CN104958321B - 蛋黄油和去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用 - Google Patents

蛋黄油和去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了蛋黄油及去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用,属于生物医药技术领域。本发明通过研究发现蛋黄油局部涂抹鼻腔可以显著改善过敏性鼻炎症状,进一步发现蛋黄油局部治疗能够降低过敏性鼻炎小鼠模型中淋巴细胞的炎症因子IL‑4和IgE抗体水平。在此基础上,本发明提出了蛋黄油作为治疗过敏性鼻炎的新用途。同时为避免加热法提取的蛋黄油存在苯并芘残留(苯并芘具有潜在致癌作用),进一步的,本发明还提出了去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用,避免了残留的苯并芘的潜在致癌作用。

Description

蛋黄油和去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及蛋黄油的应用,特别涉及蛋黄油和去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用,属于生物医药技术领域。
背景技术
过敏性鼻炎是世界范围内的常见疾病,表现为阵发性喷嚏、清水样鼻涕、鼻塞和鼻痒甚至嗅觉减退等,给病人带来极大痛苦。目前用于过敏性鼻炎的治疗药物包括抗组胺药、糖皮质激素、抗白三烯药、鼻内减充血剂等。这些药物均具有一定副作用,且需反复用药控制症状。本发明发明人研究发现蛋黄油局部涂抹鼻腔对过敏性鼻炎具有显著疗效,能够显著改善过敏性鼻炎小鼠的鼻炎症状,且蛋黄油为天然动物来源,无副作用。因此,在此基础上,本发明提出了治疗过敏性鼻炎的新的药物和方法,即局部鼻腔涂抹蛋黄油从而达到治疗过敏性鼻炎的目的。
发明内容
本发明提出一种新的治疗过敏性鼻炎的药物和方法,即本发明提出了蛋黄油作为治疗过敏性鼻炎药物的新用途以及局部鼻腔涂抹蛋黄油的方法。
本发明采用了以下技术手段:
蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。以及
去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。
在本发明中,优选的,蛋黄油的使用方法为局部鼻腔内涂抹。
在本发明中,优选的,去除苯并芘的蛋黄油的使用方法为局部鼻腔内涂抹。
在本发明中,优选的,所述蛋黄油采用下述方法制备得到:鸡蛋煮熟取黄,在80~110℃下干燥成蛋黄粉,于210~260℃下烘烤即得蛋黄油。
在本发明中,优选的,所述去除苯并芘的蛋黄油采用下述方法制备得到:
(1)鸡蛋煮熟取黄,在80~110℃下干燥成蛋黄粉,于210~260℃下烘烤即得蛋黄油;
(2)按照活性炭质量为蛋黄油质量的1.5%称取活性炭,将活性炭和用纱布过滤后的蛋黄油混合,在70℃下搅拌2~3小时,用滤布加滤纸抽滤,得到去除苯并芘的蛋黄油。
本发明通过腹腔注射卵清蛋白并鼻腔滴入卵清蛋白制备过敏性鼻炎模型,鼻腔滴入卵清蛋白同时滴入蛋黄油进行治疗。发现蛋黄油局部滴入鼻腔对过敏性鼻炎具有显著疗效,能够显著改善过敏性鼻炎小鼠的鼻炎症状,降低过敏性鼻炎小鼠模型淋巴细胞的炎症因子IL-4和IgE抗体水平。因此,在此基础上,本发明提出了蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。
为避免加热法提取的蛋黄油存在苯并芘残留(苯并芘具有潜在致癌作用),进一步的,本发明还提出了去除苯并芘的蛋黄油在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用,避免了残留的苯并芘的潜在致癌作用。
附图说明
图1为蛋黄油及去除苯并芘的蛋黄油降低过敏性鼻炎小鼠模型淋巴细胞炎症因子IL-4水平柱状图,其中,**P<0.01vs空白对照组;##P<0.01vs鼻腔致敏组;
图2为蛋黄油及去除苯并芘的蛋黄油减少过敏性鼻炎小鼠模型淋巴细胞IgE抗体水平柱状图,其中,**P<0.01vs空白对照组;#P<0.05vs鼻腔致敏组。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明,本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
本发明试验例中的蛋黄油采用下述方法制备得到:鸡蛋煮熟取黄,在80~110℃下干燥成蛋黄粉,于210~260℃下烘烤即得蛋黄油。
本发明试验例中的去除苯并芘的蛋黄油采用下述方法制备得到:
(1)鸡蛋煮熟取黄,在80~110℃下干燥成蛋黄粉,于210~260℃下烘烤即得蛋黄油;
(2)按照活性炭质量为蛋黄油质量的1.5%称取活性炭,将活性炭和用纱布过滤后的蛋黄油混合,在70℃下搅拌2~3小时,用滤布加滤纸抽滤,得到去除苯并芘的蛋黄油。
试验例1蛋黄油及去除苯并芘的蛋黄油作为一种治疗过敏性鼻炎的药物和使用方法
1.动物及实验试剂:
BALB/c雌性小鼠(品系:BALB/c,北京京维通利华实验动物技术有限公司购买),卵清蛋白(Sigma-aldrich)
2.实验方法:
随机取20只小鼠,并将小鼠随机分为5组(空白对照组,卵清蛋白(OVA)组,OVA+鼻腔致敏组,OVA+鼻腔致敏组+蛋黄油组,OVA+鼻腔致敏组+去除苯并芘蛋黄油组),每组4只小鼠。OVA组,OVA+鼻腔致敏组,OVA+鼻腔致敏组+蛋黄油组,OVA+鼻腔致敏组+去除苯并芘蛋黄油组均于第0与第7天腹腔注射卵清蛋白(10μg OVA,乳化于2mg Al(OH)3,溶于0.5ml PBS)的混合溶液。OVA组小鼠分别于第14、15、16,21、22、23,28、29、30天每个鼻孔内使用微量移液器滴入10μl PBS,以及与下述治疗药物相同容量的药物的溶剂。OVA+鼻腔致敏组小鼠分别于第14、15、16,21、22、23,28、29、30天每个鼻孔内使用微量移液器滴入10μl OVA(1mg/ml)(此时不再需要加氢氧化铝),以及与下述治疗药物相同容量的药物的溶剂。OVA+鼻腔致敏组+蛋黄油组,OVA+鼻腔致敏组+去除苯并芘蛋黄油组小鼠分别于第14、15、16,21、22、23,28、29、30天每个鼻孔内使用微量移液器滴入10μl OVA(1mg/ml),且在滴入OVA的同时滴入5μl治疗药物(蛋黄油或去除苯并芘蛋黄油)。
在第31天,即最后一次用药后24小时,将12只小鼠处死。小鼠上腭连同鼻粘膜(nasal palate containing the nasal mucosa)被取材,并迅速冻存。取小鼠颈部淋巴结,并通过100-μm细胞筛制成单细胞悬液(1*106/ml)。细胞悬液培养于含有5%FCS、庆大霉素、β-巯基乙醇的无血清细胞冻存培养基(RPMI)中,并使用10μg/ml的OVA再刺激4天。并收集上清液。
使用ELISA方法检测淋巴结培养上清液中的IL-4、IgE的含量。
3、结果
3.1.蛋黄油及去除苯并芘的蛋黄油降低过敏性鼻炎小鼠模型炎症因子IL-4水平;
取小鼠颈部淋巴结,并通过100-μm细胞筛制成单细胞悬液(1*106/ml)。细胞悬液培养于含有5%FCS、庆大霉素、β-巯基乙醇的无血清细胞冻存培养基(RPMI)中,并使用10μg/ml的OVA再刺激4天,并收集上清液。使用ELISA方法检测淋巴结培养上清液中的IL-4的含量。结果表明局部涂抹鼻腔蛋黄油和去除苯并芘的蛋黄油,均能降低过敏性鼻炎小鼠模型淋巴细胞IL-4释放水平。结果见图1。
3.2.蛋黄油及去除苯并芘的蛋黄油减少过敏性鼻炎小鼠模型IgE抗体水平;
取小鼠颈部淋巴结,并通过100-μm细胞筛制成单细胞悬液(1*106/ml)。细胞悬液培养于含有5%FCS、庆大霉素、β-巯基乙醇的无血清细胞冻存培养基(RPMI)中,并使用10μg/ml的OVA再刺激4天,并收集上清液。使用ELISA方法检测淋巴结培养上清液中的IgE抗体的含量。结果表明局部涂抹鼻腔蛋黄油和去除苯并芘的蛋黄油,均能减少过敏性鼻炎小鼠模型IgE抗体的产生。结果见图2。

Claims (6)

1.蛋黄油作为唯一活性成分在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。
2.去除苯并芘的蛋黄油作为唯一活性成分在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,蛋黄油的使用方法为局部鼻腔内涂抹。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,去除苯并芘的蛋黄油的使用方法为局部鼻腔内涂抹。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述蛋黄油采用下述方法制备得到:鸡蛋煮熟取黄,在80~110℃下干燥成蛋黄粉,于210~260℃下烘烤即得蛋黄油。
6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述去除苯并芘的蛋黄油采用下述方法制备得到:
(1)鸡蛋煮熟取黄,在80~110℃下干燥成蛋黄粉,于210~260℃下烘烤即得蛋黄油;
(2)按照活性炭质量为蛋黄油质量的1.5%称取活性炭,将活性炭和用纱布过滤后的蛋黄油混合,在70℃下搅拌2~3小时,用滤布加滤纸抽滤,得到去除苯并芘的蛋黄油。
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