与梓树的试管苗微型嫁接方法
CN107646371A (zh) * 2017-10-31 2018-02-02 钟山佳园生态农业有限公司 一种贡柑果苗的快速繁殖方法
CN107637294A (zh) * 2017-10-31 2018-01-30 钟山佳园生态农业有限公司 一种柑橘果苗的嫁接繁殖方法
CN108243756B (zh) * 2018-03-20 2020-04-14 山东农业大学 一种苹果组培苗瓶外嫁接生根的微嫁接方法
CN108713406B (zh) * 2018-06-07 2021-02-02 齐鲁师范学院 拟南芥的嫁接方法及其在恢复拟南芥突变体育性中的应用
CN108782252A (zh) * 2018-07-15 2018-11-13 惠州学院 一种淡水砂梨组培苗试管内微嫁接的方法
CN110710389A (zh) * 2018-07-15 2020-01-21 惠州学院 一种淡水砂梨组培苗试管外微嫁接的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102771318A (zh) * 2012-06-19 2012-11-14 青岛市农业科学研究院 一种番茄套管嫁接栽培方法
CN103283494A (zh) * 2013-05-24 2013-09-11 福建省农业科学院作物研究所 一种苦瓜套管嫁接方法
CN103380730A (zh) * 2013-08-05 2013-11-06 江苏省农业科学院 一种杜梨组培快繁方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN203251684U (zh) * 2013-05-31 2013-10-30 温州科技职业学院 一种用于劈接的嫁接管

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102771318A (zh) * 2012-06-19 2012-11-14 青岛市农业科学研究院 一种番茄套管嫁接栽培方法
CN103283494A (zh) * 2013-05-24 2013-09-11 福建省农业科学院作物研究所 一种苦瓜套管嫁接方法
CN103380730A (zh) * 2013-08-05 2013-11-06 江苏省农业科学院 一种杜梨组培快繁方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
新梨7号梨组培快繁体系建立及微嫁接技术的研究;田海青;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》;20150315(第3期);3-4,12-13,16,18-19
梨组织培养及器内嫁接技术的研究;陈蕾;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》;20100315(第3期);全文

Also Published As

Publication number Publication date
CN105103968A (zh) 2015-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105103968B (zh) 一种一步法完成梨微嫁接并生根的方法
CN104782486B (zh) 一种多肉植物玉露的组织培养快速繁殖方法
JP2011083235A (ja) 培養苗から多芽体の形成方法およびウイルスフリー種芋の生産方法
CN101044840B (zh) 西洋杜鹃组培快速繁殖及试管开花的方法及所用的培养基
CN109220793B (zh) 一种蝴蝶兰新品种的选育方法
CN103931497A (zh) 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法
CN101836585B (zh) 一种大花红景天的组培育苗方法
CN106718944B (zh) 一种亨利兜兰的组织培养快速繁殖方法
CN106818488B (zh) 一种长瓣兜兰的组织培养快速繁殖方法
CN103053423A (zh) 以花椰菜小孢子胚为外植体建立高效再生体系的方法
CN101248756A (zh) 一种芒属植物奇岗组培快繁方法
CN106804426A (zh) 促进土党参离体增殖的套盒和方法
CN103609444A (zh) 常绿萱草的组织培养法
CN108112479B (zh) 一种番木瓜组培苗分化芽的茎段悬空植叶促根方法
CN107711502B (zh) 一种培养基套盒及其在单叶蔓荆离体快速繁殖中的应用
KR101281934B1 (ko) 나도풍란 신품종 프린스
CN105191789B (zh) 一种香蕉组织培养过程中试管苗的提纯复壮方法
CN103988778A (zh) 一种木薯微茎尖培养基及培养方法
CN103039370A (zh) 一种金边弧叶龙舌兰离体培养及再生体系建立的方法
JP3893476B2 (ja) ササの増殖方法
JPH0690623A (ja) 東洋蘭の茎頂接ぎ木培養法
CN108668869B (zh) 慈姑水培育苗的方法
Islam et al. Effects of growth regulators on in vitro propagation and tuberization of four Dioscorea species
CN105284621B (zh) 一种通过体胚培养获得大量小蓬竹再生植株的方法
KR100330123B1 (ko) 양란 심비디움 신품종 아구리 식물

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant