CN106591146B - 一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法 - Google Patents

一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106591146B
CN106591146B CN201611096775.9A CN201611096775A CN106591146B CN 106591146 B CN106591146 B CN 106591146B CN 201611096775 A CN201611096775 A CN 201611096775A CN 106591146 B CN106591146 B CN 106591146B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fumosorosea
solid
fermentation
liquid
medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201611096775.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106591146A (zh
Inventor
张宏宇
刘亚茹
王珊珊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Huazhong Agricultural University
Original Assignee
Huazhong Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Huazhong Agricultural University filed Critical Huazhong Agricultural University
Priority to CN201611096775.9A priority Critical patent/CN106591146B/zh
Publication of CN106591146A publication Critical patent/CN106591146A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106591146B publication Critical patent/CN106591146B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N3/00—Spore forming or isolating processes

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法，它包括液体发酵和固体发酵两个阶段，液体培养基含碳源为10‑30g/L，含氮源为5‑25g/L，含微量元素为50‑250mg/L，含基础盐为0.5‑1.5g/L，pH值为4‑8；固体培养基为玉米粉、大米、花生饼粉、麦麸、豆粕。本发明生产玫烟色棒束孢的孢子产量、纯度和活孢率都非常高，全部发酵培养周期在20天左右，具有生产周期短、成本低、效率高等优点，适用于玫烟色棒束孢的大规模生产。

Description

一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法
技术领域
本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法。
背景技术
玫烟色棒束孢(Isaria fumosaroseus)是一类广泛侵染多种昆虫的病原真菌，对柑橘木虱有很强的侵染作用，是柑橘木虱生物防治的优良菌种。玫烟色棒束孢的经济、快速、大规模生产是其大量用于生物防治实践的前提，单独使用液体发酵产生的繁殖体不耐储藏，目前玫烟色棒束孢发酵的方法较复杂，成本较高，培养过程中很容易出现杂菌污染现象。因此，研发新的高效、低成本大规模化生产培养基及操作简单、不易污染的培养方法，是玫烟色棒束孢发酵生产的关键问题。
发明内容
本发明涉及一种对柑橘木虱高效的病原真菌玫烟色棒束孢(Isariafumosaroseus)的液体-固体发酵培养基及其培养方法。
本发明提供的发酵培养方法包括以下步骤：
1)液体发酵阶段：以100ml液体培养基计，接种玫烟色棒束孢的孢子悬浮液1-8ml，于20-29℃，转速100-200r/min条件下培养1-3天，得菌丝液；
2)固体发酵阶段：将菌丝液接种于固体培养基中，菌丝液的体积占固体培养基重量的4-12％，置于15-35℃下培养6-18天后收获，
所述液体培养基含碳源为10-30g/L，含氮源为5-25g/L，含微量元素为50-250mg/L，含基础盐为0.5-1.5g/L，pH值为4-8；
所述固体培养基为玉米粉、大米、花生饼粉、麦麸、豆粕中的一种或一种以上任意组合，加水至含水量为40-80％，pH值为4-8。
优选地，所述碳源为蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、玉米粉浸出液和麦麸浸出液中的一种或一种以上任意组合。
优选地，所含氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、豆粕粉、(NH4)2SO4、NH4Cl中的一种或一种以上任意组合。
优选地，所述微量元素为镁盐、铜盐、锌盐、铁盐中的一种或一种以上任意组合。
本发明的有益效果是：
本发明采用液体-固体双相发酵方法生产玫烟色棒束孢的分生孢子，孢子产量、纯度和活孢率都非常高，全部发酵培养周期在20天左右，具有生产周期短、成本低、效率高等优点，适用于玫烟色棒束孢的大规模生产。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进一步详细说明。
实施例1
1)液体发酵阶段：以100ml液体培养基计，接种玫烟色棒束孢的孢子悬浮液3.6ml(每ml含1.0×107个孢子)，于26℃，转速125r/min条件下培养3天，得菌丝液；
2)固体发酵阶段：将菌丝液接种于固体培养基中，菌丝液的体积(ml)占固体培养基重量(g)的10％，置于25℃培养15天后收获。
所述液体培养基含碳源(葡萄糖)为25g/L，含氮源(酵母粉)为25g/L，含微量元素(硫酸铜、硫酸锌、硫酸镁，重量为1:1:1)为150mg/L，含基础盐(磷酸氢二钾、氯化钾，重量为1:1)为1g/L，pH值为6。高压湿热灭菌30min，冷却后备用。
所述固体培养基为玉米粉300g，加水700g，混匀，pH值为5。高压湿热灭菌30min，冷却后备用。
将收获的孢子粉进行烘干测量，每500g干基质产孢子粉8.39g，每g孢子粉含孢子1.61×1011个，达1000亿个以上，活孢率达到92.34％。
实施例2
1)液体发酵阶段：以100ml液体培养基计，接种玫烟色棒束孢的孢子悬浮液1ml，于20℃，转速200r/min条件下培养1天，得菌丝液；
2)固体发酵阶段：将菌丝液接种于固体培养基中，菌丝液的体积(ml)占固体培养基重量(g)的4％，置于15℃培养18天后收获。
所述液体培养基含碳源(蔗糖、玉米粉浸出液，重量为3:1)为10g/L，含氮源(蛋白胨、NH4Cl，重量为4:1)为5g/L，含微量元素(硫酸铜)为50mg/L，含基础盐(氯化钠)为0.5g/L，pH值为8。
所述固体培养基为花生饼粉600g，加水400g，混匀，pH值为8。
将收获的孢子粉进行烘干测量，每500g干基质产孢子粉6.86g，每g孢子粉含孢子9.72×1010个，活孢率达到89.35％。
实施例3
1)液体发酵阶段：以100ml液体培养基计，接种玫烟色棒束孢的孢子悬浮液8ml，于29℃，转速100r/min条件下培养2天，得菌丝液；
2)固体发酵阶段：将菌丝液接种于固体培养基中，菌丝液的体积(ml)占固体培养基重量(g)的12％，置于35℃培养8天后收获。
所述液体培养基含碳源(麦芽糖、麦麸浸出液，重量为5:1)为30g/L，含氮源(蛋白胨、酵母粉，重量为1:1)为25g/L，含微量元素(硫酸锌)为250mg/L，含基础盐(氯化钠、氯化钾，重量为2:1)为1.5g/L，pH值为4。
所述固体培养基为麦麸、豆粕各100g，加水800g，混匀，pH值为8。
将收获的孢子粉进行烘干测量，每500g干基质产孢子粉7.28g，每g孢子粉含孢子6.59×1010个，活孢率达到87.77％。
实施例4
1)液体发酵阶段：以100ml液体培养基计，接种玫烟色棒束孢的孢子悬浮液5.4ml，于24℃，转速160r/min条件下培养2天，得菌丝液；
2)固体发酵阶段：将菌丝液接种于固体培养基中，菌丝液的体积(ml)占固体培养基重量(g)的8％，置于30℃培养14天后收获。
所述液体培养基含碳源(蔗糖)为15g/L，含氮源(牛肉膏)为20g/L，含微量元素(硫酸铜、硫酸锌、硫酸镁、硫酸铁，重量为1:1:1：1)为200mg/L，含基础盐(磷酸氢二钾、氯化钾，重量为1:1)为1.2g/L，pH值为7。
所述固体培养基为花生饼粉400g，加水600g，混匀，pH值为7。
将收获的孢子粉进行烘干测量，每500g干基质产孢子粉8.07g，每g孢子粉含孢子1.18×1011个，活孢率达到90.65％。

Claims (1)

1.一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法，其特征在于包括以下两个步骤：
1)液体发酵阶段：以100ml液体培养基计，接种玫烟色棒束孢的孢子悬浮液3.6ml，于26℃，转速125r/min条件下培养3天，得菌丝液；
2)固体发酵阶段：将菌丝液接种于固体培养基中，菌丝液的体积ml占固体培养基重量g的10％，置于25℃培养15天后收获，
所述液体培养基含葡萄糖为25g/L，含酵母粉为25g/L，含微量元素为150mg/L，含基础盐为1g/L，pH值为6，
所述微量元素由硫酸铜、硫酸锌、硫酸镁组成，重量比为1:1:1，
所述基础盐由磷酸氢二钾、氯化钾组成，重量比为1:1，
所述固体培养基为玉米粉300g，加水700g，混匀，pH值为5。
CN201611096775.9A 2016-12-02 2016-12-02 一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法 Active CN106591146B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611096775.9A CN106591146B (zh) 2016-12-02 2016-12-02 一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611096775.9A CN106591146B (zh) 2016-12-02 2016-12-02 一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106591146A CN106591146A (zh) 2017-04-26
CN106591146B true CN106591146B (zh) 2019-06-18

Family

ID=58595521

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611096775.9A Active CN106591146B (zh) 2016-12-02 2016-12-02 一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106591146B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108342329A (zh) * 2018-04-18 2018-07-31 吕梁学院 玫烟色棒束孢if-1106菌株液体发酵优化工艺
CN110484454B (zh) * 2019-09-19 2020-08-14 福建农林大学 一种大量生产玫烟色棒束孢的培养基
CN110777082B (zh) * 2019-12-06 2022-04-22 海南大学 一种提高棒束孢真菌产孢量的固体培养基及培养方法
CN111269840B (zh) * 2020-03-06 2022-02-22 山西农业大学 一种玫烟色棒束孢发酵与孢子粉制备工艺

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103749546A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢与高效氯氰菊酯油悬浮剂及其应用
CN103749545A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 玫烟色棒束孢与苏云金杆菌可湿性粉剂
CN103749441A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法和应用
CN103766407A (zh) * 2013-12-24 2014-05-07 华南农业大学 玫烟色棒束孢与阿维菌素油悬浮剂及其制备方法和应用
CN104642392A (zh) * 2015-01-13 2015-05-27 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢菌分生孢子可湿性粉剂及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103749546A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢与高效氯氰菊酯油悬浮剂及其应用
CN103749545A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 玫烟色棒束孢与苏云金杆菌可湿性粉剂
CN103749441A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法和应用
CN103766407A (zh) * 2013-12-24 2014-05-07 华南农业大学 玫烟色棒束孢与阿维菌素油悬浮剂及其制备方法和应用
CN104642392A (zh) * 2015-01-13 2015-05-27 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢菌分生孢子可湿性粉剂及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"玫烟色棒束孢IF-1106菌株培养条件研究";田晶等;《山西农业大学学报（自然科学版）》;20141231;第34卷(第2期);第124-128页

Also Published As

Publication number Publication date
CN106591146A (zh) 2017-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106591146B (zh) 一种玫烟色棒束孢的发酵培养方法
CN102160642B (zh) 一种北虫草稻谷食品的制备方法
CN102132881B (zh) 一种灵芝稻谷食品的制备方法
CN103609329A (zh) 提高虫草素含量的蛹虫草培养方法
CN103343152A (zh) 一种灰树花诱变株液态发酵米糠麸皮全料生产多糖的方法
CN103740772B (zh) 一种促进樟芝液态发酵生物合成安卓奎诺尔的方法
CN108531409B (zh) 一种海洋红酵母高密度发酵方法
CN106244463A (zh) 富硒高虫草素含量的虫草菌丝体的培养方法
CN109429911A (zh) 一种用菊芋制备的发酵冬虫夏草培养液及其制备方法
CN105316246A (zh) β-胡萝卜素高产菌种及其应用
CN108795819A (zh) 一种复合微生物培养物及其在生产类胡萝卜素中的应用
CN106479899B (zh) 一种蛹虫草菌株及其在制备虫草素中的应用
CN107285859A (zh) 一种猴头菇的栽培方法
CN103160550A (zh) 一种裂褶菌胞外多糖与燕麦多糖组成的复合多糖的制备方法
CN103555786A (zh) 一种灵芝诱变株液态发酵米糠麸皮全料生产多糖的方法
CN106754401A (zh) 一种中国被毛孢菌的生产方法
CN105886412A (zh) 一种冬虫夏草菌的液体发酵培养基
CN102373244B (zh) 一种花生四烯酸的微生物发酵方法
CN101861796B (zh) 一种利用有色稻米发酵废糟培养豹斑毒鹅膏的方法
CN101731101A (zh) 一种利用高产富硒杂交红米发酵废糟培养桑黄的方法
CN110218687B (zh) 一种新型红曲废渣微生态制剂的制备方法
CN104711208B (zh) 一种具有高的淀粉分解能力的乳酸菌
CN103882076A (zh) 一种高分子量普鲁兰多糖的发酵生产方法
CN106085865A (zh) 一种斜盖菇的保藏方法
CN102898207A (zh) 北虫草菌种液体培养基及其制备和使用方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant