CN105092771B - 一种石柑子的薄层色谱快速鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种石柑子的薄层色谱快速鉴别方法，基于薄层色谱谱技术鉴别石柑子中阿魏酰酪胺成分。该方法属于快速测定方法，方法简单、准确，灵敏度高，精密度、稳定性好，非常有利于在制药过程中石柑子药材快速质量控制中的应用。

Description

一种石柑子的薄层色谱快速鉴别方法

技术领域

本发明涉及一种石柑子的薄层色谱快速鉴别方法，基于薄层色谱技术的石柑子中阿魏酰酪胺成分的快速测定方法，属于中药质量检测领域。

背景技术

石柑子是天南星科石柑属植物石柑子Pothos chinensis(Raf.)Merr.的干燥全草，别名葫芦钻、柚子枫、石蜈蚣、爬崖香等，是瑶族地区治疗跌打损伤、风湿骨痛的常用药之一。然而由于瑶族无自身文字，瑶族医药知识的继承和传播完全靠耳口相传，导致瑶药在使用过程中存在同名异物和同物异名的混乱状况，临床用药的安全性和有效性难以得到保证，同时也给瑶药进一步的开发利用和质量标准的制定带来了巨大的困难。目前，石柑子仅收载于《全国中草药汇编》和各地方植物志。

石柑子作为瑶族常用中药，目前仅以性状鉴别作为鉴别依据，缺乏量化指标和手段，方法十分粗浅，不仅缺乏专属性，且也难以对药材的真伪和优劣进行准确的评价。

发明内容

本发明的目的在于利用薄层色谱技术对石柑子中阿魏酰酪胺成分进行鉴别，建立一种石柑子的快速鉴别方法，该方法满足制药过程中石柑子药材快速质量控制的要求。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：

一种石柑子的薄层色谱快速鉴别方法，其特征在于，该方法包括以下步骤和条件：

(1)取石柑子粉末(过四号筛)3g，加甲醇50mL，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加石油醚(60～90℃)振摇提取2次，每次30mL，弃去石油醚液，水层加三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

(2)取阿魏酰酪胺对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

(3)照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；

(4)供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(5)对步骤(1)～(4)进行耐用性考察，分别考察不同温度(26℃，4℃)、不同湿度(35％，88％)及不同厂家的薄层板(自制、Merck)对该方法的影响。

本发明的优点在于方法简单、准确，灵敏度高，精密度、稳定性好，可用于制药过程中石柑子药材快速质量控制。

下面结合附图与具体实施方式，对本发明进一步详细说明。

附图说明

图1，12份石柑子薄层色谱图；

图2，石柑子薄层色谱图2；

图3，石柑子薄层色谱图3；

图4，石柑子薄层色谱图4；

图5，石柑子薄层色谱图5；

图6，石柑子薄层色谱图6；

图7，石柑子薄层色谱图7；

图8，石柑子薄层色谱图8；

图9，石柑子薄层色谱图9。

具体实施方式

实施例，参见图2～3，本实施例提供石柑子的薄层色谱快速鉴别方法，图2中，1～2.阿魏酰酪胺对照品(5μL、10μL)，3～4.供试品(5μL、10μL)；图3中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品；石柑子的薄层色谱快速鉴别方法包括以下步骤和条件：

(1)取石柑子粉末(过四号筛)3g，加甲醇50mL，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加石油醚(60～90℃)振摇提取2次，每次30mL，弃去石油醚液，水层加三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

(2)取阿魏酰酪胺对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

(3)照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；

(4)供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

本实施例中，选用CAMAG Automatic TLC Sampler 4型薄层自动点样仪(瑞士)；CAMAG Reprostar 3型薄层成像系统(瑞士)；Mettler Toledo XS205DU型电子分析天平(瑞士)；KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；HH-8型数显恒温水浴锅(金坛市科析仪器有限公司)。

选用阿魏酰酪胺(自制，纯度≥99.5％)；提取用水为广东省第二中医院制剂室自制纯化水；三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯等试剂均为分析纯；硅胶GF254薄层层析板(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂)。

本实施例中，还包括以下步骤：(5)对步骤(1)～(4)进行耐用性考察，分别考察不同温度(26℃，4℃)、不同湿度(35％，88％)及不同厂家的薄层板(自制、Merck)对该方法的影响。见图4～9，图4中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品，温度T：26℃，湿度RH：35％；图5中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品，T：4℃，RH：35％；图6中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品，T：26℃，RH：88％；图7中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品，T：4℃，RH：88％；图8中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品，Merck硅胶G预制板；图9中，1.阿魏酰酪胺对照品，2～4.供试品，浙江台州硅胶G预制板。

结果表明，该方法对不同的温度和湿度适应性良好，不同厂家的薄层板均能达到较好的分离效果，可以作为石柑子中阿魏酰酪胺的薄层快速鉴别方法。

按照上述步骤(1)～(4)对12批石柑子样品进行薄层鉴别，结果见图1，12份石柑子薄层色谱图。图1中，1～6、石柑子药材S1～S6，7、阿魏酰酪胺对照品，8～13、石柑子样品S7～S12。

实施例2，本实施例为对实施例1的方法进行摸索，取石柑子粉末(过四号筛)3g，加甲醇超声提取后，加三氯甲烷振摇提取2次，合并有机相，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。取阿魏酰酪胺对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。将上述两种溶液分别点样于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)为展开剂，展开晾干后置于紫外光灯(254nm)下检视。结果显示供试品溶液背景较深，无法清晰鉴别。

因此，在步骤(1)中，对供试品进行纯化。样品加甲醇提取后先用石油醚振摇提取2次，弃去醚液，再用三氯甲烷振摇提取，步骤(2)～(4)不变。结果显示斑点清晰，对应良好。故确定实施例1为最佳实施例。

已经根据上述优选实施例对本发明作出的描述。应当理解的是前面的描述和实施例仅为了举例说明本发明。在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种石柑子的薄层色谱快速鉴别方法，其特征在于，该方法包括以下步骤和条件：

（1）取石柑子粉末3g，加甲醇50mL，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加石油醚振摇提取2次，所述石油醚的沸程为60~90℃，每次30mL，弃去石油醚液，水层加三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

（2）取阿魏酰酪胺对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

（3）照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇=10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；

（4）供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.根据权利要求1所述的石柑子的薄层色谱快速鉴别方法，其特征在于，其还包括以下步骤：（5）对步骤（1）~（4）进行耐用性考察，分别考察温度、湿度及薄层板对该方法的影响，所述温度为26℃或4℃，所述湿度为35%或88%，所述薄层板为自制或Merck生产的薄层板。