CN104826122A - 绿原酸及其衍生物的脂质修饰物及其制备和纯化方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种绿原酸及其衍生物的脂质修饰物及其制备和纯化方法，所述脂质修饰物包括绿原酸及其衍生物和磷酸甘油酯。制备时采用非质子溶剂将二者在一定温度下恒温磁力搅拌回流一定时间，所得反应液干燥后即得粗品；纯化时将上述制备得到的粗品进行复溶并过滤后取滤液干燥即得。本发明所制备绿原酸及其衍生物脂质修饰物的复合率高，且能够显著提高绿原酸及其衍生物的脂溶性，便于后续制剂的加工成型，可以此为中间体制备成脂质体、钠米粒、聚合物胶束或树枝状聚合物等钠米给药系统以及微乳、自微乳等微米级给药系统，从而增强绿原酸及其衍生物在体内的吸收，提高制剂中药物的生物利用度。

Description

绿原酸及其衍生物的脂质修饰物及其制备和纯化方法

技术领域

本发明涉及一种绿原酸及其衍生物的脂质修饰物及其制备和纯化方法，属于医药技术领域。

背景技术

绿原酸(chlorogenic acid，ChA)，又名咖啡鞣酸，是由咖啡酸(caffeic acid，CA)与奎尼酸(鸡钠酸，quinic acid，QA)缩合而成的酯，属多酚类化合物，具有广泛的生物学活性。其来源主要为忍冬科植物金银花、忍冬、红腺忍冬、山银花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或带初开的花，杜仲科植物杜仲的叶，蔷薇科植物山楂的果实，千屈菜科植物千屈菜花，无患子科植物坡柳，水龙骨科植物欧亚水龙骨根茎，马鞭草科植物假败酱根，十字花科植物卷心菜茎叶，蓼科植物扁蓄全草以及茜草科植物蓬子菜全草等。

绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、抗诱变、抗过敏，增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化作用，清除自由基和维持机体细胞正常的结构和功能、防止和延缓肿瘤突变和衰老等现象的发生、兴奋中枢神经系统和对心血管的保护作用等。鉴于以上多方面的作用，普遍把绿原酸含量的高低作为衡量金银花质量的指标。现代科学对绿原酸生物活性的研究也已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。

绿原酸在化学结构上属于极性有机酸，极性大，水溶性强，其与钠、钾、钙等金属离子形成的盐也具有较大的极性和较好的水溶性，也就使得绿原酸及其盐的膜透过性差，导致给药时生物利用度低，加之其在胃肠道中易被各种消化酶分解，更限制了口服制剂的开发。本发明中所涉及的绿原酸及其衍生物即包括绿原酸及其与钠、钾、钙形成的盐。

磷酸甘油酯是一类含磷的脂质类物质，俗称磷脂，是动植物细胞膜、核膜和类脂膜的基本成分。它不是单一的物质，主要是由为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油等成分组成。我们通常所说的大豆磷脂就是一种混合磷脂，主要由磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇等组成；而卵磷脂的主要成分是磷脂酰胆碱和不饱和脂肪酸；其主要成分为磷脂酰乙醇胺。

磷脂具有极性基团磷酸酯基(亲水头部)和非极性脂肪酸链(疏水尾部)而表现双亲性。但由于带有两条较长的脂肪链，亲脂性大于亲水性；当磷脂的极性部分与药物分子通过电荷作用形成脂质修饰物，又称为磷脂复合物。其形成机理是磷脂中磷原子上羟基中的氧原子有较强的得电子倾向，而磷脂酰胆碱基团中氮原子有较强的失电子倾向，因此在一定条件下可与一定结构的药物复合而形成复合物。复合后其电荷被中和，两者极性均降低，被包裹的药物分子与磷脂脂肪链间的范德华力增强；此外，由于药物分子与磷脂发生作用后，彼此被固定，抑制了分子间及分子内键的自由转动；同时，药物分子插入磷脂分子中，使得磷脂的两条长脂肪链间的有序性降低。因此，可自由转动的两条长脂肪链将被固定的磷脂极性端及药物包裹起来形成一个具有亲脂性表面的微小球囊状结构。有利于增强药物分子的亲脂性，增强与细胞膜的亲和力，促进药物吸收，降低药物不良反应，增加药物在体内作用时的生物利用度。

经科技文献及专利检索，尚未发现利用磷脂对绿原酸及其盐进行结构修饰的报道。本发明即是在上述背景技术下开始的研究，目的是希望通过磷脂对绿原酸及其盐进行脂质修饰，从而获得一种脂质修饰物，以克服其膜透过性差，给药时生物利用度低的局限性，同时改善了绿原酸及其盐的溶解性能，便于后续制剂的开发和加工，尤其能够解决其在胃肠道中由于易被各种消化酶分解，限制口服制剂的开发等方面的问题。

发明内容

本发明针对绿原酸及其衍生物由于良好的极性，膜透过性差，给药时生物利用度低，且在胃肠道中由于易被各种消化酶分解，限制口服制剂的开发等方面的问题，制备一种绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，即磷脂复合物，以改善药物的亲脂性，增强其与体内细胞的亲和力，增加药物作用时的生物利用度，并且为后续制剂的加工成型提供更易操作的中间体。

本发明的绿原酸及其衍生物脂质修饰物，包括绿原酸及其衍生物和磷酸甘油酯，其中，绿原酸及其衍生物与磷酸甘油酯的重量比为1∶0.5～25。其中，所述绿原酸及其衍生物与磷酸甘油酯的质量比优选为1∶1～15，进一步优选为1∶3～10。其中，绿原酸及其衍生物为绿原酸、绿原酸钠盐、绿原酸钾盐和绿原酸钙盐中的一种或一种以上任意比例的混合物。其中，磷酸甘油脂为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油中的一种或一种以上任意比例的混合物。

所述绿原酸及其衍生物的脂质修饰物的制备和纯化方法，包括如下步骤：

(1)绿原酸及其衍生物脂质修饰物的制备：

a、取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量0.5～25倍的脂质；

b、加入适量溶剂，所用溶剂的用量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度保持在一定浓度范围内；

c、于适宜温度条件下恒温磁力搅拌回流一定时间得反应液；

d、将步骤c所述反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；

(2)绿原酸及其衍生物脂质修饰物的纯化：

a、向上述步骤(1)制备得到的绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品加入复溶剂，使其充分分散得分散液；

b、将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

在上述制备和纯化过程中，对反应条件及反应所用试剂进行了进一步的优选和限定，具体如下：

其中，绿原酸及其衍生物脂质修饰物的制备过程中，加入的反应溶剂的用量为能够使绿原酸及其衍生物的药物浓度在6～48mg/ml的范围内。

其中，绿原酸及其衍生物脂质修饰物制备过程中所用溶剂选自氯仿、二氯甲烷、正己烷、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、乙酸乙酯和丙酮中的一种或一种以上任意比例的混合溶剂。

其中，绿原酸及其衍生物脂质修饰物制备过程中所述的适宜温度范围为10～65℃，优选15～55℃，进一步优选为20～50℃。

其中，绿原酸及其衍生物脂质修饰物纯化过程中所用复溶剂选自乙醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯和苯中的一种或一种以上任意比例的混合溶剂。复溶过滤纯化的机理在于绿原酸及其衍生物与脂质复合后形成的脂质修饰物能够或易溶于所选择的复溶剂中，而绿原酸及其盐在这些复溶剂中难溶或不溶或溶解度极低，经过复溶后，游离的未被复合的绿原酸及其盐会形成沉淀析出，过滤后除去游离药物即得脂质修饰物的溶液，除去溶剂后得到脂质复合物精品。

其中，在绿原酸及其衍生物脂质修饰物的制备和纯化过程中冷冻干燥或减压干燥的温度为25～55℃。

本发明所制备得到脂质修饰物是一种复合物，而不是新的化合物。高效液相色谱法测定结果显示，脂质修饰物与绿原酸及其衍生物具有相同的保留时间。此外，脂质修饰物与绿原酸及其衍生物和磷脂的物理混合物在差示扫描量热图中存在明显差别，脂质修饰物没有明显的吸放热现象，而物理混合物有吸放热现象，且吸放热速率不均一。

绿原酸及其衍生物与脂质在一定条件下反应后形成的磷脂复合物，具有以下的有益效果：

1、提高了药物的亲脂性，增强了药物作用时的膜透过性，提高药物的生物利用度。

2、降低或消除了胃肠道中被各种消化酶分解，解决了口服制剂开发中的诸多问题和难题。

3、增强了绿原酸及其衍生物在油相、乳化剂、助乳化剂等中的溶解度，便于后续制剂的加工成型。

本发明所制备的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，可以作为有效成分与药学上可以接受的其他药物辅料一起制备适合临床给药的任何给药形式。其中所述药学上可以接受的其它药用辅料包括纤维素衍生物、淀粉类、水、小分子醇类、磷脂、胆固醇、环糊精、乳化剂、高分子聚合物等。

本发明中所制备的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，可以用于制备药剂学中传统的及临床上使用最为广泛的片剂、胶囊剂、注射剂、注射用冻干粉针剂及药剂学上一些新型给药系统，如钠米给药系统。其中片剂可为普通片剂或包衣片剂，胶囊剂可为软胶囊或硬胶囊，尤其是可供制备明胶软胶囊剂型。其中所述的钠米给药系统包括脂质体、钠米粒、聚合物胶束和树枝状聚合物等具有靶向定位治疗效果的新型给药系统。所用载体材料为磷脂、胆固醇、油脂、两亲性载体材料和树枝状聚合物材料。所述的新型给药系统可以制备成口服或注射途径给药的临床给药形式。钠米给药系统因其特定的尺寸，可以利用机体组织某些部位的特殊效应，提高钠米给药系统对机体组织的选择性，从而达到靶向给药，提高药物治疗效果，降低药物毒副作用的目的。

本发明中所制备的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物还可以作为中间体制备微乳、自微乳等微米级别新型给药系统，在微乳制备过程中，其中所用油相为丙二醇单月桂酸甘油酯、油酸聚乙二醇甘油酯、单油酸甘油酯、油酸乙酯中的一种或一种以上的混合物；其中所述的乳化剂为聚山梨酯80、聚氧乙烯油酸酯、液态卵磷脂和聚氧乙烯蓖麻油中的一种或一种以上的混合物；其中所述的助乳化剂为二乙二醇单乙基醚，丙二醇、聚乙二醇中的一种或一种以上的混合物。

附图说明

图1为绿原酸DSC差示扫描量热图。

图2为绿原酸脂质修饰物的DSC差示扫描量热图。

具体实施方式

下面通过具体实施例进一步详细说明本发明，该实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。

实施例1

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量0.5倍的脂质；加入适量乙酸乙酯，所用乙酸乙酯的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为6mg/ml；于55℃条件下恒温磁力搅拌回流0.5h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

实施例2

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量25倍的脂质；加入适量氯仿，所用氯仿的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为48mg/ml；于15℃条件下恒温磁力搅拌回流3.5h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙酸乙酯，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

实施例3

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量1倍的脂质；加入适量乙醇，所用乙醇的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为20mg/ml；于40℃条件下恒温磁力搅拌回流2.5h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入二氯甲烷，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

实施例4

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量15倍的脂质；加入适量正己烷，所用正己烷的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为30mg/ml；于20℃条件下恒温磁力搅拌回流3h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

实施例5

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量7倍的脂质；加入适量2，4-二氧六环，所用2，4-二氧六环的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为40mg/ml；于35℃条件下恒温磁力搅拌回流1.5h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入氯仿，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

实施例6

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量氯仿，所用乙酸乙酯的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于45℃条件下恒温磁力搅拌回流2h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

实施例7绿原酸及其衍生物脂质修饰物单因素制备工艺优化

(1)反应溶剂的选择：

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量溶剂，所用溶剂的用量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于45℃条件下恒温磁力搅拌回流2h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入复溶剂，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

表1不同复合溶剂对脂质修饰物复合率的影响

结果表明：不同溶剂对脂质修饰物的复合率影响较大，当选用乙酸乙酯和氯仿作溶剂时，所得复合物的复合率较高。

(2)复合反应时间的考察：

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量乙酸乙酯，所用乙酸乙酯的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于45℃条件下恒温磁力搅拌回流一定时间后得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

表2不同复合时间对脂质修饰物的复合率影响

复合时间为1.5h时复合率最高，在反应2h后复合率基本达到稳定状态，在小范围内波动，原因可能是此时药物和磷脂在溶液中存在着结合与分离的平衡，复合率变化较小。

(3)复合反应温度的考察：

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量乙酸乙酯，所用乙酸乙酯的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于不同的温度条件下恒温磁力搅拌回流一定1.5h后得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

表3不同复合温度对脂质修饰物的复合率影响

(4)药物与脂质投料比的考察：

取绿原酸及其衍生物以及一定重量比的脂质；加入适量乙酸乙酯，所用乙酸乙酯的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于35℃下恒温磁力搅拌回流一定1.5h后得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

表4不同药脂比对脂质修饰物的复合率影响

(5)药物初始浓度的考察：

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量乙酸乙酯，所用乙酸乙酯的量为使绿原酸及其衍生物成不同浓度；于35℃下恒温磁力搅拌回流一定1.5h后得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

表5不同药物初始浓度对脂质修饰物的复合率影响

实施例8绿原酸及其衍生物脂质修饰物的应用

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量氯仿，所用氯仿的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于45℃条件下恒温磁力搅拌回流2h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。向绿原酸及其衍生物脂质修饰物中加入适量的注射用大豆油和注射用水，搅拌，高压乳匀，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物钠米粒。

实施例9绿原酸及其衍生物脂质修饰物的应用

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量氯仿，所用氯仿的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于45℃条件下恒温磁力搅拌回流2h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。取适量的两亲性嵌段共聚物载体材料与绿原酸及其衍生物脂质修饰物共同溶解于适当溶剂中，搅拌超声使混合均匀，将混合液逐滴缓慢地加入到搅拌下的注射用水中，室温下以600rpm速率磁力搅拌，待有机溶剂挥发完全后，收集乳液即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物的聚合物胶束。

实施例10绿原酸及其衍生物脂质修饰物的应用

取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量5倍的脂质；加入适量氯仿，所用氯仿的量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为35mg/ml；于45℃条件下恒温磁力搅拌回流2h得反应液；将反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；向粗品加入乙醚，使其充分分散得分散液；将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。取适量的油相，乳化剂和助乳化剂与绿原酸衍生物脂质修饰物，水浴加热融化，超声涡旋使之形成均一的混合液，于4℃放置平衡24h，使用前，加热使药物混合液融化，将该混合液加入到纯水中，缓慢振荡，使其乳化形成乳液。在微乳制备过程中，其中所用油相为丙二醇单月桂酸甘油酯、油酸聚乙二醇甘油酯、单油酸甘油酯、油酸乙酯中的一种或一种以上的混合物；其中所述的乳化剂为聚山梨酯80、聚氧乙烯油酸酯、液态卵磷脂和聚氧乙烯蓖麻油中的一种或一种以上的混合物；其中所述的助乳化剂为二乙二醇单乙基醚，丙二醇、聚乙二醇中的一种或一种以上的混合物。

Claims (10)

1.一种绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述修饰物包括绿原酸及其衍生物和脂质。

2.如权利要求1所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述绿原酸及其衍生物与脂质的重量比为1∶0.5～25。

3.如权利要求2所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述绿原酸及其衍生物与脂质的重量比为1∶1～15。

4.如权利要求1至3任一项所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述绿原酸及其衍生物与脂质的重量比为1∶3～10。

5.如权利要求1所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述绿原酸及其衍生物为绿原酸、绿原酸钠盐、绿原酸钾盐和绿原酸钙盐中的一种或一种以上任意比例的混合物。

6.如权利要求1所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述脂质为磷酸甘油脂。

7.如权利要求1或7所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物，其特征在于，所述磷酸甘油脂为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油中的一种或一种以上任意比例的混合物。

8.一种如权利要求1所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物的制备和纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)绿原酸及其衍生物脂质修饰物的制备：

a、取绿原酸及其衍生物以及相当于绿原酸及其衍生物重量0.5～25倍的脂质；

b、加入适量溶剂，所用溶剂的用量为使绿原酸及其衍生物的反应浓度为6～48mg/ml；

c、于15～55℃条件下恒温磁力搅拌回流0.5～3.5h得反应液；

d、将步骤c所述反应液冷冻干燥或减压干燥，得绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品；

(2)绿原酸及其衍生物脂质修饰物的纯化：

a、向上述步骤(1)制备得到的绿原酸及其衍生物脂质修饰物脂膜粗品加入复溶剂，使其充分分散得分散液；

b、将上述分散液过滤，取其滤液再次冷冻干燥或减压干燥，即得绿原酸及其衍生物脂质修饰物精品。

9.如权利要求8所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物的制备和纯化方法，其特征在于，步骤(1)中所述溶剂选自氯仿、二氯甲烷、正己烷、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、乙酸乙酯和丙酮中的一种或一种以上任意比例的混合溶剂。

10.如权利要求8所述的绿原酸及其衍生物的脂质修饰物的制备和纯化方法，其特征在于，步骤(2)中所述的复溶剂选自乙醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯和苯中的一种或一种以上任意比例的混合溶剂。