CN104982229A - 黑木耳人工出耳方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种黑木耳人工出耳方法，包括如下步骤：(1)制备野生黑木耳无病毒纯菌种；(2)制作麦粒纯菌种；(3)采集直径≤50mm的树枝并风干；(4)打捆浸泡处理，控水调湿，钻孔接种：将风干的树枝打捆后泡入石灰水中，浸泡18-24h，捞出；将所述捞出的树枝表面水分沥干；然后选取直径≥30mm的树枝钻供接种用的孔，将所述麦粒纯菌种塞入所述孔中，然后用木条封住所述孔，即完成接种；(5)荫棚发菌；(6)地埋遮荫出耳。本发明黑木耳人工出耳方法保证了黑木耳的质量，节约资源，降低了生产成本。

Description

黑木耳人工出耳方法

技术领域

本发明涉及生态农业领域，特别涉及一种黑木耳人工出耳方法。

背景技术

黑木耳中营养成分丰富，尤其含有丰富的植物胶原成分、多醣体，食用黑木耳对结石病人和癌症病人都是很有益处的；目前黑木耳生产广泛采用的出耳技术为塑料袋菌包出耳技术：利用木材加工锯木屑、棉籽壳等农林副产品的下脚料作为培养基，制作塑料袋菌包，在室外场地露天喷水出耳。由于木材加工锯木屑、棉籽壳等农林副产品的下脚料来源不明确，组成成份千差万别，原料中农残、重金属等有害物质无法监测，直接用作黑木耳生产，不仅食品安全难以保证，所生产的黑木耳营养成份、口味变化也较大。即使能够控制农残、重金属等有害物质标准，也只能生产中、低端产品。

人工伐木木桩出耳技术克服了黑木耳生产品质的问题，其大致操作过程如下：将直径100mm以上的木材截成长1m左右的木段，通过打孔接菌种、发菌、出耳。这种出耳方法模拟野生环境和生长条件，可以生产出高品质的黑木耳，但是这种方式对林木资源的需求很大，除南方速生林区，其他地区很难采用，然而即使是在南方速生林区，将直径≥100mm的木材用于黑木耳的出耳，其出耳成本已经接近或高于黑木耳的价值，得不偿失，因此不能得到广泛的推广。树枝的资源丰富，成本低廉，用来生产黑木耳可以降低成本，然而直径超过100mm的树枝很少，很难大量生产黑木耳，直径过小的树枝保湿效果不好，用来生产黑木耳成活率很低。如何能在保证黑木耳品质的前提下降低黑木耳的出耳成本成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明实施例提供黑木耳人工出耳方法，解决了采用直径过小的树枝进行黑木耳出耳的保湿问题，提高了黑木耳成活率，通过利用林间杂枝来模拟野生环境，在保证黑木耳品质的前提下降低了出耳成本，并且杂枝的资源丰富，可以得到广泛推广和应用。

一种黑木耳人工出耳方法，包括如下步骤：

(1)制备野生黑木耳无病毒纯菌种；

(2)制作麦粒纯菌种；

(3)采集直径≤50mm的树枝并风干；

(4)浸泡处理，控水调湿，钻孔接种打捆：将风干的树枝泡入石灰水中，浸泡18-24h后去除表面水分；然后选取其中≥30mm的树枝钻供接种用的孔，将所述麦粒纯菌种塞入所述孔中，用木条封住所述孔，然后将所述树枝打捆即完成接种；

(5)荫棚发菌；

(6)地埋遮荫出耳。

进一步的，所述步骤(1)具体包括如下步骤：

采集黑木耳子实体并在无菌条件下消毒后打开，取其中0.2-0.6mm³表面新鲜的菌肉组织，接种在无菌固体培养基中，室温条件下黑暗培养25-35天，菌丝长满所述固体培养基表面，然后取菌丝长势强、菌丝洁白浓密的所述菌丝进行扩大培养，即取得所述野生黑木耳无病毒纯菌种。

进一步的，所述黑木耳子实体为色泽灰黑、形状如层叠扇形、厚度≥2mm的野生黑木耳子实体；所述消毒采用酒精的质量分数≥70％的酒精水溶液，所述无菌固体培养基为无菌PDA斜面培养基。

进一步的，所述步骤(2)具体包括如下步骤：取无破粒、饱满的小麦，开水煮20-30min，去除表面水分，拌入相当于去除表面水分后的小麦质量的0.3-0.5％的熟石膏粉，密封，在温度≥100℃条件下灭菌后冷却至室温，室温条无菌条件下将所述野生黑木耳无病毒纯菌种接种到拌有熟石膏粉的麦粒种，黑暗培养30天以上，待长满菌丝，即成为麦粒纯菌种。

进一步的，所述去除表面水分为达到所述树枝干重的120％以下。

进一步的，所述孔直径为10-12mm，深度大于所述树枝半径且小于树枝直径。

进一步的，所述孔相互交错的位于所述树枝上，间距≥100mm。

进一步的，所述石灰水为常温下饱和石灰水。

进一步的，所述步骤(5)具体包括如下步骤：将接种好的树枝捆保温22-28℃，保持相对湿度85％-95％，待所述接种好的树枝捆表面出现白色健康菌丝体，即完成发菌。

进一步的，所述步骤(6)具体包括如下步骤：将发好菌的树枝捆卧式放在地面上或埋入土壤中，埋入土壤中的体积≤1/3树枝捆总体积，遮荫≥70％，保持相对湿度70％-90％，温度18-25℃，当所述树枝捆表皮见干时喷水，使其干湿交替至出耳。

与现有技术相比，本发明黑木耳人工出耳方法具有如下优点：

本发明申请采用树枝栽培，是模拟野生木耳自然生长的仿生栽培方式，减少了传统栽培所需的培养料混料、拌料、装袋、灭菌等工序，节约了能源和人工，减少了农业生产对资源、环境的破坏，是更贴近自然的生产方式；使用天然树木枝条作为唯一的培养料进行栽培，避免了使用棉籽皮、玉米芯、锯木屑、玉米粉等人工原料，造成木耳口味、营养价值改变，保证了野生木耳的营养和纯正口味。

常规的段木栽培黑木耳中采用直径大于100mm的乔木，这样造成了很大程度的森林资源浪费，采用树木枝条栽培，避免使用整木栽培时，需要伐木对森林源的破坏，降低了生产高品质黑木耳的成本。

具体实施方式

实施例1

一种黑木耳人工出耳方法，包括如下步骤：

(1)制备野生黑木耳无病毒纯菌种：采集黑木耳子实体并在无菌条件下用酒精质量分数为70％的酒精水溶液消毒后打开，取其中0.2-0.6mm³表面新鲜的菌肉组织，接种在无菌玉米碎屑培养基中，室温条件下黑暗培养30天，菌丝长满所述固体培养基表面，然后取菌丝长势强、菌丝洁白浓密的所述菌丝进行扩大培养，即取得所述野生黑木耳无病毒纯菌种；

(2)制作麦粒纯菌种：取无破粒、饱满的小麦，开水煮20min，捞出，晾干表面水分得到晾干的小麦，拌入相当于所述晾干的小麦质量的0.3％的熟石膏粉，密封，在温度100℃条件下灭菌150min后冷却至室温，室温条无菌条件下将所述野生黑木耳无病毒纯菌种接种到拌有熟石膏粉的麦粒种，黑暗培养30天，待长满菌丝，即成为麦粒纯菌种；

(3)采集直径≤50mm的树枝并风干；

(4)浸泡处理，控水调湿，钻孔接种打捆：将风干的树枝泡入石灰水中，浸泡20h，捞出；将所述捞出的树枝表面水分沥干至干重的110％；然后在其中≥30mm的树枝上相互交错的钻供接种用的孔，所述孔直径为12mm，深度与枝条的半径相同，间距为100mm，直径过小的树枝钻孔容易钻透且保湿效果不好，这些直径小的树枝可以为木耳的生长提供较大的生长空间和提供后期生长所需营养；将所述麦粒纯菌种塞入所述孔中，然后用木条封住所述孔，然后将所述树枝打捆即完成接种，打捆将有利于树枝的保湿；

(5)荫棚发菌：将接种好的树枝捆放入荫棚内，保温22-28℃，保持相对湿度85％-95％，待树枝捆表面出现白色健康菌丝体，即完成发菌；

(6)地埋遮荫出耳：将发好菌的树枝捆，卧式放在地面上，全部遮荫，保持相对湿度70％-90％，温度18-25℃，当所述树枝捆表皮见干时喷水，使其干湿交替至出耳。

实施例2

一种黑木耳人工出耳方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备野生黑木耳无病毒纯菌种：4月10-5月10日，在气温15℃时，在青河县青格里河河谷上游野生树木生长区，选择色泽灰黑、形状如层叠扇形、厚度≥2mm的野生黑木耳子实体进行采集，并将采集下的所述黑木耳子实体用保鲜箱运输至无菌接种室内，所述黑木耳子实体从采集下至运输至无菌接种室内的时间≤6h，以保证黑木耳子实体的新鲜；然后将所述无菌接种室内的黑木耳子实体放置在超净工作台上，开无菌风吹30min；用75％的酒精对超净工作台上的所述黑木耳子实体表面进行消毒，以保证制备过程中没有杂菌干扰；掰开所述黑木耳子实体，取其未与边缘接触的新鲜表面，取0.2-0.6mm³的菌肉组织，体积适中的菌肉组织保证了发菌效果且能节省原料；接种在10个无菌PDA斜面培养基试管内，PDA培养基即马铃薯葡萄糖琼脂培养基，为黑木耳培养中常用的培养基；放置在25℃恒温培养箱内，黑暗条件下培养25天，菌丝长满试管斜面，取长势强、菌丝洁白浓密的试管进行扩大培养，即取得野生无病毒纯菌种；

(2)制作麦粒纯菌种：取无破粒、饱满的小麦，开水煮25min，捞出，晾干表面水分，拌入0.5％的熟石膏粉，装入500ml玻璃瓶中，封口后，在121℃高压蒸汽下灭菌90min，取出后，放在无菌接种室内，自然冷却至25℃以下，在无菌工作台上，无菌风保护下，接入野生黑木耳无病毒纯菌种，放置在室温条件下，黑暗培养30天，待菌丝长满玻璃瓶，即成为麦粒纯菌种；这样保证了发菌期间的营养供应，保证了孢子的成活率。

(3)采集树枝并风干：秋季树落叶后，在人工抚育树林中，选取直径≤50mm的枝条，采伐后堆成宽3m，高2m，长10m柴堆使其自然风干死亡，宽度过小虽然风干效果好但是会造成柴堆堆积柴堆过多占用空间过大并且柴堆不稳定；高度过低不能合理利用空间；本实施例中的长度和高度既保证了柴堆的风干效果又节约了空间，还能保证柴堆的稳定。

(4)浸泡处理，控水调湿，钻孔接种打捆：将所述风干备用的树枝用打捆机打捆成长100cm，直径30cm的圆形树枝捆，使树枝捆中间枝条紧密结合，然后将所述打捆的树枝泡入常温下的饱和石灰水中，浸泡18h，捞出，可以对树枝捆进行消毒并能中和发菌过程中酸化产生的酸，起到调节发菌环境pH值，保证发菌环境；将所述捞出的树枝表面水分沥干至干重的120％，可以保证发菌的湿度；然后打开树枝捆在其中直径≥30mm的树枝上钻孔，所述孔直径为11mm，所述孔深度在树枝的半径长度和直径长度之间，将所述麦粒纯菌种塞入所述孔中，然后用木条封住所述孔，再次打捆即完成接种；

(5)荫棚发菌：将接种好的树枝捆捆放入荫棚内，保温22-28℃，保持相对湿度85％-95％，待树枝捆表面出现白色健康菌丝体，即完成发菌；

(6)地埋遮荫出耳：将发好菌的树枝捆，卧式1/3埋入土壤中，遮荫70％，这样可以有助于树枝捆湿度的保持，保持相对湿度70％-90％，温度18-25℃，每天喷水见湿，当所述树枝捆表皮见干时喷水，使其干湿交替至出耳。

实施例3

一种黑木耳人工出耳方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备野生黑木耳无病毒纯菌种：在气温15℃时，选择色泽灰黑、形状如层叠扇形、厚度≥2mm的野生黑木耳子实体进行采集，并将采集下的所述黑木耳子实体用保鲜箱运输至无菌接种室内，所述黑木耳子实体从采集下至运输至无菌接种室内的时间≤6h，以保证黑木耳子实体的新鲜；然后将所述无菌接种室内的黑木耳子实体放置在超净工作台上，开无菌风吹45min；用酒精质量分数为90％的酒精水溶液对超净工作台上的所述黑木耳子实体表面进行消毒，以保证制备过程中没有杂菌干扰；掰开所述黑木耳子实体，取其未与边缘接触的新鲜表面，取0.2-0.6mm³的菌肉组织，体积适中的菌肉组织保证了发菌效果且能节省原料；接种在20个无菌PDA斜面培养基试管内，PDA培养基即马铃薯葡萄糖琼脂培养基，为黑木耳培养中常用的培养基；放置在25℃恒温培养箱内，黑暗条件下培养35天，菌丝长满试管斜面，取长势强、菌丝洁白浓密的试管进行扩大培养，即取得野生无病毒纯菌种；

(2)制作麦粒纯菌种：取无破粒、饱满的小麦，开水煮30min，捞出，晾干表面水分，拌入0.4％的熟石膏粉，装入750ml玻璃瓶中，封口后，在130℃高压蒸汽下灭菌60min，取出后，放在无菌接种室内，自然冷却至25℃以下，在无菌工作台上，无菌风保护下，接入野生黑木耳无病毒纯菌种，放置在室温条件下，黑暗培养35天，待菌丝长满玻璃瓶，即成为麦粒纯菌种；

(3)采集树枝并风干：秋季树落叶后，在人工抚育树林中，选取直径≤50mm的枝条，采伐后堆成宽2.5m，高1.5m，长20m柴堆使其自然风干死亡，这样的宽度和高度保证了柴堆的风干效果。

(4)浸泡处理，控水调湿，钻孔接种：将所述风干备用的树枝用打捆机打捆成长100cm，直径30cm的圆形树枝捆，使树枝捆中间枝条紧密结合，然后将所述打捆的树枝泡入常温下的饱和石灰水中，浸泡24h，捞出，可以对树枝捆进行消毒并能中和发菌过程中酸化产生的酸，起到调节发菌环境pH值，保证发菌环境；将所述捞出的树枝表面水分沥干至干重的115％，可以保证发菌的湿度；解捆然后在直径≥30mm的树枝上钻孔，孔的直径为10mm，所述孔深度在树枝的半径长度和直径长度之间，将所述麦粒纯菌种塞入所述孔中，然后用木条封住所述孔，然后打捆即完成接种；

(5)荫棚发菌：将接种好的树枝捆放入荫棚内，保温22-28℃，保持相对湿度85％-95％，待树枝捆表面出现白色健康菌丝体，即完成发菌；

(6)地埋遮荫出耳：将发好菌的树枝捆，卧式1/5埋入土壤中，遮荫90％，这样可以有助于树枝捆湿度的保持，保持相对湿度70％-90％，温度18-25℃，每天喷水见湿，干燥见表皮干，干湿交替，防止过干或湿度过大造成菌丝死亡，不能完成出耳；半月左右即可出耳。

将本发明实施例得到的黑木耳出耳方法制备的黑木耳与野生黑木耳和袋料栽培黑木耳中的各组分及其感官进行比较，结果如表1和表2所示，表1为有机物含量对比表，表2为无机物、灰分及感官评价对比表。

表1 有机物含量对比表

表2 无机物、灰分及感官评价对比表

由表1和表2可以看出，本发明实施例得到的黑木耳与野生黑木耳相比，除粗纤维含量较低外，其他组分组分含量都很接近野生黑木耳，黑木耳中含有丰富的铁元素可以防治缺铁性贫血，而袋料栽培的黑木耳中铁的含量仅为野生黑木耳的1/2左右，本发明实施例中的黑木耳中铁元素含量与野生黑木耳接近；袋料栽培的黑木耳灰分含量高说明由于袋料栽培得到的黑木耳中营养过剩造成其质软，滑腻，无清香味，而本发明实施例得到的黑木耳口感与野生黑木耳相似都具有革质感，味涩，有木耳特有的菌体清香，说明本发明实施例栽培得到的黑木耳质量较高。

以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种黑木耳人工出耳方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备野生黑木耳无病毒纯菌种；

(2)制作麦粒纯菌种；

(3)采集直径≤50mm的树枝并风干；

(4)浸泡处理，控水调湿，钻孔接种打捆：将风干的树枝泡入石灰水中，浸泡18-24h后去除表面水分；然后选取其中≥30mm的树枝钻供接种用的孔，将所述麦粒纯菌种塞入所述孔中，然后用木条封住所述孔，然后将所述树枝打捆即完成接种；

(5)荫棚发菌；

(6)地埋遮荫出耳。

2.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述步骤(1)具体包括如下步骤：

采集黑木耳子实体并在无菌条件下消毒后打开，取其中0.2-0.6mm³表面新鲜的菌肉组织，接种在无菌固体培养基中，室温条件下黑暗培养25-35天，菌丝长满所述固体培养基表面，然后取菌丝长势强、菌丝洁白浓密的所述菌丝进行扩大培养，即取得所述野生黑木耳无病毒纯菌种。

3.根据权利要求2所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述黑木耳子实体为色泽灰黑、形状如层叠扇形、厚度≥2mm的野生黑木耳子实体；所述消毒采用酒精的质量分数≥70％的酒精水溶液，所述无菌固体培养基为无菌PDA斜面培养基。

4.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述步骤(2)具体包括如下步骤：取无破粒、饱满的小麦，开水煮20-30min，去除表面水分，拌入相当于去除表面水分后的小麦质量的0.3-0.5％的熟石膏粉，密封，在温度≥100℃条件下灭菌后冷却至室温，室温条无菌条件下将所述野生黑木耳无病毒纯菌种接种到拌有熟石膏粉的麦粒种，黑暗培养30天以上，待长满菌丝，即成为麦粒纯菌种。

5.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述去除表面水分为达到所述树枝干重的120％以下。

6.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述孔直径为10-12mm，深度大于所述树枝半径且小于树枝直径。

7.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述孔相互交错的位于所述树枝上，间距≥100mm。

8.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述石灰水为常温下饱和石灰水。

9.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述步骤(5)具体包括如下步骤：将接种好的树枝捆保温22-28℃，保持相对湿度85％-95％，待所述接种好的树枝捆表面出现白色健康菌丝体，即完成发菌。

10.根据权利要求1所述黑木耳人工出耳方法，其特征在于，所述步骤(6)具体包括如下步骤：将发好菌的树枝捆卧式放在地面上或埋入土壤中，埋入土壤中的体积≤1/3树枝捆总体积，遮荫≥70％，保持相对湿度70％-90％，温度18-25℃，当所述树枝捆表皮见干时喷水，使其干湿交替至出耳。