CN104855282A - 一种石斛培育新方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种石斛培育新方法，包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，本发明属于石斛的组织块繁殖技术，通过石斛的胚体、芽幼嫩茎段进行大规模培养，通过培养条件以及培养基的优化，可以实现石斛的工业化生产，可以有效的推动我国石斛植物资源的开发和利用，同时将产生良好的经济效益和生态效益。
Description
技术领域
本发明涉及石斛的培养方法，特别是涉及一种石斛培育新方法。
背景技术
石斛，又名万丈须、吊兰、林兰、金钗华等。茎直立，肉质状肥厚，稍扁的圆柱形，长10-60厘米，粗达1.3厘米。药用植物，性味甘淡微咸，寒，归胃、肾，肺经。益胃生津，滋阴清热。用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明。石斛花姿优雅，玲珑可爱，花色鲜艳，气味芳香，被喻为“四大观赏洋花”之一。石斛喜在温暖、潮湿、半阴半阳的环境中生长，以年降雨量1000毫米以上、空气湿度大于80％、1月平均气温高于8℃的亚热带深山老林中生长为佳，对土肥要求不甚严格，野生多在疏松且厚的树皮或树干上生长，有的也生长于石缝中。
发明内容
本发明提供了一种石斛培育新方法，包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养。
一种石斛培育新方法，其特征在于，所述培养方法包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，每种培养的方法如下：
(1)胚培养：取人工授粉的石斛果实，用体积分数为70-75％的酒精表面消毒25-30s，再用质量分数为0.1％的升汞消毒8-10min，无菌水冲洗4-6次后在无菌条件下把果实切成小方块，之后接种到胚体培养基中，每瓶3-5块；
(2)茎尖培养：取石斛当年萌发的嫩芽尖，用质量分数为10-12％的次氯酸钠消毒10-15min，之后用无菌水冲洗4-6次，之后接入茎尖培养基中培养30-35d，待长出白色颗粒状愈伤组织后再培养18-20d，形成不定芽后，将愈伤 组织和不定芽切割开，在上述培养基中继续继代培养，之后将不定芽移到生根培养基中进行生根培养，30-35d发育成完整植株；
(3)幼嫩茎段培养：剪取石斛嫩茎段，灭菌后切成2-3cm的切段，每段必须有一个茎节，将其接种到芽增值培养基中，培养30-50d后长出新芽，将新芽切下，接入上述培养基，培养30-35d生成丛生芽，切割后转入无激素的MS培养基中进行壮苗培养，40-50d后可发育成完整株。
优选的，所述步骤(1)中胚体培养基为N6培养基，附加0.2＝0.5mg/L NAA和质量分数为2-5％的蔗糖。
优选的，所述步骤(1)中培养温度控制在25-28度，光照强度为1600-2000lx。
优选的，所述步骤(2)中茎尖培养基为MS培养基，其中加入0.2-0.3mg/L的NAA和0.5-0.7mg/L的6-BA。
优选的，所述步骤(3)中芽增值培养基为MS培养基，其中加入0.1-0.5mg/L的NAA和0.5-2mg/L的6-BA。
优选的，所述步骤(3)中芽增值培养基中需要加入5％的生长调节剂，所述调节剂为0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT组成。
有益效果：本发明提供了一种石斛培育新方法，包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，本发明属于石斛的组织块繁殖技术，通过石斛的胚体、芽幼嫩茎段进行大规模培养，通过培养条件以及培养基的优化，可以实现石斛的工业化生产，可以有效的推动我国石斛植物资源的开发和利用，同时将产生良好的经济效益和生态效益。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
实施例1：
一种石斛培育新方法，其特征在于，所述培养方法包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，每种培养的方法如下：
(1)胚培养：取人工授粉的石斛果实，用体积分数为70％的酒精表面消毒25s，再用质量分数为0.1％的升汞消毒8min，无菌水冲洗4次后在无菌条件下把果实切成小方块，之后接种到胚体培养基中，每瓶3块；
(2)茎尖培养：取石斛当年萌发的嫩芽尖，用质量分数为10％的次氯酸钠消毒10min，之后用无菌水冲洗4次，之后接入茎尖培养基中培养30d，待长出白色颗粒状愈伤组织后再培养18d，形成不定芽后，将愈伤组织和不定芽切割开，在上述培养基中继续继代培养，之后将不定芽移到生根培养基中进行生根培养，30d发育成完整植株；
(3)幼嫩茎段培养：剪取石斛嫩茎段，灭菌后切成2cm的切段，每段必须有一个茎节，将其接种到芽增值培养基中，培养30d后长出新芽，将新芽切下，接入上述培养基，培养30d生成丛生芽，切割后转入无激素的MS培养基中进行壮苗培养，40d后可发育成完整株。
其中，所述步骤(1)中胚体培养基为N6培养基，附加0.2mg/L NAA和质量分数为2％的蔗糖，所述步骤(1)中培养温度控制在25度，光照强度为1600lx，所述步骤(2)中茎尖培养基为MS培养基，其中加入0.2mg/L的NAA和0.5mg/L的6-BA，所述步骤(3)中芽增值培养基为MS培养基，其中加入0.1mg/L的NAA和0.5-2mg/L的6-BA，所述步骤(3)中芽增值培养基中需要加入5％的生长调节剂，所述调节剂为0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT组成。
实施例2：
一种石斛培育新方法，其特征在于，所述培养方法包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，每种培养的方法如下：
(1)胚培养：取人工授粉的石斛果实，用体积分数为72％的酒精表面消毒28s，再用质量分数为0.1％的升汞消毒9min，无菌水冲洗5次后在无菌条件下把果实切成小方块，之后接种到胚体培养基中，每瓶4块；
(2)茎尖培养：取石斛当年萌发的嫩芽尖，用质量分数为11％的次氯酸钠消毒12min，之后用无菌水冲5次，之后接入茎尖培养基中培养32d，待长出白色颗粒状愈伤组织后再培养19d，形成不定芽后，将愈伤组织和不定芽切割开，在上述培养基中继续继代培养，之后将不定芽移到生根培养基中进行生根培养，32d发育成完整植株；
(3)幼嫩茎段培养：剪取石斛嫩茎段，灭菌后切成2cm的切段，每段必须有一个茎节，将其接种到芽增值培养基中，培养40d后长出新芽，将新芽切下，接入上述培养基，培养32d生成丛生芽，切割后转入无激素的MS培养基中进行壮苗培养，45d后可发育成完整株。
其中，所述步骤(1)中胚体培养基为N6培养基，附加0.3mg/L NAA和质量分数为3％的蔗糖，所述步骤(1)中培养温度控制在27度，光照强度为1800lx，所述步骤(2)中茎尖培养基为MS培养基，其中加入0.2mg/L的NAA和0.6mg/L的6-BA，所述步骤(3)中芽增值培养基为MS培养基，其中加入0.3mg/L的NAA和1mg/L的6-BA，所述步骤(3)中芽增值培养基中需要加入5％的生长调节剂，所述调节剂为0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT组成。
实施例3：
一种石斛培育新方法，其特征在于，所述培养方法包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，每种培养的方法如下：
(1)胚培养：取人工授粉的石斛果实，用体积分数为75％的酒精表面消毒30s，再用质量分数为0.1％的升汞消毒10min，无菌水冲洗6次后在无菌条件下把果实切成小方块，之后接种到胚体培养基中，每瓶5块；
(2)茎尖培养：取石斛当年萌发的嫩芽尖，用质量分数为12％的次氯酸钠 消毒15min，之后用无菌水冲洗6次，之后接入茎尖培养基中培养35d，待长出白色颗粒状愈伤组织后再培养20d，形成不定芽后，将愈伤组织和不定芽切割开，在上述培养基中继续继代培养，之后将不定芽移到生根培养基中进行生根培养，35d发育成完整植株；
(3)幼嫩茎段培养：剪取石斛嫩茎段，灭菌后切成3cm的切段，每段必须有一个茎节，将其接种到芽增值培养基中，培养50d后长出新芽，将新芽切下，接入上述培养基，培养35d生成丛生芽，切割后转入无激素的MS培养基中进行壮苗培养，50d后可发育成完整株。
其中，所述步骤(1)中胚体培养基为N6培养基，附加0.5mg/L NAA和质量分数为5％的蔗糖，所述步骤(1)中培养温度控制在28度，光照强度为2000lx，所述步骤(2)中茎尖培养基为MS培养基，其中加入0.3mg/L的NAA和0.7mg/L的6-BA，所述步骤(3)中芽增值培养基为MS培养基，其中加入0.5mg/L的NAA和2mg/L的6-BA，所述步骤(3)中芽增值培养基中需要加入5％的生长调节剂，所述调节剂为0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的ZT组成。
根据上述表格数据可知，采用本发明培养的石斛和现有的技术参数比较，水溶浸出物含量高，石斛碱和毛兰素含量较高，从而药用价值高。
本发明提供了一种石斛培育新方法，包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，本发明属于石斛的组织块繁殖技术，通过石斛的胚体、芽幼嫩茎段进行大 规模培养，通过培养条件以及培养基的优化，可以实现石斛的工业化生产，可以有效的推动我国石斛植物资源的开发和利用，同时将产生良好的经济效益和生态效益。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (6)
1.一种石斛培育新方法，其特征在于，所述培养方法包括胚培养、茎尖培养和幼嫩茎段培养，每种培养的方法如下：
（1）胚培养：取人工授粉的石斛果实，用体积分数为70-75%的酒精表面消毒25-30s，再用质量分数为0.1%的升汞消毒8-10min，无菌水冲洗4-6次后在无菌条件下把果实切成小方块，之后接种到胚体培养基中，每瓶3-5块；
（2）茎尖培养：取石斛当年萌发的嫩芽尖，用质量分数为10-12%的次氯酸钠消毒10-15min，之后用无菌水冲洗4-6次，之后接入茎尖培养基中培养30-35d，待长出白色颗粒状愈伤组织后再培养18-20d，形成不定芽后，将愈伤组织和不定芽切割开，在上述培养基中继续继代培养，之后将不定芽移到生根培养基中进行生根培养，30-35d发育成完整植株；
（3）幼嫩茎段培养：剪取石斛嫩茎段，灭菌后切成2-3cm的切段，每段必须有一个茎节，将其接种到芽增值培养基中，培养30-50d后长出新芽，将新芽切下，接入上述培养基，培养30-35d生成丛生芽，切割后转入无激素的MS培养基中进行壮苗培养，40-50d后可发育成完整株。
2.根据权利要求1所述的石斛培育新方法，其特征在于，所述步骤（1）中胚体培养基为N6培养基，附加0.2-0.5mg/L NAA和质量分数为2-5%的蔗糖。
3. 根据权利要求1所述的石斛培育新方法，其特征在于，所述步骤（1）中培养温度控制在25-28度，光照强度为1600-2000lx。
4. 根据权利要求1所述的石斛培育新方法，其特征在于，所述步骤（2）中茎尖培养基为MS培养基，其中加入0.2-0.3mg/L的NAA和0.5-0.7mg/L的6-BA。
5. 根据权利要求1所述的石斛培育新方法，其特征在于，所述步骤（3）中芽增值培养基为MS培养基，其中加入0.1-0.5mg/L的NAA和0.5-2mg/L的6-BA。
6. 根据权利要求1所述的石斛培育新方法，其特征在于，所述步骤（3）中芽增值培养基中需要加入5%的生长调节剂，所述调节剂为0.1mg/L的2,4-D和1mg/L的 ZT组成。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1608424A (zh) * | 2004-11-24 | 2005-04-27 | 上海增靓生物科技有限公司 | 铁皮石斛的人工大面积栽培方法 |
| CN102173949A (zh) * | 2011-02-23 | 2011-09-07 | 南京市蔬菜科学研究所 | 一种草菇栽培基质及其循环栽培草菇方法 |
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