CN105007934B - 对麸质不耐受以及相关病症的治疗 - Google Patents
对麸质不耐受以及相关病症的治疗 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105007934B CN105007934B CN201380070689.9A CN201380070689A CN105007934B CN 105007934 B CN105007934 B CN 105007934B CN 201380070689 A CN201380070689 A CN 201380070689A CN 105007934 B CN105007934 B CN 105007934B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- protease
- common nepenthes
- seitan
- nepenthes
- derivatives
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title abstract description 22
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title abstract description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title description 4
- 241000208720 Nepenthes Species 0.000 claims abstract description 169
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 145
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 139
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 59
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims abstract 6
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims description 26
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 23
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 35
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 21
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 abstract description 11
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 138
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 133
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 40
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 39
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 38
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 38
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 34
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 34
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 34
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 31
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 31
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 30
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 27
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 13
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 13
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 13
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 13
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 13
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 12
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 11
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 11
- 102100027828 DNA repair protein XRCC4 Human genes 0.000 description 10
- 101000649315 Homo sapiens DNA repair protein XRCC4 Proteins 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 10
- 108010061711 Gliadin Proteins 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- -1 trypsase Proteins 0.000 description 7
- 206010012468 Dermatitis herpetiformis Diseases 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 6
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 5
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 5
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 5
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 108091005502 Aspartic proteases Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 4
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 4
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 4
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 4
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 4
- 244000082988 Secale cereale Species 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 4
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 4
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 235000010746 mayonnaise Nutrition 0.000 description 4
- 239000008268 mayonnaise Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000035101 Aspartic proteases Human genes 0.000 description 3
- 241000191380 Byblis gigantea Species 0.000 description 3
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 3
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 3
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZKLPARSLTMPFCP-OAQYLSRUSA-N 2-[2-[4-[(R)-(4-chlorophenyl)-phenylmethyl]-1-piperazinyl]ethoxy]acetic acid Chemical compound C1CN(CCOCC(=O)O)CCN1[C@@H](C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 ZKLPARSLTMPFCP-OAQYLSRUSA-N 0.000 description 2
- WEQNUNAIQXHGHB-UHFFFAOYSA-N 4,6-dioxo-10-propylpyrano[3,2-g]chromene-2,8-dicarboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C(CCC)=C1OC(C(O)=O)=CC(=O)C1=C2 WEQNUNAIQXHGHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 102000004580 Aspartic Acid Proteases Human genes 0.000 description 2
- 108010017640 Aspartic Acid Proteases Proteins 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZKLPARSLTMPFCP-UHFFFAOYSA-N Cetirizine Chemical compound C1CN(CCOCC(=O)O)CCN1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 ZKLPARSLTMPFCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 2
- 108700033317 EC 3.4.23.12 Proteins 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- 241000243251 Hydra Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- PVLJETXTTWAYEW-UHFFFAOYSA-N Mizolastine Chemical compound N=1C=CC(=O)NC=1N(C)C(CC1)CCN1C1=NC2=CC=CC=C2N1CC1=CC=C(F)C=C1 PVLJETXTTWAYEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JAUOIFJMECXRGI-UHFFFAOYSA-N Neoclaritin Chemical compound C=1C(Cl)=CC=C2C=1CCC1=CC=CN=C1C2=C1CCNCC1 JAUOIFJMECXRGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 2
- NFQIAEMCQGTTIR-UHFFFAOYSA-N Repirinast Chemical compound C12=CC=C(C)C(C)=C2NC(=O)C2=C1OC(C(=O)OCCC(C)C)=CC2=O NFQIAEMCQGTTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- YEEZWCHGZNKEEK-UHFFFAOYSA-N Zafirlukast Chemical compound COC1=CC(C(=O)NS(=O)(=O)C=2C(=CC=CC=2)C)=CC=C1CC(C1=C2)=CN(C)C1=CC=C2NC(=O)OC1CCCC1 YEEZWCHGZNKEEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003792 acrivastine Drugs 0.000 description 2
- PWACSDKDOHSSQD-IUTFFREVSA-N acrivastine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(\C=1N=C(\C=C\C(O)=O)C=CC=1)=C/CN1CCCC1 PWACSDKDOHSSQD-IUTFFREVSA-N 0.000 description 2
- SGRYPYWGNKJSDL-UHFFFAOYSA-N amlexanox Chemical compound NC1=C(C(O)=O)C=C2C(=O)C3=CC(C(C)C)=CC=C3OC2=N1 SGRYPYWGNKJSDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003731 amlexanox Drugs 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 2
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 2
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012970 cakes Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 description 2
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 229960001803 cetirizine Drugs 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 2
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 229940099112 cornstarch Drugs 0.000 description 2
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 229960001271 desloratadine Drugs 0.000 description 2
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010083141 dipeptidyl carboxypeptidase Proteins 0.000 description 2
- VLARUOGDXDTHEH-UHFFFAOYSA-L disodium cromoglycate Chemical compound [Na+].[Na+].O1C(C([O-])=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C([O-])=O)O2 VLARUOGDXDTHEH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- MJJALKDDGIKVBE-UHFFFAOYSA-N ebastine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(=O)CCCN1CCC(OC(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 MJJALKDDGIKVBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001971 ebastine Drugs 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N fexofenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003592 fexofenadine Drugs 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 229960001508 levocetirizine Drugs 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 229960003088 loratadine Drugs 0.000 description 2
- JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N loratadine Chemical compound C1CN(C(=O)OCC)CCC1=C1C2=NC=CC=C2CCC2=CC(Cl)=CC=C21 JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 2
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001144 mizolastine Drugs 0.000 description 2
- 230000002969 morbid Effects 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 229960004398 nedocromil Drugs 0.000 description 2
- RQTOOFIXOKYGAN-UHFFFAOYSA-N nedocromil Chemical compound CCN1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C(CCC)=C1OC(C(O)=O)=CC(=O)C1=C2 RQTOOFIXOKYGAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 235000015927 pasta Nutrition 0.000 description 2
- 235000021400 peanut butter Nutrition 0.000 description 2
- HIANJWSAHKJQTH-UHFFFAOYSA-N pemirolast Chemical compound CC1=CC=CN(C2=O)C1=NC=C2C=1N=NNN=1 HIANJWSAHKJQTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004439 pemirolast Drugs 0.000 description 2
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 229950009147 repirinast Drugs 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 229960000371 rofecoxib Drugs 0.000 description 2
- RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N rofecoxib Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=CC=CC=2)C(=O)OC1 RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N theobromine Chemical compound CN1C(=O)NC(=O)C2=C1N=CN2C YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008256 whipped cream Substances 0.000 description 2
- 229960004764 zafirlukast Drugs 0.000 description 2
- QSLPNSWXUQHVLP-UHFFFAOYSA-N $l^{1}-sulfanylmethane Chemical compound [S]C QSLPNSWXUQHVLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- JCZPMGDSEAFWDY-SQOUGZDYSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanamide Chemical compound NC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO JCZPMGDSEAFWDY-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- FEOHYDSNGHIXOM-WLDMJGECSA-N (3R,4R,5S,6R)-3-amino-6-(hydroxymethyl)-2-methyloxane-2,4,5-triol Chemical compound CC1(O)[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO FEOHYDSNGHIXOM-WLDMJGECSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFFTVZUIDYJUQS-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxy-4-oxo-10-propyl-6,7,8,9-tetrahydrobenzo[g]chromene-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C(CCC)=C1CCCCC1=C2O VFFTVZUIDYJUQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 241001466804 Carnivora Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 1
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- VGMFHMLQOYWYHN-UHFFFAOYSA-N Compactin Natural products OCC1OC(OC2C(O)C(O)C(CO)OC2Oc3cc(O)c4C(=O)C(=COc4c3)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C(O)C1O VGMFHMLQOYWYHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 101710147593 Cysteine proteinase B Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108010030718 DegP protease Proteins 0.000 description 1
- 108010001682 Dextranase Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 1
- 101100449439 Drosophila melanogaster grass gene Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710087459 Gamma-gliadin Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 102000004286 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000895 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Proteins 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010029660 Intrinsically Disordered Proteins Proteins 0.000 description 1
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical group C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical group CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 229940122696 MAP kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- UCHDWCPVSPXUMX-TZIWLTJVSA-N Montelukast Chemical compound CC(C)(O)C1=CC=CC=C1CC[C@H](C=1C=C(\C=C\C=2N=C3C=C(Cl)C=CC3=CC=2)C=CC=1)SCC1(CC(O)=O)CC1 UCHDWCPVSPXUMX-TZIWLTJVSA-N 0.000 description 1
- 206010028116 Mucosal inflammation Diseases 0.000 description 1
- HTLZVHNRZJPSMI-UHFFFAOYSA-N N-ethylpiperidine Chemical compound CCN1CCCCC1 HTLZVHNRZJPSMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000208721 Nepenthes alata Species 0.000 description 1
- 244000038458 Nepenthes mirabilis Species 0.000 description 1
- 241001627620 Nepenthes rafflesiana Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N Pravastatin Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710180316 Protease 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710180012 Protease 7 Proteins 0.000 description 1
- 101710127332 Protease I Proteins 0.000 description 1
- 108700039882 Protein Glutamine gamma Glutamyltransferase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100038095 Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 2 Human genes 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N SJ000287055 Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 241000208442 Sarracenia Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710137710 Thioesterase 1/protease 1/lysophospholipase L1 Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000013 aluminium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910000329 aluminium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003699 antiulcer agent Substances 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 1
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000002318 cardia Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000021245 dietary protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- UZBQIPPOMKBLAS-UHFFFAOYSA-N diethylazanide Chemical compound CC[N-]CC UZBQIPPOMKBLAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- MVCOAUNKQVWQHZ-UHFFFAOYSA-N doramapimod Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1N1C(NC(=O)NC=2C3=CC=CC=C3C(OCCN3CCOCC3)=CC=2)=CC(C(C)(C)C)=N1 MVCOAUNKQVWQHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015177 dried meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940031098 ethanolamine Drugs 0.000 description 1
- 229940012017 ethylenediamine Drugs 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- XGIHQYAWBCFNPY-AZOCGYLKSA-N hydrabamine Chemical compound C([C@@H]12)CC3=CC(C(C)C)=CC=C3[C@@]2(C)CCC[C@@]1(C)CNCCNC[C@@]1(C)[C@@H]2CCC3=CC(C(C)C)=CC=C3[C@@]2(C)CCC1 XGIHQYAWBCFNPY-AZOCGYLKSA-N 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 1
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940065725 leukotriene receptor antagonists for obstructive airway diseases Drugs 0.000 description 1
- 239000003199 leukotriene receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000036445 liquid secretion Effects 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 235000013310 margarine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003264 margarine Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N mevastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=CCC[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N 0.000 description 1
- BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N mevastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C21 BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 229960005127 montelukast Drugs 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 235000012459 muffins Nutrition 0.000 description 1
- 108091005763 multidomain proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002170 nanoflow liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010091212 pepstatin Proteins 0.000 description 1
- 229950000964 pepstatin Drugs 0.000 description 1
- FAXGPCHRFPCXOO-LXTPJMTPSA-N pepstatin A Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)C[C@H](O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CC(C)C FAXGPCHRFPCXOO-LXTPJMTPSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000003053 piperidines Chemical class 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 229960002965 pravastatin Drugs 0.000 description 1
- TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N pravastatin Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)[C@H]2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@H](O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N 0.000 description 1
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 235000012434 pretzels Nutrition 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 1
- 229950003082 proxicromil Drugs 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N spiromesifen Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1C(C(O1)=O)=C(OC(=O)CC(C)(C)C)C11CCCC1 GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960004559 theobromine Drugs 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008371 tortilla/corn chips Nutrition 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N tripropylamine Chemical compound CCCN(CCC)CCC YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/63—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/06—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/488—Aspartic endopeptidases (3.4.23), e.g. pepsin, chymosin, renin, cathepsin E
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/23—Aspartic endopeptidases (3.4.23)
- C12Y304/23012—Nepenthesin (3.4.23.12)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本文提供一种包含猪笼草蛋白酶或其衍生物的组合物、食品以及使用猪笼草蛋白酶或其衍生物调节麸质不耐受以及诸如乳糜泻之类的相关病症的方法。
Description
技术领域
本发明提供用于治疗麸质不耐受以及相关病症(例如，乳糜泻)的组合物、食物和方法。
背景技术
在麸质不耐受的个体体内，对含有麸质的小麦、大麦、黑麦以及可能的燕麦的消化可能会引起异常自体免疫反应，例如，乳糜泻、小麦过敏症和疱疹样皮炎。麸质是富含谷氨酰胺和脯氨酸的谷蛋白和醇溶蛋白分子的混合物。大多数具有异常自体免疫反应的个体表达人白细胞抗原(HLA)DQ2或DQ8分子。自体免疫反应引起小肠粘膜绒毛萎缩的发生，并伴有隐窝肥大和粘膜炎症。乳糜泻的症状可因个体差异而不同并且所述症状可包括疲劳、慢性腹泻、便秘、营养素吸收不良、体重降低、腹胀、贫血中的一种或多于一种并且大大提高发展成骨质疏松和肠恶性肿瘤(淋巴瘤和癌)的风险。
治疗麸质不耐受通常涉及终生严格的不含麸质的膳食。然而，不含麸质的膳食并不方便，会受到限制并且麸质很难避免。因此，本领域亟需对麸质不耐受的备选治疗方法。
发明内容
本发明涉及如下发现：酶猪笼草蛋白酶具有较高的裂解蛋白质和寡肽(包括麸质)的蛋白水解活性，尤其是在低pH(例如，约2-3)条件下。猪笼草蛋白酶(EC 3.4.23.12)是起源于植物的天冬氨酸蛋白酶，该天冬氨酸蛋白酶可从多种植物来源中分离或浓缩，所述植物例如猪笼草(肉食性猪笼草植物，carnivorous pitcher plant)的猪笼草分泌物，在热带地区通常称为瓶子草(monkey cups)。等人的文章“Digestive Enzymes Secretedby the Carnivorous Plant Nepenthes macferlanei L.”，Planta(Berl.)119,39-46(1974)。在本领域中目前已发现猪笼草蛋白酶的活性比胃蛋白酶(EC 3.4.23.1)的活性高约1000倍，胃蛋白酶是存在于人类胃部的酶，其部分负责将食物蛋白质降解成肽。目前已发现，猪笼草蛋白酶具有比胃蛋白酶高得多的松弛的特异性(relaxed specificity)，其裂解除了G,S,T,V,I和W之外的大部分氨基酸残基之后的位点。值得注意的是，猪笼草蛋白酶裂解K,R和P之后的位点。通过比较，胃蛋白酶对疏水残基F,L和M表现出高效裂解，但是对P,H,K和R之后的位点的裂解基本被禁止。
麸质不耐受以及相关病症和症状，例如乳糜泻和/或疱疹样皮炎，由患者对小肠粘膜内的麸质的异常免疫反应引起。一些麸质成分耐受胃肽酶和胰腺肽酶的裂解，所述胃肽酶和胰腺肽酶例如胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶，等等。虽然不受任何理论的限制，本发明涉及在麸质到达患者的肠道之前由猪笼草蛋白酶将麸质降解成无毒肽，从而降低进入小肠的毒性麸质蛋白质或肽的水平。因为猪笼草蛋白酶是酸稳定的，所以其与胃部pH具有相容性并且其消化麸质，从而调节患者的麸质不耐受或相关病症或症状。
考虑到猪笼草蛋白酶在低pH条件下具有高活性和宽活性谱，猪笼草蛋白酶尤其在胃部消化麸质蛋白质方面有用。将麸质降解为无毒肽也称为麸质的解毒。
一方面，本发明提供一种调节具有麸质不耐受的患者体内的麸质不耐受的方法，所述方法包括将有效量的猪笼草蛋白酶或其衍生物给药于所述患者。
在一种实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物作为食品添加剂施用，这样，猪笼草蛋白酶或其衍生物与含有麸质的食品结合以调节或抑制与麸质不耐受有关的病症。猪笼草蛋白酶或其衍生物可单独使用或与一些食物联合使用。
另一方面，本发明提供一种调节患者体内由麸质不耐受介导的病症的方法，所述方法包括将有效量的猪笼草蛋白酶或其衍生物给药于所述患者。仅举例而言，这些病症包括乳糜泻、小麦过敏症、麸质敏感和/或疱疹样皮炎。
在任何事件中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可在食用含有麸质或怀疑含有麸质的食物之前给药于患者、在食用含有麸质或怀疑含有麸质的食物的同时给药于患者或在食用含有麸质或怀疑含有麸质的食物之后立刻给药于患者。
另一方面，本发明提供一种调节有此需要的患者体内的麸质不耐受或相关病症的方法，所述病症例如乳糜泻、小麦过敏症、麸质敏感或疱疹样皮炎，所述方法包括在所述患者食用含有麸质或怀疑含有麸质的食物之前用有效量的猪笼草蛋白酶处理含有麸质或怀疑含有麸质的食物。
另一方面，本发明提供一种含有猪笼草蛋白酶的食物或组合物。
本发明的这些或其他方面在下文中进一步描述。
附图说明
图1显示了猪笼草蛋白酶优先在(A)裂解位点的P1或N末端侧和(B)裂解位点的P1’或C末端侧裂解。根据氨基酸类型对数据进行分组，并且将数据与来自Hamuro等人的文章“Specificity of immobilized porcine pepsin in H/D exchange compatibleconditions”,Rapid Communications in Mass Spectrometry22(7):1041-1046(2008)中的胃蛋白酶数据的类似结果进行比较。黑色柱表示猪笼草蛋白酶消化，灰色柱表示胃蛋白酶消化。裂解％表示相对于一组给定残基的总数量的在给定残基处观察到的裂解数量。猪笼草蛋白酶数据获自六种变性蛋白的消化物，如实施例中所描述的。
图2显示了XRCC4复合肽序列图谱，其根据结构域类型进行排布。所述肽在四种不同的酶和底物的比例(65:1至520:1，蓝色柱)条件下使用胃蛋白酶消化获得，以及在四种不同的酶和底物的比例(0.0075:1至0.38:1，红色柱)条件下使用猪笼草蛋白酶消化获得。
图3显示了在猪笼草消化之后获得的肽的平均MASCOT分数，其由C-末端氨基酸分组。用于每次计算的肽的数目与末端氨基酸有关，如在柱上方所示。肽获自六种变性蛋白的消化物，如实施例中所描述的。
图4显示了在多种不同的酶和底物的比例(如图例所示)条件下用猪笼草蛋白酶(A)和胃蛋白酶(B)消化的XRCC4的肽离子色谱图(PIC)。用于酶消化的PIC通过柱上的相同的质量负载的底物产生。
图5显示了在37℃条件下，1分钟、5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、60分钟、130分钟、360分钟或810分钟之后，使用LC-MS/MS，通过猪笼草蛋白酶消化小麦中的麦胶蛋白而识别的所有肽的平均长度。分数上的95％的置信度切割(p<0.05)用于除去假阳性识别。肽长度的相对标准偏差在插图中显示。
图6显示了在37℃条件下，消化1分钟、5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、60分钟、130分钟、360分钟或810分钟之后，由LC-MS/MS识别的肽的数目，根据长度分组。数据如图5所示。
图7显示了与图5相同的数据，作为在37℃条件下，消化10分钟、60分钟、120分钟、360分钟或810分钟之后获得一些长度的可能性。
具体实施方式
I.释义
除非另有说明，本文使用的所有技术术语和科学术语具有与本领域普通技术人员通常理解的含义相同的含义。虽然与本文描述的那些方法和材料类似或等同的任何方法和材料可用于实践或测试本发明，但是，目前本文描述优选的方法、设备和材料。本文引用的所有科技出版物和专利公开的全部内容通过引用并入本文。本文中并没有承认鉴于在先发明而本发明无权优先于这些公开的内容。
除非上下文中另有明确说明，说明书和权利要求书中使用的单数形式的冠词(“a”、“an”和“the”)包括复数指代物。
本文使用的术语“包含(comprising)”是指组合物和方法包括所记载的元素，但是不排除其他元素。限定组合物和方法时使用的“基本由……构成”是指排除对组合有任何实质意义的其他元素。例如，基本由本文定义的元素构成的组合物可不排除本质上不影响要求保护的本发明的基本特性和新特性的其他元素。“由……构成”是指排除高于痕量的所记载的其他成分和实质方法步骤。这些过渡术语中的每一个所限定的实施方式在本发明的范围内。
本文使用的术语“麸质”通常是指存在于小麦或相关谷物物种中的蛋白质，所述相关谷物物种包括大麦和黑麦，所述蛋白质对某些个体具有潜在的有害作用。麸质蛋白包括麦胶蛋白和谷蛋白，所述麦胶蛋白例如，α-麦胶蛋白，β-麦胶蛋白，γ-麦胶蛋白和ω-麦胶蛋白，它们是单体蛋白质，所述谷蛋白是由二硫化物键连接在一起的高分子量和低分子量亚单位的聚集体的高度异源性混合物。本领域中已表征了许多小麦麸质蛋白，请参见，例如，Woychik等人,Amino Acid Composition of Proteins in Wheat Gluten,J.Agric.Food Chem.,9(4),307–310(1961)。本文使用的术语麸质还包括寡肽，其通过正常人类对麸质蛋白的消化，从含有麸质的食物中衍生得到并且引起异常免疫反应。这些寡肽中的一些对正常消化酶具有耐受性。包括上述蛋白质和寡肽的麸质被认为在具有麸质不耐受的患者的乳糜泻过程中充当T细胞抗原。
术语“猪笼草蛋白酶”是指酶学委员会编号EC3.4.23.12的天冬氨酸蛋白酶并且包括猪笼草蛋白酶的所有亚型和变体(例如，I型猪笼草蛋白酶和II型猪笼草蛋白酶)及其盐。盐类是指由猪笼草蛋白酶和一种或多于一种碱或者一种或多于一种酸形成的那些盐，所述碱和所述酸维持游离猪笼草蛋白酶的生物有效性和性质，并且，所述盐不是生理学上不理想的或其他方面不理想的。由无机碱衍生得到的盐包括但不限于：钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐，等等。由有机碱衍生得到的盐包括但不限于：下列胺的盐，伯胺、仲胺和叔胺，包括天然生成的取代的胺在内的取代的胺，环胺和碱性离子交换树脂，例如，异丙胺、三甲基胺、二乙基胺、三乙基胺、三丙基胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明青霉素(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙烯基二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂，等等。可形成盐的酸包括但不限于：无机酸和有机酸，所述无机酸例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，等等；所述有机酸例如，乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸，等等。
猪笼草蛋白酶衍生物包括生物等同物、其片段和延长的猪笼草蛋白酶及其盐，这些衍生物保持了对麸质解毒的能力。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶衍生物包括猪笼草蛋白酶的生物等同物。“生物等同物”包括与猪笼草蛋白酶具有至少约80％同源性或一致性的那些生物等同物，可选地，与猪笼草蛋白酶具有至少约85％同源性的那些生物等同物，可选地，与猪笼草蛋白酶具有至少约90％同源性的那些生物等同物，可选地，与猪笼草蛋白酶具有至少约95％同源性的那些生物等同物，可选地，与猪笼草蛋白酶具有98％同源性的那些生物等同物，可选地，“生物等同物”包括由在严格条件下与编码猪笼草蛋白酶或其补体的核苷酸序列杂交的多核苷酸编码的多肽或蛋白质，同时该多肽或蛋白质保持期望的结构并表现出猪笼草蛋白酶蛋白水解活性的至少一部分。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶衍生物是具有全长猪笼草蛋白酶蛋白质中的至少约20个连续氨基酸的猪笼草蛋白酶片段，或者是具有全长猪笼草蛋白酶蛋白质中的至少约50个连续氨基酸的猪笼草蛋白酶片段，或者是包含猪笼草蛋白酶中的100或多于100个连续氨基酸直至猪笼草蛋白酶的全部蛋白质的猪笼草蛋白酶片段。猪笼草蛋白酶衍生物还包括具有额外序列的猪笼草蛋白酶。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶衍生物具有猪笼草蛋白酶的蛋白水解活性中的至少约10％，或猪笼草蛋白酶的蛋白水解活性中的至少约50％，或猪笼草蛋白酶的蛋白水解活性中的至少约70％，或猪笼草蛋白酶的蛋白水解活性中的至少约90％，或猪笼草蛋白酶的蛋白水解活性的100％或更高。
“杂交”是指可在不同“严格程度”条件下进行的杂交反应。增加杂交反应的严格程度的条件是本领域周知的并且在本领域中公开，参见，例如，Sambrook and Russell编辑.(2001)Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第三版。相关条件的实例包括(以增加严格程度的顺序)：孵育温度25℃，37℃，50℃和68℃；缓冲液浓度10X SSC,6X SSC,1X SSC,0.1X SSC(其中，SSC是0.15M NaCl和15mM柠檬酸盐缓冲液)以及使用其他缓冲系统的它们的等同物；甲酰胺浓度0％，25％，50％和75％；孵育时间5分钟至24小时，以及逐渐增加洗涤持续时间，逐渐增加频率或逐渐减低缓冲液浓度。
术语“调节(modulate或modulating)”是指对受治者体内的疾病或失调的任何治疗，所述受治者例如，哺乳动物，所述“调节”包括：
·预防疾病或失调或者防止受到疾病或失调的影响，即，使异常生物反应或症状不发展；
·抑制疾病或失调，即，禁止或抑制异常生物反应和/或临床症状的发展；和/或
·缓解疾病或失调，即，使异常生物反应和/或临床症状衰退。
本文使用的术语“预防”是指对有此需要的患者进行预防性治疗。所述预防性治疗可通过向处于患上疾病风险中的受治者提供合适剂量的治疗剂来完成，从而基本上防止疾病的发作。
本文使用的术语“病症”是指疾病状态，将本文提供的化合物、组合物和方法用于该疾病状态。
本文使用的术语“患者”或“受治者”是指哺乳动物，并且包括人类和非人类哺乳动物。在本文的具体实施方式中，患者或受治者是人类。
在数值之前使用的术语“约”表示数值可在合理的范围内发生改变，例如，±5％,±1％,和±0.2％。
II.方法和组合物
一方面，本发明提供一种用于调节具有麸质不耐受的患者体内的麸质不耐受的方法，所述方法包括将有效量的猪笼草蛋白酶或其衍生物给药于所述患者。
在一种实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物作为食品添加剂施用，这样，猪笼草蛋白酶或其衍生物与含有麸质的食品结合以调节或抑制与麸质不耐受有关的病症。猪笼草蛋白酶或其衍生物可单独使用或与一些食品联合使用。
另一方面，本发明提供一种用于调节由患者体内的麸质不耐受介导的病症的方法，所述方法包括将有效量的猪笼草蛋白酶或其衍生物给药于所述患者。仅举例而言，这些病症包括乳糜泻、小麦过敏症、麸质敏感和疱疹样皮炎。猪笼草蛋白酶或其衍生物可在消化含有麸质或怀疑含有麸质的食品之前施用，在消化含有麸质或怀疑含有麸质的食品的同时施用，或者在消化含有麸质或怀疑含有麸质的食品之后立刻施用。
猪笼草蛋白酶具有两种已知的亚型：I型猪笼草蛋白酶(已知具有两种变体，猪笼草蛋白酶Ia和猪笼草蛋白酶Ib)以及II型猪笼草蛋白酶。猪笼草蛋白酶的序列以及编码猪笼草蛋白酶的cDNA的核苷酸序列是本领域已知的，例如，在Athauda SB等人的文章,Enzymic and structural characterization of nepenthesin,a unique member of anovel subfamily of aspartic proteinases,Biochem.J.381:295–306(2004)中描述的。
猪笼草蛋白酶可从天然来源通过已知的方法浓缩或纯化，所述已知的方法例如，过滤或基于固定的胃酶抑素的亲和性纯化，所述天然来源例如诸如猪笼草之类的植物的猪笼草分泌物。除了从植物来源中分离之外，猪笼草蛋白酶或其衍生物可通过化学合成或生物合成方法，使用本领域已知的常规方法制备。化学合成方法可根据猪笼草蛋白酶的序列通过连接氨基酸来完成。各种不同的肽连接方法和商用的肽合成装置可用于合成肽或蛋白质，例如，Applied Biosystems,Inc.,Foster City,Calif.,Beckman以及其他生产商的自动合成仪。猪笼草蛋白酶的生物合成方法可通过使用已知的生物工程技术用猪笼草蛋白酶的DNA和/或信使RNA转录细胞，使用重组生成系统完成，这样，所述细胞能够生成猪笼草蛋白酶。例如，猪笼草蛋白酶可通过在生物体内和植物细胞培养物中建立宿主载体系统而生成，所述生物体例如，大肠杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母、乳酸菌、杆菌、曲霉，所述植物细胞培养物例如，烟草细胞，等等。
合成的猪笼草蛋白酶或其衍生物可根据已知的方法浓缩或纯化，所述已知的方法例如用于从植物猪笼草液体中分离猪笼草蛋白酶或其衍生物的那些方法。
在一些实施方式中，从天然来源或合成的来源中分离的蛋白质产物包含至少20％重量的猪笼草蛋白酶或其衍生物。在一些实施方式中，分离的蛋白质产物包含至少约50％重量，约75％重量，约90％重量，约95％重量的猪笼草蛋白酶或其衍生物。在一些实施方式中，分离的蛋白质产物包含至少99％重量的猪笼草蛋白酶或其衍生物。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在患者消化含有麸质或怀疑含有麸质的食物之前给药于所述患者。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在使所述猪笼草蛋白酶或其衍生物至少部分有效(例如，原始活性的至少约10％，20％，50％，70％，90％)降解患者将要消化的食物中的麸质的时间段内施用。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在患者消化食物之前不超过约4小时、3小时、2小时、1小时或30分钟施用。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在患者消化含有麸质或怀疑含有麸质的食物的同时给药于患者。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物与食物一同施用，例如，食物中的成分或添加剂。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物与食物分开施用。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在患者消化含有麸质或怀疑含有麸质的食物之后立刻给药于患者。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在食物中的麸质中的至少一部分(例如，至少约10％，20％，50％，70％，90％)仍然留在患者胃部的时间段内施用。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在患者消化食物之后不超过4小时、3小时、2小时、1小时或30分钟施用。
猪笼草蛋白酶或其衍生物可以多种组合物的形式单独施用或与合适的药学上可接受的载体或稀释剂或膳食成分一同施用。
因此，另一方面，本发明提供一种可食用的组合物，其包括猪笼草蛋白酶或其衍生物。在一些实施方式中，所述组合物是膳食补充品。在一些实施方式中，所述组合物是药物组合物。在一些实施方式中，所述组合物是食品或食品添加剂。所述组合物可配制成固体、半固体或液体形式，例如，片剂、胶囊、粉剂、颗粒、软膏、溶液、注射液、凝胶和微球。猪笼草蛋白酶或其衍生物的施用可通过各种不同的方式完成，例如，通过口服的方式。
对于口服而言，猪笼草蛋白酶或其衍生物可单独使用或与合适的添加剂联合使用以形成片剂、粉末、颗粒、胶囊、糖浆、液体、悬浮液，等等。例如，猪笼草蛋白酶或其衍生物的固体口服形式可由常用添加剂、崩解剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂和调味剂制备。赋形剂的非限定性实例包括乳糖、甘露醇、玉米淀粉、土豆淀粉、结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯树胶、玉米淀粉、羧甲基纤维素钠、滑石粉、硬脂酸镁、调味剂和着色剂。在一些实施方式中，制剂在患者的胃部释放猪笼草蛋白酶或其衍生物，这样，麸质可被猪笼草蛋白酶或其衍生物降解。
猪笼草蛋白酶或其衍生物可任选地在存在合适的缓冲液(例如，磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、组氨酸缓冲液、咪唑缓冲液)和赋形剂(例如，冷冻保护剂，例如，蔗糖、乳糖、海藻糖)的条件下通过水性溶液冻干。冻干的饼可任选地与赋形剂混合并制成不同形式。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物作为食品添加剂与含有麸质或怀疑含有麸质的食品一同施用，所述食品例如，面包、意大利面，麦片粥，等等，所述食品由小麦、黑麦和大麦等制成。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物作为这些食品中的成分而添加。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物在食用食品之前分散于食品中，任选地在猪笼草蛋白酶或其衍生物为惰性的pH条件下分散于食品中，所述pH条件例如大于等于5的pH条件。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可制成或掺入粉末、涂抹料、喷雾、酱料、蘸料、搅打奶油等，所述猪笼草蛋白酶或其衍生物可在患者食用食物时施加于含有麸质的食品。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可制成引起人们食欲的形式，例如，糖果、口香糖、膳食添加咀嚼物、糖浆，等等，以易于服用。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可与常见食品种类混合，例如，糖、盐、沙拉酱、调味料、奶酪、黄油、人造奶油、涂抹料、黄油、煎炸起酥油、蛋黄酱、膳食产品、坚果酱、种子酱、桃仁酱、花生酱，等等。优选地，包含猪笼草蛋白酶的食品种类或添加剂不需要在患者消化之前进行加热，这样由于温度升高而引起的可能的猪笼草蛋白酶或其衍生物的活性损失可被最小化。
通常，猪笼草蛋白酶或其衍生物可以安全且足以产生期望的麸质解毒作用的量施用。确切的量取决于多种因素，例如，所施用的特定猪笼草蛋白酶或其衍生物，食物的量或类型，患者对麸质的敏感性，等等。一般而言，猪笼草蛋白酶或其衍生物在需要时施用，例如在患者将要或正在或已经食用了含有麸质或怀疑含有麸质的食物时。猪笼草蛋白酶或其衍生物可以约0.01mg/kg体重/天至约1000mg/kg体重/天的剂量施用，或者对于一般人而言，猪笼草蛋白酶或其衍生物可以每剂约1mg至约100g的剂量施用。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可在0.01mg/kg体重/天，0.1mg/kg体重/天，1mg/kg体重/天，5mg/kg体重/天，10mg/kg体重/天，50mg/kg体重/天，100mg/kg体重/天，500mg/kg体重/天，或1000mg/kg体重/天的条件下施用并且可在这些值(包括端点值)中任何两个值之间的范围值条件下施用。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可在1mg/剂，10mg/剂，100mg/剂，200mg/剂，500mg/剂，700mg/剂，1g/剂，10g/剂，20g/剂，50g/剂，70g/剂，100g/剂的条件下施用并且可在这些值(包括端点值)中的任何两个值之间的范围值条件下施用。在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物可每天施用一次、两次、三次等等，这取决于患者消化含麸质的食品的次数。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物与另一酶一同施用，所述另一酶例如，胃部蛋白酶(例如，胃蛋白酶和胃蛋白酶原)，另一天冬氨酸蛋白酶(例如，Chen等人在Aspartic proteases gene family in rice:Gene structure and expression,predicted protein features and phylogenetic relation,Gene442:108–118(2009)中所描述的那些)，以及诸如美国专利第7,910,541号中所描述的脯酰肽内切酶(PEP)，IV型二肽基肽酶(DPP IV)和二肽基羧肽酶(DCP)或半胱氨酸蛋白酶B之类的酶。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶与另一药剂一同给药于患者。可与猪笼草蛋白酶一同给药的药剂的非限定性实例包括组织转谷氨酰酶的抑制剂，诸如HMG-CoA还原酶抑制剂(例如，康白丁(compactin)，洛伐他汀(lovastatin)，辛伐他汀(simvastatin)，普伐他汀(pravastatin)和阿伐他汀(atorvastatin))之类的抗炎剂，白三烯受体拮抗剂(例如，孟鲁司特(montelukast)和扎鲁司特(zafirlukast))，COX-2抑制剂(例如，塞来昔布(celecoxib)和罗非昔布(rofecoxib))，p38MAP激酶抑制剂(例如，BIRB-796)；诸如色甘酸钠(色甘酸)，吡嘧司特(pemirolast)，普希罗米(proxicromil)，瑞吡司特(repirinast)，硫蒽唑(doxantrazole)，氨来占诺(amlexanox)，奈多罗米(nedocromil)以及普克罗米(probicromil)之类的肥大细胞稳定剂；抗溃疡剂，诸如抗组胺剂(例如，阿伐斯汀(acrivastine)，西替利嗪(cetirizine)，地氯雷他定(desloratadine)，依巴斯汀(ebastine)，非索非那定(fexofenadine)，左西替利嗪(levocetirizine)，氯雷他定(loratadine)和咪唑斯汀(mizolastine))之类的抗过敏剂，谷氨酰胺转移酶2(TG 2)的抑制剂，以及抗TNFα药剂。
另一方面，本发明提供一种用于治疗有此需要的患者体内的麸质不耐受或相关病症的方法，所述病症例如，乳糜泻、小麦过敏症、麸质敏感和疱疹样皮炎，所述方法包括在所述患者食用含有麸质或怀疑含有麸质的食品之前用有效量的猪笼草蛋白酶或其衍生物处理含有麸质或怀疑含有麸质的食品。在一些实施方式中，所述食品在其制备过程中，优选地在任何加热步骤之后，与有效量的猪笼草蛋白酶或其衍生物结合。
另一方面，本发明提供一种食品，其包含猪笼草蛋白酶或其衍生物。在一些实施方式中，所述食品含有麸质或怀疑含有麸质，所述食品例如，烘烤产品(例如，蛋糕、松饼、甜甜圈、甜糕饼、面包卷以及面包)，意大利面，咸饼干，墨西哥炸玉米片，麦片粥等等，它们由小麦、黑麦和大麦制成。在一些实施方式中，所述食品可与另一含有麸质或怀疑含有麸质的食品一同食用。这些食品的非限定性实例包括面粉、涂抹料，喷雾，酱料，蘸料，搅打奶油，糖果，口香糖，糖浆，糖，盐，沙拉酱，调味剂，奶酪，黄油，人造奶油，涂抹料，黄油，煎炸起酥油，蛋黄酱，乳制品，坚果酱，种子酱，桃仁酱，花生酱，等等。
在一些实施方式中，猪笼草蛋白酶或其衍生物与食品混合或用于预先处理含有麸质的食物。食品中存在的猪笼草蛋白酶可通过酶解的方式被活化以在消化食物之前或消化食物过程中降低食物中的麸质水平。
III.实施例
除非另有说明，说明书中使用的缩写具有如下含义：
g＝克
kDa＝千道尔顿
kg＝千克
L＝升
LC＝液相色谱
mg＝毫克
min＝分钟
mL＝毫升
mM＝豪摩尔
MS＝质谱
nM＝纳摩尔
pM＝微微摩尔
s.d.＝标准偏差
μCi＝微居里
μL＝微升
μM＝微摩尔
μm＝微米
℃＝摄氏度
这些单个字母符号在代表氨基酸时具有下列含义：
A＝丙氨酸
R＝精氨酸
N＝天冬酰胺
D＝天冬氨酸
C＝半胱氨酸
E＝谷氨酸
Q＝谷氨酰胺
G＝甘氨酸
H＝组氨酸
I＝异亮氨酸
L＝亮氨酸
K＝赖氨酸
M＝蛋氨酸
F＝苯丙氨酸
P＝脯氨酸
S＝丝氨酸
T＝苏氨酸
W＝色氨酸
Y＝酪氨酸
V＝缬氨酸
材料和方法
化学品
HPLC级的水和乙腈形成Burdick和Jackson，购自VWR。甲酸、Tris、甘氨酸购自Sigma Aldrich。
植物培养
莱佛士猪笼草(Nepenthes rafflesiana)、苹果猪笼草(Nepenthes ampularia)、奇异猪笼草(Nepenthes mirabilis)和海盗猪笼草(Nepenthes globosa)的移植株购自Keehns Carnivores(http://www.keehnscarnivores.ca)。这些移植株用木皮、珍珠岩、泥煤苔和腐殖土栽培(分别为40％、35％、10％、5％)。生长条件包括每天14小时光照，80％湿度和23℃至28℃的温度以及每周浇水两次至三次。在猪笼草成熟之后，向每株植物供给一个或两个果蝇并且一周之后收获猪笼草液体。留下猪笼草及其分泌物进行回收持续一周，随后进行第二轮供给和提取。
液体制备
从所有四种植物中收集猪笼草液体并将其合并。粗猪笼草液体首先通过0.22μm的过滤器进行澄清，随后使用Amicon Ultra离心10kDa分子量截留过滤器(均来自Millipore)使液体浓缩80倍至100倍。在用于消化之前，用100mM甘氨酸HCl(pH 2.5)酸活化浓缩液持续3小时，随后在过滤设备中用100mM甘氨酸-HCl(pH 2.5)洗涤3次，每次洗涤使用10X液体体积。最后的分离物随后基于猪笼草液体的原始采样再次稀释至11倍浓度。
通过质谱绘制猪笼草蛋白酶的消化
蛋白质的消化使用LEAP HTX-PAL自动采样仪和设计为氢/重氢交换(HDX)应用的分配系统在溶液中进行，并且使用AB Sciex Triple-TOF 5600QqTOF质谱仪收集数据。使用Mascot(v2.3)通过MS/MS数据识别肽。简言之，在10℃，将8μL，8μM蛋白质(XRCC4,XLF,连接酶IV-串联BRCT结构域，PNK，肌红蛋白或细胞色素C)与10μL，11倍浓缩的液体混合2分钟。肌红蛋白和细胞色素C购自Sigma。在稀释至1μM底物浓度之后，将15μL注射至冷冻反相LC系统中(4℃)，该系统连接至质谱仪。肽被捕获在5cm，200μm i.d.Onyx C18整体式柱(Phenomenex Inc.)上并且在10分钟内用梯度为3％至40％的乙腈洗脱。选择这些分析中检测到的肽的MS/MS光谱的多个信息依赖性获得物中的CID片段，类似于气相分馏策略。Blonder J,等人，Proteomic investigation of natural killer cell microsomesusing gas-phase fractionation by mass spectrometry.Biochimica Et BiophysicaActa-Proteins and Proteomics1698(1):87-95(2004)。根据包含所有六个蛋白质的小型数据库搜索光谱。测序结果由人工核实。
DNA-损伤修复中所涉及的络合物的HD交换
含有BRCT的XRCC4(1-200)的母液以及含有BRCT的XRCC4(全长)的母液在缓冲液(10mM Tris-HCl，pH7.5)中稀释至等摩尔浓度(10mM)并且在4℃下孵育最少30分钟以提升络合作用。样品保持在4℃下直至进行HDX分析。等份样品在20℃下通过加入D2O(25％v/v)进行氘化持续2分钟。随后以两种方式对等份样品进行消化。在第一消化策略中，蛋白质氘化作用通过将样品加至冷冻的100mM甘氨酸-HCl(pH2.5)中进行淬灭，并且淬灭的蛋白质溶液被注入胃蛋白酶微反应器中。该微反应器安装在注射器阀和C18柱之间的HTX-PAL系统中。蛋白质消化物捕获在整体式C18毛细柱上并且洗脱至质谱仪中。所有液体元素，包括微反应器，冷冻在4℃下以在分析时间期间(<15min)最小化氘化返回交换。在第二消化策略中，在10℃下，等量的氘化蛋白质分别被3μL或5μL的11倍浓度的猪笼草液体同时淬灭和消化持续3min或5min。样品被注入连接至质谱仪的冷冻LC-系统中。
进行一式两份的质量位移测量(4或更多)并且参比对照蛋白质状态—游离XRCC4(1-200)，游离XRCC4(全长)以及游离LigIV-BRCT。每种肽的平均氘水平使用Mass SpecStudio测定，Mass Spec Studio是Hydra v1.5重建的。Slysz GW,et al.,Hydra:softwarefor tailored processing of H/D exchange data from MS or tandem MSanalyses.Bmc Bioinformatics 10(2009)。(a)如果质量位移中的微小扰动使用来自每种状态的分析结果的汇集的标准偏差通过了双尾t测试(p<0.05)那么被认为是显著的；(b)如果质量位移中的微小扰动通过了分配分析防止光谱重叠那么被认为是显著的，以及(c)如果质量位移中的微小扰动超过了基于位移噪音的测量值的且假设其正常分配的阈值位移值(±2s.d.)那么被认为是显著的。Bennett MJ,等人,Discovery and Characterizationof the Laulimalide-Microtubule Binding Mode by Mass Shift PerturbationMapping.Chemistry&Biology 17(7):725-734(2010)。
结果
猪笼草液体提取物
猪笼草植物的液体分泌物被浓缩并且通过降低pH(pH 2.5)活化消化酶。富集过程的影响以及对液体蛋白质组的活化使用蛋白质组学方法测定。首先，为了确定猪笼草蛋白酶的存在，通过SDS-PAGE分离惰性浓缩物。带有非常微弱的考马斯染料的七个邻近的凝胶区用胰蛋白酶消化并且使用标准方法通过nanoLC-MS/MS分析。这并未被预期是活化的液体蛋白质组的全部类别，但是分析确认了天冬氨酸蛋白质酶猪笼草蛋白酶I/II的存在，以及植物来源的葡聚糖酶、壳多糖酶、羧肽酶以及过氧化酶的存在，以及适当水平的果蝇属污染和细菌污染的存在。液体蛋白质组的低络合性与最近的分析一致，Hatano N,Hamada T(2012)Proteomic analysis of secreted protein induced by a component of preyin pitcher fluid of the carnivorous plant Nepenthes alata.Journal ofProteomics 3；75(15):4844-52(Epub Jun.15,2012)，但是在该分析中，I型猪笼草蛋白酶被发现在宽得多的质量范围内分配(40-70kDa)。酸活化的液体随后以类似的方式处理并分析。活化过程降低了整个蛋白质产率并且还看起来简化了组合物。除了I型猪笼草蛋白酶之外，只有来自角蛋白和肌动蛋白的少量污染物存在。这些分析着眼于富集的液体的低络合性，在所述富集的液体中猪笼草蛋白酶是主要成分。活化的且80X富集的液体的总蛋白质浓度通过BCA分析法测量，其为22ng/μL。该值与描述液体的富集的在前研究一致。Tokes ZA,等人,Digestive Enzymes Secreted by Carnivorous Plant Nepenthes-Macferlanei-L.Planta 119(1):39-46(1974)。
在适于HDX-MS实验的条件下用富集的液体消化一系列蛋白质。浓缩物的消化特异性在P1和P1’位置(图1)表征，从而支持与应用于胃蛋白酶的类似研究的比较。Hamuro Y,etal.,Specificity of immobilized porcine pepsin in H/D exchange compatibleconditions.Rapid Communications in Mass Spectrometry 22(7):1041-1046(2008)。在该实施例中，基于如下假设：富集的液体中所有测量的蛋白质是猪笼草蛋白酶，即便明显存在一些污染性蛋白质，酶-底物的比例是1:85。
猪笼草蛋白酶数据表示1612个残基的评估，虽然没有对应的胃蛋白酶数据(13,766个残基)那么广泛，但是蛋白质中序列多样性足够高以确保在P1和P1’位置水平的比较。胃蛋白酶的最大特异性看起来位于P1位置。胃蛋白酶对疏水性残基F,L和M表现出高效裂解，但是对P,H,K和R之后的位点的裂解基本上被禁止。猪笼草蛋白酶裂解除了G,S,T,V,I和W之外的大部分残基之后的位点。这支持了对在预期的胃蛋白酶P1残基之后的位点的高速裂解，但是也支持了对在胃蛋白酶消化过程中对被禁止的残基进行高速裂解，尤其是K,R和P处的高速裂解。在P1’位置，胃蛋白酶表现出总体上优选疏水残基，包括具有芳香性的任何残基。相反，猪笼草蛋白酶表现出在P1’位置几乎没有选择性方式，除了可能对G,P和H有选择性。总体而言，猪笼草蛋白酶相对于胃蛋白酶在P1位置表现出显著松弛的特异性并且提供非常高效的象征。
为了测定松弛的特异性是否翻译成用于HDX-MS应用的序列绘图中的改善，表征全长XRCC4(一种包含球状结构域的蛋白质和延长的螺旋杆以及长的失调的C末端的蛋白质)。Hammel M,等人,XLF Regulates Filament Architecture of the XRCC4.Ligase IVComplex.Structure 18(11):1431-1442(2010)；以及Junop MS,等人,Crystal structureof the Xrcc4DNA repair protein and implications for end joining.Embo J 19(22):5962-5970(2000)。在单一消化规程中，尝试包含这种多结构域蛋白质，并且具体而言，本质上失调的区域趋向于胃蛋白酶消化不良，因为它们在疏水残基中相对耗尽并且富集于脯氨酸和带电荷的残基中。Dunker AK,et al.Intrinsically disorderedprotein.Journal of Molecular Graphics&Modelling 19(1):26-59(2001)。用于该蛋白质的胃蛋白酶和猪笼草蛋白酶绘图在图2中显示。在该比较中，使用多种不同的蛋白酶量以及回归MS/MS实验寻求两种酶的全面绘图。猪笼草蛋白酶提供更优的全长蛋白质覆盖：相对于胃蛋白酶的187个肽，猪笼草蛋白酶具有357个肽。(11个残基的平均肽长度与这两个酶相同)。这两个酶代表了球状和杆状区域，带有大量重叠肽，但是猪笼草蛋白酶提供的互补性是明显的。例如，猪笼草蛋白酶提供对球状结构域(残基1-30)中β-片状区域显著更深的覆盖。以大得多的程度覆盖失调的C-末端区域并且覆盖至显著较高水平的冗余。使用猪笼草蛋白酶在该失调的尾部区域中的每个残基容纳16X的覆盖并且对于胃蛋白酶仅有4.7X的覆盖。
肽检测中任何偏差的存在通过选择平均检索分数作为度量标准进行检测(图3)。该方法强调了作为基本方法的序列识别中的置信度，通过该方法限定序列绘图。一个视图是R。末端在R的肽的较高的分数可能反映较高的平均肽强度和更好的片段的组合，这与基于胰蛋白酶的倒置的蛋白质组学所获知的一致。Warwood S,等人，Guanidinationchemistry for qualitative and quantitative proteomics.Rapid Communications inMass Spectrometry20(21):3245-3256(2006)。
更加详细地检测酶的效率。简单地通过改变酶-底物比例而改变或调节肽质量图谱的程度在图4中显示。猪笼草蛋白酶负载在溶液中的消化在50倍的范围内变化。对于胃蛋白酶实验而言，使用以浆状物形式固定的胃蛋白酶，而非游离的胃蛋白酶以避免大量胃蛋白酶自体溶解。酶负载在8倍范围内变化，较低的量导致较差的肽强度并且较高的量对绘图没有作用。即使在较高负载条件下，也会发现猪笼草蛋白酶产生非常低的自体溶解特点。聚集肽离子色谱图(PIC)用作有效消化的测量。在0.38:1(猪笼草蛋白酶：底物)与520:1(胃蛋白酶：底物)条件下发现的相对类似的分布的比较代表相对于HDX-样应用中的胃蛋白酶，猪笼草蛋白酶效率显著改善1400倍。
猪笼草蛋白酶消化物更易于通过改变酶负载以及产生XRCC4的变量表示从大片段调节至小片段。这在图4A中显示，通过在PIC中从低负载条件下的长滞留时间转变至高负载条件下的低滞留时间。该转变与最丰富的肽的平均肽长度有关，在低酶负载条件下从>12位移至高负载条件下的10。相反，改变的胃蛋白酶负载没有显著改变PIC或平均肽长度(图4B)。强制流动的胃蛋白酶微反应器可改善调节，但是可能不会产生较小的片段。
由猪笼草蛋白酶消化麦胶蛋白
由猪笼草蛋白酶消化麦胶蛋白通过使用LEAP HTX-PAL自动采样仪以及设计为氢/氘交换(HDX)应用的分配系统在溶液中进行。数据使用AB Sciex Triple-TOF 5600QqTOF质谱仪收集。肽使用Mascot(v2.3)通过MS/MS数据识别。简言之，将12pmol粗麦胶蛋白(购自Sigma Aldrich)与2μL 100倍浓缩的液体混合。在消化之后，将整个量注入连接至质谱仪的反相LC系统。在7cm，150μm i.d.Magic C18柱上捕获肽并在10分钟或30分钟内用10％至40％梯度的乙腈洗脱。选择在这些分析中所检测到的肽的MS/MS图谱的多种信息依赖性获得物的CID片段。在包含所有识别的小麦麦胶蛋白(α、β、γ、ω)蛋白质以及低分子量和高分子量的谷蛋白的微小数据库中检索图谱。图5显示了在37℃下，在1分钟、5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、60分钟、130分钟、360分钟或810分钟之后，使用LC-MS/MS，来自消化来自小麦的麦胶蛋白的猪笼草蛋白酶的所识别的所有肽的平均长度。在分数方面，95％置信度(p<0.05)切割用于除去假阳性识别。肽长度的相关标准偏差在内插图中显示。
图6显示了在37℃下消化1分钟、5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、60分钟、130分钟、360分钟或810分钟之后由LC-MS/MS识别的肽的数目，由长度分组。数据在图5中显示。
图7显示了与图5相同的数据，在37℃下消化10分钟、60分钟、120分钟、360分钟或810分钟之后获得某一长度的可能性。
虽然为了更加清楚地理解本发明，上述内容以举例说明的方式描述了一些细节和实例，但是本领域技术人员会理解的是，某些改变或改良可再后附的权利要求的范围内实施。此外，本文提供的每个参考文献其全部内容通过引用并入本文，这与将每个参考文献通过引用独立地并入本文的程度相同。
Claims (4)
1.猪笼草蛋白酶在制备用于调节患有麸质不耐受的患者体内的麸质不耐受的药物或用于调节患者体内由麸质不耐受介导的病症的药物方面的应用，其中，所述猪笼草蛋白酶是I型猪笼草蛋白酶、II型猪笼草蛋白酶和/或其盐。
2.如权利要求1所述的应用，其中，所述药物在消化含有麸质或怀疑含有麸质的食品之前给药于所述患者。
3.如权利要求1所述的应用，其中，所述药物在消化含有麸质或怀疑含有麸质的食品的同时给药于所述患者。
4.如权利要求1所述的应用，其中，所述药物在消化含有麸质或怀疑含有麸质的食品之后给药于所述患者。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261729210P | 2012-11-21 | 2012-11-21 | |
| US61/729,210 | 2012-11-21 | ||
| US201261797040P | 2012-11-27 | 2012-11-27 | |
| US61/797,040 | 2012-11-27 | ||
| PCT/CA2013/000970 WO2014078935A1 (en) | 2012-11-21 | 2013-11-20 | Treatment of gluten intolerance and related conditions |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105007934A CN105007934A (zh) | 2015-10-28 |
| CN105007934B true CN105007934B (zh) | 2019-02-05 |
Family
ID=50728145
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201380070689.9A Active CN105007934B (zh) | 2012-11-21 | 2013-11-20 | 对麸质不耐受以及相关病症的治疗 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (7) | US9005610B2 (zh) |
| EP (1) | EP2922568A1 (zh) |
| JP (1) | JP6412876B2 (zh) |
| KR (1) | KR102296428B1 (zh) |
| CN (1) | CN105007934B (zh) |
| AU (1) | AU2013350261B2 (zh) |
| CA (1) | CA2892474C (zh) |
| DK (1) | DK3004340T3 (zh) |
| ES (1) | ES2821771T3 (zh) |
| HR (1) | HRP20201459T1 (zh) |
| HU (1) | HUE050868T2 (zh) |
| IL (2) | IL238912B (zh) |
| MX (2) | MX2015006419A (zh) |
| PT (1) | PT3004340T (zh) |
| WO (2) | WO2014078935A1 (zh) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9005610B2 (en) | 2012-11-21 | 2015-04-14 | Nepetx, Llc | Treatment of gluten intolerance and related conditions |
| EP3753571A1 (en) * | 2013-03-15 | 2020-12-23 | Nepetx LLC | Treatment of gluten intolerance and related conditions |
| JP6829077B2 (ja) | 2014-06-16 | 2021-02-10 | ネプエトゥクス，エルエルシー | グルテン不耐症及びそれから生じる障害を治療するための組成物及び方法 |
| US10857214B2 (en) | 2015-12-16 | 2020-12-08 | Codexis, Inc. | Compositions and methods for treating gluten intolerance and disorders arising therefrom |
| US11549124B2 (en) | 2017-09-20 | 2023-01-10 | Aarhus Universitet | Nepenthesin-1 derived resistance to fungal pathogens in major crop plants |
| KR102684843B1 (ko) * | 2019-04-02 | 2024-07-15 | 새미-사빈사 그룹 리미티드 | 글루텐 불내증의 치료적 관리를 위한 방법 및 조성물 |
Family Cites Families (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
| DK81193D0 (da) * | 1993-07-06 | 1993-07-06 | Novo Nordisk As | Enzym |
| JP3767831B2 (ja) * | 1995-06-14 | 2006-04-19 | 木村 健 | ヘリコバクター・ピロリ除菌用組成物 |
| JP3521635B2 (ja) | 1996-08-07 | 2004-04-19 | 日本電信電話株式会社 | 映像生成方法および映像生成システム |
| JPH1149697A (ja) * | 1997-08-01 | 1999-02-23 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | ストレス抑制剤及びストレス抑制用食品 |
| US8143210B2 (en) | 2002-02-14 | 2012-03-27 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Enzyme treatment of foodstuffs for celiac sprue |
| US7320788B2 (en) * | 2002-02-14 | 2008-01-22 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Enzyme treatment of foodstuffs for Celiac Sprue |
| DK2364718T3 (en) | 2002-02-14 | 2016-10-03 | Univ Leland Stanford Junior | Enzyme treatment of foods for celiac disease |
| JP4415244B2 (ja) * | 2003-02-21 | 2010-02-17 | グリコ栄養食品株式会社 | 小麦蛋白質にプロテアーゼを限定的に作用させて得られる食品素材 |
| US7628985B2 (en) | 2004-04-26 | 2009-12-08 | The Board Of Regents Of The Leland Stanford Junior University | Therapeutic enzyme formulations and uses thereof in celiac sprue and/or dermatitis herpetoformis |
| US20060095096A1 (en) | 2004-09-09 | 2006-05-04 | Debenedictis Leonard C | Interchangeable tips for medical laser treatments and methods for using same |
| EP1856291A4 (en) | 2005-03-04 | 2009-04-01 | Verenium Corp | NUCLEIC ACIDS AND PROTEINS, AND METHODS OF MAKING AND USING SAME |
| KR101360379B1 (ko) * | 2005-10-11 | 2014-02-07 | 모핀 에스.알.엘. | 셀리악병에 의한 영향을 받는 사람을 위한 “무글루텐”블루바인 유제품 |
| US8119125B2 (en) | 2005-10-11 | 2012-02-21 | Alvine Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for enhanced gastrointestinal stability of oligopeptides and polypeptides |
| AU2007299219A1 (en) | 2006-04-05 | 2008-03-27 | Metanomics Gmbh | Process for the production of a fine chemical |
| WO2008115428A2 (en) | 2007-03-16 | 2008-09-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | A scaleable manufacturing process for cysteine endoprotease b, isoform 2 |
| EP2229404A4 (en) * | 2007-12-10 | 2011-03-09 | Univ Leland Stanford Junior | ENZYMATIC POLYTHERAPY FOR GASTRIC DIGESTION OF FOOD GLUTEN IN PATIENTS WITH CELIAC DISEASE |
| US8980254B2 (en) | 2008-08-21 | 2015-03-17 | Alvine Pharmaceuticals, Inc. | Formulation for oral administration of proteins |
| JP2011049697A (ja) | 2009-08-25 | 2011-03-10 | Panasonic Corp | フリッカ検出装置、撮像装置、フリッカ検出プログラム、及び、フリッカ検出方法 |
| JP2013518589A (ja) | 2010-02-02 | 2013-05-23 | アマノ エンザイム ユーエスエー，リミテッド | グルテン不耐性に対するプロテアーゼの使用 |
| WO2011126873A2 (en) | 2010-03-30 | 2011-10-13 | Alvine Pharmaceuticals, Inc. | Proteases for degrading gluten |
| US9023345B2 (en) * | 2011-03-01 | 2015-05-05 | Novus International, Inc. | Methods for improving gut health |
| US9005610B2 (en) | 2012-11-21 | 2015-04-14 | Nepetx, Llc | Treatment of gluten intolerance and related conditions |
-
2013
- 2013-03-15 US US13/843,369 patent/US9005610B2/en active Active
- 2013-06-06 US US13/912,077 patent/US9623092B2/en active Active
- 2013-11-20 KR KR1020157016524A patent/KR102296428B1/ko active IP Right Grant
- 2013-11-20 EP EP13857431.4A patent/EP2922568A1/en not_active Withdrawn
- 2013-11-20 WO PCT/CA2013/000970 patent/WO2014078935A1/en active Application Filing
- 2013-11-20 MX MX2015006419A patent/MX2015006419A/es unknown
- 2013-11-20 AU AU2013350261A patent/AU2013350261B2/en active Active
- 2013-11-20 JP JP2015543220A patent/JP6412876B2/ja active Active
- 2013-11-20 CN CN201380070689.9A patent/CN105007934B/zh active Active
- 2013-11-20 CA CA2892474A patent/CA2892474C/en active Active
-
2014
- 2014-03-14 DK DK14763905.8T patent/DK3004340T3/da active
- 2014-03-14 WO PCT/CA2014/000258 patent/WO2014138927A1/en active Application Filing
- 2014-03-14 HU HUE14763905A patent/HUE050868T2/hu unknown
- 2014-03-14 ES ES14763905T patent/ES2821771T3/es active Active
- 2014-03-14 PT PT147639058T patent/PT3004340T/pt unknown
- 2014-03-14 MX MX2015011825A patent/MX2015011825A/es active IP Right Grant
- 2014-10-03 US US14/506,456 patent/US9745565B2/en active Active
-
2015
- 2015-02-11 US US14/620,066 patent/US20150290301A1/en not_active Abandoned
- 2015-05-20 IL IL238912A patent/IL238912B/en active IP Right Grant
-
2016
- 2016-07-13 US US15/209,681 patent/US10266818B2/en active Active
-
2019
- 2019-03-18 US US16/357,191 patent/US10982201B2/en active Active
-
2020
- 2020-09-14 HR HRP20201459TT patent/HRP20201459T1/hr unknown
-
2021
- 2021-03-23 US US17/209,879 patent/US11725198B2/en active Active
- 2021-05-26 IL IL283484A patent/IL283484A/en unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105007934B (zh) | 对麸质不耐受以及相关病症的治疗 | |
| Liu et al. | Exploration of the molecular interactions between angiotensin-I-converting enzyme (ACE) and the inhibitory peptides derived from hazelnut (Corylus heterophylla Fisch.) | |
| Cermeño et al. | Identification of bioactive peptides from brewers’ spent grain and contribution of Leu/Ile to bioactive potency | |
| Wang et al. | Dipeptidyl peptidase IV inhibitory peptides derived from oat (Avena sativa L.), buckwheat (Fagopyrum esculentum), and highland barley (Hordeum vulgare trifurcatum (L.) Trofim) proteins | |
| Zheng et al. | Isolation of novel ACE‐inhibitory peptide from naked oat globulin hydrolysates in silico approach: Molecular docking, in vivo antihypertension and effects on renin and intracellular endothelin‐1 | |
| US11723960B2 (en) | Compositions and methods for treating gluten intolerance and disorders arising therefrom | |
| Olagunju et al. | Thermoase‐hydrolysed pigeon pea protein and its membrane fractions possess in vitro bioactive properties (antioxidative, antihypertensive, and antidiabetic) | |
| Xia et al. | Preparation of saltiness-enhancing enzymatic hydrolyzed pea protein and identification of the functional small peptides of salt reduction | |
| Lemus-Conejo et al. | Nutritional composition and biological activity of narrow-leafed lupins (Lupinus angustifolius L.) hydrolysates and seeds | |
| Arısoy et al. | Hydrolysis of food-derived opioids by dipeptidyl peptidase IV from Lactococcus lactis spp. lactis | |
| Althnaibat et al. | Identification of peptides from camel milk that inhibit starch digestion | |
| JP2019189647A (ja) | α−グルコシダーゼに関連付けられる病的状態の予防及び／又は治療のための組成物 | |
| Bleakley | Cereal Proteins: Potential Health Applications and Allergenicities | |
| Kaneko et al. | Rice endoplasmic protein-derived peptides, rice-ghretropins A and B, stimulate ghrelin release in MGN3-1 cells and increase plasma acylated ghrelin and food intake in mice | |
| Amin et al. | In silico and in vitro study of rice bran peptides for the treatment of oxidative stress diabetes and hypertension | |
| Rusu et al. | frontiers Frontiers in Nutrition ORIGINAL RESEARCH published: 30 June 2022 | |
| Amin et al. | In Silico and | |
| CN105492602B (zh) | 对麸质不耐受以及相关病症的治疗 | |
| Schalk | Development of targeted mass spectrometric methods for the quantitation of gluten-specific peptides in foods | |
| AU2020201654A1 (en) | Treatment of gluten intolerance and related conditions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20201130 Address after: Delaware, USA Patentee after: Kodak Heath Address before: Florida, USA Patentee before: NEPETX, LLC |