CN105039236A - 一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法；驯化培养方法为首先配制不同铜离子浓度驯化培养基和基础培养基；将所培养的产朊假丝酵母种子液，接种到不同铜离子浓度驯化培养基中，摇床培养；选择所培养的菌液中OD600值高，上清液中铜离子的含量较低的产朊假丝酵母菌作为出发菌种；取出发菌种菌液，接种到最低含铜离子的浓度为的驯化培养基中，摇瓶培养后，再吸取菌液接种到浓度为次低的驯化培养基中，按照此方法，接种培养；最后检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率，当铜离子的转化率不变或降低时，该菌种即为富铜酵母生产菌种。本发明所培养的酵母菌可在高铜离子浓度培养基中生长，对铜离子的转化效率高，为酵母新功能开发提供基础。
Description
技术领域
本发明涉及一种酵母菌培养方法，具体的说是一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法。
背景技术
随着我国经济的飞速发展和人民生活水平的不断提高，对肉、蛋、奶、皮、毛、羽等畜产品的需求与日俱增。这导致了我国畜牧业的飞速发展，养殖种类增加，养殖规模加大，饲料在养殖业中所占的成本比例和产值也在不断扩大。2013年，全国商品饲料总产量1.934亿吨(产值6784亿元)，已经成为国民经济的支柱产业。微量金属元素是动物体必不可少的营养物质，参与多种代谢途径。然而，最初的微量元素都是以无机盐的形式添加，在动物体内的转化效率低，大部分随粪便排到环境当中，严重污染环境。大剂量的无机盐添加还会影响到饲料的适口性，使动物的采食量降低。
酵母是一种单细胞真菌，细胞个体大，且酵母富含维生素、酶、寡糖等营养物质，被列为单细胞蛋白饲料的范围内。在对酵母研究的一系列成果中均证明，酵母在自身代谢过程中能够利用多种微量元素转化为自身成分，或者与酵母体内氨基酸结合变成金属元素氨基酸螯合物，这种形式存在的金属元素在动物体内能够与氨基酸一起直接被消化道上皮细胞吸收，大大提高了生物学效价，降低了金属离子的使用量。同时酵母培养简单，培养成本低，本方案采用无机铜离子（硫酸铜）作为铜源，培养和驯化酵母，然后作为动物饲料使用，既可以降低养殖业无机铜的使用，减少环境污染；又能够提供酵母蛋白，改善饲料品质。
现有的发明专利如：专利201210595217采用酵母菌液态发酵法将无机铜硫酸铜转化为有机酵母铜，所涉及的菌株为酿酒酵母CGMCC-6438，该发明所生产的产品铜含量可达21.47mg/g风干菌体重，产量可达16.05g/L风干菌体。专利200910066547提供一种酵母铜、酵母铁和酵母锌复合仔猪饲料添加剂，由酵母铜、酵母铁和酵母锌组成。该发明相对于现有饲料具有的优点在于：通过添加酵母铜、酵母铁、酵母锌，既减少铜、铁和锌的添加量，又可避免微量元素铜、铁和锌之间的颉颃作用，提高仔猪的生长性能、增强仔猪的抗氧化作用和免疫功能以及预防疾病的优点。这两个专利技术前者主要是利用酿酒酵母生产酿酒酵母铜产品，最终以产品形式体现，所用菌种也局限在了酿酒酵母，没有形成富铜酵母培养和驯化的系统方法。后者主要是一种简单的有机微量元素复配，重点是作为有机微量元素添加剂产品，也没有体现酵母对铜离子的耐受力和如何培养驯化的方法。
发明内容
本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法，所培养的酵母菌在250ug/mL的铜离子浓度培养基中正常生长，对铜离子的转化效率达到95.6%，为酵母新功能开发提供基础。
一种酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，包括以下步骤：
（1）、驯化培养基的配制：每1000mL蒸馏水中加入玉米浆40g，糖蜜20g，葡萄糖5g，硝酸铵2g，硫酸镁0.2g和磷酸二氢钾0.5g，搅拌至完全溶解后用盐酸或氨水调节pH值为5.0，将所得混合溶液分为10份，分别添加硫酸铜调整混合溶液中铜离子的浓度分别为：0.156μmol/mL、0.313μmol/mL、0.469μmol/mL、0.625μmol/mL、0.781μmol/mL、1.563μmol/mL、2.344μmol/mL、3.125μmol/mL、3.906μmol/mL和4.688μmol/mL，得到十种不同铜离子浓度的驯化培养基，分别装入10个三角瓶中，装液量为三角瓶体积的20%，进行高压蒸汽灭菌后，备用；
基础液体培养基的配制：每1000mL蒸馏水中加入蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g和蒸馏水1000mL，搅拌至完全溶解后用盐酸或氨水调节pH值为5.0，备用；
（2）、产朊假丝酵母培养：挑取2-3接种环活化后的产朊假丝酵母斜面菌种，接种到装有基础培养基的试管中，30℃下，220rpm/min摇床培养至菌液的OD600值为1.0，得到产朊假丝酵母种子液，备用；
（3）、将产朊假丝酵母种子液分别接种到上述步骤（1）所制备10个装有不同铜离子浓度驯化培养基的三角瓶中；将接种后的10个三角瓶置于30℃下，220rpm/min，摇床培养14h，得到产朊假丝酵母菌液；分别检测上述步骤（3）中所培养的产朊假丝酵母菌液其OD600值和上清液中铜离子的含量；
（4）、选择上述步骤（3）中所培养的产朊假丝酵母菌其菌液OD600值最高，且其菌液中铜离子的含量最低的产朊假丝酵母菌，作为出发菌种；取上述步骤（3）所培养的该出发菌种的菌液1mL，接种到铜离子的浓度为0.781umol/mL的50mL驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h后，吸取1mL菌液接种到铜离子的浓度为1.563umol/mL的50mL驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,吸取1mL菌液接种到铜离子的浓度为2.344umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为3.125umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为3.906umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为4.688umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h；在培养过程中，所培养的菌液除接种外所剩余菌液均存放于冰箱中，备用；
（5）、将上述步骤（4）冰箱中所保存的菌液取出，分别检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率，当铜离子的转化率不变或降低时，认为达到该菌种对铜离子的最大耐受能力；保留此菌种作为富铜酵母生产菌种，以此时的培养基配方作为生产富铜酵母的最佳培养基配方。
步骤(5)中所述检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率的方法为：
（1）、称取恒重的硫酸铜配制成铜离子浓度为0.156umol/mL的铜离子标准液，用移液枪依次吸取0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL和2.50mL铜离子标准液，分别移入5个体积为125mL的分液漏斗中；另外取1个不添加铜离子标准液的分液漏斗，即空白对照；然后分别在6个分液漏斗中添加硫酸至分液漏斗中的溶液体积为20mL；然后，分别向6个分液漏斗中依次加入5mL柠檬酸铵和乙二胺四乙酸二钠的混合水溶液、3滴酚红试剂，摇匀后，采用氨水将分液漏斗中的溶液调至红色；接着，再分别加入2mL二乙基二硫代氨基甲酸钠水溶液和10mL四氯化碳溶液，剧烈振摇2min，静置等分层后，分别用脱脂棉将四氯化碳层滤入体积为2cm的比色杯中；采用四氯化碳调节零点，在波长为440nm处测铜标准溶液的吸光度，用铜标准溶液各点吸光值减去空白对照管吸光值后，在软件中绘制标准曲线并计算回归方程；
（2）、取1ml冰箱中所保存的待检测菌液加入到离心管中，放入3000r/min的离心机中离心2min，取上清液置于分别250mL具塞锥形瓶中，加入100mL盐酸，充分摇匀后，转入250mL容量瓶中，加水定容至250mL；吸取5mL容量瓶中溶液置于体积为125mL的分液漏斗中，然后加入15mL水稀释至20mL；按照铜离子标准曲线的方法进行测其在波长为440nm的吸光度，将吸光度结果带入回归方程计算铜离子浓度。
所述柠檬酸铵乙二胺和四乙酸二钠的混合水溶液的制备方法为：称取20g柠檬酸铵和5g乙二胺四乙酸二钠溶于水中，并用水定容至100mL。
步骤(2)中所述装有基础培养基的试管的装液量为试管体积的25%。
步骤(3)中所述检测产朊假丝酵母菌液中铜离子的含量的方法为，通过离心测定产朊假丝酵母菌液的上清液中铜离子的量。
有益效果是：
本发明通过在产朊假丝酵母液体培养基中添加不同浓度的硫酸铜，筛选产朊假丝酵母对无机铜的最大耐受力，并在此基础上确定无机铜即硫酸铜在培养基中的最大添加量。通过检测培养液中剩余铜离子的浓度，确定被产朊假丝酵母转化的铜离子量。以此添加量作为出发基础，对产朊假丝酵母进行传代培养，每培养一代逐渐增加铜离子的浓度，对产朊假丝酵母的铜耐受力进行驯化。本发明的目的是建立起一套完整的酵母富集铜离子的培养驯化和检测方法，为酵母新功能开发提供整套方案。
附图说明
图1是本发明中铜离子浓度标准曲线图。
具体实施方式
一种酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，包括以下步骤：
（1）、驯化培养基的配制：每1000mL蒸馏水中加入玉米浆40g，糖蜜20g，葡萄糖5g，硝酸铵2g，硫酸镁0.2g和磷酸二氢钾0.5g，搅拌至完全溶解后用盐酸或氨水调节pH值为5.0，将所得混合溶液分为10份，分别添加硫酸铜调整混合溶液中铜离子的浓度分别为：0.156μmol/mL、0.313μmol/mL、0.469μmol/mL、0.625μmol/mL、0.781μmol/mL、1.563μmol/mL、2.344μmol/mL、3.125μmol/mL、3.906μmol/mL和4.688μmol/mL，得到十种不同铜离子浓度的驯化培养基，分别装入10个三角瓶中，装液量为三角瓶体积的20%，进行高压蒸汽灭菌后，备用；
基础液体培养基的配制：每1000mL蒸馏水中加入蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g和蒸馏水1000mL，搅拌至完全溶解后用盐酸或氨水调节pH值为5.0，备用；
（2）、产朊假丝酵母培养：挑取2-3接种环活化后的产朊假丝酵母斜面菌种，接种到装有基础培养基的试管中，30℃下，220rpm/min摇床培养至菌液的OD600值为1.0，得到产朊假丝酵母种子液，备用；
（3）、将产朊假丝酵母种子液分别接种到上述步骤（1）所制备10个装有不同铜离子浓度驯化培养基的三角瓶中；将接种后的10个三角瓶置于30℃下，220rpm/min，摇床培养14h，得到产朊假丝酵母菌液；分别检测上述步骤（3）中所培养的产朊假丝酵母菌液其OD600值和上清液中铜离子的含量；
（4）、选择上述步骤（3）中所培养的产朊假丝酵母菌其菌液OD600值最高，且其菌液中铜离子的含量最低的产朊假丝酵母菌，作为出发菌种；取上述步骤（3）所培养的该出发菌种的菌液1mL，接种到铜离子的浓度为0.781umol/mL的50mL驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h后，吸取1mL菌液接种到铜离子的浓度为1.563umol/mL的50mL驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,吸取1mL菌液接种到铜离子的浓度为2.344umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为3.125umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为3.906umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为4.688umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h；在培养过程中，所培养的菌液除接种外所剩余菌液均存放于冰箱中，备用；
（5）、将上述步骤（4）冰箱中所保存的菌液取出，分别检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率，当铜离子的转化率不变或降低时，认为达到该菌种对铜离子的最大耐受能力；保留此菌种作为富铜酵母生产菌种，以此时的培养基配方作为生产富铜酵母的最佳培养基配方。
步骤(5)中所述检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率的方法为：
（1）、称取恒重的硫酸铜配制成铜离子浓度为0.156umol/mL的铜离子标准液，用移液枪依次吸取0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL和2.50mL铜离子标准液，分别移入5个体积为125mL的分液漏斗中；另外取1个不添加铜离子标准液的分液漏斗，即空白对照；然后分别在6个分液漏斗中添加硫酸至分液漏斗中的溶液体积为20mL；然后，分别向6个分液漏斗中依次加入5mL柠檬酸铵和乙二胺四乙酸二钠的混合水溶液、3滴酚红试剂，摇匀后，采用氨水将分液漏斗中的溶液调至红色；接着，再分别加入2mL二乙基二硫代氨基甲酸钠水溶液和10mL四氯化碳溶液，剧烈振摇2min，静置等分层后，分别用脱脂棉将四氯化碳层滤入体积为2cm的比色杯中；采用四氯化碳调节零点，在波长为440nm处测铜标准溶液的吸光度，用铜标准溶液各点吸光值减去空白对照管吸光值后，在软件中绘制标准曲线并计算回归方程；
（2）、取1ml冰箱中所保存的待检测菌液加入到离心管中，放入3000r/min的离心机中离心2min，取上清液置于分别250mL具塞锥形瓶中，加入100mL盐酸，充分摇匀后，转入250mL容量瓶中，加水定容至250mL；吸取5mL容量瓶中溶液置于体积为125mL的分液漏斗中，然后加入15mL水稀释至20mL；按照铜离子标准曲线的方法进行测其在波长为440nm的吸光度，将吸光度结果带入回归方程计算铜离子浓度。
所述柠檬酸铵乙二胺和四乙酸二钠的混合水溶液的制备方法为：称取20g柠檬酸铵和5g乙二胺四乙酸二钠溶于水中，并用水定容至100mL。
步骤(2)中所述装有基础培养基的试管的装液量为试管体积的25%。
步骤(3)中所述检测产朊假丝酵母菌液中铜离子的含量的方法为，通过离心测定产朊假丝酵母菌液的上清液中铜离子的量。
实施例1
按本发明技术方案进行试管培养产朊假丝酵母，得到产朊假丝酵母种子液，将产朊假丝酵母种子接种在10个不同铜离子浓度的三角瓶驯化培养基中，培养结果如表1所示。由表1可以看出，在铜离子浓度为50ug/mL时，OD600和铜离子吸收率都较高，故以此浓度铜离子培养的酵母菌种为出发菌种进行传代驯化，每代驯化结果如表2所示。由表2可知，传代至第4代时，OD600值开始下降，铜离子吸收率开始下降，第5代，第6代接连下降，故可确定第4代为培养出的富铜酵母，且铜离子浓度为200ug/mL的驯化培养基为最佳培养基。
表1初始酵母生长和铜离子利用情况
表2驯化酵母生长和铜离子富集情况
实施例2
按本发明技术方案进行试管培养产朊假丝酵母，得到产朊假丝酵母种子液，将产朊假丝酵母种子接种在10个不同铜离子浓度的三角瓶驯化培养基中，培养结果如表3所示。由表3可以看出，在铜离子浓度为100ug/mL时，OD600和铜离子吸收率都较高，故以此浓度铜离子培养的酵母菌种为出发菌种进行传代驯化，每代驯化结果如表4所示。由表4可知，传代至第3代时，OD600值开始下降，铜离子吸收率开始下降，第4代，第5代接连下降，故可确定第3代为培养出的富铜酵母，且铜离子浓度为200ug/mL的驯化培养基为最佳培养基。
表3初始酵母生长和铜离子利用情况
表4驯化酵母生长和铜离子富集情况
实施例3
按本发明技术方案进行试管培养产朊假丝酵母，得到产朊假丝酵母种子液，将产朊假丝酵母种子接种在10个不同铜离子浓度的三角瓶驯化培养基中，培养结果如表5所示。由表5可以看出，在铜离子浓度为50ug/mL时，OD600和铜离子吸收率都较高，故以此浓度铜离子培养的酵母菌种为出发菌种进行传代驯化，每代驯化结果如表6所示。由表6可知，传代至第4代时，OD600值开始下降，铜离子吸收率维持不变，第5代，第6代接连下降，故可确定第4代为培养出的富铜酵母，且铜离子浓度为200ug/mL的驯化培养基为最佳培养基。
表5初始酵母生长和铜离子利用情况
表6驯化酵母生长和铜离子富集情况
本发明所用的酵母菌为产朊假丝酵母（Candidautilis31170），购自中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）。该菌种是公知公用菌种，方便获得。本发明所采用的试剂也均可通过市场购买得到。
Claims (5)
1.一种酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）、驯化培养基的配制：每1000mL蒸馏水中加入玉米浆40g，糖蜜20g，葡萄糖5g，硝酸铵2g，硫酸镁0.2g和磷酸二氢钾0.5g，搅拌至完全溶解后用盐酸或氨水调节pH值为5.0，将所得混合溶液分为10份，分别添加硫酸铜调整混合溶液中铜离子的浓度分别为：0.156μmol/mL、0.313μmol/mL、0.469μmol/mL、0.625μmol/mL、0.781μmol/mL、1.563μmol/mL、2.344μmol/mL、3.125μmol/mL、3.906μmol/mL和4.688μmol/mL，得到十种不同铜离子浓度的筛选培养基，分别装入10个三角瓶中，装液量为三角瓶体积的20%，进行高压蒸汽灭菌后，备用；
基础液体培养基的配制：每1000mL蒸馏水中加入蛋白胨20g，酵母膏10g，葡萄糖20g和蒸馏水1000mL，搅拌至完全溶解后用盐酸或氨水调节pH值为5.0，备用；
（2）、产朊假丝酵母培养：挑取2-3接种环活化后的产朊假丝酵母斜面菌种，接种到装有基础培养基的试管中，30℃下，220rpm/min摇床培养至菌液的OD600值为1.0，得到产朊假丝酵母种子液，备用；
（3）、将产朊假丝酵母种子液分别接种到上述步骤（1）所制备10个装有不同铜离子浓度的驯化培养基的三角瓶中；将接种后的10个三角瓶置于30℃下，220rpm/min，摇床培养14h，得到产朊假丝酵母菌液；分别检测上述步骤（3）中所培养的产朊假丝酵母菌液其OD600值和上清液中铜离子的含量；
（4）、选择上述步骤（3）中所培养的产朊假丝酵母菌其菌液OD600值最高，且其菌液中铜离子的含量最低的产朊假丝酵母菌，作为出发菌种；取上述步骤（3）所培养的该出发菌种的菌液1mL，接种到铜离子的浓度为0.781umol/mL的50mL驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h后，吸取1mL菌液接种到铜离子的浓度为1.563umol/mL的50mL驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,吸取1mL菌液接种到铜离子的浓度为2.344umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为3.125umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为3.906umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h,再次吸取1mL菌液，接种到铜离子的浓度为4.688umol/mL的驯化培养基中，30℃下，摇瓶培养14h；在培养过程中，所培养的菌液除接种外所剩余菌液均存放于冰箱中，备用；
（5）、将上述步骤（4）冰箱中所保存的菌液取出，分别检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率，当铜离子的转化率不变或降低时，认为达到该菌种对铜离子的最大耐受能力；保留此菌种作为富铜酵母生产菌种，以此时的培养基配方作为生产富铜酵母的最佳培养基配方。
2.如权利要求1所述酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，其特征在于：步骤(2)中所述装有基础培养基的试管的装液量为试管体积的25%。
3.如权利要求1所述酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，其特征在于：步骤(5)中所述检测不同代次产朊假丝酵母的铜离子转化率的方法为：
（1）、称取恒重的硫酸铜配制成铜离子浓度为0.156umol/mL的铜离子标准液，用移液枪依次吸取0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL和2.50mL铜离子标准液，分别移入5个体积为125mL的分液漏斗中；另外取1个不添加铜离子标准液的分液漏斗，即空白对照；然后分别在6个分液漏斗中添加硫酸至分液漏斗中的溶液体积为20mL；然后，分别向6个分液漏斗中依次加入5mL柠檬酸铵和乙二胺四乙酸二钠的混合水溶液、3滴酚红试剂，摇匀后，采用氨水将分液漏斗中的溶液调至红色；接着，再分别加入2mL二乙基二硫代氨基甲酸钠水溶液和10mL四氯化碳溶液，剧烈振摇2min，静置等分层后，分别用脱脂棉将四氯化碳层滤入体积为2cm的比色杯中；采用四氯化碳调节零点，在波长为440nm处测铜标准溶液的吸光度，用铜标准溶液各点吸光值减去空白对照管吸光值后，在软件中绘制标准曲线并计算回归方程；
（2）、取1ml冰箱中所保存的待检测菌液加入到离心管中，放入3000r/min的离心机中离心2min，取上清液置于分别250mL具塞锥形瓶中，加入100mL盐酸，充分摇匀后，转入250mL容量瓶中，加水定容至250mL；吸取5mL容量瓶中溶液置于体积为125mL的分液漏斗中，然后加入15mL水稀释至20mL；按照铜离子标准曲线的方法进行测其在波长为440nm的吸光度，将吸光度结果带入回归方程计算铜离子浓度。
4.如权利要求3所述酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，其特征在于：所述柠檬酸铵乙二胺和四乙酸二钠的混合水溶液的制备方法为：称取20g柠檬酸铵和5g乙二胺四乙酸二钠溶于水中，并用水定容至100mL。
5.如权利要求1所述酵母菌富集铜离子的驯化培养方法，其特征在于：步骤(3)中所述检测产朊假丝酵母菌液中铜离子的含量的方法为，通过离心测定产朊假丝酵母菌液的上清液中铜离子的量。
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108395004A (zh) * | 2018-04-27 | 2018-08-14 | 成都渤茂科技有限公司 | 一种印制线路板污水残余铜的处理方法 |
| CN110358691A (zh) * | 2019-09-02 | 2019-10-22 | 广西壮族自治区畜牧研究所 | 一株啤酒酵母及其应用 |
| CN111434767A (zh) * | 2019-01-15 | 2020-07-21 | 中国科学院微生物研究所 | 一株富铜酵母及酵母铜制备方法 |
| CN112501107A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-16 | 台州学院 | 一种驯化米根霉的方法及生产乳酸的方法 |
| CN112813014A (zh) * | 2019-11-15 | 2021-05-18 | 洛阳华清天木生物科技有限公司 | 一种基于微流控技术的菌种驯化与筛选方法 |
| CN113155815A (zh) * | 2021-03-08 | 2021-07-23 | 安徽大学 | 以甲基橙生物降解溶液测定水中铜离子(ii)浓度的方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR900007000B1 (ko) * | 1988-10-07 | 1990-09-25 | 선일포도당 주식회사 | 칸디다 유틸리스의 변이주 sh 8636 및 이를 이용한 단세포단백질의 제조방법 |
| CN101508961A (zh) * | 2009-03-16 | 2009-08-19 | 浙江大学 | 一种富铜酵母的制备方法 |
| CN104543398A (zh) * | 2015-01-20 | 2015-04-29 | 河南科技大学 | 一种发酵态铜饲料添加剂的制备方法 |
-
2015
- 2015-09-22 CN CN201510605672.XA patent/CN105039236B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR900007000B1 (ko) * | 1988-10-07 | 1990-09-25 | 선일포도당 주식회사 | 칸디다 유틸리스의 변이주 sh 8636 및 이를 이용한 단세포단백질의 제조방법 |
| CN101508961A (zh) * | 2009-03-16 | 2009-08-19 | 浙江大学 | 一种富铜酵母的制备方法 |
| CN104543398A (zh) * | 2015-01-20 | 2015-04-29 | 河南科技大学 | 一种发酵态铜饲料添加剂的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| FERDA GONEN ET AL.: "Use of response surface methodology (RSM) in the evaluation of growth and copper(II) bioaccumulation properties of Candida utilis in molasses medium", 《JOURNAL OF HAZARDOUS MATERIALS》 * |
| 中国环境监测总站编: "《环境监测方法标准实用手册》", 31 January 2013, 中国环境科学出版社 * |
| 赵修华等: "产朊假丝酵母生物吸附Cu2+影响因素及吸附机理的研究", 《环境科学学报》 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108395004A (zh) * | 2018-04-27 | 2018-08-14 | 成都渤茂科技有限公司 | 一种印制线路板污水残余铜的处理方法 |
| CN111434767A (zh) * | 2019-01-15 | 2020-07-21 | 中国科学院微生物研究所 | 一株富铜酵母及酵母铜制备方法 |
| CN111434767B (zh) * | 2019-01-15 | 2021-10-15 | 中国科学院微生物研究所 | 一株富铜酵母及酵母铜制备方法 |
| CN110358691A (zh) * | 2019-09-02 | 2019-10-22 | 广西壮族自治区畜牧研究所 | 一株啤酒酵母及其应用 |
| CN110358691B (zh) * | 2019-09-02 | 2022-12-16 | 广西壮族自治区畜牧研究所 | 一株啤酒酵母及其应用 |
| CN112813014A (zh) * | 2019-11-15 | 2021-05-18 | 洛阳华清天木生物科技有限公司 | 一种基于微流控技术的菌种驯化与筛选方法 |
| CN112501107A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-16 | 台州学院 | 一种驯化米根霉的方法及生产乳酸的方法 |
| CN113155815A (zh) * | 2021-03-08 | 2021-07-23 | 安徽大学 | 以甲基橙生物降解溶液测定水中铜离子(ii)浓度的方法 |
| CN113155815B (zh) * | 2021-03-08 | 2023-01-10 | 安徽大学 | 以甲基橙生物降解溶液测定水中铜离子(ii)浓度的方法 |
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