CN104725425A

CN104725425A - 一种头孢洛林酯的制备方法

Info

Publication number: CN104725425A
Application number: CN201510165057.1A
Authority: CN
Inventors: 李明杰; 刘明霞; 李志滨; 韩后良
Original assignee: Shandong Luoxin Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Shandong Luoxin Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2015-04-09
Filing date: 2015-04-09
Publication date: 2015-06-24
Anticipated expiration: 2035-04-09
Also published as: CN104725425B

Abstract

本发明涉及一种头孢洛林酯的合成方法，以7-苯乙酰氨-3-羟基-3-头孢-4-羧酸-二苯甲酯为原料，经氯化，在C-3位与4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐反应得到硫醚化合物，采用对甲酚和固定化青霉素酶分别脱除羧基和氨基保护基，再与酰氯化的AE-活性酯反应进行C-7位缩合反应，水解，在乙酸中结晶成功制备了头孢洛林酯；本发明的制备方法，避免了使用三氟乙酸、五氯化磷等有毒有害物质，反应条件温和，副反应少，工艺简单、收率高、成本低，产品纯度高，原料廉价易得，适合工业化生产。

Description

一种头孢洛林酯的制备方法

技术领域

本发明涉及药物合成领域，具体涉及一种头孢洛林酯的制备方法。

背景技术

头孢洛林酯 (ceftaroline fosamil) 由日本武田制药(Takeda Pharm aceutical)公司开发，美国 Forest Laboratories(Cerexa)公司获得市场授权，于2010年10月29日经美国药品食品管理局批准上市。该药商品名为Teflaro，是头孢洛林的前药 (即N-磷酰化头孢洛林) ,属于第五代头孢菌素类抗菌药。该药用于治疗成人社区获得性细菌性肠炎(CABP)和急性细菌性皮肤和皮肤组织感染(ABSSSI)，包括甲氧西林耐受性金黄色酿脓葡萄球菌 (MRSA)感染。

头孢洛林酯的中文化学名称：( 6 R, 7R ) -7 -{ ( 2 Z ) -2 -(乙氧基亚氨基) -2-[ 5-(磷酰胺基)1,2,4-噻二唑-3-基]-乙酰氨基}-3-{[4-(1-甲基-4-吡啶)-1,3-噻唑-2-基]硫代}-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.20]辛-2-烯-2-羧酸乙酸盐一水化物；分子式： C₂₂H₂₁N₈O₈PS₄·C₂H₄O₂·H₂O；分子量：762.75；CAS登记号：866021-48-9，其化学结构式如下所示：

。

有关头孢洛林酯的合成工艺主要有以下几种：

1、中国专利CN01816095“膦酰基头孢烯化合物”报道了头孢洛林酯的合成路线是以(6R,7R)-7-苯乙酰胺基-3-甲磺酰氧基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸二苯甲酯(2)为起始原料，与化合物(3)通过取代反应得到化合物(4)，化合物(4)经过成季铵盐、氨基脱保护、羧基脱保护生成化合物(5)，化合物(5)酰化后与稀乙酸混合结晶得到头孢洛林酯(1)。

该路线以3-甲磺酰氧基-头孢为原料，但未公开该化合物的公开步骤；由中国专利CN00802003.5“3-磺酰氧基-3-头孢烯化合物的制备方法”可知，在合成3-磺酰氧基-3-头孢烯化合物时，常常会副反应产生大量的双键异构体△2-头孢烯化合物，副反应产生△2-头孢烯化合物导致头孢菌素的活性母核△3-头孢烯化合物的纯度和收率降低，给精制工艺带来很大的负荷；且反应中大量应用了五氯化磷或甲醇钠等环境不友好试剂，不利于工业化生产。

2、申请号为20141084251.4的中国专利报道了头孢洛林酯的合成方法：该方法是以(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-乙氧亚胺基乙酸(式Ⅱ)为原料，先与酸/氯化亚砜在三乙胺作用下反应得到化合物式Ⅲ，其次化合物式Ⅲ与卤代试剂在甲苯中反应得到化合物式Ⅳ，化合物式Ⅳ再与式Ⅴ在三乙胺作用下于四氢呋喃中反应得到化合物式Ⅵ，化合物式Ⅵ在碱的作用下脱保护得到化合物式Ⅶ，化合物式Ⅶ在乙酸乙酯中与PCl₅ 反应，产物经过水解反应得到化合物式Ⅷ，最后化合物式Ⅷ与水、乙酸钠反应，在硫酸与乙酸中成盐得头孢洛林酯 (式I)，其反应路线如下所示：

其中，R₁ 为三氟乙酰基、三氟丙酰基、三氟甲磺酰基、三氯乙酰基、叔丁氧羰基、乙酰基、对甲苯磺酰基或甲磺酰基。

文献 Bioorg.Med.Chem，2003，2427～2437 报道了一种头孢洛林酯非水合物前体药的合成方法，以(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-乙氧亚胺基乙酸为原料，先与PCl₅反应，合成(Z)-2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-乙氧亚胺基乙酰氯，其次将该化合物与7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二盐酸化合物反应，最后经水解，与乙酸成盐得到头孢洛林酯前体药物，其合成路线如下：

专利 WO0214333以及 WO2013034718A1 在此基础上分别公开了合成头孢洛林酯的新方法。该两种方法中，在以 (Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-乙氧亚胺基乙酸为原料的之后合成步骤与以上合成路线类似。

这些合成方法虽然合成路线较短，但是式Ⅴ化合物的市场上没有供应，原料不易得，且反应中大量应用了五氯化磷等环境不友好试剂，不利于工业化生产；还有由于(Z)-2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-乙氧亚胺基乙酰氯中的二氯磷酸酯的活性较强，能在碱性条件下与伯胺发生反应，从而使得获得的化合物3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰胺基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸的副产物较多，进而导致产率降低，不利于工业化生产。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种生产条件温和、生产工艺简单、副反应少、产品收率和纯度高的头孢洛林酯的制备方法。

本发明是采用以下技术方案来实现的：

步骤一：7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia）与二甲基甲酰胺和氯化亚砜反应，得到7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）；再与4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐反应，得到7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）；

步骤二：7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）在DMF、碱性试剂条件下，与甲基化试剂反应，加水并酸化析晶，得到7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）；所述甲基化试剂为碳酸二甲酯，碱性试剂为三乙胺；

步骤三：7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）用对甲酚脱除二苯甲基，固定化青霉素 G 酰化酶脱除苯乙酰基，结晶、过滤、真空干燥得到7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb）；

步骤四：在甲基叔丁基醚、石油醚的混合溶剂中，AE-活性酯（式Ⅳa）与三氯氧磷反应得到2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）；

步骤五：将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲ）和2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）在乙醇中滴加三乙胺、DMAP反应缩合，加盐酸水解，然后在乙酸中成盐结晶得到头孢洛林酯（式Ⅴ）。

其合成路线如下所示：

优选的，所述步骤一中，7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia）与脱水的二甲基甲酰胺和氯化亚砜、二甲基砜反应，得到7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib），反应完成后，降温冷却，过滤，并用少量清水清洗，得到7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）湿料，将其混悬于丙酮中，加入4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐，并搅拌至溶清，反应完毕后，加水析晶，抽滤、少量水清洗、真空干燥得到7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）。

更进一步优选的，所述步骤一中，7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia）：脱水的二甲基甲酰胺：氯化亚砜的用料质量配比为1：5-40：0.3-3：，反应温度为 0-30℃，反应时间为 2-8 小时；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）与2-巯基-4-(4- 吡啶基) 噻唑的摩尔比为1：1.1～1.2；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）与催化剂的质量比为1：0.01～0.03；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）与丙酮的质量体积比为1：3～6；反应温度为40～50℃，反应时间为1～2 小时。

优选的，所述步骤二中，将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）的DMF溶液与甲基化试剂反应，加入碱性试剂，保温反应完毕后冷却至室温，加水析晶，再用盐酸调pH为1.3～2，继续搅拌析晶，过滤，水洗，得到7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）；所述甲基化试剂为碳酸二甲酯，碱性试剂为三乙胺；7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）与DMF的质量体积比为1：3；7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）与甲基化试剂、碱性试剂的摩尔比为1：1.4～1.5：1.5～1.6；DMF与稀盐酸溶液的体积比为1：5～6；反应温度为 35～40℃，反应时间为 5～6 小时。

优选的，在步骤三中，7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）用对甲酚脱除二苯甲基时，7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯盐酸化物（式Ⅱ）：对甲酚=1：2-10，反应温度为45-50℃，反应时间为0.5-6 小时；反应完全后冷至40℃加入乙酸乙酯继续冷至10℃以下加入2％碳酸氢钠溶液萃取，收集萃取液，待用；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯盐酸化物（式Ⅱ）：对甲酚：乙酸乙酯：2％碳酸氢钠溶液的质量比=1：2-10：5-15：10-30。将上述萃取液中加入固定化青霉素G酰化酶IPA-450或IPA-750，用料质量配比为：7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸：固定化青霉素G酰化酶=1：0.65-1；反应温度为30-37℃，反应时间1-3小时，反应时持续加入2％碳酸氢钠溶液控制pH值在7.0-8.5；反应完成后，结晶、过滤、真空干燥得到7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb）。

优选的，在步骤四中，在甲基叔丁基醚、石油醚的混合溶剂中，加入AE-活性酯（式Ⅳa），随后加入三氯氧磷，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应4-8小时；向反应液中加水，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应1小时；抽滤，滤饼用石油醚洗涤，在40-50℃真空干燥，得到2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）；其中AE-活性酯（式Ⅳa）与三氯氧磷、水的摩尔比为1：2：1。

优选的，在步骤五中，所述乙醇的体积为7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲ）质量的15-25倍；7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲ）、2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）、三乙胺和DMAP的反应摩尔比为1：1.1～1.3：1.05～1.15：0.01～0.02，控制温度5～20℃反应3～5小时；反应液蒸去乙醇，加水，以乙酸乙酯萃取，水层加活性炭脱色，抽滤，将滤液置于冰浴下搅拌，滴加盐酸调至pH2-3，静置，抽滤，真空干燥得白色固体；将其加入水中，滴加2M乙酸钠溶液至全部溶解，加入乙酸，搅拌3h，结晶，抽滤，滤饼用少量水淋洗，真空干燥，得头孢洛林酯（式Ⅴ）。

本发明改进了头孢洛林酯的合成工艺，以7-苯乙酰氨-3-羟基-3-头孢-4-羧酸-二苯甲酯为原料, 经氯化，在C-3位与4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐反应得到硫醚化合物，脱保护基采用水解去4 位二苯甲基和固定化青霉素酶裂解去7位苯乙酰基，再与酰氯化的AE-活性酯反应进行C-7位缩合反应，水解，在乙酸中结晶成功制备了头孢洛林酯。相对于现有技术，本发明具有如下优点：

(1)本发明避免使用价格昂贵毒性大腐蚀性强的五氯化磷、三氟乙酸、碘甲烷、甲醇钠等原料和反应后处理繁琐的难题；反应条件温和，副反应少，提高了纯度，产品纯度为99.8%以上。本发明缩短了工艺步骤，工艺简单、收率高、成本低，产品纯度高，原料廉价易得，适合工业化生产。在脱羧基保护基时用苯酚作溶剂，避免使用价格昂贵腐蚀性强的五氯化磷等原料和反应后处理繁琐的难题；采用了青霉素酶进行氨基保护基团的脱去，替代了原有的三氟乙酸工艺，提高了反应收率，对产品质量有较明显的提高，且酶可以套用 300 次以上，降低了生产成本，对环境无污染，具有更好的环保性，使工艺符合产业化的要求。

(2)本发明以7-苯乙酰氨-3-羟基-3-头孢-4-羧酸-二苯甲酯为原料先经氯化，C-3位上的氯相对于羟基为更活泼的基团，增加反应活性，更容易与亲核试剂2-巯基-4-（4-吡啶基）噻唑发生取代反应，使硫醚化合物产品收率和纯度更高，外观颜色好，避免了使用甲醇钠等强碱，使生产条件更温和、减少副产物发生、生产工艺更简单、生产成本更低。

(3) C-7位缩合方法有酰氯法、活性酯法及二环己基碳二亚胺(DCC)直接脱水等方法，DCC做缩合剂时，侧链氨基需保护；酰氯法要求无水操作，且需要在低温下进行. 本发明采用活性酯法，简化了合成路线，且反应条件温和易于操作，较高收率的形成酰胺键；选择乙醇作溶剂，简化了操作，而且加入DMAP后，加快了反应进程，4h可以定量反应；提高了产率，达到95.2%，HPLC归一化法测产品纯度99%以上。

具体实施方式

以下用实施例对本发明的技术方案作进一步的说明，将有助于对本发明的技术方案的优点、效果有更进一步的了解，实施例不限定本发明的保护范围，本发明的保护范围由权利要求来决定。其中，7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯、固定化青霉素G酰化酶和AE-活性酯均为工业级，其余所用试剂均为市售CP或AR。

实施例1：

1）7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）的制备

在 20-25℃温度下，在干燥的反应容器内加入2000mL 脱水二甲基甲酰胺，在室温下加入80g氯化亚砜，控制温度在30℃，搅拌1小时，然后加入222g 7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia，0.4mol，工业级，含量≥90%），控制温度在25℃，搅拌8小时，加入15 升冰水，对分离出的固体过滤，用少量清水冲洗，抽滤，得到约228g 7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯滤饼（式Ib，测定水分为15.8%，折合干重为192g，0.36mol），摩尔收率为90%。

将221.5g7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯滤饼（式Ib，测定水分为15.8%，折合干重为0.35mol）其混悬于1200ml丙酮中，加入83.5g4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐，反应温度为40～50℃，反应时间为2 小时，反应完毕后，加水析晶，抽滤、少量水清洗、真空干燥得到234g7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic），收率为96%，HPLC纯度为99.2%。

）7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）的制备

将实施例1中制备的228g7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic，0.33mol）和 44.6g 碳酸二甲酯加入0.5LDMF 中，搅拌下滴加50g 三乙胺，控温＜30℃，滴加完毕后于35～40℃保温反应5小时，反应完毕后冷却至室温，加入2kg水，搅拌析晶，再用盐酸调pH为1.3～1.5，继续搅拌析晶1小时，过滤，水洗，40℃减压干燥得到221.2g7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ，0.3mol），收率：90%，HPLC纯度＞99%。

）7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb）的制备

将实施例2制得的221g 7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ，0.3mol）、1700mL对甲酚加入反应釜中，控制温度在45-50℃，搅拌反应6小时；反应完全后冷至40℃加入2200mL乙酸乙酯继续冷至10℃以下分三批加入1500mL2％碳酸氢钠溶液萃取，收集萃取液，待用；将上述萃取液中加入150g固定化青霉素G酰化酶IPA-750，反应温度为30-37℃，反应时间1-3小时，反应时持续加入2％碳酸氢钠溶液控制pH值在7.8-8.5。反应毕，冷至室温，滤出IPA-750。并用少许水洗涤，滤液和洗液冷却到3～5℃，用盐酸调pH值至酸性后析出白色固体，滤过，干燥得115.9g7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb），收率为95%，HPLC纯度>99%。

）2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）的制备

在反应釜中加入200g的甲基叔丁基醚、200g的石油醚，搅拌，加入170gAE-活性酯（式Ⅳa，含量93%，0.45mol），再分次加入138g三氯氧磷，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应6小时；向反应液中加8.1g水，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应1小时；将反应液抽滤，滤饼用石油醚45g洗涤，在40-50℃真空干燥，得到173.1g2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb，0.35mol），摩尔收率77.8%，HPLC含量为94.5%。

）头孢洛林酯的制备

将101.6g7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb，0.25mol）加入2000ml乙醇中，降温至0℃，滴加三乙胺38.5mL(0.275mol)，搅拌30min，加入140.2g2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb，0.3mol），加入DMAP0.3g（0.0025mol），升温至8～12℃，控温搅拌4h后，蒸去乙醇，加入水2000ml，乙酸乙酯萃去过量的AE-活性酯，水层加活性炭脱色1小时，抽滤，将滤液置于冰浴下搅拌，滴加4mol/L盐酸调至pH3，静置，抽滤，干燥得白色固体。将上述白色固体加入300ml水中，滴加2M乙酸钠溶液至全部溶解，加入600ml乙酸，搅拌3h，结晶，抽滤，滤饼用少量水淋洗，45℃鼓风干燥12h，得白色固体化合物头孢洛林酯（式Ⅴ）171.5g，收率94％，HPLC纯度为99.8%。

¹H NMR(DMSO-d₆)，δ(ppm)：1.23(3H，t，J＝7Hz)，2.28(3H，s)，1.91(3H，s)，3.3(2H，brs)，3.58-3.95(2H，m)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，4.34(3H，s)，5.32(1H，d，J＝5Hz)，5.92(1H，dd，J＝5Hz，8Hz)，8.51(2H，d，J＝6Hz)，8.99(3H，m)，9.30(1H，m)，9.70(1H，d，J＝8Hz)，11.0(1H，s)。

实施例2：

在 20-25℃温度下，在干燥的反应容器内加入2800mL 脱水二甲基甲酰胺，在室温下加入120g氯化亚砜，控制温度在30℃，搅拌1小时，然后加入278g 7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia，0.5mol，工业级，含量≥90%），控制温度在25℃，搅拌8小时，加入15 升冰水，对分离出的固体过滤，用少量清水冲洗，抽滤，得到约295g 7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯滤饼（式Ib，测定水分为18.0%，折合干重为242g，0.455mol，摩尔收率为91%）。

将上述7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯滤饼（式Ib）其混悬于1500ml丙酮中，加入118g4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐，反应温度为40~50℃，反应时间为1小时，反应完毕后，加水析晶，抽滤、少量水清洗、真空干燥得到305g7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic），收率为96.5%，HPLC纯度为99.5%。

将实施例1中制备的276g7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic，0.4mol）和 54g 碳酸二甲酯加入0.83L的DMF 中，搅拌下滴加65g 三乙胺，控温＜30℃，滴加完毕后于35～40℃保温反应6小时，反应完毕后冷却至室温，加入3kg水，搅拌析晶，再用盐酸调pH为1.5～2，继续搅拌析晶1小时，过滤，少量水洗，40℃减压干燥得到275g7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱl），收率：92%，纯度＞99%。

将实施例2制得的260g 7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ，0.35mol）、2000mL对甲酚加入反应釜中，控制温度在45-50℃，搅拌反应6小时；反应完全后冷至40℃加入3900mL乙酸乙酯继续冷至10℃以下分四批加入2000mL2％碳酸氢钠溶液萃取，收集萃取液，待用；将上述萃取液中加入200g固定化青霉素G酰化酶IPA-450，反应温度为30-37℃，反应时间2小时，反应时持续加入2％碳酸氢钠溶液控制pH值在7.0-7.8。反应毕，冷至室温，滤出IPA-450。并用少许水洗涤，滤液和洗液冷却到3～5℃，用盐酸调pH值至酸性后析出白色固体，滤过，干燥得135g7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb），收率为95%，纯度>99%。

在反应釜中加入200g的甲基叔丁基醚、200g的石油醚，搅拌，加入185gAE-活性酯（式Ⅳa，含量95%，0.5mol），再分次加入153g三氯氧磷（1mol），加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应6小时；向反应液中加18g水，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应1小时；将反应液抽滤，滤饼用石油醚50g洗涤，在40-50℃真空干燥，得到198g2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb，0.4mol），摩尔收率80%，HPLC含量为94.5%；

在步骤四中，在甲基叔丁基醚、石油醚的混合溶剂中，加入AE-活性酯（式Ⅳa），随后加入三氯氧磷，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应4-8小时；向反应液中加水，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应1小时；抽滤，滤饼用石油醚洗涤，在40-50℃真空干燥，得到2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）；其中AE-活性酯（式Ⅳa）与三氯氧磷、水的摩尔比为1：2：1。

）头孢洛林酯的制备

将122g7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb，0.3mol）加入2500ml乙醇中，降温至0℃，滴加三乙胺35mL，搅拌30min，加入182g2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb，0.39mol），加入DMAP0.36g（0.003mol），升温至10～15℃，控温搅拌3h后，蒸去乙醇，加入水2000ml，乙酸乙酯萃去过量的AE-活性酯，水层加活性炭脱色1小时，抽滤，将滤液置于冰浴下搅拌，滴加4mol/L盐酸调至pH3，静置过夜，抽滤，真空干燥得白色固体。将上述白色固体加入300ml水中，滴加2M乙酸钠溶液至全部溶解，加入600ml乙酸，搅拌3h，结晶，抽滤，滤饼用少量水淋洗，45℃鼓风干燥12h，得头孢洛林酯（式Ⅴ）217.5g，收率95％，纯度为99.8%。

Claims

1.一种头孢洛林酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：所述步骤一中，7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia）与脱水的二甲基甲酰胺和氯化亚砜反应，得到7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib），反应完成后，降温冷却，过滤，并用少量清水清洗，得到7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）湿料，将其混悬于丙酮中，加入4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐，反应完毕后，加水析晶，抽滤、少量水清洗、真空干燥得到7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）。

3.根据权利要求2所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：所述步骤一中，7-苯乙酰氨基-3-羟基-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ia）：脱水的二甲基甲酰胺：氯化亚砜的用料质量配比为1：5-40：0.3-3，反应温度为 0-30℃，反应时间为 2-8 小时；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）与4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐的摩尔比为1：1.1～1.2；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯（式Ib）与丙酮的质量体积比为1：3～6；反应温度为40～50℃，反应时间为1～2 小时。

4.根据权利要求1所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：所述步骤二中，将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）的DMF溶液与甲基化试剂反应，加入碱性试剂，保温反应完毕后冷却至室温，加水析晶，再用盐酸调pH为1.3～2，继续搅拌析晶，过滤，水洗，干燥得到7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）。

5.根据权利要求4所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：所述步骤二中，7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）与DMF的质量体积比为1：3；7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯（式Ic）与甲基化试剂、碱性试剂的摩尔比为1：1.4～1.5：1.5～1.6；DMF与水的体积比为1：5～6；反应温度为 35～40℃，反应时间为 5～6 小时。

6.根据权利要求1所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：在步骤三中，7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯盐酸化物（式Ⅱ）用对甲酚脱除二苯甲基时，反应温度为45-50℃，反应时间为0.5-6 小时；反应完全后冷至40℃加入乙酸乙酯继续冷至10℃以下加入2％碳酸氢钠溶液萃取，收集萃取液，待用；7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸二苯甲酯盐酸化物（式Ⅱ）：对甲酚：乙酸乙酯：2％碳酸氢钠溶液的质量比=1：2-10：5-15：10-30。

7.根据权利要求1所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：在步骤三中，将上述萃取液中加入固定化青霉素G酰化酶IPA-450或IPA-750，用料质量配比为：7-苯乙酰氨基-3-氯-3-头孢环-4-羧酸：固定化青霉素G酰化酶=1：0.65-1；反应温度为30-37℃，反应时间1-3小时，反应时持续加入2％碳酸氢钠溶液控制pH值在7.0-8.5；反应完成后，结晶、过滤、真空干燥得到7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲb）。

8.根据权利要求1所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：在步骤四中，在甲基叔丁基醚、石油醚的混合溶剂中，加入AE-活性酯（式Ⅳa），随后加入三氯氧磷，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应4-8小时；向反应液中加水，加入过程控制反应液温度≤5℃，加完后控温0-5℃反应1小时；抽滤，滤饼用石油醚洗涤，在40-50℃真空干燥，得到2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）；其中AE-活性酯（式Ⅳa）与三氯氧磷、水的摩尔比为1：2：1。

9.根据权利要求1所述的头孢洛林酯的制备方法，其特征在于：在步骤五中，所述乙醇的体积为7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲ）质量的15-25倍；7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸内盐化合物（式Ⅲ）、2-(2-二氯磷酰胺-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酸硫代苯并噻唑酯（式Ⅳb）、三乙胺和DMAP的反应摩尔比为1：1.1～1.3：1.05～1.15：0.01～0.02，控制温度5～20℃反应3～5小时；反应液蒸去乙醇，加水，以乙酸乙酯萃取，水层加活性炭脱色，抽滤，将滤液置于冰浴下搅拌，滴加盐酸调至pH2-3，静置，抽滤，真空干燥得白色固体；将其加入水中，滴加2M乙酸钠溶液至全部溶解，加入乙酸，搅拌3小时，结晶，抽滤，滤饼用少量水淋洗，真空干燥，得头孢洛林酯（式Ⅴ）。