CN104958259A - 一种盐酸表柔比星脂质体注射液及抗肿瘤活性应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,涉及盐酸表柔比星脂质体注射液的制备及抗肿瘤活性应用。采用硫酸铵梯度法制备盐酸表柔比星脂质体注射液。本发明的抗肿瘤活性结果表明盐酸表柔比星脂质体注射液对乳腺癌有显著抑制作用,且抗肿瘤活性优于盐酸多柔比星脂质体注射液(楷莱)、盐酸表柔比星注射液。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,涉及一种注射液及其药物用途,特别涉及一种适合工业化生产的盐酸表柔比星脂质体注射液及抗肿瘤活性应用。
技术背景
表柔比星(Epirubicin),又名表阿霉素,是典型的蒽环类抗肿瘤抗生素。1975年意大利学者通过半合成途径合成表柔比星,与另一典型的蒽环类抗肿瘤抗生素药物多柔比星(阿霉素)是同分异构体,区别在于其氨基糖苷的4′位上的羟基由顺势变为方式。表柔比星用于乳腺癌、卵巢癌等多种实体瘤。
脂质体作为药物载体,具有一定的靶向性,尤以与抗肿瘤药物的结合既增强治疗作用又可以降低药物毒性。普通脂质体由磷脂和胆固醇组成,但靶向性差,为提高脂质体的稳定性、靶向性和细胞内导入能力,可以采用某些功能基团修饰脂质体表面,如聚乙二醇链修饰的脂质体(长循环脂质体,STEALTH技术)。STEALTH技术采用PEG的磷脂作为载体,延长药物在血液循环时间,使脂质体可以有效的达到病变部位。
目前,上市的PEG化脂质体包括美国Sequus公司开发的盐酸多柔比星脂质体注射液,商品名(楷莱),是第一个得到美国认可的长循环脂质体(1995年)。静脉注射后,盐酸多柔比星脂质体会蓄积到肿瘤组织中,很少进入正常组织,体内分布呈现肿瘤靶向性,显著提高多柔比星的抗癌效能。国内三家公司成功仿制开发了该产品,其中上海复旦张江生物医药股份有限公司自主创新的阿霉素脂质体(里葆多)是国内批准上市的首个PEG化阿霉素脂质体,作为乳腺癌、淋巴癌等癌症的一线化疗药物。已上市的阿霉素脂质体属于传统的脂质体,即表面没有任何修饰。技术的核心就是利用脂质体内外pH的差异而使药物被动装载于脂质体内,即pH梯度法。与PEG修饰的多柔比星脂质体比较,的膜结构的组成缺少PEG的保护,容易被巨噬细胞吞噬清除,因此其体内半衰期要短得多,对肿瘤组织的靶向性,也较低,因此带来更多的急性毒性。
发明内容
本发明目的在于提供一种盐酸表柔比星脂质体注射液及其制备方法,本发明是由如下技术方案实现的:
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,该注射液由如下原料制成(按脂质体注射液每100体积份计):
本发明所述盐酸表柔比星脂质体注射液,原料优选为:
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,该注射液原料优选为:
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,原料优选为:
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,原料优选为:
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其中:
硫酸铵溶液的浓度为0.1~0.3mol/L;组氨酸缓冲液浓度为0.05mol/L~0.4mol/L,pH为6.2~6.8;蔗糖溶液浓度为7~10%,pH为6.50~7.50。优选地,硫酸铵溶液的浓度为0.15mol/L~0.25mol/L;组氨酸缓冲液浓度为0.1mol/L~0.3mol/L;蔗糖溶液浓度为8%。优选地,硫酸铵溶液的浓度为0.2mol/L;组氨酸缓冲液浓度为0.2mol/L;蔗糖溶液浓度为9%。
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其中HSPC:CHO:DSPE-PEG2000的最佳比例为3:1:1。
本发明所述的盐酸表柔比星脂质体注射液终产品中磷脂的最佳浓度16mg/mL;终产品中磷脂与药物盐酸表柔比星的最佳比例为8:1,药物盐酸表柔比星的浓度为2mg/mL。
本发明盐酸表柔比星脂质体注射液的制备工艺包含以下步骤:
(1)油相:称取氢化大豆卵磷脂/胆固醇/二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000,溶于无水乙醇,加热溶解后,于55~65℃保温;
(2)水相:配制硫酸铵水溶液,于55~65℃保温;
(3)乳化:在55~65℃条件下,将油相注入到水相中,不断加热搅拌,并通入氮气,直到无水乙醇完全挥发,得到空白脂质体a;
(4)整粒:将空白脂质体a高压均质减小粒径,最大均质压力在1400bar以下;挤出器挤出,挤出器中采用孔径为0.05~0.5nm的滤膜,得到空白脂质体b;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法或采用凝胶柱层析法,用蔗糖溶液置换外水相的硫酸铵溶液,得到空白脂质体c;
(6)载药、孵化:空白脂质体c中加入组氨酸缓冲液,将盐酸表柔比星溶于上述混合液中,55~65℃保温,蔗糖溶液定容,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d;
(7)除菌、分装:将d用0.22μm微孔滤膜除菌、分装。
本发明方法中所述超滤法可以是:向空白脂质体加入同等体积的9%蔗糖溶液,混合均匀,设置流量10-25mL/min,泵速15-35rpm/min,用蔗糖溶液置换内水相硫酸铵,置换5-8次,得到空白脂质体。处理量不同,流量、泵速也不同,过大会破坏脂质体。
本发明方法中所述凝胶柱层析法可以是:空白脂质体上样到凝胶柱中,用蔗糖溶液洗脱,收集洗脱液。
将盐酸表柔比星脂质体注射液平均粒径控制在50~150nm,更优选为70~100nm,经过挤出后粒径分布均匀。
附图说明
图1为d1粒径分布图;
图2为d2粒径分布图;
图3为乳腺癌小鼠相对肿瘤体积随时间的变化。
本发明采用无水乙醇溶解磷脂,解决了以氯仿为溶剂产生毒性的问题;通过加热搅拌的方法除去乙醇,容易得到空白脂质体,解决了采用减压旋转蒸发除乙醇缓慢且不易工业化生产的问题;空白脂质体中残留的乙醇采用超滤法去除,与其他方法相比,极好的控制了乙醇的残留量。本发明中空白脂质体用高压均质机减小粒径后,采用挤出器挤出,使空白脂质体粒径分布更均匀。
本发明将盐酸表柔比星为长循环脂质体注射液,符合工业化大生产要求。与盐酸表柔比星注射液以及盐酸多柔比星脂质体注射液(楷莱)进行对比试验,治疗MCF-7乳腺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤活性结果表明,本发明将盐酸表柔比星长循环脂质体注射液具有更好的抗肿瘤作用。
下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1:本发明以MCF-7荷瘤小鼠为模型,采用尾静脉注射给药,比较盐酸表柔比星脂质体注射液、盐酸多柔比星脂质体注射液(楷莱)、表柔比星注射液的抗肿瘤活性。
1.实验方法
取裸鼠(4周龄),将MCF-7细胞混悬均匀,右前肢腋下进行接种,每只注射0.2mL(1*107)细胞液,80只全部接种。接种肿瘤细胞后,每天观察肿瘤生长情况。当裸鼠接种MCF-7细胞3天后,可在右前腋下隐约触及肿块,肿块逐渐增大,5天后由外观可见肿块形成,待肿瘤直径至0.6~0.8cm时,取60只进行实验。
将成模裸鼠随机分为6组,每组10只(每隔7天给药1次,给药3次)。
1组:实施例5盐酸表柔比星脂质体注射液5mg/kg
2组:实施例5盐酸表柔比星脂质体注射液10mg/kg
3组:实施例5盐酸表柔比星脂质体注射液15mg/kg
4组:盐酸多柔比星脂质体注射液(楷莱)10mg/kg
5组:盐酸表柔比星注射液10mg/kg
6组:空白对照(9%蔗糖溶液)
尾静脉注射给药,每隔7天给药1次(一个给药周期),待生理盐水对照组肿瘤体积达到2000mm3时(长径a达到20mm),停止试验(试验必须≥注射3个周期)。
给药后每天观察裸鼠的精神:自主活动量、动物休息时体态、爬行时体态、饮食等情况,每隔3天用游标卡尺测量肿瘤最长直径(a)、最短径(b)及体重,估算肿瘤体积。肿瘤体积=a×b2/2。根据估算出的肿瘤体积计算相对肿瘤体积RTV,RTV=Vt/V0,其中V0为测量开始时同一肿瘤的体积,Vt为每一次测量时的肿瘤体积。
获得的数据以()表示,并做t检验,取α=0.05显著性水平。
注:实验过程中正常饲养小鼠(记录发生的异常情况)。
2.实验结果
实验结果显示,盐酸表柔比星脂质体注射液有显著的抗肿瘤活性,且抗肿瘤活性优于盐酸多柔比星脂质体注射液和盐酸表柔比星注射液。实验过程中,15mg/kg给药剂量组在21天时有2只小鼠死亡,盐酸表柔比星注射液组在21天有3只小鼠死亡。结果见表1和表2。
表1不同制剂给药后体重的变化
注:*对比于空白对照组有显著意义(P<0.05)。
结果显示:
1)与空白对照组相比,其他5组药物对小鼠体重变化有显著意义(P<0.05);
2)第3组高剂量组小鼠在21天有2只死亡,第5组小鼠在21天有3只小鼠死亡,并且体重减少量高于1、2、4组,说明这两组药物毒性较大。
表2不同制剂给药后肿瘤体积的变化
注:1)*对比于空白对照组有显著意义(P<0.05);
2)**对比于空白对照组有极显著意义(P<0.01);
3)&对比于10mg/kg盐酸多柔比星脂质体注射液有显著意义(P<0.05);
4)#对比于10mg/kg盐酸表柔比星注射液有显著意义(P<0.05)。
结果显示:
1)与空白对照组相比,其他5组药物降低肿瘤体积有极显著意义(P<0.01),表明5组药物均具有显著的抗肿瘤活性;
2)盐酸表柔比星脂质体注射液中剂量组(2组)和盐酸表柔比星脂质体注射液高剂量组(3组)小鼠肿瘤体积变化相近,但由于3组药物毒性较大可导致小鼠死亡,同时盐酸表柔比星脂质体注射液低剂量组(1组)小鼠肿瘤体积变化小,因此可选择中剂量组作为优选剂量组;
3)与盐酸表柔比星注射液(5组)和盐酸多柔比星脂质体注射液(4组)相比,盐酸表柔比星脂质体注射液(2组和3组)降低肿瘤体积有显著意义(P<0.05),表明盐酸表柔比星脂质体注射液抗肿瘤活性优于盐酸表柔比星注射液和盐酸多柔比星脂质体注射液。
实验例2:
实施例1~5制备的盐酸表柔比星脂质体注射液包封率均达到90%以上,结果见表3。经过挤出器挤出的脂质体粒径分布均匀,d1粒径分布宽度32.42,d2粒径分布宽度26.74,结果见图1和图2。
表3实施例中制备的盐酸表柔比星脂质体注射液粒径和包封率
具体实施方式
实施例1
(1)油相:称取HSPC 1500.8mg,CHO 500.6mg,DSPE-PEG2000500mg,溶于13mL无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液130mL,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65℃条件下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a1;
(4)整粒:空白脂质体a1用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为410bar、800bar、1030bar、1385bar每个压力2min,在最大压力1385bar时均质8min,得到空白脂质体b1;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法,用9%蔗糖溶液700mL置换空白脂质体b1外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.93,超滤7次,得到86mL空白脂质体c1;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c185mL,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液8.5mL,测定混合液pH6.48,称取276.2mg盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH6.52,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH6.52,用9%蔗糖溶液定容至138.1mL,pH6.50,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d1;
(7)除菌、分装、保存:将d1用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装,批号为1312250101,4℃保存。
实施例2
(1)油相:称取HSPC 1500.6mg,CHO 500.3mg,DSPE-PEG2000500.1mg,溶于13mL无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液130mL,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65℃条件下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a2;
(4)整粒:空白脂质体a2用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为410bar、800bar、1030bar、1385bar每个压力2min,在最大压力1385bar时均质8min,均质后空白脂质体通过挤出器挤出,挤出10次,频率20Hz,挤出器所用滤膜孔径为0.1μm,得到空白脂质体b2;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:挤出后的空白脂质体用9%的蔗糖溶液700mL置换外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.93,超滤7次,得到86mL空白脂质体c2;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c285mL,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液8.5mL,测定混合液pH 6.47,称取276.2mg盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH 6.54,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH 6.51,用9%蔗糖溶液定容至138.1mL,pH 6.49,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d2;
(7)除菌、分装、保存:将d2用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装,批号为1312250102,4℃保存。
实施例3
(1)油相:称取HSPC 1500mg,CHO 499.4mg,DSPE-PEG2000499.4mg,溶于13mL无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液130mL,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65℃条件下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,转速600r/min,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a3;
(4)整粒:空白脂质体a3用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为410bar、800bar、1030bar、1385bar每个压力2min,在最大压力1385bar时均质8min,均质后将空白脂质体通过挤出器挤出,挤出10次,频率20Hz,挤出器所用滤膜孔径为0.22μm,得到空白脂质体b3;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法,用9%蔗糖溶液700mL置换空白脂质体b3外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.95,超滤7次,得到77.4mL空白脂质体c3;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c370mL,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液7mL,测定混合液pH6.46,称取227.6mg盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH6.48,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH6.46,用9%蔗糖溶液定容至113.8mL,pH6.45,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d3;
(7)除菌、分装、保存:将d3用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装,批号为1402100101,4℃保存。
实施例4
(1)油相:称取DSPC1499.5mg,CHO 499.7mg,DSPE-PEG2000501.0mg,溶于13mL无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液130mL,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65℃条件下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,转速600r/min,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a4;
(4)整粒:空白脂质体a4用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为400bar、810bar、1020bar、1300bar每个压力2min,在最大压力1300bar时均质8min,均质后将空白脂质体通过挤出器挤出,挤出10次,频率20Hz,挤出器所用滤膜孔径为0.1μm,得到空白脂质体b4;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法,用9%蔗糖溶液700mL置换空白脂质体b4外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.96,超滤7次,得到85mL空白脂质体c4;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c480mL,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液8mL,测定混合液pH6.52,称取260.2mg盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH6.28,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH6.43,用9%蔗糖溶液定容至130.1mL,pH6.45,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d4;
(7)除菌、分装、保存:将d4用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装,批号为1403030101,4℃保存。
实施例5
(1)油相:称取HSPC150.02g,CHO 50.01g,PEG-DSPE200050.02g,溶于1.3L无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液13L,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65条件℃下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,转速600r/min,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a5;
(4)整粒:空白脂质体a5用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为405bar、810bar、1020bar、1350bar每个压力2min,在最大压力1350bar时均质8min,均质后将空白脂质体通过挤出器挤出,挤出10次,频率20Hz,挤出器所用滤膜孔径为0.1μm,得到空白脂质体b5;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法,用9%蔗糖溶液70L置换空白脂质体b4外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.98,超滤7次,得到8.94L空白脂质体c5;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c58.9L,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液0.89L,测定混合液pH6.50,称取28.93g盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH6.38,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH6.48,用9%蔗糖溶液定容至14.47L,pH6.45,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d6;
(7)除菌、分装、保存:将d5用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装,批号为1404080101,4℃保存。
实施例6:
制备:
(1)油相:称取HSPC,CHO,PEG-DSPE2000,溶于无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65条件℃下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,转速600r/min,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a;
(4)整粒:空白脂质体a用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为405bar、810bar、1020bar、1350bar每个压力2min,在最大压力1350bar时均质8min,均质后将空白脂质体通过挤出器挤出,挤出10次,频率20Hz,挤出器所用滤膜孔径为0.1μm,得到空白脂质体b;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法,用8%蔗糖溶液置换空白脂质体b外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.98,超滤7次,得到空白脂质体c;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液,测定混合液pH6.50,盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH6.38,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH6.48,用8%蔗糖溶液定容至100L,pH6.45,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d。
(7)除菌、分装、保存:将d用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装。
实施例7
制备:
(1)油相:称取HSPC,CHO,PEG-DSPE2000,溶于无水乙醇中,加热溶解后,于65℃水浴保温30min;
(2)水相:配制0.2mol/L硫酸铵水溶液,于65℃水浴保温30min;
(3)乳化:在65条件℃下,将油相注入到水相中,用磁力搅拌器搅拌,转速600r/min,并通入氮气,直到乙醇完全挥发,得到空白脂质体a;
(4)整粒:空白脂质体a用高压均质机在不同压力下高压均质,均质压力分别为405bar、810bar、1020bar、1350bar每个压力2min,在最大压力1350bar时均质8min,均质后将空白脂质体通过挤出器挤出,挤出10次,频率20Hz,挤出器所用滤膜孔径为0.1μm,得到空白脂质体b;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法,用9%蔗糖溶液置换空白脂质体b外水相的硫酸铵溶液,蔗糖溶液用氢氧化钠调节pH至6.98,超滤7次,得到空白脂质体c;
(6)载药、孵化、定容:取空白脂质体c,加入0.27mol/L组氨酸缓冲液,测定混合液pH6.50,盐酸表柔比星溶于上述混合液中,加热溶解,测定pH6.38,通入氮气,在65℃水浴中孵化1h,孵化后pH6.48,用9%蔗糖溶液定容至80L,pH6.45,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d。
(7)除菌、分装、保存:将d用0.22μm微孔滤膜过滤除菌分装。
本发明所述重量份与体积份的关系均为g/L或mg/ml的关系。
Claims (10)
1.一种盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于该注射液由按脂质体注射液每100体积份计的如下原料制成:
2.一种如权利要求1所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于该注射液由按脂质体注射液每100体积份计的如下原料制成:
3.一种如权利要求1所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于该注射液由按脂质体注射液每100体积份计的如下原料制成:
4.一种如权利要求1所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于该注射液由按脂质体注射液每100体积份计的如下原料制成:
5.一种如权利要求1所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于该注射液由按脂质体注射液每100体积份计的如下原料制成:
6.如权利要求1-5任一所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于其中:
硫酸铵溶液的浓度为0.1~0.3mol/L;组氨酸缓冲液浓度为0.05mol/L~0.4mol/L,pH为6.2~6.8;蔗糖溶液浓度为7~10%,pH为6.50~7.50;或者,硫酸铵溶液的浓度为0.15mol/L~0.25mol/L;组氨酸缓冲液浓度为0.1mol/L~0.3mol/L;蔗糖溶液浓度为8%;或者,硫酸铵溶液的浓度为0.2mol/L;组氨酸缓冲液浓度为0.2mol/L;蔗糖溶液浓度为9%。
7.如权利要求6所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于其中:
所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其中HSPC:CHO:DSPE-PEG2000的最佳比例为3:1:1。
8.如权利要求1-5,7任一所述的盐酸表柔比星脂质体注射液,其特征在于其中:
所述的盐酸表柔比星脂质体注射液终产品中磷脂的最佳浓度16mg/mL;终产品中磷脂与药物盐酸表柔比星的最佳比例为8:1,药物盐酸表柔比星的浓度为2mg/mL。
9.如权利要求1-5,7任一所述的盐酸表柔比星脂质体注射液的制备方法,其特征在于该方法包含以下步骤:
(1)油相:称取氢化大豆卵磷脂/胆固醇/二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000,溶于无水乙醇,加热溶解后,于55~65℃保温;
(2)水相:配制硫酸铵水溶液,于55~65℃保温;
(3)乳化:在55~65℃条件下,将油相注入到水相中,不断加热搅拌,并通入氮气,直到无水乙醇完全挥发,得到空白脂质体a;
(4)整粒:将空白脂质体a高压均质减小粒径,最大均质压力在1400bar以下;挤出器挤出,挤出器中采用孔径为0.05~0.5nm的滤膜,得到空白脂质体b;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法或采用凝胶柱层析法,用蔗糖溶液置换外水相的硫酸铵溶液,得到空白脂质体c;
(6)载药、孵化:空白脂质体c中加入组氨酸缓冲液,将盐酸表柔比星溶于上述混合液中,55~65℃保温,蔗糖溶液定容,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d;
(7)除菌、分装:将d用0.22μm微孔滤膜除菌、分装。
10.如权利要求6所述的盐酸表柔比星脂质体注射液的制备方法,其特征在于该方法包含以下步骤:
(1)油相:称取氢化大豆卵磷脂/胆固醇/二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000,溶于无水乙醇,加热溶解后,于55~65℃保温;
(2)水相:配制硫酸铵水溶液,于55~65℃保温;
(3)乳化:在55~65℃条件下,将油相注入到水相中,不断加热搅拌,并通入氮气,直到无水乙醇完全挥发,得到空白脂质体a;
(4)整粒:将空白脂质体a高压均质减小粒径,最大均质压力在1400bar以下;挤出器挤出,挤出器中采用孔径为0.05~0.5nm的滤膜,得到空白脂质体b;
(5)制造脂质体内外跨膜梯度:采用超滤法或采用凝胶柱层析法,用蔗糖溶液置换外水相的硫酸铵溶液,得到空白脂质体c;
(6)载药、孵化:空白脂质体c中加入组氨酸缓冲液,将盐酸表柔比星溶于上述混合液中,55~65℃保温,蔗糖溶液定容,得到盐酸表柔比星脂质体注射液d;
(7)除菌、分装:将d用0.22μm微孔滤膜除菌、分装。
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Cited By (3)
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---|---|---|---|---|
CN109453117A (zh) * | 2018-10-26 | 2019-03-12 | 南京中医药大学 | 强心苷类活性化合物脂质体及其制备方法 |
CN111265480A (zh) * | 2018-12-04 | 2020-06-12 | 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司 | 一种表柔比星脂质体及其制备方法 |
CN115192449A (zh) * | 2021-04-08 | 2022-10-18 | 江苏长泰药业有限公司 | 一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101264056A (zh) * | 2008-04-22 | 2008-09-17 | 复旦大学 | 盐酸表阿霉素脂质体及其制备方法 |
CN102357074A (zh) * | 2011-11-08 | 2012-02-22 | 北京中医药大学 | 抗肿瘤多药耐药靶向脂质体 |
CN103550157A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-02-05 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种表阿霉素脂质体的制备及其抗肿瘤用途 |
-
2015
- 2015-07-10 CN CN201510406550.8A patent/CN104958259A/zh active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101264056A (zh) * | 2008-04-22 | 2008-09-17 | 复旦大学 | 盐酸表阿霉素脂质体及其制备方法 |
CN102357074A (zh) * | 2011-11-08 | 2012-02-22 | 北京中医药大学 | 抗肿瘤多药耐药靶向脂质体 |
CN103550157A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-02-05 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种表阿霉素脂质体的制备及其抗肿瘤用途 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109453117A (zh) * | 2018-10-26 | 2019-03-12 | 南京中医药大学 | 强心苷类活性化合物脂质体及其制备方法 |
CN111265480A (zh) * | 2018-12-04 | 2020-06-12 | 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司 | 一种表柔比星脂质体及其制备方法 |
CN111265480B (zh) * | 2018-12-04 | 2022-10-21 | 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司 | 一种表柔比星脂质体及其制备方法 |
CN115192449A (zh) * | 2021-04-08 | 2022-10-18 | 江苏长泰药业有限公司 | 一种微反应器制备盐酸阿霉素脂质体的方法 |
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