CN109444285B - 一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法 - Google Patents

一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，包括如下步骤：步骤一：向粉碎的调味面制品的样品中加入提取液，充分提取后，离心，收集上清液；步骤二：除去上清液中的提取液溶质，得到残液，将残液离心除去其中的脂肪成分，收集液相溶液；步骤三：对得到的液相溶液利用液相色谱串联质谱仪进行检测。该检测方法能够有效的避免因基质干扰而造成假阳性或假阴性的误判，能够同时对调味面制品中多种添加剂进行快速准确的定性定量。

Description

一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法
技术领域
本发明涉及食品检测技术领域，特别是涉及一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法。
背景技术
调味面制品，俗称“辣条”，主要指以小麦粉为主要原料，以食用植物油、盐、白砂糖以及香辛料等为辅料，经挤压熟化、分切、拌料、包装等工艺加工而成的即食预包装食品。该类产品不但价格低廉，且具有丰富的口感，因而受到人们特别是青少年的青睐，因此其产品质量以及安全性显得尤为重要。目前在调味面制品生产加工过程中会用到多种添加剂，以提升产品的口感、使产品的色泽更诱人以及延长产品的保质期。从具体的不合格产品的问题来看，超范围及超剂量使用食品添加剂是其中一个重要的原因，因此定性定量的检测这些食品添加剂不仅是为了保证产品的质量，更重要的是保护消费者的利益。
针对调味面制品中的甜味剂(甜蜜素、糖精钠、安赛蜜等)、防腐剂(苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸酯类)以及着色剂(胭脂红、柠檬黄、日落黄、苋菜红、亮蓝)等添加剂的检测，一般采用色谱法进行检测，易因基质干扰而造成假阳性或假阴性的误判。而调味面制品的特点是高油、高糖、添加剂种类多，而现有大多数检测方法的检测基质效应显著，容易造成假阳性或假阴性的误判。
发明内容
基于此，有必要提供一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，以解决传统的检测基质效应显著，容易造成假阳性或假阴性的误判的问题。
一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，包括如下步骤：
步骤一：向粉碎的调味面制品的样品中加入提取液，充分提取后，离心，收集上清液；
步骤二：除去所述上清液中的提取液溶质，得到残液，将残液离心除去其中的脂肪成分，收集液相溶液；
步骤三：对所述液相溶液利用液相色谱串联质谱仪进行检测。
在其中一个实施例中，所述步骤二中，所述提取液溶质为乙醇和氨水或者为乙腈和氨水，溶剂为水。
在其中一个实施例中，
所述提取液溶质为乙醇和氨水，溶剂为水，其中，乙醇、氨水、水的体积比为7︰2︰1；或者
所述提取液溶质为乙腈和氨水，溶剂为水，其中，乙腈、氨水、水的体积比为7︰2︰1。
在其中一个实施例中，所述步骤三中，色谱的条件是：
色谱柱：填料粒径为1.7μm，柱内径为2.1mm，柱长为100mm的亚乙基桥杂化颗粒柱；
流动相：10mmol/L的乙酸铵水溶液和甲醇，其梯度洗脱条件如下：
Figure BDA0001909536270000021
Figure BDA0001909536270000031
柱温：30～40℃；
进样量：5～10μL；
流速：0.2～0.4mL/min。
在其中一个实施例中，所述步骤三中，质谱的条件是：
毛细管电压：1.0～2.5kV；
脱溶剂气温度：400～800℃；
脱溶剂气流量：500～1000L/Hr；
锥孔气流量：30～60L/Hr；
扫描模式：正离子扫描和负离子扫描。
在其中一个实施例中，所述步骤三中，质谱的条件是：
15种添加剂的特征母离子子离子对、锥孔电压以及碰撞能如下：
Figure BDA0001909536270000032
Figure BDA0001909536270000041
上表中的“+”为正离子扫描模式，“-”为负离子扫描模式。
在其中一个实施例中，所述步骤二中，所述得到残液之后还包括调节残液的酸碱度至pH为7.0±0.2的步骤。
在其中一个实施例中，所述调节残液的酸碱度至pH为7.0±0.2是采用乙酸水溶液进行调节，所述乙酸水溶液中乙酸与水的体积比为1︰1。
在其中一个实施例中，所述步骤二中，所述将残液离心除去其中的脂肪成分是在温度为0℃～5℃的环境下进行离心。
在其中一个实施例中，所述步骤三中，对所述液相溶液利用液相色谱串联质谱仪进行检测包括：将步骤二中收集的液相溶液利用0.22μm滤膜进行过滤，过滤后得到的溶液作为所述液相色谱串联质谱仪进行检测的供试液。
上述同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法通过检测调味面制品中添加剂的含量来鉴别调味面制品中添加剂的量是否符合相关的标准。利用上述检测方法能够有效的避免因基质干扰而造成假阳性或假阴性的误判，也能够同时对调味面制品中多种添加剂进行快速准确的定性定量。上述方法能够为国家食品安全标准提供新的技术支持和数据支撑，进一步保障消费者的利益。
附图说明
图1为同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法的技术路线图。
具体实施方式
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。
本发明涉及一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，包括如下步骤：
步骤一：将调味面制品剪切成1cm3～2cm3的大小，放入-20℃～-50℃的环境中冷冻0.5h～4h，将冷冻后的样品进行粉碎处理。向粉碎的调味面制品样品中加入溶质为乙醇和氨水，溶剂为水，其中，乙醇、氨水、水的体积比为7︰2︰1，或者溶质为乙腈和氨水，溶剂为水，其中，乙腈、氨水、水的体积比为7︰2︰1，振荡，均质，超声，离心，收集上清液。优选的，振荡提取8min～12min、均质提取5min～15min以及超声波提取10min～20min后，在3500r/min～4500r/min下离心4min～6min，收集上清液，下层残渣用提取液重复提取一次或多次，合并上层清液，旋转蒸发除去提取液溶质。
步骤二：除去步骤一得到的上清液中的提取液溶质，离心除去其中的脂肪成分，收集液相溶液。具体的，在除去上清液中的提取液溶质后得到残液，用乙酸与水的体积比为1︰1的乙酸水溶液调节残液的酸碱度至pH为7.0±0.2，再在温度为0℃～5℃，转速为8000r/min～12000r/min下离心8min～12min除去其中的脂肪成分，收集液相溶液。
步骤三：将步骤二中得到的液相溶液利用液相色谱串联质谱仪进行检测。具体的，将步骤二中得到的液相溶液过0.22μm滤膜进行过滤的步骤，过滤后得到的溶液作为所述液相色谱串联质谱仪进行检测的供试液。
色谱的条件优选但不限于是：
色谱柱：规格为1.7μm，2.1mm*100mm(填料粒径为1.7μm，内径为2.1mm，长度为100mm)的亚乙基桥杂化颗粒柱；
流动相：10mmol/L的乙酸铵水溶液和甲醇的混合液；
10mmol/L乙酸铵水溶液和甲醇不同体积比、不同洗脱时间的梯度洗脱条件如下：
Figure BDA0001909536270000071
柱温：30～40℃；
进样量：5～10μL；
流速：0.2～0.4mL/min。
质谱的条件优选但不限于是：
毛细管电压：1.0～2.5kV；
脱溶剂气温度：400～800℃；
脱溶剂气流量：500～1000L/Hr；
锥孔气流量：30～60L/Hr；
扫描模式：正离子扫描和负离子扫描；
15种添加剂的母离子子离子对、锥孔电压以及碰撞能如下：
Figure BDA0001909536270000072
Figure BDA0001909536270000081
Figure BDA0001909536270000091
上表中的+为正离子扫描模式，-为负离子扫描模式。
以下为具体实施例部分。
1仪器和试剂
1.1仪器：液相色谱串联质谱仪
1.2试剂
分析纯试剂：乙醇，乙腈，氨水，乙酸。
色谱纯试剂：甲醇，乙酸铵。
标准物质：甜蜜素，日落黄，柠檬黄，胭脂红，苋菜红，亮蓝，山梨酸，苯甲酸，安赛蜜，脱氢乙酸，糖精钠，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸丁酯。
2实验过程
2.1标准溶液的制备
准确称取适量甜蜜素，日落黄，柠檬黄，胭脂红，苋菜红，亮蓝，山梨酸，苯甲酸，安赛蜜，脱氢乙酸，糖精钠，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，对羟基苯甲酸丙酯，对羟基苯甲酸丁酯标准物质，分别用50％甲醇水溶解，定容至10mL，配制成1.0mg/mL的单标标准储备液；
混合标准溶液：分别移取上述单标标准储备液各1mL混合于100mL容量瓶中，用水定容，配制成100μg/mL的混合标准溶液；
混合标准工作液：移取上述混合标准溶液，用水稀释，配制成0.01～0.25μg/mL的混合标准工作液。
2.2供试液的制备
按照调味面制品特点以及基质影响因素(高油、高糖、高韧性等)对试样进行预处理，首先对样品预剪切，剪切成1cm3～2cm3的大小，处理后样品在超低温冷冻箱里-50℃冷冻30min，迅速将冷冻后的样品于高速万能粉碎机中粉碎。
称取粉碎后的样品5.0g，加入提取液20mL。提取液溶质为乙醇和氨水，溶剂为水，其中乙醇、氨水、水的体积比为7:2:1。然后用振荡器振荡提取10min，均质器均质提取10min，超声波提取15min，在离心机中以4000r/min的速度离心5min，取上清液。下层残渣用提取液重复提取两次，合并上层清液，旋转蒸发除去上层清液中的提取液溶质，残液用乙酸水溶液调节酸碱度至pH为7.0±0.2，乙酸水溶液中乙酸与水的体积比为1:1，用水定容至10mL，混合均匀后，在0～5℃下以10000r/min的速度离心10min，除去溶液中的脂肪成分，然后将除去脂肪成分的溶液用0.22μm滤膜进行过滤，过滤后得到供试液。
2.3标准液和供试液的检测
将上述供试液进行液相色谱串联质谱仪进行检测，色谱条件：
色谱柱：
Figure BDA0001909536270000101
BEH C18(亚乙基桥杂化颗粒柱)，规格1.7μm，2.1mm*100mm(填料粒径为1.7μm，内径为2.1mm，长度为100mm)；
柱温：40℃；流速：0.3mL/min；
进样量：10μL；流动相：10mmol/L乙酸铵水溶液和甲醇的混合液；
10mmol/L乙酸铵水溶液和甲醇的混合液为流动相，其不同体积比、不同洗脱时间的梯度洗脱条件如下：
Figure BDA0001909536270000102
Figure BDA0001909536270000111
质谱条件：
毛细管电压：1.50kV；
脱溶剂气温度：500℃；
脱溶剂气流量：800L/Hr；
锥孔气流量：50L/Hr；
扫描模式：正离子和负离子同时扫描。
在使用质谱的过程中，优化出15种添加剂的母离子子离子对、锥孔电压以及碰撞能量，以下为15种添加剂优选的特征离子对、锥孔电压以及碰撞能：
Figure BDA0001909536270000112
Figure BDA0001909536270000121
3方法验证及分析
利用上述调味面中添加剂的检测方法对调味面制品中目标化合物的加标回收率达到80％以上，24h内精密度和稳定性测试RSD<10％，检出限均达到0.5mg/kg，能快速准确的同时对调味面制品中多种食品添加剂进行定性定量分析。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一：向粉碎的调味面制品的样品中加入提取液，充分提取后，离心，收集上清液；
步骤二：除去所述上清液中的提取液溶质，得到残液，将残液离心除去其中的脂肪成分，收集液相溶液；
步骤三：对所述液相溶液利用液相色谱串联质谱仪进行检测；
所述步骤二中，所述得到残液之后还包括调节残液的酸碱度至pH为7.0±0.2的步骤，所述调节残液的酸碱度至pH为7.0±0.2是采用乙酸水溶液进行调节，所述乙酸水溶液中乙酸与水的体积比为1︰1；所述将残液离心除去其中的脂肪成分是在温度为0℃～5℃的环境下以转速为8000r/min～12000r/min进行离心；
所述提取液溶质为乙醇和氨水，溶剂为水，其中，乙醇、氨水、水的体积比为7︰2︰1；或者
所述提取液溶质为乙腈和氨水，溶剂为水，其中，乙腈、氨水、水的体积比为7︰2︰1；
所述多种食品添加剂为甜蜜素、日落黄、柠檬黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝、山梨酸、苯甲酸、安赛蜜、脱氢乙酸、糖精钠、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯与对羟基苯甲酸丁酯。
2.根据权利要求1所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，所述步骤三中，色谱的条件是：
色谱柱：填料粒径为1.7μm，柱内径为2.1mm，柱长为100mm的亚乙基桥杂化颗粒柱；
流动相：10mmol/L的乙酸铵水溶液和甲醇，其梯度洗脱条件如下：
Figure FDA0003240850770000021
柱温：30～40℃；
进样量：5～10μL；
流速：0.2～0.4mL/min。
3.根据权利要求2所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，所述步骤三中，质谱的条件是：
毛细管电压：1.0～2.5kV；
脱溶剂气温度：400～800℃；
脱溶剂气流量：500～1000L/Hr；
锥孔气流量：30～60L/Hr；
扫描模式：正离子扫描和负离子扫描。
4.根据权利要求3所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，所述步骤三中，质谱的条件是：
15种添加剂的特征母离子子离子对、锥孔电压以及碰撞能如下：
Figure FDA0003240850770000022
Figure FDA0003240850770000031
Figure FDA0003240850770000041
上表中的“+”为正离子扫描模式，“-”为负离子扫描模式。
5.根据权利要求1所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，步骤一中，充分提取包括如下步骤：振荡，均质，超声。
6.根据权利要求5所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，步骤一中，充分提取包括如下步骤：振荡8min～12min，均质5min～15min，超声10min～20min。
7.根据权利要求1所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，步骤二中，离心的时间为8min～12min。
8.根据权利要求7所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，步骤二中，离心的时间为10min。
9.根据权利要求1所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，所述转速为10000r/min。
10.根据权利要求1所述的同时检测调味面制品中多种食品添加剂的方法，其特征在于，所述步骤三中，对所述液相溶液利用液相色谱串联质谱仪进行检测包括：将步骤二中收集的液相溶液利用0.22μm滤膜进行过滤，过滤后得到的溶液作为所述液相色谱串联质谱仪进行检测的供试液。
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调味面制品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸检测方法的探索;刘海涛;《内江科技》;20131231;第34卷(第09期);第101页，第63页 *
超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱筛查水果罐头中37 种食品添加剂;王骏 等;《食品与发酵工业》;20171231;第43卷(第11期);第212-219页 *
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