CN104784182B - 一种治疗畜禽腹泻的组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及兽药领域，具体而言，涉及一种治疗畜禽腹泻的组合物及其制备方法。一种治疗畜禽腹泻的组合物，主要含有乳酸诺氟沙星和乙酰甲喹。本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物，主要由乳酸诺氟沙星和乙酰甲喹制成，两者之间协同配合增强，使乳酸诺氟沙星与乙酰甲喹联合使用，具有双重功效，双重抑菌杀菌，降低细菌产生耐药性的几率，并增加细菌的敏感性，对畜禽腹泻治疗见效快，抗菌效力强，能防止传染和继发感染，达到标本兼治的目的，降低了用药次数和剂量，很好的解决了药物残留超标的问题。本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物的制备方法工艺简单，容易实现，制得的制剂中的成分分布均匀，易于使用，治疗效果好。

Description

一种治疗畜禽腹泻的组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及兽药领域，具体而言，涉及一种治疗畜禽腹泻的组合物及其制备方法。

背景技术

目前治疗畜禽腹泻采用的药物有乳酸诺氟沙星、乙酰甲喹等。乳酸诺氟沙星属于喹诺酮类抗菌药。通过作用于细菌的DNA旋转酶(gyrase A)亚单位，抑制细菌DNA复制和转录而产生杀菌作用。对革兰氏阴性菌如绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、肺炎克雷伯氏菌、亲水气单胞菌等有较强的杀菌作用，对支原体也有一定的作用。乳酸诺氟沙星肌注吸收均较迅速，1～2小时达血药峰浓度。

乙酰甲喹属于抗菌药物，通过抑制菌体的脱氧核糖核酸(DNA)合成而达到抗菌作用。具有广谱抗菌作用，对多数细菌具有较强的抑制作用，对革兰氏阴性菌强于革兰氏阳性菌，对猪痢疾密螺旋体的作用尤其突出。肌注给药易吸收，猪肌注后10分钟即可分布全身各组织，体内消除快，半衰期约2小时。用于肠道感染所致的痢疾和肠炎等。对猪密螺旋体性痢疾有效，对仔猪黄痢和白痢也有较好疗效。

由于在药物使用过程中，细菌产生耐药性，使其对药物的敏感度降低，单独使用这些药物治疗效果下降，有的甚至没有治疗效果，有的会因为继发感染，引起其他疾病的发生。为了达到治疗疾病的目的，养殖户一般采用增大用药剂量或延长使用时间的方式，这样就出现了药物残留超标的问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种治疗畜禽腹泻的组合物，所述的组合物具有治疗畜禽腹泻见效快，抗菌效力强、能防止传染和继发感染，能标本兼治畜禽腹泻。

本发明的第二目的在于提供一种所述的组合物的制备方法，该方法工艺简单，容易实现。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种治疗畜禽腹泻的组合物，主要含有乳酸诺氟沙星和乙酰甲喹。

本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物，主要由乳酸诺氟沙星和乙酰甲喹制成，两者之间协同配合增强，使乳酸诺氟沙星与乙酰甲喹联合使用，具有双重功效，双重抑菌杀菌，降低细菌产生耐药性的几率，并增加细菌的敏感性，对畜禽腹泻治疗见效快，抗菌效力强，能防止传染和继发感染，达到标本兼治的目的，降低了用药次数和剂量，很好的解决了药物残留超标的问题。

为了使乳酸诺氟沙星和乙酰甲喹具有更好的协同增强效果，优选地，所述乳酸诺氟沙星与所述乙酰甲喹的重量比为5～10：1～2。

优选地，所述组合物还包括乳酸甲氧苄啶。乳酸甲氧苄啶作为增效因子，大大增强乳酸诺氟沙星和乙酰甲喹的治疗效果，进一步增强抑菌杀菌的效果，降低细菌产生耐药性的几率，并增加细菌的敏感性，对畜禽腹泻治疗见效快，抗菌效力强，能防止传染和继发感染，达到标本兼治的目的，降低了用药次数和剂量，很好的解决了药物残留超标的问题。

为了使组合物的各成分之间达到更好的协同增强效果，优选地，所述乳酸诺氟沙星、所述乙酰甲喹与所述乳酸甲氧苄啶的重量比为5～10：1～2：2.5～5。

进一步地，所述组合物还包括阿托品。阿托品又名硫酸阿托品，属于抗胆碱药物，可以与胆碱受体结合，对抗乙酰胆碱的作用，缓解腹泻引起的胃肠道平滑肌痉挛，减轻动物疼痛，缓解腹泻症状。通过添加阿托品，减少胃肠腺体分泌，使肠道液体减少，吸收增多而减少水分营养流失，使得组合物作用更为友好，减少畜禽治疗过程中的不适。

为了使阿托品发挥更有效的效果，优选地，所述阿托品为所述乳酸诺氟沙星重量的0.8％-1.2％。

本发明提供的组合物可添加相应的辅料制成各种剂型，以满足市场的需求。优选地，所述组合物的剂型为颗粒剂、片剂、散剂、冲剂、膏剂、注射剂中的任一种。

进一步地，所述组合物的剂型为注射剂，所述组合物还包括辅料，所述辅料包括：二甲基亚砜、亚硫酸氢钠、乙二胺四乙酸二钠和注射用水。添加这些辅料，使组合物中的各成分更好的混合均匀，制得的注射剂中的各活性成分能更久的保持活性。

更进一步地，以所述注射剂的体积计，所述注射剂含有乳酸诺氟沙星50～100g/L，乙酰甲喹10～20g/L，乳酸甲氧苄啶25-50g/L，阿托品0.5-1g/L，二甲基亚砜25-35ml/L，亚硫酸氢钠1.5-2.5g/L，乙二胺四乙酸二钠0.08-0.15g/L，注射用水定容。

本发明还提供了上述组合物的制备方法，包括以下步骤：

(a)、取二甲基亚砜加热，加入乙酰甲喹搅拌溶解，得到第一混合液；

(b)、取部分注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星、乳酸甲氧苄啶、阿托品、亚硫酸氢钠、乙二胺四乙酸二钠，搅拌溶解，得到第二混合液；

(c)、将所述第一混合液与所述第二混合液混后搅拌均匀，用余量的注射用水定容即可。

本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物的制备方法工艺简单，容易实现，制得的制剂中的成分分布均匀，易于使用，治疗效果好。

进一步地，在所述步骤(c)后还包括：将定容后的液体进行滤膜过滤，得到的滤液灌封，于121℃、0.15MPa灭菌15-20分钟，即得治疗畜禽腹泻的注射液成品。通过过滤和灭菌得到成品制剂，易于保存。

优选地，在步骤(b)中，所述部分注射用水的体积为总注射用水的80％以上。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物，通过乳酸诺氟沙星与乙酰甲喹的联合使用，具有双重功效，双重抑菌杀菌，降低细菌产生耐药性的几率，并增加细菌的敏感性，对畜禽腹泻治疗见效快，抗菌效力强，能防止传染和继发感染，达到标本兼治的目的，降低了用药次数和剂量，很好的解决了药物残留超标的问题；

(2)为了进一步增强乳酸诺氟沙星与乙酰甲喹的治疗效果，本发明还增加了增效因子乳酸甲氧苄啶，并且为了使治疗畜禽腹泻的组合物各成分之间具有更好的协同增强的效果，本发明还限定了乳酸诺氟沙星、乙酰甲喹和乳酸甲氧苄啶这三种成分的配比；

(3)本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物，还通过添加阿托品，减少胃肠腺体分泌，使肠道液体减少，吸收增多而减少水分营养流失，使得组合物作用更为友好，减少畜禽治疗过程中的不适；

(4)本发明提供的组合物可添加相应的辅料制成各种剂型，以满足市场的需求；

(5)本发明还提供了注射剂型的组合物，组合物中的各成分更好的混合均匀，制得的注射剂中的各活性成分能更久的保持活性；

(6)本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物的制备方法工艺简单，容易实现，制得的制剂中的成分分布均匀，易于使用，治疗效果好。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售获得的常规产品。

实施例1

体外药敏试验

1.材料

1.1 受试菌株 大肠杆菌、沙门氏菌、均来自四川省畜牧科学研究院从病死畜禽体内分离鉴定保存。

1.2 试验药品 乳酸甲氧苄啶、乳酸诺氟沙星、乙酰甲喹、硫酸阿托品标准品购自中国兽医药品监察所。

1.3 M-H培养基 购自杭州市微生物试剂有限公司。

2.方法

2.1 受试药物的制备

2.1.1 A乳酸诺氟沙星注射液：取80ml注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星10g(以诺氟沙星计)，搅拌均匀使之充分溶解，再加入处方量亚硫酸氢钠0.2g，乙二胺四乙酸二钠0.01g，搅拌溶解；补加注射用水定容至100ml，滤膜滤过，灌封，100℃灭菌30分钟，冷却保存备用。

2.1.2 B乙酰甲喹注射液：取苯甲醇6ml，适当加热，加入痢菌净(乙酰甲喹)2g，搅拌溶解，加入乙醇35ml，搅拌均匀，加注射用水至100ml，用乙醇胺调节pH至9.5～10.0，定容，滤膜过滤，灌封，100℃灭菌30分钟，冷却保存备用。

2.1.3 C复方制剂注射液：①取二甲基亚砜3ml，适当加热，加入痢菌净(乙酰甲喹)2g搅拌溶解。②取80ml注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星10g(以诺氟沙星计)，亚硫酸氢钠0.2g，乙二胺四乙酸二钠0.01g，搅拌溶解。将①加入②中，搅拌均匀，注射用水定容至100ml，滤膜过滤，灌封，100℃灭菌30分钟，冷却保存备用。

2.1.4 D复方制剂注射液：①取二甲基亚砜3ml，适当加热，加入痢菌净(乙酰甲喹)2g搅拌溶解。②取80ml注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星10g(以诺氟沙星计)，乳酸甲氧苄啶5g(以TMP计)，亚硫酸氢钠0.2g，乙二胺四乙酸二钠0.01g，搅拌溶解。将①加入②中，搅拌均匀，注射用水定容至100ml，滤膜过滤，灌封，100℃灭菌30分钟，冷却保存备用。

2.2 药液的稀释

A乳酸诺氟沙星注射液：稀释1000倍，每毫升含诺氟沙星100μg；

B乙酰甲喹注射液：稀释1000倍，每毫升含乙酰甲喹20μg；

C复方制剂注射液：稀释1000倍，每毫升含诺氟沙星100μg，乙酰甲喹20μg；

D复方制剂注射液：稀释1000倍，每毫升含诺氟沙星100μg，乙酰甲喹20μg，TMP50μg；

2.3 菌液制备 在已分离纯化的待测菌平板上挑取4～5个形态相同的菌落接种于3～5ml M-H培养基内，35℃培养6～8h，校正菌液浓度，使其相当于0.5麦氏比浊标准，再用M-H液体培养液按1∶200稀释，稀释后的菌液在30min内接种。

2.4 细菌MIC值测定

采用微量肉汤稀释法测定三种注射液对大肠杆菌和沙门氏菌的MIC值。96孔板每排的第一孔加入0.2ml药液，其余各孔加入0.1mlMH肉汤，移液器从第一孔取0.1ml药液至第二孔，混匀，再取0.1ml至第三孔，混匀，以此类推，倍比稀释，共12个稀释度。即A：第一孔：诺氟沙星100μg/ml，最后一孔0.05μg/ml；B：第一孔：乙酰甲喹20μg/ml，最后一孔0.01μg/ml；C：第一孔：诺氟沙星100μg/ml，乙酰甲喹20μg/ml；最后一孔诺氟沙星0.05μg/ml，乙酰甲喹0.01μg/ml。D：第一孔：诺氟沙星100μg/ml，乙酰甲喹20μg/ml，TMP50μg/ml；最后一孔诺氟沙星0.05μg/ml，乙酰甲喹0.01μg/ml，TMP：0.025μg/ml。每种药物分别加入0.1ml大肠杆菌菌液和沙门氏菌菌液，恒温培养箱37℃18h培养，观察结果。凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该待测菌的MIC。

3.结果

诺氟沙星注射液、乙酰甲喹注射液单用对大肠杆菌的MIC值分别为6.25μg/ml和10.00μg/ml，诺氟沙星+乙酰甲喹的复方制剂，对大肠杆菌MIC值分别为诺氟沙星1.60μg/ml和乙酰甲喹2.50μg/ml，抗菌效力比两者单用增强约4倍。诺氟沙星+乙酰甲喹+乳酸甲氧苄啶(TMP)的复方制剂，对大肠杆菌MIC值分别为诺氟沙星0.40μg/ml和乙酰甲喹0.60μg/ml，抗菌效力比两者单用增强约16倍。诺氟沙星注射液、乙酰甲喹注射液单用对沙门氏菌的MIC值分别为3.13μg/ml和10.00μg/ml，诺氟沙星+乙酰甲喹的复方制剂对沙门氏菌MIC值分别为诺氟沙星0.80μg/ml和乙酰甲喹2.50μg/ml，抗菌效力比两者单用增强约4倍。诺氟沙星+乙酰甲喹+TMP的复方制剂对沙门氏菌的MIC值分别为诺氟沙星0.20μg/ml和乙酰甲喹0.60μg/ml，抗菌效力比两者单用也增强约16倍。MIC值具体见表1所示。

表1 三种注射液对大肠杆菌和沙门氏菌MIC值的测定

可以看出，诺氟沙星和乙酰甲喹对大肠杆菌和沙门氏菌的抗菌效力具有协同作用，两者连用比单用抗菌效力提高4倍。当诺氟沙星和乙酰甲喹复方制剂中加入了TMP后，抗菌效力又得到显著提升，比两者单用提高16倍。因此，诺氟沙星+乙酰甲喹+TMP的复方制剂较单方制剂比，更能有效治疗大肠杆菌和沙门氏菌引起的畜禽疾病。

实施例2

一种治疗畜禽腹泻的注射剂的制备方法，包括以下步骤：

1)取二甲基亚砜3ml，适当加热，加入乙酰甲喹1g搅拌溶解。

2)取80ml注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星5g，乳酸甲氧苄啶2.5g，阿托品0.05g，亚硫酸氢钠0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.008g，搅拌溶解。

3)将步骤1)制得的溶液加入步骤2)制得的溶液中，搅拌均匀，注射用水定容，滤膜过滤，滤液灌封，121℃、0.15MPa灭菌15-20分钟，即制成本发明的治疗畜禽腹泻的乳酸诺氟沙星注射液。

实施例3

一种治疗畜禽腹泻的注射剂的制备方法，包括以下步骤：

1)取二甲基亚砜3.5ml，适当加热，加入乙酰甲喹2g搅拌溶解。

2)取80ml注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星10g，乳酸甲氧苄啶5g，阿托品0.1g，亚硫酸氢钠0.25g，乙二胺四乙酸二钠0.015g，搅拌溶解。

3)将步骤1)制得的溶液加入步骤2)制得的溶液中，搅拌均匀，注射用水定容，滤膜过滤，滤液灌封，121℃、0.15MPa灭菌15-20分钟，即制成本发明的治疗畜禽腹泻的乳酸诺氟沙星注射液。

实施例4

一种治疗畜禽腹泻的注射剂的制备方法，包括以下步骤：

1)取二甲基亚砜2.5ml，适当加热，加入乙酰甲喹1g搅拌溶解。

2)取80ml注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星8g，乳酸甲氧苄啶3g，阿托品0.07g，亚硫酸氢钠0.2g，乙二胺四乙酸二钠0.01g，搅拌溶解。

3)将步骤1)制得的溶液加入步骤2)制得的溶液中，搅拌均匀，注射用水定容，滤膜过滤，滤液灌封，121℃、0.15MPa灭菌15-20分钟，即制成本发明的治疗畜禽腹泻的乳酸诺氟沙星注射液。

将实施例2-4制得的治疗畜禽腹泻的乳酸诺氟沙星注射液进行临床试验，具体如下：

1.实验动物：

随机选取患病成猪只150头，体重在5～10kg；将150头患腹泻的猪按体重随机分为A、B、C、D四组，每组25头。

A组为空白对照组，不给予药物治疗；

B组用实施例1制得的乳酸诺氟沙星注射液进行治疗，用法：肌肉注射，每1kg体重0.1ml，一日2次，连用4日；

C组用实施例1制得的乙酰甲喹注射液进行治疗，用法：每1kg体重用0.1ml，一日2次，连用4日；

D组用本发明实施例2-4制备的复方乳酸诺氟沙星注射液进行治疗，用法：肌肉注射，每1kg体重用0.075～0.15ml，一日1次，连用2次。

治疗开始后，每日记录患畜身体变化情况和死亡动物分布，治疗10天后统计治疗效果，其中：

无效：指10天后，患畜症状无明显改变，仍保持治疗前的症状。

有效：指10天后，患畜症状有改变，症状优于治疗前的效果。

治愈：指10天后，症状消失，患畜恢复健康。

试验结果如表2所示。

表2 不同药物的治疗结果

从表2的试验结果经统计分析，复方乳酸诺氟沙星注射液治疗组、乳酸诺氟沙星注射液治疗组和乙酰甲喹注射液组与对照组差异极显著(P＜0.01)。本发明提供的治疗畜禽腹泻的组合物的疗效比已有两种药物显著有效。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

Claims (6)

1.一种治疗畜禽腹泻的组合物，其特征在于，其成分为乳酸诺氟沙星、乙酰甲喹、乳酸甲氧苄啶、阿托品和辅料；

所述乳酸诺氟沙星、所述乙酰甲喹与所述乳酸甲氧苄啶的重量比为5～10：1～2：2.5～5；

所述阿托品为所述乳酸诺氟沙星重量的0.8％-1.2％。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的剂型为颗粒剂、片剂、散剂、冲剂、膏剂、注射剂中的任一种。

3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物的剂型为注射剂，所述辅料包括：二甲基亚砜、亚硫酸氢钠、乙二胺四乙酸二钠和注射用水。

4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，以所述注射剂的体积计，所述注射剂含有乳酸诺氟沙星50～100g/L，乙酰甲喹10～20g/L，乳酸甲氧苄啶25-50g/L，阿托品0.5-1g/L，二甲基亚砜25-35ml/L，亚硫酸氢钠1.5-2.5g/L，乙二胺四乙酸二钠0.08-0.15g/L，注射用水定容。

5.权利要求3-4任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)、取二甲基亚砜加热，加入乙酰甲喹搅拌溶解，得到第一混合液；

(b)、取部分注射用水加热至沸腾，冷却至80℃，加入乳酸诺氟沙星、乳酸甲氧苄啶、阿托品、亚硫酸氢钠、乙二胺四乙酸二钠，搅拌溶解，得到第二混合液；

(c)、将所述第一混合液与所述第二混合液混后搅拌均匀，用余量的注射用水定容即可。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤(c)后还包括：将定容后的液体进行滤膜过滤，得到的滤液灌封，于121℃、0.15MPa灭菌15-20分钟，即得治疗畜禽腹泻的注射液成品。