CN104862221A - 核酸扩增反应容器以及核酸扩增反应装置 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的核酸扩增反应容器以及核酸扩增反应装置,在使核酸扩增反应溶液在具有不同的温度区域的油中移动,由此以高速进行核酸扩增反应的方法中,能够更稳定地复制核酸。本发明涉及的核酸扩增反应容器具有:第一内壁、和与上述第一内壁对置地配置的第二内壁,上述第一内壁与上述第二内壁的距离为如下长度,即:在注入有核酸扩增反应液的情况下,上述核酸扩增反应液与上述第一内壁以及上述第二内壁的双方接触的长度。
Description
技术领域
本发明涉及核酸扩增反应容器以及核酸扩增反应装置。
背景技术
作为使核酸以高速扩增的方法,公知有如下的方法,即:向圆筒状的核酸扩增反应容器中投入油和少量的核酸扩增反应液,将该容器的一端维持为高温,将另一端维持为低温,使容器旋转,并交替地在以使其一端成为铅垂方向下方的方式使反应液位于高温的油中的状态、和以使另一端成为铅垂方向下方的方式使反应液位于低温的油中的状态之间进行切换,由此使核酸扩增反应液的温度以高速产生热循环(例如,参照专利文献1)。
专利文献1:日本特开2012-115208号公报
在专利文献1所记载的核酸扩增反应装置中使用圆筒状的反应容器,由于核酸扩增反应液的液滴的直径比反应容器的直径小,因此核酸扩增反应液在与反应容器的长度方向垂直的面中存在二维的自由度。因此,核酸扩增反应液的液滴相对于重力作用的方向倾斜地落下、或垂直地落下,由此核酸扩增反应液的液滴落下的速度产生差别,因此不容易严格地管理核酸扩增反应液的加热量。若核酸扩增反应液的加热量的管理不充分,则存在核酸的扩增量产生差别的可能性。
发明内容
本发明是鉴于上述情况而完成的,其课题在于使核酸稳定地扩增。
本发明的一个实施方式的核酸扩增反应容器,具有:第一内壁;和第二内壁,其与所述第一内壁对置地配置,所述第一内壁与所述第二内壁的距离为如下长度,即:在注入有核酸扩增反应液的情况下,所述核酸扩增反应液与所述第一内壁以及所述第二内壁的双方接触的长度。优选为所述第一内壁以及所述第二内壁是平面。在所述核酸扩增反应液为1.0~7.0μl时,所述距离可以为0.2~1.4mm。所述核酸扩增反应容器的底部的中央部可以比周边部向外侧突出。
本发明的其他实施方式的核酸扩增反应装置,包括:安装部,其能够供本发明涉及的技术方案1所述的核酸扩增反应容器安装;第一加热部,在所述安装部安装有所述核酸扩增反应容器的情况下,该第一加热部对所述核酸扩增反应容器的第一区域进行加热;以及驱动机构,其使所述第一区域、所述核酸扩增反应容器的第二区域、以及所述第一加热部的配置在第一配置与第二配置之间切换,所述第一配置是指所述第一区域在重力作用的方向上处于比所述第二区域靠下方的配置,所述第二配置是指所述第二区域在重力作用的方向上处于比所述第一区域靠下方的配置。也可以包括第二加热部,在所述安装部安装有所述核酸扩增反应容器的情况下,该第二加热部对所述第二区域进行加热,所述第一加热部将所述第一区域加热至第一温度,所述第二加热部将所述第二区域加热至与所述第一温度不同的第二温度。
根据本发明,能够提供在通过使核酸扩增反应溶液在具有不同的温度区域的油中移动由此以高速进行核酸扩增反应的方法中,更稳定地复制核酸的核酸扩增反应容器以及核酸扩增反应装置。
附图说明
图1A、图1B是实施方式的核酸扩增反应装置的立体图,图1A表示关闭盖后的状态,图1B表示打开盖后的状态。
图2是实施方式的核酸扩增反应装置的主体的分解立体图。
图3A、图3B是实施方式的核酸扩增反应容器的剖视图,图3A是相对于核酸扩增反应容器100的对置的第一内壁113以及第二内壁114平行的方向的剖视图,图3B是相对于核酸扩增反应容器100的第一内壁113以及第二内壁114正交的方向的剖视图。
图4A、图4B是示意地表示实施方式的核酸扩增反应装置的主体的沿图1A的A-A线的剖面的剖视图,图4A表示第一配置,图4B表示第二配置。
图5是表示使用了实施方式的核酸扩增反应装置的处理顺序的流程图。
图6A、图6B是变形例的核酸扩增反应装置的立体图,图6A表示关闭盖后的状态,图6B表示打开盖后的状态。
图7是示意地表示变形例的核酸扩增反应装置的主体的沿图6A的B-B线的剖面的剖视图。
图8是表示核酸扩增反应容器内的液滴的投影直径的大小的图。
图9是表示本发明的核酸扩增反应容器内的液滴的投影直径相对于圆筒状的核酸扩增反应容器内的液滴的投影直径之比的图。
具体实施方式
以下,使用附图按照以下顺序对本发明的优选的实施方式进行说明。另外,以下说明的实施方式并未不恰当地限定权利要求书所记载的本发明的内容。另外,以下说明的全部结构并不一定是本发明必需的构成要件。
1.实施方式
1-1.实施方式的核酸扩增反应装置的结构
图1是实施方式的核酸扩增反应装置1的立体图。图1A表示关闭核酸扩增反应装置1的盖50后的状态,图1B表示打开核酸扩增反应装置1的盖50后的状态,并且表示在安装部11安装有核酸扩增反应容器100的状态。图2是实施方式的核酸扩增反应装置1的主体10的分解立体图。图4A是示意地表示实施方式的核酸扩增反应装置1的主体10的沿图1A的A-A线的剖面的剖视图。
如图1A所示,实施方式的核酸扩增反应装置1包括主体10以及驱动机构20。如图2所示,主体10包括:安装部11、第一加热部12(相当于加热部)以及第二加热部13。在第一加热部12与第二加热部13之间设置有隔离件14。在本实施方式的主体10中,第一加热部12配置于底板17侧,第二加热部13配置于盖50侧。在本实施方式的主体10中,第一加热部12、第二加热部13以及隔离件14被固定于凸缘16、底板17以及固定板19。
安装部11是安装后述的核酸扩增反应容器100的构造。如图1B以及图2所示,本实施方式的安装部11是供核酸扩增反应容器100插入、安装的插槽构造,并且成为将核酸扩增反应容器100插入至贯通第一加热部12(加热部)的第一加热块12b、隔离件14以及第二加热部13的第二加热块13b的孔的构造。安装部11的数量可以为多个,在图1B的例子中,在主体10设置有八个安装部11。
本实施方式的核酸扩增反应装置1优选包括将核酸扩增反应容器100相对于第一加热部12以及第二加热部13保持于规定的位置的构造。由此,能够利用第一加热部12以及第二加热部13对核酸扩增反应容器100的规定的区域进行加热。更具体而言,如图4所示,利用第一加热部12能够对构成后述的核酸扩增反应容器100的流路110的第一区域111进行加热,利用第二加热部13能够对构成后述的核酸扩增反应容器100的流路110的第二区域112进行加热。在本实施方式中,规定核酸扩增反应容器100的位置的构造是底板17,如图4A所示,将核酸扩增反应容器100插入至与底板17接触的位置,从而能够将核酸扩增反应容器100相对于第一加热部12以及第二加热部13保持于规定的位置。
在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11的情况下,第一加热部12将后述的核酸扩增反应容器100的第一区域111加热至第一温度。在图4A所示的例子中,第一加热部12在主体10中,配置于对核酸扩增反应容器100的第一区域111进行加热的位置。
第一加热部12也可以包括:产生热的机构、和将产生的热传递至核酸扩增反应容器100的部件。在图2表示的例子中,第一加热部12包括第一加热器12a以及第一加热块12b。在本实施方式中,第一加热器12a是筒式加热器,且通过导线15与未图示的外部电源连接。第一加热器12a插入至第一加热块12b,且通过第一加热器12a发热而对第一加热块12b进行加热。第一加热块12b是将从第一加热器12a产生的热传递至核酸扩增反应容器100的部件。在本实施方式中是铝制的块。
由于筒式加热器容易进行温度控制,所以通过使第一加热器12a形成为筒式加热器,从而能够容易地使第一加热部12的温度稳定。因此,能够实现更准确的热循环。由于铝热传导率较高,所以通过将第一加热块12b形成为铝制,从而能够高效地加热核酸扩增反应容器100。另外,由于在第一加热块12b难以产生加热不均匀,所以能够实现高精度的热循环。另外,由于容易加工,所以能够高精度地成型第一加热块12b,从而能够提高加热的精度。因此能够实现更准确的热循环。
在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11的情况下,优选第一加热部12与核酸扩增反应容器100接触。由此,在利用第一加热部12对核酸扩增反应容器100进行加热的情况下,能够将第一加热部12的热稳定地传递至核酸扩增反应容器100,因此能够使核酸扩增反应容器100的温度稳定。如本实施方式那样,在安装部11形成为第一加热部12的一部分的情况下,优选安装部11与核酸扩增反应容器100接触。由此,能够将第一加热部12的热稳定地传递至核酸扩增反应容器100,因此能够高效地加热核酸扩增反应容器100。
在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11的情况下,第二加热部13将核酸扩增反应容器100的第二区域112加热至与第一温度不同的第二温度。在图4A所示的例子中,在主体10中,第二加热部13配置于对核酸扩增反应容器100的第二区域112进行加热的位置。如图2所示,第二加热部13包括第二加热器13b以及第二加热块13b。第二加热部13除了加热的核酸扩增反应容器100的区域以及加热的温度与第一加热部12不同以外,与第一加热部12相同。
在本实施方式中,第一加热部12以及第二加热部13的温度由未图示的温度传感器以及后述的控制部控制。优选将第一加热部12以及第二加热部13的温度设定为:将核酸扩增反应容器100加热至预期的温度。在本实施方式中,通过将第一加热部12控制为第一温度,将第二加热部13控制为第二温度,从而能够将核酸扩增反应容器100的第一区域111加热至第一温度,将第二区域112加热至第二温度。本实施方式的温度传感器是热电偶。
驱动机构20是对安装部11、第一加热部12以及第二加热部13进行驱动的机构。在本实施方式中,驱动机构20包括未图示的马达以及驱动轴,驱动轴与主体10的凸缘16连接。本实施方式的驱动轴相对于安装部11的长度方向垂直地设置,若使马达动作,则将驱动轴作为旋转轴而使主体10旋转。
本实施方式的核酸扩增反应装置1包括未图示的控制部。控制部对后述的第一温度、第二温度、第一时间、第二时间以及热循环的循环次数中的至少一个进行控制。在控制部控制第一时间或者第二时间的情况下,控制部对驱动机构20的动作进行控制,由此控制将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13保持为规定的配置的时间。控制部可以按照每个控制的项目而设置不同的机构,也可以对所有项目一并进行控制。
本实施方式的核酸扩增反应装置1的控制部是电子控制,且控制全部上述项目。本实施方式的控制部包括:未图示的CPU等处理器、以及ROM(Read Only Memory)、RAM(Random Access Memory)等存储装置。在存储装置中存储有用于控制上述各项目的各种程序、数据等。另外,存储装置具有对各种处理的处理中数据、处理结果等暂时进行存储的动作区域。
如图2以及图4A的例子所示,本实施方式的主体10在第一加热部12与第二加热部13之间设置有隔离件14。本实施方式的隔离件14是保持第一加热部12或者第二加热部13的部件。通过设置隔离件14,能够更准确地规定第一加热部12与第二加热部13之间的距离。即,能够更准确地规定第一加热部12以及第二加热部13相对于后述的核酸扩增反应容器100的第一区域111以及第二区域112的位置。
隔离件14的材质能够根据需要适当地选择,但优选隔热材料。由此,能够减少第一加热部12以及第二加热部13的热相互带来的影响,因此第一加热部12以及第二加热部13的温度控制变得容易。在隔离件14是隔热材料的情况下,在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11的情况下,优选以包围核酸扩增反应容器100的方式在第一加热部12与第二加热部13之间的区域配置隔离件14。由此,能够抑制从第一加热部12与第二加热部13之间的区域,向核酸扩增反应容器100散热,因此核酸扩增反应容器100的温度更加稳定。在本实施方式中,隔离件14是隔热材料,在图4A的例子中,安装部11贯通隔离件14。由此,在利用第一加热部12以及第二加热部13,对核酸扩增反应容器100进行加热的情况下,核酸扩增反应容器100的热难以逸出,因此能够使第一区域111以及第二区域112的温度更稳定。
本实施方式的主体10包括固定板19。固定板19是对安装部11、第一加热部12以及第二加热部13进行保持的部件。在图1B以及图2表示的例子中,将两张固定板19嵌合于凸缘16,从而将第一加热部12、第二加热部13以及底板17固定。借助固定板19使主体10的构造更稳固,因此主体10变得难以破损。
本实施方式的核酸扩增反应装置1包括盖50。在图1A以及图4A的例子中,安装部11由盖50覆盖。通过盖50覆盖安装部11,从而在利用第一加热部12加热的情况下,能够抑制从主体10朝外部散热,因此能够使主体10内的温度稳定。盖50也可以通过固定部51而固定于主体10。在本实施方式中,固定部51是磁铁。如图1B以及图2的例子所示,在主体10的与盖50接触的面设置有磁铁。在图1B以及图2中虽未图示,但在盖50上在供主体10的磁铁接触的位置也设置有磁铁,若用盖50覆盖安装部11,则盖50因磁力而被固定于主体10。由此,能够防止在由驱动机构20驱动主体10的情况下,盖50脱落或移动的情况。因此能够防止因盖50脱落而使核酸扩增反应装置1内的温度变化的情况,因而能够在后述的反应液140中实施更准确的热循环。
主体10优选为高气密性的构造。若主体10是高气密性的构造,则主体10内部的空气难以向主体10的外部逸出,从而主体10内的温度更稳定。在本实施方式中,如图2所示,由两个凸缘16、底板17、两个固定板19以及盖50,将主体10内部的空间封闭。
固定板19、底板17、盖50、凸缘16优选使用隔热材料形成。由此,能够进一步抑制从主体10朝外部散热,因此能够使主体10内的温度更稳定。
1-2.使用了实施方式的核酸扩增反应装置的热循环处理
图3是实施方式的核酸扩增反应容器100的剖视图。图4A以及图4B是示意地表示实施方式的核酸扩增反应装置1的沿图1A的A-A线的剖面的剖视图。图4A以及图4B表示在核酸扩增反应装置1安装有核酸扩增反应容器100的状态。图4A表示第一配置,图4B表示第二配置。图5是表示使用了实施方式的核酸扩增反应装置1的热循环处理的顺序的流程图。以下,首先,对实施方式的核酸扩增反应容器100进行说明,接下来,对使用了核酸扩增反应容器100的情况下的实施方式的核酸扩增反应装置1的热循环处理进行说明。
如图3的例子所示,实施方式的核酸扩增反应容器100包括流路110以及密封部120。在流路110填充有反应液140、和比反应液140比重小并且不与反应液140混合的液体(以下,称为“液体”)130,并由密封部120密封。
图3A以及图3B是实施方式的核酸扩增反应容器100的剖视图,图3A是相对于核酸扩增反应容器100的对置的第一内壁113以及第二内壁114平行的方向的剖视图,图3B是相对于核酸扩增反应容器100的第一内壁113以及第二内壁114正交的方向(以下,称为“厚度方向”)的剖视图。核酸扩增反应容器100的形状为扁平状,沿中心轴方向(图3的上下方向)形成有流路110,在核酸扩增反应装置的起动中,该流路110用于供核酸扩增反应液移动。核酸扩增反应容器100由密封部120密封。为了使进入到容器内部的核酸扩增反应液140的液滴容易位于底部170中底部的中央,核酸扩增反应容器100的底部170的中央形成为朝向外部突出的形状。第一内壁113以及第二内壁114是平面。第一内壁113与第二内壁114的距离(图3中示出的宽度a)为:注入到核酸扩增反应容器100的核酸扩增反应液140的一个液滴同时与第一内壁113以及第二内壁114的双方接触的长度。例如在注入1~7μl核酸扩增反应液140的情况下,第一内壁113与第二内壁114的距离优选为0.2~1.4mm,更优选为0.2~0.8mm。另外,为了不妨碍核酸扩增反应液140朝液滴的流路110的长度方向移动,对置的侧面的内壁亦即第三内壁115以及第四内壁116的距离(图3中示出的宽度c)为:核酸扩增反应液140的一个液滴同时不与第三内壁115以及第四内壁116的双方接触的长度,优选为从核酸扩增反应容器100的厚度方向观察的液滴直径的两倍以上,更优选为三倍以上。
若使用本实施方式的核酸扩增反应容器100,则在核酸扩增反应液140沿核酸扩增反应容器100的长度方向移动时,核酸扩增反应液140总是与核酸扩增反应容器100的对置的内壁的双方接触,因此限制核酸扩增反应液140的与内壁垂直的方向的移动,从而抑制核酸扩增反应液移动的速度的偏差,能够稳定地使核酸扩增。
另外,本实施方式的核酸扩增反应容器100,核酸扩增反应液140的落下位置在核酸扩增反应容器100的厚度方向上稳定,因此如下述变形例1所示,容易从水平方向进行核酸扩增反应液140的荧光测量。以往是从核酸扩增反应容器的下方进行荧光测量,但存在在核酸扩增反应容器的底部沉积有遮光的杂质的情况,因此从水平方向进行荧光测量,能够实现更准确的测量。
优选使核酸扩增反应液140的液滴的注入量为1.5μl以上,将第一内壁113以及第二内壁114的距离(图3中示出的宽度a)设为0.6mm以下。在该条件下,如实施例所示,核酸扩增反应液140被核酸扩增反应容器100的第一内壁113以及第二内壁114夹持,核酸扩增反应液140的液滴在厚度方向被压缩,其大小在相对于厚度方向正交的方向上扩大。由此,在从核酸扩增反应容器的厚度方向观察的情况下液滴的直径b,大于由于没有第一内壁113以及第二内壁114的压缩效果而为球形的情况下液滴的直径。来自加热部的热从核酸扩增反应容器100的壁面以较宽的面积且不经由油而能够直接向核酸扩增反应液140传递,因此热传递效率较高。
核酸扩增反应容器100的第一区域111是利用第一加热部12加热至第一温度的流路110的一部分的区域。第二区域112是利用第二加热部13加热至第二温度的与第一区域111不同的流路110的一部分的区域。在本实施方式的核酸扩增反应容器100中,第一区域111是包括流路110的长度方向的一方的端部的区域,第二区域112是包括流路110的长度方向的另一方的端部的区域。在图4A以及图4B所示的例子中,包括流路110的密封部120侧的端部的用虚线围起的区域是第二区域112,包括从密封部120远离的一侧的端部的用虚线围起的区域是第一区域111。
在流路110中填充有液体130和反应液140。液体130不与反应液140混合,即为不混合的性质,因此如图3所示,反应液140在液体130中保持为液滴的状态。反应液140的比重比液体130大,因此位于流路110的重力方向的最下部的区域。作为液体130,例如能够使用二甲基硅油或者石蜡油。反应液140是包括反应所需的成分的液体。在反应为PCR的情况下,包括通过PCR扩增的DNA(标的核酸)、用于扩增DNA所需的DNA聚合酶、以及引物等。例如,在使用油作为液体130进行PCR的情况下,反应液140优选为包括上述成分的水溶液。
以下,参照图4A、图4B以及图5,对使用了实施方式的核酸扩增反应装置1的热循环处理进行说明。在图4A以及图4B中,箭头g的方向(图的下方)是重力作用的方向。在本实施方式中,作为热循环处理的例子,对进行往复PCR(两个阶段温度PCR)的情况进行说明。另外,以下说明的各工序表示热循环处理的一个例子。可以根据需要更换工序的顺序、连续或并行地进行两个以上工序、或者增加工序等。
往复PCR是反复对反应液实施高温和低温的两个阶段的温度处理,由此使反应液中的核酸扩增的方法。在高温的处理中,双链DNA的解离在低温的处理中进行退火(引物与单链DNA结合的反应)以及伸长反应(以引物为起点而形成DNA的互补链的反应)。
一般情况下,往复PCR中的高温是80℃~100℃之间的温度,低温是50℃~70℃之间的温度。一般进行规定时间的各温度的处理,保持为高温的时间比保持为低温的时间短。例如,高温可以为1秒~10秒左右,低温可以为10秒~60秒左右,也可以根据反应的条件而成为比上述时间长的时间。
另外,因使用的试剂的种类、量不同,而适当的时间、温度以及循环次数(反复进行高温和低温的次数)也不同,因此优选考虑试剂的种类、反应液140的量,并在决定了适当的协定的基础上进行反应。
首先,将本实施方式的核酸扩增反应容器100安装于安装部11(步骤S101)。在本实施方式中,在向填充有液体130的流路110导入反应液140之后,将由密封部120密封的核酸扩增反应容器100安装于安装部11。反应液140的导入能够使用微管、喷射式分注装置等进行。在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11的状态下,第一加热部12在包括第一区域111的位置与核酸扩增反应容器100接触,第二加热部13在包括第二区域112的位置与核酸扩增反应容器100接触。在本实施方式中,如图4A所示,将核酸扩增反应容器100安装为与底板17接触,从而能够将核酸扩增反应容器100相对于第一加热部12以及第二加热部13而保持于规定的位置。
在本实施方式中,步骤S101的安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置是第一配置。如图4A所示,第一配置是指第一区域111处于比第二区域112靠铅垂方向下方的配置,在本实施方式中,是使核酸扩增反应容器100的第一区域111位于重力作用的方向的流路110的最下部的配置。因此,在安装部11、第一加热部12以及第二加热部13处于规定的配置的情况下,第一区域111是位于重力作用的方向的流路110的最下部的流路110的一部分的区域。在第一配置中,第一区域111位于重力作用的方向的流路110的最下部,因此比液体130比重大的反应液140位于第一区域111。在本实施方式中,在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11之后,利用盖50覆盖安装部11,使核酸扩增反应装置1动作。在本实施方式中,若使核酸扩增反应装置1动作,则步骤S102以及步骤S103开始。
在步骤S102中,利用第一加热部12以及第二加热部13,对核酸扩增反应容器100进行加热。第一加热部12与第二加热部13将核酸扩增反应容器100的不同区域加热至不同温度。即,第一加热部12将第一区域111加热至第一温度,第二加热部13将第二区域112加热至第二温度。由此在流路110的第一区域111与第二区域112之间,形成有在第一温度与第二温度之间温度逐渐变化的温度梯度。在本实施方式中,第一温度是在热循环处理中适于成为目标的反应的温度中相对较高的温度,第二温度是在热循环处理中适于成为目标的反应的温度中相对较低的温度。因此在本实施方式的步骤S102中,形成有从第一区域111朝向第二区域112温度变低的温度梯度。本实施方式的热循环处理是往复PCR,因此优选第一温度是适于双链DNA的解离的温度,第二温度是适于退火以及伸长反应的温度。
步骤S102的安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置是第一配置,因此若在步骤S102中对核酸扩增反应容器100进行加热,则将反应液140加热至第一温度。因此在步骤S102中,对反应液140进行第一温度的反应。
在步骤S103中,在第一配置中,对是否经过了第一时间进行判定。在本实施方式中,通过未图示的控制部进行判定。第一时间是将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13保持于第一配置的时间。在本实施方式中,在步骤S101中安装之后接着进行步骤S103的情况下,即,在第一次进行步骤S103的情况下,判定从使核酸扩增反应装置1动作之后的时间是否到达第一时间。在第一配置中,将反应液140加热至第一温度,因此优选第一时间成为在成为目标的反应中使反应液140在第一温度反应的时间。在本实施方式中,优选成为双链DNA的解离所需的时间。
在步骤S103中,在判定为经过了第一时间的情况下(是),进入步骤S104。在判定为未经过第一时间的情况下(否),重复步骤S103。
在步骤S104中,通过驱动机构20驱动主体10,将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置从第一配置向第二配置切换。第二配置是第二区域112处于比第一区域111靠铅垂方向下方的配置,在本实施方式中,是使第二区域112在重力作用的方向上位于流路110的最下部的配置。换言之,在安装部11、第一加热部12以及第二加热部13处于与第一配置不同的规定的配置的情况下,第二区域112是位于重力作用的方向的流路110的最下部的区域。
在本实施方式的步骤S104中,将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置从图4A的状态向图4B的状态切换。在本实施方式的核酸扩增反应热装置1中,通过控制部的控制,驱动机构20驱动主体10旋转。若将驱动轴作为旋转轴,通过马达驱动凸缘16旋转,则固定于凸缘16的安装部11、第一加热部12以及第二加热部13旋转。由于驱动轴是与安装部11的长度方向垂直的方向的轴,所以若通过马达的动作使驱动轴旋转,则安装部11、第一加热部12以及第二加热部13旋转。在图4A以及图4B所示的例子中,使主体10旋转180°。由此,将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置从第一配置向第二配置切换。
在步骤S104中,第一区域111与第二区域112的重力作用的方向的位置关系与第一配置相反,因此反应液140因重力的作用而从第一区域111向第二区域112移动。若在安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置到达第二配置的情况下,控制部使驱动机构20的动作停止,则将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置保持于第二配置。在安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置到达第二配置后,开始步骤S105。
在步骤S105中,判定在第二配置中是否经过了第二时间。第二时间是在第二配置保持安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的时间。在本实施方式中,第二区域112在步骤S102中被加热至第二温度,因此在本实施方式的步骤S105中,对从安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置到达第二配置之后的时间是否到达第二时间进行判定。在第二配置中,将反应液140保持于第二区域112,因此在将主体10保持于第二配置的时间,将反应液140加热至第二温度。因此,优选第二时间成为在成为目标的反应中将反应液140加热至第二温度的时间。在本实施方式中,优选成为退火与伸长反应所需的时间。
在步骤S105中,在判定为经过了第二时间的情况下(是),进入步骤S106。在判定为未经过第二时间的情况下(否),重复步骤S105。
在步骤S106中,判定热循环的次数是否达到规定的循环次数。具体而言,对从步骤S103至步骤S105的顺序是否结束了规定次数进行判定。在本实施方式中,步骤S103以及步骤S105结束的次数是以判定为“是”的次数来判定。若从步骤S103至步骤S105进行一次,则对反应液140实施一次循环的热循环,因此能够使从步骤S103至步骤S105进行的次数成为热循环的循环次数。因此,通过步骤S106,能够对是否实施了成为目标的反应所需的次数的热循环进行判定。
在步骤S106中,在判定为热循环进行了预定的循环次数(是)的情况下,结束处理(结束)。在判定为热循环未进行预定的循环次数(否)的情况下,过渡至步骤S107。
在步骤S107中,将安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置从第二配置朝第一配置切换。通过驱动机构20驱动主体10,从而能够使安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置形成为第一配置。在安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置到达了第一配置后,开始步骤S103。
在步骤S107之后进行步骤S103的情况下,即,在第二次以后的步骤S103中,对安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置到达了第一配置之后的时间是否到达了第一时间进行判定。
通过驱动机构20使安装部11、第一加热部12以及第二加热部13旋转的方向优选为与步骤S104的旋转、以及步骤S107的旋转相反的方向。由此,能够消除因旋转使导线15等配线产生的扭曲,因此能够抑制配线劣化。优选旋转的方向在每次通过驱动机构20进行一次动作时都反转。由此,与多次连续进行朝相同方向的旋转的情况比较,能够降低配线扭曲的程度。
2.变形例
以下,基于实施方式对变形例进行说明。图6是变形例的核酸扩增反应装置2的立体图。图6A表示关闭盖50后的状态,图6B表示打开盖50后的状态。图7是示意地表示变形例的核酸扩增反应装置2的主体10a的沿图6A的B-B线的剖面的剖视图。以下的变形例只要是相互不矛盾的结构则能够进行任意的组合,图6A、图6B以及图7所示的核酸扩增反应装置2,是将变形例1、4、16、17的结构组合的例子。参照图6~图7对该变形例进行说明。以下,对与实施方式不同的结构进行详述,对与实施方式相同的结构标注相同的附图标记,并省略说明。
(变形例1)
在实施方式中,示出核酸扩增反应装置1不包括检测装置的例子,但如图6A以及图6B所示,本变形例的核酸扩增反应装置2也可以包括经由核酸扩增反应用容器的第二区域112的侧壁而用于测量核酸量的荧光检测器40。由此,例如能够在伴随着实时PCR那样的荧光检测的用途中使用核酸扩增反应装置2。荧光检测器40的数量只要能够使检测不出现问题地进行则可以任意设置。在本变形例中,使一个荧光检测器40沿着滑动件22移动来进行荧光检测。为了进行荧光检测,在主体10a的第二加热部13侧的侧面部设置有孔,并形成有测量窗18(参照图6、图7)。荧光检测器40在核酸扩增反应液位于第二区域112中时,通过测量窗18向核酸扩增反应用容器的第二区域112的侧壁照射激励光,对放射的荧光进行测量,从而能够对核酸扩增反应液140中的核酸扩增量进行测量。
在本变形例中,在图6A、图6B以及图7所示的核酸扩增反应装置2中,在盖50侧设置有第一加热部12,且在从盖50远离的一侧设置有第二加热部13。即,第一加热部12以及第二加热部13、与主体10所包括的其他部件之间的位置关系与核酸扩增反应装置1不同。除了位置关系不同以外,第一加热部12以及第二加热部13的功能与第一实施方式相同。在本变形例中,如图7所示,在第二加热部13的侧面设置有测量窗18。由此,在低温侧(进行退火以及伸长反应的温度)进行荧光测量的实时PCR中能够进行适当的荧光测量。
(变形例2)
在实施方式中,第一温度以及第二温度从热循环处理的开始至结束形成为恒定,但也可以使第一温度以及第二温度中的至少一方在处理的中途变更。第一温度以及第二温度能够通过控制部的控制进行变更。通过切换第一加热部12以及安装部11的配置而使反应液140移动,从而能够将反应液140加热至变更后的温度。因此不增加加热部的数量、不使装置的构造复杂,也能够进行例如逆向转印PCR那样的需要两种以上温度组合的反应。
(变形例3)
在实施方式中,示出安装部11是插槽构造的例子,但安装部11是能够保持核酸扩增反应容器100的构造即可。例如,也可以采用将核酸扩增反应容器100嵌入到与核酸扩增反应容器100的形状匹配的凹部的构造,或夹持保持核酸扩增反应容器100的构造。
(变形例4)
在实施方式中,规定核酸扩增反应容器100的位置的构造是底板17,但规定位置的构造只要是能够将核酸扩增反应容器100保持于预期的位置的构造即可。规定位置的构造可以是设置于核酸扩增反应装置1的构造,可以是设置于核酸扩增反应容器100的构造,也可以是双方的组合。例如,能够采用螺钉、插入式棒、在核酸扩增反应容器100设置突出部的构造、以及安装部11与核酸扩增反应容器100配合的构造。在使用螺钉、棒的情况下,也可以通过变更螺钉的长度、拧入的长度、插入棒的位置,而能够对与热循环的反应条件、核酸扩增反应容器100的大小等对应地保持的位置进行调节。
(变形例5)
在实施方式中,示出第一加热部12与第二加热部13均为筒式加热器的例子,但第一加热部12只要能够将第一区域111加热至第一温度即可。第二加热部13只要能够将第二区域112加热至第二温度即可。例如,作为第一加热部12以及第二加热部13,能够使用石墨加热器、片状加热器、IH(电磁感应加热)、珀耳帖元件、加热液体以及加热气体。另外,第一加热部12与第二加热部13也可以采用不同的加热机构。
(变形例6)
在实施方式中,示出利用第一加热部12和第二加热部13对核酸扩增反应容器100进行加热的例子,但也可以取代第二加热部13而设置冷却第二区域112的冷却部。作为冷却部,例如能够使用珀耳帖元件。由此,例如,在通过来自核酸扩增反应容器100的第一区域111的热而使第二区域112的温度难以降低的情况下,也能够在流路110形成预期的温度梯度。另外,例如,能够对反应液140实施使加热与冷却反复的热循环。
(变形例7)
在实施方式中,示出第一加热块12b以及第二加热块13b的材质为铝的例子,但可以考虑热传导率、保温性能、加工难易度等条件来选择加热块的材质。例如可以使用铜合金,也可以将多个材质组合。另外,第一加热块12b与第二加热块13b也可以是不同材质。
(变形例8)
如实施方式所例示那样,在形成安装部11作为第一加热部12的一部分的情况下,也可以设置使安装部11紧贴于核酸扩增反应容器100的机构。紧贴的机构只要能够使核酸扩增反应容器100的至少一部分紧贴于安装部11即可。例如,可以通过设置于主体10、盖50的弹簧将核酸扩增反应容器100向安装部11的一侧的壁面推压。由此,能够将第一加热部12的热更稳定地传递至核酸扩增反应容器100,因此能够使核酸扩增反应容器100的温度更稳定。
(变形例9)
在实施方式中,示出以使第一加热部12以及第二加热部13的温度实际上与加热核酸扩增反应容器100的温度相等的方式进行控制的例子,但第一加热部12以及第二加热部13的温度控制不限定于实施方式。也可以将第一加热部12以及第二加热部13的温度控制为:将核酸扩增反应容器100的第一区域111以及第二区域112加热至预期的温度。例如,通过考虑核酸扩增反应容器100的材质、大小,能够更准确地将第一区域111以及第二区域112的温度加热至预期的温度。
(变形例10)
在实施方式中,示出驱动机构20是马达的例子,但驱动机构20只要能够驱动安装部11、第一加热部12以及第二加热部13即可。在驱动机构20是使安装部11、第一加热部12以及第二加热部13旋转的机构的情况下,优选驱动机构20能够控制为不因离心力而使液体130的温度梯度紊乱的程度的旋转速度。另外,为了消除配线产生的扭曲,优选能够使旋转的方向反转的机构。作为这种机构,例如能够采用手柄、发条等。
(变形例11)
在实施方式中,示出安装部11是第一加热部12的一部分的例子,但只要在使驱动机构20动作的情况下两者的位置关系不变化,安装部11也可以是与第一加热部12不同的部件。在安装部11是与第一加热部12不同的部件的情况下,优选两者直接或者经由其他部件固定。另外,安装部11与第一加热部12可以通过相同的机构驱动,也可以通过单独的机构驱动,但优选以将两者的位置关系保持为恒定的方式进行动作。由此,在使驱动机构20动作的情况下能够将安装部11与第一加热部12的位置关系维持为恒定,因此能够将核酸扩增反应容器100的规定的区域加热至规定的温度。此外,在驱动安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的机构是单独的机构的情况下,能够将两者组合成为驱动机构20。
(变形例12)
在实施方式中,示出温度传感器是热电偶的例子,但例如也可以使用测温电阻器、热敏电阻。
(变形例13)
在实施方式中,示出固定部51是磁铁的例子,但只要固定部51能够将盖50与主体10固定即可。例如,也可以采用铰链、搭扣。
(变形例14)
在实施方式中,驱动轴的方向与安装部11的长度方向垂直,但驱动轴的方向只要能够使安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置在第一配置与第二配置之间切换便任意。在驱动机构20是驱动安装部11、第一加热部12以及第二加热部13旋转的机构的情况下,使相对于安装部11的长度方向不平行直线的成为旋转轴,从而能够切换安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置。
(变形例15)
在实施方式中,示出控制部是电子控制器的例子,但控制第一时间或者第二时间的控制部(时间控制部)只要能够控制第一时间或者第二时间即可。即,能够控制驱动机构20的动作或者停止的时机即可。另外,控制热循环的循环次数的控制部(循环次数控制部)能够控制循环次数即可。作为时间控制部以及循环次数控制部,例如能够采用物理机构、电子控制机构、以及它们的组合。
(变形例16)
如图6A以及图6B所例示,核酸扩增反应装置也可以包括设定部25。设定部25是UI(用户界面),其是设定热循环的条件的设备。通过操作设定部25,能够设定第一温度、第二温度、第一时间、第二时间、以及热循环的循环次数中的至少一个。设定部25与控制部机械式或者电子式连动,将通过设定部25的设定反映于控制部的控制。由此,能够变更反应的条件,因此能够对反应液140实施预期的热循环。设定部25可以能够单独地设定上述的任一个项目,也可以例如若从预先注册的多个反应条件中选择一个,则自动地设定需要的项目。图6的例子中设定部25是按钮式的,通过按项目按压按钮,能够设定反应条件。
(变形例17)
如图6A以及图6B所例示,核酸扩增反应装置也可以包括显示部24。显示部24是显示装置,显示与核酸扩增反应装置相关的各种信息。显示部24也可以显示设定部25所设定的条件、热循环处理中的实际的时间、温度。例如,可以显示在进行设定的情况下输入的条件,也可以显示热循环处理中通过温度传感器测量的温度、在第一配置或者第二配置中经过的时间、以及实施了热循环的循环次数等。另外,也可以在结束了热循环处理的情况下、装置产生任何异常的情况下,显示该内容。并且,也可以通过声音进行通知。进行通过显示、声音的通知,从而装置的使用者能够容易地掌握热循环处理的进行、结束。
(变形例18)
在实施方式中,液体130为比反应液140比重小的液体,但液体130只要不与反应液140混合并且是与反应液140比重不同的液体即可。例如,也可以采用不与反应液140混合并且比反应液140比重大的液体。在液体130比反应液140比重大的情况下,反应液140位于重力方向的流路110的最上部。
(变形例19)
在实施方式中,使步骤S104的旋转的方向与步骤S107的旋转的方向成为相反的方向,但也可以在多次进行了朝相同方向的旋转后,再朝相反方向旋转相同的次数。由此,能够消除配线产生的扭曲,因此与不进行朝相反方向的旋转的情况比较,能够抑制配线的劣化。
(变形例20)
实施方式的核酸扩增反应装置1包括第一加热部12以及第二加热部13,但也可以不具有第二加热部13。即,也可以加热部仅为第一加热部12。由此,能够减少使用的部件的数量,因此能够降低制造成本。
在本变形例中,通过第一加热部12对核酸扩增反应容器100的第一区域111进行加热,由此在随着距离远离第一区域111而温度变低的核酸扩增反应容器100形成有温度梯度。第二区域112是与第一区域111不同的区域,因此维持为比第一区域111低的第二温度。在本变形例中,第二温度通过例如核酸扩增反应容器100的设计、液体130的性质、第一加热部12的温度的设定等控制。
在本变形例中,通过驱动机构20将安装部11以及第一加热部12的配置在第一配置与第二配置之间切换,从而能够使反应液140在第一区域111与第二区域112之间移动。将第一区域111与第二区域112维持为不同的温度,因此能够对反应液140实施热循环。
在没有第二加热部13的情况下,隔离件14保持第一加热部12。由此,能够更准确地规定主体10的第一加热部12的位置,因此能够更可靠地加热第一区域111。在隔离件14是隔热材料的情况下,以包围通过第一加热部12加热的区域以外的核酸扩增反应容器100的区域的方式配置隔离件14,从而能够使第一区域111以及第二区域112的温度更稳定。
本变形例的核酸扩增反应装置也可以具有将主体10的温度保持为恒定的机构。由此,核酸扩增反应容器100的第二区域112的温度更稳定,因此能够对反应液140实施更准确的热循环。作为对主体10进行保温的机构例如能够使用恒温槽。
(变形例21)
在实施方式中,示出核酸扩增反应装置1包括盖50的例子,但也可以不具有盖50。由此,能够减少使用的部件的数量,因此能够降低制造成本。
(变形例22)
在实施方式中,示出核酸扩增反应装置1包括隔离件14的例子,但也可以不具有隔离件14。由此,能够减少使用的部件的数量,因此能够降低制造成本。
(变形例23)
在实施方式中,示出核酸扩增反应装置1包括底板17的例子,但如图7所示,也可以不具有底板17。由此,能够减少使用的部件的数量,因此能够降低制造成本。
(变形例24)
在实施方式中,示出核酸扩增反应装置1包括固定板19的例子,但也可以不具有固定板19。由此,能够减少使用的部件的数量,因此能够降低制造成本。
(变形例25)
在实施方式中,示出隔离件14与固定板19是单独的部件的例子,但如图7所示,可以将隔离件14与固定板19形成为一体。另外,也可以将底板17与隔离件14、或者底板17与固定板19形成为一体。
(变形例26)
隔离件14以及固定板19也可以透明。由此,在将透明的核酸扩增反应容器100用于热循环处理的情况下,能够从装置的外部观察反应液140移动的情况。因此,通过目测能够确认是否适当地进行热循环处理。因此,此处的“透明”的程度只要在将这些部件用于核酸扩增反应装置1而进行热循环处理的情况下,能够辨识反应液140的移动的程度即可。
(变形例27)
为了观察核酸扩增反应装置1的内部,可以使隔离件14透明并不具有固定板19,可以使固定板19透明并不具有隔离件14,也可以不具有隔离件14与固定板19双方。存在于观察者与观察对象的核酸扩增反应容器100之间的部件越少,光因物体而产生的折射的影响越少,因此使内部的观察变容易。另外,部件越少越能够降低制造成本。
(变形例28)
为了观察核酸扩增反应装置1的内部,也可以如图6以及图7所例示那样,在主体10a设置观察窗23。观察窗23例如也可以是形成于隔离件14或者固定板19的孔、狭缝。在图7的例子中,观察窗23是设置于与固定板19形成为一体的透明的隔离件14的凹部。通过设置观察窗23,能够使存在于观察者与观察对象的核酸扩增反应容器100之间的部件的厚度变小,因此使内部的观察变容易。
(变形例29)
在实施方式中,示出在主体10的底板17侧配置有第一加热部12,在盖50侧配置有第二加热部13的例子,但也可以如图7所示,在盖50侧配置有第一加热部12。在将第一加热部12配置于盖50侧的情况下,在实施方式的步骤S101中安装了核酸扩增反应容器100的情况下的安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置是第二配置。即,是第二区域112位于重力作用的方向的流路110的最下部的配置。因此,在将本变形例的核酸扩增反应装置2用于实施方式的热循环处理的情况下,将核酸扩增反应容器100安装于安装部11后,进行朝第一配置的切换。具体而言,在从步骤S101过渡至步骤S102以及步骤S103前,进行步骤S107的处理。
(变形例30)
在实施方式中,示出通过第一加热部12以及第二加热部13加热核酸扩增反应容器100的工序(步骤S102)、与进行是否经过了第一时间的判定的工序(步骤S103)在将核酸扩增反应容器100安装于安装部11后(步骤S101)开始的例子,但开始步骤S102的时机不限定于实施方式。只要在步骤S103中计时开始的时刻之前将第一区域111加热第一温度,步骤S102便可以在任意的时机开始。进行步骤S102的时机考虑使用的核酸扩增反应容器100的大小、材料、第一加热块12b的加热所需要的时间等来决定。例如,可以是在步骤S101之前、与步骤S101同时、以及在步骤S101之后步骤S103之前的任一个。
(变形例31)
在实施方式中,示出通过控制部控制第一温度、第二温度、第一时间、第二时间以及热循环的循环次数、驱动机构20的动作的例子,但使用者也可以控制这些项目中的至少一个。在使用者控制第一温度或者第二温度的情况下,也可以由显示部24显示例如通过温度传感器测量的温度,使用者操作设定部25而调节温度。在使用者控制热循环的循环次数的情况下,在到达了规定次数的情况下使用者使核酸扩增反应装置1停止。循环次数的计数可以由使用者进行,也可以核酸扩增反应装置1进行计数而将循环次数显示于显示部24。
在使用者控制第一时间或者第二时间的情况下,使用者对是否达到规定的时间进行判断,在核酸扩增反应装置2切换安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置。即,使用者进行图5的步骤S103和步骤S105、以及步骤S104和步骤S107的至少一部分。时间可以使用不与核酸扩增反应装置2连动的计时器测量,也可以在核酸扩增反应装置2的显示部24显示经过了的时间。配置的切换可以通过操作设定部25(UI)来进行,也可以对驱动机构20采用手柄并通过手动来进行。
(变形例32)
在实施方式中,示出通过驱动机构20的旋转切换安装部11、第一加热部12以及第二加热部13的配置的情况下的旋转角度是180°的例子,旋转角度只要是第一区域111与第二区域112的在重力方向的上下的位置关系变化的角度即可。例如,若旋转角度不足180°,则反应液140的移动速度变慢。因此,通过调节旋转角度,能够调节反应液140在第一温度与第二温度之间移动的时间。即,能够调节反应液140的温度在第一温度与第二温度之间变化的时间。
实施例
表示本发明的核酸扩增反应容器的第一内壁与第二内壁的距离以及注入的核酸扩增反应液的液量的适宜条件。
其中,在估计注入有核酸扩增反应液的情况下、在该核酸扩增反应容器的厚度方向观察的核酸扩增反应液的液滴的直径时,可以考虑核酸扩增反应容器内的液滴的形状为圆柱形状,其中,液滴与第一内壁以及第二内壁接触的部分成为圆状的底面,核酸扩增反应容器的宽度(第一内壁与第二内壁的间隔)成为高度。而且,将该底面的直径看作核酸扩增反应液的液滴的直径。另外,向比较例的圆筒状的核酸扩增反应容器注入核酸扩增反应液的情况下的液滴的形状可以考虑为球状。而且,将其直径看作核酸扩增反应液的液滴的直径。图8示出本实施例与比较例的结果。图9示出了求出本实施例相对于比较例之比的结果。
如图8以及图9所示,可知向第一内壁与第二内壁的距离为0.2mm~0.8mm的核酸扩增反应容器注入1.0μl~7.0μl的核酸扩增反应液的情况与向圆筒状的核酸扩增反应容器注入液滴的情况相比,液滴的直径较大。
本发明不限定于上述的实施方式,能够进一步进行各种变形。例如,本发明包括与实施方式所说明的结构实质上相同的结构(例如,功能、方法以及结果相同的结构、或者目的以及效果相同的结构)。另外本发明包括置换了不是实施方式所说明的结构的本质的部分的结构。另外本发明包括能够起到与实施方式所说明的结构相同的作用效果的结构或者能够实现相同的目的的结构。另外本发明包括对实施方式所说明的结构附加了公知技术的结构。
附图标记说明:1、2...核酸扩增反应装置;10、10a...主体;11...安装部;12...第一加热部(加热部);12a...第一加热器;12b...第一加热块;13...第二加热部;13a...第二加热器;13b...第二加热块;14...隔离件;15...导线;16...凸缘;17...底板;18...测量窗;19...固定板;20...驱动机构;22...滑动件;23...观察窗;24...显示部;25...设定部;40...荧光检测器;50...盖;51...固定部;100、100a...核酸扩增反应容器;110...流路;111...第一区域;112...第二区域;113...第一内壁;114...第二内壁;115...第三内壁;116...第四内壁;117...底部;120...密封部;130...液体;140...反应液。
Claims (6)
1.一种核酸扩增反应容器,其特征在于,具有:
第一内壁;和
第二内壁,其与所述第一内壁对置地配置,
所述第一内壁与所述第二内壁的距离为如下长度,即:在注入有核酸扩增反应液的情况下,所述核酸扩增反应液与所述第一内壁以及所述第二内壁的双方接触的长度。
2.根据权利要求1所述的核酸扩增反应容器,其特征在于,
所述第一内壁以及所述第二内壁是平面。
3.根据权利要求1或2所述的核酸扩增反应容器,其特征在于,
在所述核酸扩增反应液为1.0~7.0μl时,所述距离为0.2~1.4mm。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的核酸扩增反应容器,其特征在于,
所述核酸扩增反应容器的底部的中央部比周边部向外侧突出。
5.一种核酸扩增反应装置,其特征在于,包括:
安装部,其能够供权利要求1所述的核酸扩增反应容器安装;
第一加热部,在所述安装部安装有所述核酸扩增反应容器的情况下,该第一加热部对所述核酸扩增反应容器的第一区域进行加热;以及
驱动机构,其使所述第一区域、所述核酸扩增反应容器的第二区域、以及所述第一加热部的配置在第一配置与第二配置之间切换,
所述第一配置是指所述第一区域在重力作用的方向上处于比所述第二区域靠下方的配置,
所述第二配置是指所述第二区域在重力作用的方向上处于比所述第一区域靠下方的配置。
6.根据权利要求5所述的核酸扩增反应装置,其特征在于,
包括第二加热部,在所述安装部安装有所述核酸扩增反应容器的情况下,该第二加热部对所述第二区域进行加热,
所述第一加热部将所述第一区域加热至第一温度,
所述第二加热部将所述第二区域加热至与所述第一温度不同的第二温度。
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