CN104792904A - 食品中合成着色剂的测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种食品中合成着色剂的测定方法，旨在提供一种检测误差小，检测结果准确的食品中合成着色剂的测定方法；其技术方案依次包括下述步骤：1)试样处理；2)色素提取：试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH＝4的水洗涤3次到5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次到5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次到5次，每次5mL，收集解吸液，用10ml乙醇洗涤抽滤瓶中的残液，并与上步中的解吸液一同收集，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，经0.45um滤膜过滤，取10uL进高效液相色谱仪；3)计算；属于食品检测术领域。

Description

食品中合成着色剂的测定方法

技术领域

本发明涉及一种合成着色剂的检测方法，具体的说，是一种食品中合成着色剂的测定方法，属于食品检测技术领域。

背景技术

合成色素即人工合成的色素，其优点不少，如色泽鲜艳，着色力强，色调多样，但它有一个大缺点，即具毒性(包括毒性、致泻性和致癌性)。这些毒性源于合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐，它们对人体均可造成不同程度的危害。中国1982年公布了《食品添加剂使用卫生标准》，其中规定了只能使用5种合成色素，并定出了最大使用量，如合成色素的纯色素含量不得低于85～99％，1公斤合成色素中砷的含量应在1毫克以下，铅在10毫克以下，铜在20毫克以下，每100克色素中，苯酚不应超过5毫克，苯胺不应超过4毫克，各种氯化物不应超过0.5％等，这些规定是为了限制色素中的杂质，以减少对人体的毒害。

GB/T 5009.35～2003公开了三种合成色素的检测方法，其高效液相色谱法

检测步骤为：一)试样处理；二)色素提取；聚酰胺吸附法：试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH＝4的水洗涤3次到5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次到5次(含赤藓红的试样用5.2.2法处理)，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次到5次，每次5mL，收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL。经0.45um滤膜过滤，取10uL进高效液相色谱仪。液～液分配法(适用于含赤藓红的试样)：将制备好的试样溶液放入分液漏斗中，加2mL盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5％)10mL～20mL，振摇提取，分取有机相，重复提取至有机相无色，合并有机相，用饱和硫酸钠溶液洗2次，再次10mL，分取有机相，放蒸发皿中，水浴加热浓缩至10mL，转移到分液漏斗中，加60mL正己烷，混匀，加氨水提取2次到3次，每次5mL，合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗2次，氨水层加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至5mL。经滤膜0.45um过滤，取10uL进高效液相色谱仪，三)结果计算。

但是该方法，在收集解吸液，直接加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，这样着色剂可能收集的不够完全，从而导致了检测误差较大，实验结果不够准确。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种检测误差小，检测结果准确的食品中合成着色剂的测定方法。

本发明提供的的技术方案是这样的：

一种食品中合成着色剂的测定方法，依次包括下述步骤：

1)试样处理

2)色素提取

试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH＝4的水洗涤3次到5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次到5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次到5次，每次5mL，收集解吸液，用约10ml乙醇洗涤抽滤瓶中的残液，并与上步中的解吸液一同收集，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，经0.45um滤膜过滤，取10uL进高效液相色谱仪；

3)计算

$X=\frac{A\×1000}{m\×V_1/V_2\×1000\×1000}$

式中：

X-试样中着色剂的含量，单位为克每千克；

A-样液中着色剂的质量，单位为微克；

V₁-试样稀释总体积，单位为毫克；

V₂-进样体积，单位为毫升；

M-试样质量，单位为克。

进一步的，上述的食品中合成着色剂的测定方法，所述的试样溶液不含赤藓红。

与现有技术相比，本发明提供的技术方案在试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH＝4的水洗涤3次到5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次到5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次到5次，每次5mL，收集解吸液后，再用10ml乙醇洗涤抽滤瓶中的残液，并与上步中的解吸液一同收集，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，经0.45um滤膜过滤，取10uL进高效液相色谱。由于抽滤瓶中残余的残液可溶于乙醇。且乙醇易挥发，在接下来的水浴加热步骤中会被蒸发完全，所以不会影响计算结果。并且在加入乙醇洗涤并收集残液能收集残液中残留的色素(即着色剂)，能减小实验误差，使实验结果更准确。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不构成对本发明的任何限制，任何人在本发明的权利要求范围内所做的有限次的修改仍在本发明的权利要求范围内。

实施例1

本发明提供的技术方案用于测定食品中合成着色剂

1、本方法检出限：

新红5ng，柠檬黄4ng，苋菜红6ng，胭脂红8ng，日落黄7ng，亮蓝26ng，当进样量相当0.025g时，检出浓度分别为0.2mg/Kg，0.16mg/Kg，0.24mg/Kg，0.32mg/Kg，0.28mg/Kg，0.72mg/Kg，0.72mg/Kg，1.04mg/Kg。

2、原理

食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或掖～液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

3试剂

3.1正己烷。

3.2盐酸。

3.3乙酸。

3.4甲醇：经0.5um滤膜过滤。

3.5聚酰胺粉(尼龙6)：过200目筛。

3.6乙酸铵溶液(0.02mol/L)；称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45um滤膜过滤。

3.7氨水：量取氨水2Ml.加水100Ml.混匀。

3.8氨水～乙酸铵溶液(0.02，mol/L):称取氨水0.5mL，加乙酸铵溶液(0.02mol/L)至1000mL，混匀。

3.9甲醇-甲酸(6+4)溶液：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀。

3.10柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸，加水至100mL，溶解混匀。

3.11无水乙醇-氨水-水(7+2+1)溶液：量取无水乙醇70mL，氨水20mL，水10mL，混匀。

3.12三正辛胺正丁醇溶液(5％)：量取三正辛胺5mL，加正丁醇至100mL，混匀。

3.13饱和硫酸钠溶液。

3.14硫酸钠溶液(2g/L)。

3.15pH6的水：水加柠檬酸溶液pH值到6。

3.16合成着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为100％质量的柠檬黄，日落黄，苋菜红，胭脂红，新红，赤鲜红，亮蓝，靛蓝各0.100g，置100mL容量瓶中，加pH6水到刻度，配成水溶液(1.00mg/mL)。

3.17合成着色剂的标准使用液：临用时上述溶液(或将3.16)加水稀释20倍，经0.45um滤膜过滤，配成每毫克相当于50.0um的合成着色剂。

4仪器

高效液相色谱仪，带紫外检测器，254nm波长。

5分析步骤

5.1式样处理

5.1.1橘子汁、果味水、果子露汽水等：称取20.0g～40.0g，放入100mL烧杯中，含二氧化碳式样加热除去二氧化碳。

5.1.2配制酒类：称取20.0g～40.0g，放100mL烧杯中，加小碎瓷片数片，加热除去乙醇。

5.1.3硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等：称取5.00g～10.00g粉碎式样，放入100mL小烧杯中，加水30mL，温热溶解，若式样溶液pH值较高，用柠檬酸溶液调pH值到6左右。

5.1.4巧克力豆及着色糖衣制品：称取5.00g～10.00g，放入100mL小烧杯中，用水反复洗涤色素，到式样无色素为止，合并色素漂洗液为式样溶液。

5.2色素提取

聚酰胺吸附法：式样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入式样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH＝4的水洗涤3次到5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次到5次(含赤藓红的式样用5.2.2法处理)，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次到5次，每次5mL，收集解吸液，用约10ml乙醇洗涤抽滤瓶中的残液，并与上步中的解吸液一同收集，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL。经0.45um滤膜过滤，取10uL进高效液相色谱仪。

5.3高效液相色谱参考条件

5.3.1柱：YWG～C1810um不锈钢柱4.6mm(I，d)*250mm.

5.3.2流动相：甲醇：乙酸铵溶液(pH＝4，0.02mol/L)。

5.3.3梯度洗脱：甲醇：20％～35％，3％/min；35％～98％，9％/min；98％继续6min.

5.3.4流速：1mL/min.

5.3.5紫外检测器，254nm波长。

5.4测定

取相同体积样液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。

5.5结果计算

式样中着色剂的含量按式(1)进行计算。

$X=\frac{A\×1000}{m\×V_1/V_2\×1000\×1000}$

式中：

X-式样中着色剂的含量，单位为克每千克(g/kg)；

A-样液中着色剂的质量，单位为微克(ug)；

V₁-式样稀释总体积，单位为毫克(mL)；

V₂-进样体积，单位为毫升(mL)；

M-式样质量，单位为克(g)；

计算结果保留两位有效数字。

5.6精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。

Claims (2)

1.一种食品中合成着色剂的测定方法，其特征在于，依次包括下述步骤：

1)试样处理

2)色素提取

试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH＝4的水洗涤3次到5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次到5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次到5次，每次5mL，收集解吸液，用10ml乙醇洗涤抽滤瓶中的残液，并与上步中的解吸液一同收集，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，经0.45um滤膜过滤，取10uL进高效液相色谱仪；

3)计算

$X=\frac{A\×1000}{m\×V_1/V_2\×1000\×1000}$

式中：

X-试样中着色剂的含量，单位为克每千克；

A-样液中着色剂的质量，单位为微克；

V₁-试样稀释总体积，单位为毫克；

V₂-进样体积，单位为毫升；

M-试样质量，单位为克。

2.根据权利要求1所述的食品中合成着色剂的测定方法，其特征在于，所述的试样溶液不含赤藓红。