CN104887798B - 一种具有治疗痛经作用的栓剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有治疗痛经作用的栓剂及其制备方法，它由北细辛3～9份，肉桂6～18份，醋炙没药10～30份，乳香10～30份，延胡索15～45份，醋炙五灵脂10～30份，全蝎10～30份，枳壳10～30份，炙甘草6～18份制成。本发明提供的栓剂，中药原料配比科学合理，各药味之间用量配比严谨科学。实验结果表明，本发明提供的栓剂对痛经疾病具有非常好的治疗效果，有效率高达90%以上，并且起效迅速，持久，不良反应低，安全性高。本发明通过大量实验筛选出最佳的辅料及其栓剂的成型工艺，制备得到的栓剂，载药量大，稳定性好，释放药物的速度快，起效迅速，且持久性好，能发挥很好的治疗痛经的功效。

Description

一种具有治疗痛经作用的栓剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂，具体涉及一种具有治疗痛经作用的栓剂及其制备方法。

背景技术

痛经是一种女性内分泌失调的最常见疾病，其发病率高，国外发病率更高，严重者占15％，影响着青年女性的工作和生活质量。传统医学认为痛经发病主要由情志所伤，起居不慎或六淫为害引起，并与素体及经期、经期前后特殊的生理环境有关。其发病机理主要是冲任瘀阻或寒凝经脉，使气血运行不畅，胞宫经血流通受碍，以致“不通则痛”；或冲任、胞宫失于濡养，”不荣则痛”。依据病因病机寒凝血瘀、气滞血瘀为痛经的两种主要证型。

目前，西医临床治疗多使用止痛类药物、非甾体抗炎药、口服避孕药等，虽然具有一定疗效，但由于药物对机体代谢有广泛影响而具有诸多不良反应，如引起头痛、头晕等中枢神经系统以及胃肠道反应等。

并且现有技术还没有快速，有效的治疗该疾病的中药制剂。并且现有药物多采用口服给药形式，存在较大的肝脏首过效应，生物利用度较低，且易造成对胃部损伤等不良反应。

发明内容

发明目的：本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种疗效确切，不良反应低，能够快速起效，具有很好的治疗子宫腺肌病痛经作用的栓剂。本发明另一个目的是提供该栓剂的制备方法。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛3～9份，肉桂6～18份，醋炙没药10～30份，乳香10～30份，延胡索15～45份，醋炙五灵脂10～30份，全蝎10～30份，枳壳10～30份，炙甘草6～18份。

作为优选方案，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛3～6份，肉桂6～12份，醋炙没药10～20份，乳香10～20份，延胡索15～30份，醋炙五灵脂10～20份，全蝎10～20份，枳壳10～20份，炙甘草6～12份。

作为更加优选方案，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛3份，肉桂6份，醋炙没药10份，乳香10份，延胡索15份，醋炙五灵脂10份，全蝎10份，枳壳10份，炙甘草6份。

本发明以北细辛、肉桂共为君药。北细辛味辛性温，有小毒，归肺、肾、心经，可散少阴肾经在里之寒以通阳散结。肉桂味辛、甘，性大热，归肾、脾、心、肝经，气厚纯阳，入下焦，能助肾中阳气而益命门之火；入中焦，可暖脾胃以滋健运；入血分，善温通血脉而散寒止痛。二药共为君药，共奏温肾助阳，散寒止痛之功。炙乳香、炙没药、延胡索，枳壳为臣药。乳香味辛苦，性温，归心、肝、脾经，其辛散走窜，味苦通泻，既入血分又入气分，能行血中气滞，化瘀止痛，内能宣通脏腑气血，外能透达经络，可用于一切气滞血瘀之痛证。没药味辛苦，性平，归心、肝、脾经，具有活血止痛，消肿生肌的功效。乳香、没药伍用，出自《证治准绳》之“乳香止痛散”。枳壳是常用中药,具有理气宽中、行滞消胀的功效。常用于胸胁气滞、胀满疼痛、食积不化、痰饮内停、胃下垂、脱肛、子宫脱垂。延胡索味辛苦，性温，归心、肝、脾经，具有活血散瘀，理气止痛的功效。以上4药共为臣药，共奏活血化瘀、行气止痛之功，加强君药之作用。方中以全蝎、五灵脂为佐药。全蝎味辛，性平，有毒，归肝经，具有息风阵痉，攻毒散结，通络止痛的作用。五灵脂味苦、咸、甘，性温，归肝经。能活血止痛，化瘀止血，本品炒用，既能活血散瘀，又能止血，故可用于瘀血内阻，血不归经之出血。以上二药共为佐药，活血通络，化瘀止痛，增君臣之力且祛邪不伤正。方中以甘草为使药。甘草味甘，性平，归心、肺、脾、胃经，可补脾益气，缓急止痛，清热解毒，调和诸药。其为使药可缓和细辛，全蝎之毒性，缓急止痛，调和诸药，使药力直达病所。

本发明提供的中药组合物，既补先天肾气，又补后天脾气，诸药合用，共奏温肾助阳、散寒止痛、活血化瘀之功，使阳长阴消，胞宫得养，冲任调畅，瘀滞得散，气血津液代谢输布正常，则诸症自除。全方辛温并用，攻补兼施，标本兼顾，祛邪而不伤正，对子宫腺肌病痛经具有很好的治疗效果。

本发明所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按重量份数取北细辛，肉桂，炙没药，乳香，延胡索，炙五灵脂，炙枳壳和甘草，加入总药材重量8～12倍量的水，煎煮提取1～3次，每次0.5～1.5小时，并合并煎煮液，浓缩，得浸膏；

(2)取步骤(1)制备得到的浸膏，加入乙醇使乙醇的体积浓度为70～80％时，静置沉淀，固液分离，取上清液，浓缩得到提取物；

(3)按重量份数取全蝎，加入全蝎药材重量4～8倍量体积浓度为50％～60％的乙醇回流提取1～3次，每次30～60min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物；

(4)将栓模洗净、擦干，将油溶性基质在40℃下加热使其成熔融状态，然后将步骤(2)得到的提取物和步骤(3)得到的全蝎提取物直接加入于已熔化的油溶性基质中，充分搅拌均匀，然后滴入润滑剂液体石蜡，继续不停搅拌，在油溶性基质待凝固时倾入栓模内至稍溢出模口，放冷，待完全凝固后，切去溢出部分，开启栓模，将栓剂推出即得。

作为优选实验，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，步骤(1)中加入总药材重量8倍量的水，煎煮提取2次，每次40分钟。

作为优选实验，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，步骤(1)中煎煮液的浓缩分两步，第一步减压浓缩至60℃时相对密度为1.10，静置、离心；第二步，将离心好的上清液浓缩至60℃时相对密度为1.20。

作为优选实验，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，步骤(2)中加入乙醇，使乙醇的体积浓度为70％。

作为优选实验，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，步骤(3)中，加入全蝎药材重量4倍量体积浓度为50％的乙醇回流提取3次，每次30min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物。

作为优选实验，以上所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，步骤(4)中，油溶性基质为可可豆脂基质，可可豆脂基质与提取物的重量比为3:2；液体石蜡与可可豆脂基质质量比为4％。

本发明所述的具有治疗痛经作用的栓剂在制备防治痛经药物中的应用。

本发明所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备工艺筛选试验：

一.提取工艺条件筛选

1.本发明中药组成的9味药材，对除全蝎外，其它八味中药材用水煎煮提取，以桂皮醛转移率、水提得率和正丁醇萃取得率为评价指标，采用正交试验法考察加水量、提取时间和提取次数等因素对提取效果的影响，优选提取工艺，并进行工艺验证。选用正交试验表L₉(3⁴)，见表1。表中A为加水量(倍)，B为煎煮时间(min)，C为煎煮次数(次)。

2含量测定

2.1色谱条件与系统适应性

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈—水(35：75)为流动相；检测波长290nm。理论板数按桂皮醛峰计算应不低于3000。

2.2对照品溶液的制备

取桂皮醛对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1ml含10ug的溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备

取本品粉末(过三号筛)约0.5g，称重，加甲醇25ml，超声10min，放置过夜。再超声10min，称重。用甲醇补重，摇匀，滤过，取续滤液1ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，即得。

2.4线性关系考察

吸取对照品25ul，加甲醇定容至25ml，配成浓度为1.0497mg/ml的储备液。从储备液中分别吸1，1.5，2，2.5，3，4ml至10ml容量瓶中，加甲醇定容，配成一系列浓度梯度的溶液进高效液相测峰面积，其线性回归方程结果如下：

A＝459.84*C-18.015其中A是峰面积，C是浓度(ug/ml)。R²＝0.9999，说明线性关系良好。

3.水提取工艺正交试验方法与结果

按照处方比例称取药材，按照正交试验设计方案进行提取，滤过，滤液合并，水浴浓缩后分别用适量正丁醇萃取，萃取2次，合并正丁醇液，水浴挥干成浸膏状，置恒重蒸发皿中冷却至室温后称重，并用HPLC测定桂皮醛的含量，换算成转移率，如下表2。

表2

表3方差分析结果

从表3中分析可知，3种因素对结果的影响的大小为：B>A>C。A、B因素的P值<0.05，因此对提取率有显著影响，C因素对提取率的影响很小。确定优选提取工艺为A₁B₁C₂，即加水量8倍、提取时间40分钟、提取2次。

4.浓缩工艺考察

从实验结果可知，减压浓缩较常压浓缩桂皮醛含量略高(表4)，且本工艺水煎煮液量大，浓缩时间相对较长，采用减压浓缩可以节约时间，提高生产效率，减少可能的未知有效成分被破坏损失，浓缩时宜采用多效节能浓缩器或减压浓缩罐减压浓缩。

经过优选实验，本发明煎煮液浓缩分两步，第一步减压浓缩至相对密度为1.10左右(60℃)，静置、离心。第二步，将离心好的清液浓缩至相对密度1.20左右(60℃)的浸膏，备用。

表4不同浓缩方法，得到桂皮醛峰面积

5.验证试验

按正交表优化最佳组合提取工艺后，需进一步对其进行验证，平行称取三份处方量药物，按A₁B₁C₂组合进行提取。提取液浓缩后，每份验证平行做两份水提得率、浸膏得率、测含量，取均值，由表5和表6结果显示，验证试验与正交结果较一致。表明此水提取工艺条件较稳定、可行。

表5验证试验结果(水提得率)

表6验证试验结果(正丁醇萃取得率)

6精制工艺考察

因水提液中所含杂质较多，需要纯化，本发明以醇沉试验作为纯化工艺进行考察。将药材按处方量称取，按正交试验的最优组合工艺进行提取，分成若干等份，每份浓缩成不同密度的浸膏，每份再分别醇沉至不同浓度的乙醇溶液，共九份，静置过夜，过滤，取上清，每份测浸膏得率及含量，详见下表7。

表7醇沉工艺试验结果

从表7中实验结果表明，当药液浓缩至密度为1.2的浸膏，且醇沉至80％醇浓度时，试验结果最好。

7.精制工艺的验证试验

取水提液适量，共3份。按上述优选的醇沉工艺进行验证试验，结果见表8。

表8精制工艺的验证试验

验证试验结果表明，桂皮醛转移率平均值为8.12％，表明优选的醇沉工艺稳定、可行。

8.回收乙醇工艺研究

为了降低生产成本和减少有效成分的损失，对水提醇沉液采用减压回收乙醇。将水提醇沉液置减压浓缩器中减压回收乙醇至尽，工艺条件为：温度65～70℃，真空度0.05～0.08MPa。

9.全蝎提取工艺考察

全蝎的主要有效成分系蝎毒蛋白，因此应该以蝎毒蛋白的含量作为提取工艺的评价指标，本发明采用紫外分光度法测定全蝎蛋白质类活性部位的含量，且样品中含有核酸，故参照文献用双波长测定其含量。具体方法如下。

9.1供试液的制备

将全蝎粉5g，用提取二次或三次，提取液纱布过滤，离心(3000转/min，10min，下同)，取上清液于60℃减压浓缩至1:1(浓缩液体积与全蝎粉重量的数值比)加入1:4(浓缩液:乙醇)的95％的乙醇(缓缓加入，加边搅拌)于10℃沉淀、立即离心，分取沉淀用蒸馏水洗涤、振摇、离心、反复3次，此上清液定容至50ml。

9.2测定方法

将全蝎蛋白定容于50ml的容量瓶中，取3ml在754紫外分光光度计上用蒸馏水作空白对照测出样品在波长280nm、260nm的吸光度A₂₈₀、A₂₆₀。由于样品中含有核酸等杂质(经预试已证明)。可按下列公式计算蛋白质的浓度：

蛋白质浓度C(mg/ml)＝1.55A₂₈₀–0.75A₂₆₀

由此计算出：全蝎蛋白的含量(mg)＝50*C

9.3全蝎醇提工艺的研究

对全蝎采用乙醇进行提取，以全蝎蛋白含量为评价指标，采用正交试验法考察乙醇浓度、加醇量和提取时间等因素对提取效果的影响，优选提取工艺，并进行工艺验证。因素水平及正交设计详见下表9。

表9

表10方差分析结果

以全蝎蛋白含量为考察指标，由表中极差R值大小显示各因素作用的主次为C>A>B，A因素以2水平为好，C因素以1水平为佳，B因素的三个水平影响虽相差甚微，但亦以1水平较好；由方差分析结果表明：A、C因素的影响均有非常显著意义(P<0.01)，故以A₂B₁C₁组合为佳，即最佳的工艺为每次用4倍量50％的乙醇回流提取30min，共提3次。

9.4验证试验

按正交表优化最佳组合提取工艺后，需进一步对其进行验证，平行称取三份处方量药物，按A₂B₁C₁组合进行验证试验，表11结果显示，验证试验与正交结果较一致，重现性好。表明此提取工艺条件稳定、可行。

表11验证实验结果

二、栓剂成型工艺研究

对栓剂辅料基质的要求主要有：①室温时应有适当的硬度，当塞入腔道时不变形，不碎裂，在体温下易软化、熔化或溶解；②不与主药起反应，不影响主药的含量测定；③对黏膜无刺激性，无毒性，无过敏性；④理化性质稳定，在贮藏过程中不易霉变，不影响生物利用度等；⑤具有润湿及乳化的性质，能混入较多的水。并且辅料基质选择关系到给药后起效快慢、强弱，因此成本发明通过大量实验筛选栓剂的成型工艺。主要包括辅料的选择、以及成型工艺条件筛选等内容。

1.辅料筛选

辅料对制剂成型具有重要的作用，直接影响制剂质量。选择合适的辅料可制出外观良好，质量稳定，释放性能好，病人容易接受的制剂。

1.1栓剂常用基质分为水溶性基质和油溶性基质。常用的油溶性基质有可可豆脂和不饱和脂肪酸甘油酯等；常用的水溶性基质有聚乙二醇类，甘油明胶，非离子型表面活性剂类(包括聚氧乙烯-40、泊洛沙姆)。本发明首先以脱模时间、外观成型性作为评价指标对可可豆脂、PEG400、PEG4000等常用基质进行单一辅料的筛选，然后进行混合辅料配比的优选。在保证成型性较好的前提下，尽量减少辅料的用量。

经筛选试验结果表明，采用可可豆脂作为基质能使得本发明各中药原料提取得到的提取物与其较好互融，其它基质如PEG4000作为基质时其与药物不能较好互融，难以成型。因此，本发明优选用可可豆脂熔融后与药物能良好融合，制得的栓剂成型性、硬度，稳定性均良好。

基质可可豆脂与中药原料提取物的最佳用量比筛选试验，如表12：

表12不同可可豆脂与中药原料提取物的用量比的成型性实

(-)：不能成型；(+)：可以成型

综合考虑栓剂的成型性以及药物所占比重，最终选取可可豆脂：中药原料提取物重量比(g:g)＝3:2作为最佳配比。

1.2润滑剂及其用量比例研究

本发明通过大量实验优选采用液体石蜡作为润滑剂，并通过筛选试验筛选液体石蜡占基质的重量比例，实验结果如表13。

表13液体石蜡占基质不同比例栓剂硬度情况

由表13结果可知，液体石蜡在4％、6％、8％比例下均可以很好地脱模，考虑栓剂的大小和剂量，本发明选用4％的液体石蜡作润滑剂。

1.3栓剂制剂工艺

本发明最终优选得到的栓剂制备工艺为：先将栓模洗净、擦干，将可可豆脂在40℃下加热使其成熔融状态，提取出来的药液直接加入于已熔化的油脂性基质中，充分搅拌均匀，加最后滴入液体石蜡，于低温下继续不停搅拌，于可可豆脂待凝固时倾入栓模内至稍溢出模口，放冷，待完全凝固后，切去溢出部分，开启模型，将栓剂推出即得。

有益效果：本发明提供的具有治疗痛经作用的栓剂和现有技术相比具有以下优点：

1、本发明提供的具有治疗痛经作用的栓剂，其中中药原料组方配比科学合理，尤其是各药味之间用量配比非常严谨科学。实验结果表明，本发明提供的中药组合物对子宫腺肌病，痛经疾病具有非常好的治疗效果，有效率高达90％以上，并且起效迅速，持久，不良反应低，安全性高。

2.本发明通过大量实验筛选具有治疗痛经作用的栓剂的制备工艺，本发明首先筛选了中药组合物各原料药的最佳具体提取工艺，提取得到的有效成分高，杂质少，活性强，不良反应低。并且本发明通过大量实验筛选了栓剂的处方组成，由于辅料影响药物的载药量，稳定性，释放药物的速度，本发明通过大量对比实验筛选出最佳的辅料及其成型工艺，制备得到的栓剂，载药量大，稳定性好，释放药物的速度快，起效迅速，且持久性好，能发挥很好的治疗疼经的功效。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。

实施例1

1.一种具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛3份，肉桂6份，醋炙没药10份，乳香10份，延胡索15份，醋炙五灵脂10份，全蝎10份，枳壳10份，炙甘草6份。

2.所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按重量份数取北细辛3份，肉桂6份，醋炙没药10份，乳香10份，延胡索15份，醋炙五灵脂10份，枳壳10份，炙甘草6份，加入总药材重量8倍量的水，煎煮提取2次，每次40分钟，并合并煎煮液，浓缩分两步：第一步减压浓缩至60℃时相对密度为1.10，静置、离心；第二步，将离心好的上清液浓缩至60℃时相对密度为1.20，得浸膏；

(2)取步骤(1)制备得到的浸膏，加入乙醇使乙醇的体积浓度为70％时，静置沉淀，固液分离，取上清液，浓缩得到提取物；

(3)按重量份数取全蝎全蝎10份，加入全蝎药材重量4倍量体积浓度为50％的乙醇回流提取3次，每次30min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物；

(4)将栓模洗净、擦干，将可可豆脂基质在40℃下加热使其成熔融状态，然后将步骤(2)得到的提取物和步骤(3)得到的全蝎提取物直接加入于已熔化的可可豆脂基质中，充分搅拌均匀，然后滴入4％重量的润滑剂液体石蜡，继续不停搅拌，在油溶性基质待凝固时倾入栓模内至稍溢出模口，放冷，待完全凝固后，切去溢出部分，开启栓模，将栓剂推出即得。实施例2

1.一种具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛6份，肉桂12份，醋炙没药20份，乳香20份，延胡索30份，醋炙五灵脂20份，全蝎20份，枳壳20份，炙甘草12份。

2.所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按重量份数取北细辛6份，肉桂12份，醋炙没药20份，乳香20份，延胡索30份，醋炙五灵脂20份，枳壳20份，炙甘草12份，加入总药材重量8倍量的水，煎煮提取2次，每次40分钟，并合并煎煮液，浓缩分两步：第一步减压浓缩至60℃时相对密度为1.10，静置、离心；第二步，将离心好的上清液浓缩至60℃时相对密度为1.20，得浸膏；

(2)取步骤(1)制备得到的浸膏，加入乙醇使乙醇的体积浓度为70％时，静置沉淀，固液分离，取上清液，浓缩得到提取物；

(3)按重量份数取全蝎全蝎20份，加入全蝎药材重量4倍量体积浓度为50％的乙醇回流提取3次，每次30min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物；

(4)将栓模洗净、擦干，将可可豆脂基质在40℃下加热使其成熔融状态，然后将步骤(2)得到的提取物和步骤(3)得到的全蝎提取物直接加入于已熔化的可可豆脂基质中，充分搅拌均匀，然后滴入4％重量的润滑剂液体石蜡，继续不停搅拌，在油溶性基质待凝固时倾入栓模内至稍溢出模口，放冷，待完全凝固后，切去溢出部分，开启栓模，将栓剂推出即得。实施例3

1.一种具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛3份，肉桂18份，醋炙没药30份，乳香30份，延胡索45份，醋炙五灵脂30份，全蝎30份，枳壳30份，炙甘草18份。

2.所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按重量份数取北细辛3份，肉桂18份，醋炙没药30份，乳香30份，延胡索45份，醋炙五灵脂30份，全蝎30份，炙甘草18份，加入总药材重量8倍量的水，煎煮提取2次，每次40分钟，并合并煎煮液，浓缩分两步：第一步减压浓缩至60℃时相对密度为1.10，静置、离心；第二步，将离心好的上清液浓缩至60℃时相对密度为1.20，得浸膏；

(2)取步骤(1)制备得到的浸膏，加入乙醇使乙醇的体积浓度为70％时，静置沉淀，固液分离，取上清液，浓缩得到提取物；

(3)按重量份数取全蝎全蝎30份，加入全蝎药材重量4倍量体积浓度为50％的乙醇回流提取3次，每次30min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物；

(4)将栓模洗净、擦干，将可可豆脂基质在40℃下加热使其成熔融状态，然后将步骤(2)得到的提取物和步骤(3)得到的全蝎提取物直接加入于已熔化的可可豆脂基质中，充分搅拌均匀，然后滴入4％重量的润滑剂液体石蜡，继续不停搅拌，在油溶性基质待凝固时倾入栓模内至稍溢出模口，放冷，待完全凝固后，切去溢出部分，开启栓模，将栓剂推出即得。

实施例4药理实验

(一)本发明提供的具有治疗痛经作用的栓剂对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

应用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验，观察本发明栓剂的抗炎作用。给小鼠腹腔内注射稀醋酸溶液，在H⁺的刺激下，腹腔内毛细血管通透性增高，血液内液体成分从血管内向腹腔渗出，当静脉内注射伊文思蓝，该染料可与血浆蛋白瞬间结合随液体渗入腹腔，测量腹腔内的染料量即可代表炎性渗出的多少，观察本发明栓剂能否抑制急性炎症早期的毛细血管通透性抗进而渗出。

1.实验材料与仪器：

1.1实验药物及试剂

药物：本发明实施例1制备得到的具有治疗痛经作用的栓剂；阿司匹林泡腾片：阿斯利康制药有限公司，批号：1411134；保妇康栓：海南碧凯药业有限公司，批号：20141009；冰醋酸(分析纯)：南京化学试剂有限公司，；伊文思蓝：上海化学试剂采购供应站进口分装。

1.2实验用动物

ICR小鼠，40只，由南通大学实验动物中心提供，合格证号：scxk(苏)2008-0004

1.3实验用饲料

全价营养颗粒饲料：由江苏省协同医药生物技术有限公司提供，

1.4实验条件

实验动物均分笼饲养，饲喂全价营养颗粒饲料，自由饮水，室温22±2℃，湿度55-65％，光照适度，通风洁净良好。

1.5实验仪器

LDZ5-2台式低速离心机：北京京力离心机有限公司；756pc紫外线分光光度仪：上海光谱仪器有限公司

1.6统计学处理

结果用表示，显著性比较采用SPSS 17.0统计软件包，采用单因素方差分析。

1.7药物配制

1.7.1 0.6％醋酸生理盐水溶液：准确吸取100％的冰醋酸0.3ml,溶于PH 7.0-7.2生理盐水50ml中。1.7.20.5％伊文思蓝生理盐水溶液：精确称取伊文思蓝0.5g，溶解于生理盐水中成100ml。

2实验方法

2.1实验动物分组

将40只小鼠随机分为4组，每组10只

空白组：等量生理盐水

阿司匹林组：300mg/kg，0.2ml/10g，15mg/ml

保妇康栓组：5g/kg，0.05g/10g

实施例1制备得到的栓剂组：5g/kg，0.05ml/10g，1g/ml

2.2实验方法

各组小鼠分别给予相应药物，持续9天。末次给药1小时后各鼠均静注0.5％伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g，随即腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，20分钟后脱颈椎处死，剪开腹部皮肤肌肉，用6ml生理盐水分三次洗涤腹腔，吸管洗出洗涤液、合并后加入生理盐水至10ml，3000rpm离心15min；取上清液于590nm比色测定OD值。

3.实验结果

3.1药物对小鼠体重的影响

表14药物对小鼠体重的影响

与空白组比较，“**”p＜0.01,“*”p＜0.05

由以上表14实验结果所示：各给药组小鼠体重与空白组小鼠相比，没有显著性差异。

3.2各组对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响

表15各组对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响(n＝10)

与空白组比较，“**”p＜0.01,“*”p＜0.05

由以上表15实验结果所示：空白组小鼠腹腔毛细血管通透性明显增高，给予相应的药物后，都有一定程度的降低，保妇康栓组、阿司匹林组和本发明提供的栓剂组，3组小鼠腹腔通透性均明显降低，与空白组相比，具有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)；表明本发明提供的栓剂对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的增高具有很好的降低作用。

(二)镇痛作用实验

应用小鼠热板镇痛法实验，观察本发明提供的栓剂的镇痛作用。

1.实验材料：

1.1实验药物及试剂

受试药物：本发明实施例1制备得到的栓剂；阿司匹林泡腾片：阿斯利康制药有限公司，批号：1411134；保妇康栓：海南碧凯药业有限公司，批号：20141009。

1.2实验用动物

ICR小鼠，40只，由南通大学实验动物中心提供，合格证号：scxk(苏)2008-0004

1.3实验用饲料

全价营养颗粒饲料：由江苏省协同医药生物技术有限公司提供。

1.4实验条件

实验动物均分笼饲养，饲喂全价营养颗粒饲料，自由饮水，室温22±2℃，湿度55-65％，光照适度，通风洁净良好。

1.5实验仪器

YLS-6B智能热板仪：济南益延科技发展有限公司

1.6统计学处理

结果用表示，显著性比较采用SPSS 17.0统计软件包，采用单因素方差分析。

2实验方法

2.1实验动物分组

将470只小鼠随机分为4组，每组10只

空白组：等量生理盐水

阿司匹林组：300mg/kg，0.2ml/10g,15mg/ml

保妇康栓组：5g/kg,0.05g/10g

本发明实施例1制备得到的栓剂组：5g/kg,0.05ml/10g,1g/ml

2.2实验方法

2.2.1动物筛选

热板仪调至55℃，将小鼠放入仪器热板上，30s内有舔后足反应者为合格小鼠，对逃避跳跃者和30s内不出现添后足者，弃之不用。

2.2.2测痛阈值

灌胃给予小鼠相应药物，测定末次给药后0.5，1，2，3h时的痛阈值。以小鼠舔后足反应作为痛阈指标。若小鼠在热板上60s仍无痛觉反应，即取出，按60s计。

3.实验结果

3.1药物对小鼠体重的影响

表16.药物对小鼠体重的影响

表16实验结果所示：各给药组小鼠体重增加明显，与空白组小鼠的体重相比，没有显著性差异。

3.2药物对小鼠热板镇痛作用的影响

表17药物对小鼠热板镇痛作用的影响(n＝10)

与空白组比较，“**”p＜0.01,“*”p＜0.05

由表17实验结果所示：各组小鼠给予相应的药物后，镇痛作用都有一定程度的增强，阿司匹林组、本发明提供的栓剂组小鼠镇痛作用明显增强，与空白组相比，具有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)；保妇康栓组小鼠给药15min和30min后镇痛作用明显(p＜0.01)。表明本发明提供的中药复方制成的栓剂具有很好的镇痛的功效。

实施例5临床试验

选取40例痛经病人，采用本发明实施例1制备得到的栓剂给药，结果显示总有效率达94.9％，表现出了非常好的治疗痛经的功效。

以上实施方式只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人了解本发明内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所做的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种具有治疗痛经作用的栓剂，其特征在于，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛 3～9份，肉桂 6～18份，醋炙没药 10～30份，乳香 10～30份，延胡索 15～45份，醋炙五灵脂 10～30份，全蝎 10～30份，枳壳 10～30份，炙甘草 6～18份。

2.根据权利要求1所述的具有治疗痛经作用的栓剂，其特征在于，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛 3～6份，肉桂 6～12份，醋炙没药 10～20份，乳香 10～20份，延胡索 15～30份，醋炙五灵脂 10～20份，全蝎 10～20份，枳壳 10～20份，炙甘草 6～12份。

3.根据权利要求2所述的具有治疗痛经作用的栓剂，它是由以下重量份数的原料药制成：

北细辛 3份，肉桂 6份，醋炙没药 10份，乳香 10份，延胡索 15份，醋炙五灵脂 10份，全蝎 10份，枳壳 10份，炙甘草 6份。

4.权利要求1至3任一项所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）按权利要求1至3任一项所述的重量份数取北细辛，肉桂，炙没药，乳香，延胡索，炙五灵脂，炙枳壳和甘草，加入总药材重量8～12倍量的水，煎煮提取1～3次，每次0.5～1.5小时，并合并煎煮液，浓缩，得浸膏；

（2）取步骤（1）制备得到的浸膏，加入乙醇使乙醇的体积浓度为70～80%时，静置沉淀，固液分离，取上清液，浓缩得到提取物；

（3）按权利要求1至3任一项所述的重量份数取全蝎，加入全蝎药材重量4～8倍量体积浓度为50%～60%的乙醇回流提取1~3次，每次30 ~60min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物；

（4）将栓模洗净、擦干，将油溶性基质在40℃下加热使其成熔融状态，然后将步骤（2）得到的提取物和步骤（3）得到的全蝎提取物直接加入于已熔化的油溶性基质中，充分搅拌均匀，然后滴入润滑剂液体石蜡，继续不停搅拌，在油溶性基质待凝固时倾入栓模内至稍溢出模口，放冷，待完全凝固后，切去溢出部分，开启栓模，将栓剂推出即得。

5.根据权利要求4所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中加入总药材重量8倍量的水，煎煮提取2次，每次40分钟。

6.根据权利要求4所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中煎煮液的浓缩分两步，第一步减压浓缩至60℃时相对密度为1.10，静置、离心；第二步，将离心好的上清液浓缩至60℃时相对密度为1.20。

7.根据权利要求4所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）中加入乙醇，使乙醇的体积浓度为70%。

8.根据权利要求4所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，加入全蝎药材重量4倍量体积浓度为50%的乙醇回流提取3次，每次30 min，合并乙醇提取液，减压浓缩得到全蝎提取物。

9.根据权利要求4所述的具有治疗痛经作用的栓剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，油溶性基质为可可豆脂基质，可可豆脂基质与提取物的重量比为3:2；液体石蜡与可可豆脂基质质量比为4%。

10.权利要求1至3任一项所述的具有治疗痛经作用的栓剂在制备防治痛经药物中的应用。