CN105028478B - 一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂 - Google Patents

Abstract

本发明属于农作物育种领域，具体涉及一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂。所述处理剂包括以下质量‑体积‑体积比的原料：氯氧化铜1‑5，乙酸0.2‑2，水500‑3000。所述氯氧化铜来自于王铜可湿性粉剂，优选为50％王铜可湿性粉剂；所述乙酸来自于食醋，优选为白醋。本发明采用氯氧化铜和乙酸作为有效成分，二者协同作用，共同提高了杀菌率，既适用于干种子，也适用于湿种子，可以减少瓜类种子的带菌率。

Description

一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂

技术领域

本发明属于农作物育种领域，具体涉及一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂。

背景技术

瓜类细菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch)是葫芦科作物的重要病害，属于世界范围的检疫性病害，最早于1965年由Webb等首次在美国佛罗里达州发现，并对症状进行了描述^[1]，种子带菌为该病的主要侵染源^[2]。

近几年来，随着集约化育苗工厂的迅速发展，西甜瓜工厂化嫁接育苗的规模越来越大，由于工厂化育苗的高密度和育苗环境的高温高湿，为细菌性果斑病在育苗期的扩散和大规模的发生提供了有利的条件，导致嫁接育苗工厂损失惨重，尤其对无籽西瓜的嫁接苗危害最为严重，这样对西瓜种子的健康质量提出了更高的要求。

目前西瓜种子健康处理的方法和技术很多，药剂处理仍然是防止种子带菌的主要措施之一，但大部分的药剂处理后都需要充分的清洗种子，清洗不彻底很容易影响种子的发芽率和田间成苗率，而且很多药剂会对人、畜产生危害，不适合没有一定防护设施的农户使用。研究表明，种子快速干燥可以阻止病原菌在种子表面的进一步繁殖，降低种子的带菌率^[3]，种子经销商集中处理种子，种子在生产过程中需要经历二次干燥过程，这无疑会增加病原菌繁殖的机会。

因此，目前的科研和实践中，需要一种操作简便、安全，适合制种农户采后处理西瓜种子的瓜类细菌性果斑病的防治方法，从而减少瓜类种子的带菌率，为生产上提供健康无菌的西瓜种子。

发明内容

本发明提供一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂。

一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，包括以下质量-体积-体积比的原料：氯氧化铜1-5，乙酸0.2-2，水500-3000。

上述种子处理剂的优选的实施方式中，所述氯氧化铜来自于王铜可湿性粉剂，优选为50％王铜可湿性粉剂；所述乙酸来自于食醋，优选为白醋。

上述种子处理剂的优选的实施方式中，所述处理剂包括以下质量-体积-体积比的原料：王铜可湿性粉剂2-10，食醋5-50，水500-3000。

上述种子处理剂的优选的实施方式中，制备方法包括以下步骤：先在所述水中加入所述食醋，得到食醋稀释液；再将所述王铜可湿性粉剂溶解于所述食醋稀释液中，得到所述种子处理剂。

相比现有技术，本发明具有如下有益效果：

1、本发明采用氯氧化铜和乙酸作为有效成分，二者协同作用，共同提高了杀菌率，既适用于干种子，也适用于湿种子，可以减少瓜类种子的带菌率。

2、本发明与大多数防治瓜类细菌性果斑病的种子处理药剂相比，本发明不需要清洗种子，也不影响种子质量，符合高效节水的原则。

3、本发明操作简便、安全，防治效果好，适合制种农户采后处理瓜类种子，

具体实施方式

一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，包括以下质量-体积-体积比的原料：

氯氧化铜1-5，乙酸0.2-2，水500-3000。

上述质量-体积-体积比的含义为：上述氯氧化铜的质量(g)：乙酸的体积(ml)：水的体积(ml)。

示例性地，上述氯氧化铜、乙酸、水的质量-体积-体积比可以为：2：2：3000、1：1.5：1000、5：0.2：1000、3.5：1.5：500、1.5：2：2500。

上述种子处理剂的制备方法为：按照上述配比称取和量取氯氧化铜、乙酸、和水，混合后得到种子处理剂。

在本发明优选的实施例中：

上述氯氧化铜来自于王铜可湿性粉剂，优选为50％王铜可湿性粉剂，其中氯氧化铜的质量百分比为50％；该50％王铜可湿性粉剂由江西禾益化工有限公司生产；上述乙酸来自于食醋，优选为白醋，其中乙酸的体积百分比含量为4.0％；该白醋的为龙门白醋，由北京六必居食品有限公司生产。

上述种子处理剂，包括以下质量-体积-体积比的原料：

50％王铜可湿性粉剂2-10，食醋5-50，水500-3000。

示例性地，上述50％王铜可湿性粉剂、食醋、水的质量-体积-体积比可以为：2：5：3000、10：5：500、5：50：1000、7.5：50：3000、3：45：2500。

上述处理剂的制备方法包括以下步骤：

先在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将该50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，得到种子处理剂。

该种子处理剂中，王铜可湿性粉剂中的有效成分为氯氧化铜，氯氧化铜不溶于水而溶于稀释过的弱酸性溶液中，起到杀菌的作用。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于本发明而不用于限制本发明的范围。对外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1

本实施例的防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，含有以下重量比的原料：

50％王铜可湿性粉剂4g(其中含有氯氧化铜2g)，食醋15mL(其中含有乙酸0.6mL)，水1L。

其制备方法为：

按照上述配比，在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，搅拌均匀，即得到种子处理剂。

实施例2

本实施例的防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，含有以下重量比的原料：

50％王铜可湿性粉剂2g(其中含有氯氧化铜1g)，食醋15mL(其中含有乙酸0.6mL)，水1L。

上述种子处理剂的制备方法为：

按照上述配比，在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，搅拌均匀，即得到种子处理剂。

参照以下对比例中的操作方法，本实施例的种子处理剂在人工接种Ac菌的干种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为1％，相对防治效果为84.6％；在对西瓜湿种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为2.1％。

实施例3

本实施例的防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，含有以下重量比的原料：

50％王铜可湿性粉剂10g(其中含有氯氧化铜5g)，食醋20mL(其中含有乙酸0.8mL)，水1L。

上述种子处理剂的制备方法为：

按照上述配比，在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，搅拌均匀，即得到种子处理剂。

参照以下对比例中的操作方法，本实施例的种子处理剂在人工接种Ac菌的干种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为0.5％，相对防治效果为92.3％；在对西瓜湿种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为1.3％。

实施例4

本实施例的防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，含有以下重量比的原料：

50％王铜可湿性粉剂5g(其中含有氯氧化铜2.5g)，食醋10mL(其中含有乙酸0.4mL)，水1L。

上述种子处理剂的制备方法为：

按照上述配比，在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，搅拌均匀，即得到种子处理剂。

参照以下对比例中的操作方法，本实施例的种子处理剂在人工接种Ac菌的干种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为0.75％，相对防治效果为88.5％；在对西瓜湿种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为1.5％。

实施例5

本实施例的防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，含有以下重量比的原料：

50％王铜可湿性粉剂8g(其中含有氯氧化铜4g)，食醋10mL(其中含有乙酸0.4mL)，水1L。

上述种子处理剂的制备方法为：

按照上述配比，在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，搅拌均匀，即得到种子处理剂。

参照以下对比例中的操作方法，本实施例的种子处理剂在人工接种Ac菌的干种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为0.5％，相对防治效果为92.3％；在对西瓜湿种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为1.2％。

实施例6

本实施例的防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，含有以下重量比的原料：

50％王铜可湿性粉剂5g(其中含有氯氧化铜2.5g)，食醋20mL(其中含有乙酸0.8mL)，水1L。

上述种子处理剂的制备方法为：

按照上述配比，在水中加入食醋，得到食醋稀释液；再将50％王铜可湿性粉剂溶解于该食醋稀释液中，搅拌均匀，即得到种子处理剂。

参照以下对比例中的操作方法，本实施例的种子处理剂在人工接种Ac菌的干种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为0％，相对防治效果为100％；在对西瓜湿种子对BFB的防治效果方面，平均发病率为0.7％。

对比例：

本对比例中，将实施例1的种子处理剂(即本对比例中的JY-W杀菌剂)与盐酸溶液、福尔马林溶液、杀菌剂1号溶液对于感染Ac菌的干种子和湿种子的杀菌效果加以比较。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1 Ac菌悬液的制备

供试菌株为Pslbtw 20，由中国农业科学院植物保护所提供。挑取保存的供试菌株在YDC斜面培养基上活化培养24h，加无菌水配成菌悬液，在紫外分光光度计600nm波长下测量菌悬液的OD值，用无菌水调整OD值至0.1左右(菌液浓度约为1×10⁸cfu/mL)，再稀释至4×10⁵cfu/mL，备用。

1.1.2供试药剂

选用4种杀菌剂，以不处理种子作为对照：1.5％盐酸，福尔马林100倍液，杀菌剂1号200倍液(中国农科院植物保护所)，JY-W(北京市农林科学院蔬菜研究中心自配)。

1.1.3供试种子

瓜类品种包括西瓜，甜瓜和南瓜，其种子均由北京市农林科学院蔬菜研究中心提供。

1.2试验方法

1.2.1干种子处理

不同种子处理药剂的比较：用浓度为4×10⁵cfu/ml的Ac(中文名：瓜类细菌性果斑病，病原拉丁学名Acidovorax citrulli,Ac)菌悬液(供试菌株为Pslbtw 20)浸泡商品种子30min，自然晾干。

以此为材料，选用4种杀菌剂(1.5％的盐酸溶液，1％的福尔马林溶液稀释了100倍液，0.5％的杀菌剂1号，JY-W杀菌剂(实施例1))处理种子，以未处理的种子作对照(CK)。处理方法如表1。

表1不同种子处理的方法

对不同瓜类作物的处理：以自然带菌的商品种子(京欣2号，大籽京欣2号，伊丽莎白甜瓜，西瓜砧2-南瓜)为材料，选用实施例1的种子处理剂处理每一个品种。处理方法为：处理种子30min，为防止种子漂浮起来，适当加重物压在种子上，适当搅动使种子充分接触药液，控干水分后晒干或晾干。每一个品种均以不处理种子作为对照。

1.2.2湿种子处理

从没有发现瓜类细菌性果斑病发生的西瓜生产大田取种，充分清洗干净后，分3种处理：Ⅰ.马上晾干，作为阴性对照；Ⅱ.取种后马上用浓度为4×10⁵cfu/ml的Ac菌悬液(供试菌株为Pslbtw 20)浸泡30min，部分种子自然晾干作为阳性对照；Ⅲ.另一部分菌悬液浸泡后的种子马上用实施例1的种子处理剂，处理种子30min，自然晾干。

1.2.3防治效果的检测

采用幼苗生长试验，在适宜的温湿度条件下播种试验种子，出苗后每天观察幼苗上的BFB可疑症状，直到21天时间，统计各处理发病的幼苗数，并计算发病率，以此来评估试验各处理的结果。

2.结果与分析

比较不同杀菌剂对人工感染Ac菌的西瓜干种子的处理效果，其检测结果表明：未处理的对照幼苗发病率为6.5％，采用4种杀菌剂处理的种子幼苗发病率在0～0.25％，相对防治效果在96.2～100％(表2)，4种杀菌剂处理的效果相当。

表2：不同药剂处理人工接种Ac菌的干种子对BFB的防治效果

实施例1的种子处理剂(即：JY-W)处理了4个自然感染Ac菌的葫芦科作物商品种子，涉及到西瓜、南瓜和甜瓜三个种类。检测结果表明：自然带菌的干种子经药剂处理后，其幼苗均没有发生BFB，而对照的幼苗BFB发病率在0.1～0.7％之间(表3)，不同品种间种子的带菌率存在差异。

表3：JY-W处理不同品种自然携带Ac菌的干种子对BFB的防治效果

新鲜的西瓜湿种子中，人工接种Ac菌的湿种子经药剂处理后，幼苗BFB的发病率为0.6％，而未接种Ac菌的湿种子生长的幼苗没有BFB的发生，人工接种Ac菌的湿种子不进行药剂处理，其幼苗BFB的发病率为11.2％(表4)。

表4：JY-W处理西瓜湿种子对BFB的防治效果

注：^*Ⅰ为未接种Ac菌的湿种子；Ⅱ为没有进行药剂处理人工接种Ac菌的湿种子；Ⅲ为经药剂处理人工接种Ac菌的湿种子。

3.讨论

西瓜细菌性果斑病是一种典型的种传病害，带菌种子是该病在西甜瓜生产区发生发展的主要初侵染源，因此采取方便有效的种子处理方法是提高种子健康质量，从源头控制该病害在田间发生流行的主要措施^[4]。

以上4种杀菌剂对瓜类种子携带Ac菌的处理效果，其结果表明，JY-W(即实施例1的种子处理剂)对4个自然带菌瓜类品种的处理防治效果为100％，而4种杀菌剂对人工接种Ac菌的西瓜种子处理后幼苗发病率仍为0.25～0.6％。分析认为，与自然带菌种子比较，人工接菌的种子上携带的病原菌数量多，种子的带菌率高，杀菌处理的效果不如带菌率低的种子。结果说明有针对性的种子处理措施能提高种子的健康质量，但是如果种子的带菌率过高，是不能通过种子处理来达到完全防治病害的目的，应该采取更加谨慎的措施。目前由于生产上普遍进行西瓜的工厂化嫁接育苗，其环境条件很适合细菌病害的快速传播，0.01％的种子传带即可导致田间果斑病的大规模爆发。这些也都说明了生产上尽管普遍采取严格的种子处理措施，瓜类细菌性果斑病的发生和流行还是没有得到完全控制。本对比例中人工接种Ac后，西瓜商品种子幼苗的果斑病发病率低(6.5％)，而大田取种的种子幼苗果斑病发病率高(11.2％)，推测有可能是商品种子为F₁种子，种子的遗传质量和生理质量均好于大田废弃瓜果上的F₂种子，因而抗病力较强。

目前防治瓜类细菌性果斑病的种子处理措施很多^[5-9]，大多数药剂处理种子后都需要充分的清洗种子，以防止影响种子质量。本发明对幼苗BFB的防治效果显著，处理种子后不需要清洗种子，对种子的质量没有任何影响(数据未显示)。目前西瓜是一家一户小规模的制种模式，农户没有安全防护设施，不具备安全操作处理种子的条件，大多数种子都是生产者收回种子后集中进行处理。研究表明^[3],种子干燥的过程中，病原菌在种子表面会进一步的繁殖，如果种子采收后不及时进行杀菌处理，无疑又增加了病原菌繁殖的机会。因此从安全性和处理程序上考虑，本发明具有操作简便和节约用水的特点，适合于农户采后及时处理种子，更为实用和高效。

参考文献：

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Claims (5)

1.一种防治瓜类细菌性果斑病的种子处理剂，其特征在于：所述处理剂包括以下质量-体积-体积比的原料：

氯氧化铜1-5，乙酸0.2-2，水500-3000；

所述质量-体积-体积比的含义为：上述氯氧化铜的质量g：乙酸的体积ml：水的体积ml。

2.根据权利要求1所述的种子处理剂，其特征在于：所述氯氧化铜来自于王铜可湿性粉剂；所述乙酸来自于食醋。

3.根据权利要求1所述的种子处理剂，其特征在于：所述氯氧化铜来自于50％王铜可湿性粉剂，其中氯氧化铜的质量百分比为50％；

所述乙酸来自于食醋，其中乙酸的体积百分比含量为4.0％。

4.根据权利要求3所述的种子处理剂，其特征在于：所述处理剂包括以下质量-体积-体积比的原料：

王铜可湿性粉剂2-10，食醋5-50，水500-3000；

所述质量-体积-体积比的含义为：上述氯氧化铜的质量g：乙酸的体积ml：水的体积ml。

5.权利要求2-4中任一项所述的种子处理剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

先在水中加入所述食醋，得到食醋稀释液；再将所述王铜可湿性粉剂溶解于所述食醋稀释液中，得到所述种子处理剂。