CN1046848A

CN1046848A - 磷脂水制剂及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN1046848A
Application number: CN90102579.8A
Authority: CN
Inventors: 汉斯-海纳·劳滕施拉格; 约阿希姆·洛丁; 米克洛斯·盖克齐
Original assignee: A Natterman und Cie GmbH
Current assignee: A Natterman und Cie GmbH
Priority date: 1989-04-25
Filing date: 1990-04-24
Publication date: 1990-11-14
Also published as: IL94103A0; WO1990012565A1

Abstract

在溶胀促进剂存在下制备磷脂水制剂的方法，生成的胶滞体经水稀释可用于制备脂质体制剂。

Description

本发明涉及使用溶胀促进剂制备磷脂水制剂的方法以及将该制剂应用于制备脂质体。

磷脂和脂质体系许多研究的对象并已在大量发表的文献中进行了介绍。因此，在水介质中处理磷脂就其巨大经济意义而言具有重要的作用。同时对脂质体作为各种活性物质的载体用于治疗也引起人们很大的兴趣。

然而公众已经知道，各种磷脂实际上不溶于水，而且在水中只是缓慢地膨胀，尤其是如不采用耗资的方法，就不可能制备较高浓度的磷脂或脂质体水溶液。关于制备脂质体的各种方法，Szoka等已经进行了综述介绍（参阅Ann.Rev.Biophys.Bioeng.，9，467-508，1980）。

但是许多应用领域仍然想望能在水中溶解磷脂，或至少能使其分散在水中。

EP-98561介绍了加入有机溶剂和乳化剂，使磷脂混合物或含磷脂混合物在溶液中溶解或乳化。DE-PS-1141639介绍了使用胆汁酸的盐类，使磷酸胆碱-甘油二酯化合物溶于水。DE-AS-1227191介绍了在乙醇存在下用脂族聚醇，使卵磷脂在水中乳化。DE-OS-1617542介绍了用含糖的醇水溶液使脱油粗卵磷脂溶于水。US-PS-2402690介绍了加入单酸甘油酯，能使含油卵磷脂分散于水中。DE-PS-3218027介绍了加入羟乙基脂肪酸酰胺，可以获得液化水溶性磷脂。但是为了使某些磷脂或一定的磷脂混合物或卵磷脂混合物发挥作用，上述方法都存在着严重缺点，因此只能在很少的几种特定条件下才能使用。采用DE-OS-3610873所述方法，加入一定的胺，虽然可以使许多磷脂或卵磷脂混合物可以分散或溶解于水中，但是由于溶液介质（所用的胺）的有害的刺激（有味！）和毒性，这些溶液不适宜口服、非肠道和局部施用。

为了由磷脂或磷脂混合物制备脂质体和制备脂质体溶液，过去已经研究了许多方法，这些方法已经作为常规方法在使用。然而根据不同的方法，获得的脂质体的成份和大小也各不相同，必然使许多种类的脂质体各有不同。

一般最常用的方法即所谓的“薄膜工艺”，即先将磷脂或磷脂混合物溶于易挥发的有机溶剂中，例如氯仿、乙醚和乙醇等，然后在旋转蒸发器上蒸去溶剂，使圆底烧瓶中留下一层薄薄的类脂薄膜，加入水或适合的缓冲溶液后即形成脂质体（Bangham，A.D.et al.，Methods in Membrane Biology 1，1-68，1976）。由此获得多层薄片状脂质体（MLV），其缺点是颗粒大小和不同大小的颗粒的分布差异很大。

通过超声波对多层薄片状脂质体进行处理（Huang，G.，Biochemistry 8，346-352，1969）可使颗粒变小，由此得到单层脂质体，其缺点是有时出现重金属粉末。

采用Batzri和Korn的注入法（Batzri，S.，Korn，E.D.，Biochim.Biophys.Acta，298，1015-1019，1976）也可得到脂质体溶液，该方法是将溶于乙醇的类脂注入缓冲溶液中。这种方法并不适用于工业规模，因为必须用很多的人力物力除去溶剂。

使用法兰西压力机在较低压力下，将常规方法生产的多层薄片状脂质体制剂挤压通过狭缝，也可得到单层薄片状脂质体（Hamilton，R.L.，et al.，J.Lipid.Res.，21，981-992，1980）。

还有一种方法是由磷脂和表面活性物质加溶剂，生成类脂-去垢剂胶囊，去除去垢剂后形成脂质体。但是彻底除去去垢剂可能需要投入很多的人力物力，而且去垢剂还常常残留在脂质体制剂中。

上述各种方法的共同的缺点在于都要使用有机溶剂才能生产，如使用氯仿、乙醚、乙醇或其他有机溶剂。这些溶剂至少对人的皮肤有刺激作用，其中还有部分毒性作用，因此必须采用一些昂贵的方法，从磷脂溶液或脂质体水制剂中彻底除去这些溶剂。

本发明的任务在于提供一种方法能够非常简单地将不同组份和不同浓度的磷脂转化为适宜于制备脂质体的水制剂。

令人惊奇地已经得到这种方法，即在水中加入一定量的溶胀促进剂或溶胀促进剂混合物，用搅动产生自发溶胀，就可直接加工来源极不相同的磷脂和组份浓度极不相同的磷脂混合物。

本发明的任务是通过一种制备磷脂水制剂的方法予以解决，即磷脂在溶胀促进剂存在下，将磷脂放置水中搅动，其特征在于用pH5-7的饱和或不饱和的有机羧酸和其与强碱生成的盐的混合物作为溶胀促进剂，用量为1-30（重量）%溶胀促进剂和20-50（重量）%磷脂，余量为水（均以制剂的总重量计）。

优选采用1-10（重量）%（以制剂总重量计）的溶胀促进剂。较佳的饱和和或不饱和羧酸是10-20个碳原子的天然或合成的羧酸。例如正亮氨酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、十七酸、花生酸、山萮酸、十一酸、10-十一酸、十三酸、十五酸、十九酸、二十一烷酸，月桂烯酸、肉豆蔻脑酸、棕榈油酸、反岩芹酸、油酸、反油酸、亚油酸、反亚油酸、亚麻酸、桐酸、顺式9-二十碳烯酸、廿碳烯酸、芥酸、巴西烯酸、鱼酸、羟基十一酸、岩芹酸、十八碳四烯酸、10-甲基十八酸、异十三酸（一种C₁₃-酸异构体混合物）、10-甲基硬脂酸，以及它们的混合物。

溶胀促进剂也可用通式Ⅰ的骨胶原水解产物或胶原相应的酰基化水解产物。

式中R¹代表氢或1-22个碳原子的饱和或不饱和的酰基;

R²代表骨胶原氨基酸的侧链;

R³代表1-10的整数。

骨胶原主要含有甘氨酸、脯氨酸和羟基脯氨酸，还含少量谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、丝氨酸和异亮氨酸。

R²对各个氨基酸具有下列含意：

R²＝-H （对甘氨酸）

R²＝-CH₂-CH₂-CH₂- （对脯氨酸）

R²＝-CH₂-CHOH-CH₂- （对羟基脯氨酸）

R²＝-CH₂-CH₂-COOH （对谷氨酸）

R²＝-（CH₂）₃-NH-C＝⁺NH₂（对精氨酸）

NH₂

R²＝-CH₃（对丙氨酸）

R²＝-CH₂-COOH （对天冬氨酸）

R²＝-（CH₂）₄-⁺NH₃（对赖氨酸）

R²＝-CH₂-CH-CH₃CH₃（对亮氨酸）

R²＝-CH₂OH （对丝氨酸）

R₂＝-CH-CH₂-CH₃（对异亮氨酸）

CH₃

羧酸还可用酪蛋白、角蛋白或羟基吡咯啉的O-酰基衍生物的水解产物或酰基化水解产物。

酰基化氨基酸或酰基化肽或胆碱以及它们的盐同样也是适用的。

与有机羧酸能生成盐的强碱中特别适用的有氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵和胺，如乙醇胺和三乙醇胺。

所有天然的和合成的磷脂都可用作水制剂的磷脂，水化的或非水化的均可。例如：

大豆-卵磷脂：30%磷脂酰胆碱、1-2%溶血磷脂酰胆碱、22%磷脂酰乙醇胺、1-2%溶血磷脂酰乙醇胺、3-4%磷脂酰丝氨酸、18%磷脂酰肌醇、13%植物糖脂、2%磷脂酸，还有8%类脂。

油菜籽-卵磷脂：30-32%磷脂酰胆碱、3%溶血磷脂酰胆碱、30-32%磷脂酰乙醇胺、2-3%溶血磷酰脂乙醇胺、14-18%磷脂酰肌醇、1%溶血磷脂酰肌醇、10%植物糖脂、1%磷脂酸，还有2-3%类脂。

红花-卵磷脂：32-39%磷脂酰胆碱、1-2%溶血磷脂酰胆碱、14-17%磷脂酰乙醇胺、2%溶血磷脂酰乙醇胺、21-27%磷脂酰肌醇、1%溶血磷脂酰肌醇，还有15-28%类脂。

蛋-卵磷脂：73%磷脂酰胆碱、5-6%溶血磷脂酰胆碱、15%磷脂酰乙醇胺、2-3%溶血磷脂酰乙醇胺、1%磷脂酰肌醇、2-3%鞘磷脂、1%缩醛磷脂。

各种卵磷脂均可用已知方法纯化，相应的磷脂都可分离成单个成分，如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰丝氨酸、溶血磷脂酰甘油、n-酰基磷脂酰乙醇胺、磷脂酸、心磷脂、鞘磷脂、缩醛磷脂等，也可制成烯属混合物。

市售磷脂制品含有下列成份：

Phospholipon^R100（96%磷脂酰胆碱），Phospholipon^R100 H（98%磷脂酰胆碱，全水化），Phospholipon^R80（80%磷脂酰胆碱、10%磷脂酰乙醇胺），Phospholipon^R55（55%磷脂酰胆碱、25%磷脂酰乙醇胺、2%磷脂酰肌醇），Phospholipon^R38（38%磷脂酰胆碱、16%N-酰基磷脂酰乙醇胺），Phospholipon^R25（25%磷脂酰胆碱、25%磷脂酰乙醇胺、20%磷脂酰肌醇）。这些磷脂制品可按EP-68295所述方法制备。

合成磷脂可以考虑的例子有联十六酰磷脂酰胆碱，联十四酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二亚油酰磷脂酰胆碱、二牛油酰磷脂酰胆碱、二己酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱，尤其可用二棕榈酰磷脂酰胆碱和二棕榈酰磷脂酰甘油。

关于溶胀促进剂的作用，主要在其种类和用量，必要时考虑羧酸与盐的比例，需与磷脂或磷脂混合物相一致。

为了避免磷脂分解或皂化为溶血磷脂，制剂的pH应为5-7。

磷脂以及必要时还有其他助剂和应包括的组份都可装入常规搅拌设备中。

强烈的搅拌作用主要是为了充分混合，搅拌设备可以用转子搅拌器、叶式搅拌器、螺旋浆搅拌器和混合用透平，但最好装有排喷器。装磷脂时应非常注意，操作前先将设备灭菌消毒，以制备无热原制剂。混合可在室温和高至50℃的温度条件下进行。

按本发明方法用溶胀剂制备的磷脂水制剂可用水稀释，从而形成脂质体相或脂质体。与电解质结合使用时，在装有搅拌器的非常简单的容器中生成的脂质体的泡径大小为10nm-1500nm。根据搅拌和混合强度，磷脂的膨胀需要10-60分钟。按本发明方法制备的制剂呈胶状混合物，可用水稀释。本发明方法的一个特殊的优点是脂质体可以在混合器一个装置中形成。

为了使磷脂在水中充分湿润和迅速膨胀，在混合时根据需要也可与助溶剂结合使用，如低级醇（甲醇、乙醇、丙醇），氯仿、二氯甲烷等易蒸发有机溶剂。如果在以后形成的组份中需要含有脂质体，则更需要考虑使用有机溶剂。然而需要再从制剂中除去有机溶剂，因此最好尽可能少用或不用有机溶剂。在混合磷脂时，水中可加入的其他辅助物质有电解质，如NaCl，CaCl₂，Na₂HPO₄，NaHCO₃，胆碱盐酸盐、磷酸胆碱、乙酸钠或它们的混合物。辅助物质的用量以制剂的总重量计最好为0（重量）%至20（重量）%。辅助物质可在磷脂加入水中的同时加入，但也可在磷脂加入水中后再加到制剂水溶液中。

制剂中还可附加碳水化合物和/或淀粉水解产物、单糖、双糖和它们的混合物。

附加物质的量以制剂总重量计不超过30（重量）%。

脂质体中可含有各种不同的成份，例如：

治喘息药：氨茶碱、肾上腺素、麻黄素、异丙肾、异丙喘宁、去甲肾上腺素、茶碱、叔丁喘宁。

强心苷：洋地黄、洋地黄毒苷、地高辛、毛花苷丙。

抗高血压药：肼苯哒嗪、氨酰心安、Captopril。

抗寄生虫药：吡喹酮、戊烷脒、甲硝基羟乙唑。

抗心律不齐药：氨酰心安、异二缩山梨醇、萘心安、异搏定。

激素：皮质甾类、睾酮、抗利尿药、雌激素、甲状腺、生长激素、黄体酮、促性腺激素、盐皮质激素、降钙素、促皮质素。

抗糖尿病药：胰岛素、氯磺丙脲。

抗癌药：阿霉素、正定霉素、博来霉素、硫唑嘌呤、环磷酰胺、长春新碱、氨甲喋呤、长春碱、氯氨铂。

镇静剂：Benziodoazepine，氯丙嗪，Bytyrophenon，羟嗪、安宁、吩噻嗪、利血平、Thioxanthin。

类甾醇：倍他米松、地塞米松、羟基可的松。

抗组胺药：去敏灵、氯苯吡丙胺、苯海拉明。

镇静剂+止痛药：吗啡、氢化吗啡酮、可待因、可待因+类似合成药物、哌替啶、羟基双氢吗啡酮、苯巴比妥、巴比妥。

抗菌素：羟氨苄青霉素、氨苄青霉素、羧苄青霉素、氨羟苄头孢菌素、噻吩甲氧头孢菌素、头孢菌素、红霉素、庆大霉素、氧杂头霉素、Imipenem、青霉素、氧哌嗪青霉素、四环素、托普霉素、万古霉素、其他氨基糖苷。

蛋白质+糖蛋白：苯胺氮芥、白细胞溶菌素1，2，3，4，5，6，Cytokine GM-CFS，M-CSF，G-CFS，抑制素、神经生长因子、肿瘤生长因子、肿瘤组织坏死因子、缪勒抑制物质、胰岛素、骨胶原、纤维结合素、褐藻氨酸、可通过DNA重组得到的其他蛋白。

免疫药物：干扰素、白细胞溶菌素-2-球蛋白、单克隆抗体。

抗菌剂：两性霉素B，Myconazol，胞壁酰二肽、Chlortrimazol。

高渗药物：多巴胺、右旋苯丙胺。

疫苗：流感疫苗。

抗病毒药：Acylovir及其衍生物，儿用退热片-511711，三氮唑核苷、金刚烷乙胺，金刚胺、叠氮胸苷及其衍生物，腺嘌呤-Arabinosid，脒类蛋白酶抑制素。

核酸及其类似物：DNA，RNA甲基磷酸盐及其类似物。

其他：细胞表面受体阻滞剂。

在脂质体制剂中作为化妆品和营养的活性物质优先考虑下列物质：

放线菌素D，乙酰谷氨酸、AD32，、腺苷三磷酸、肾上腺素、阿霉素、丙氨酸、白蛋白、别嘌呤醇、芦荟提取液、氨基苯甲酸、硫酸苯丙胺、Amglo葡糖苷酶、血管紧张素、蒽环烯、抗坏血酸、L-天冬酰胺酶、咪唑硫嘌呤、细菌、Benaxoprofen，倍他米松、2，3-二磷酸甘油酸、双甲苯喘定甲磺酸盐、溴吡二氮草、溴隐亭、Butaconazolnittrat，降血钙素、肾上腺色素缩氨脲、胡萝卜素、酪蛋白、氯化喹啉、糜蛋白酶、氯硝安定、辅酶、秋水仙碱、骨胶原、皮质甾类、维生素B12、环孢菌素、阿糖胞苷、道诺霉素，十烃甘油一月桂酸、地塞米松、葡聚糖、诊断剂、安定、磷酸联十六烷酯、二羟基麦角毒素、二羟基丙酮、硫氮

酮、潘生丁、DNA、阿霉素、EDTA、弹性硬蛋白、麻黄素、肾上腺素、麦角碱、红霉素、雌二醇、硫代水杨酸乙基汞、铁蛋白、丝蛋白、氟硝安定、肤轻松、5-Fluoracil、Frentizol、α-球蛋白、Glycagon、葡萄糖、谷胱甘肽、甘油、甘氨酸、糖蛋白、氯金酸钠、灰黄霉素、乌嘌呤、血红蛋白、肝素、疱疹抗原、玻璃酸、氢醌、氢可的松、羟基脯氨酸、茛菪碱、布洛芬、双咪苯脲、丙咪嗪、免疫球蛋白、Imometacin、五磷酸肌醇、四磷酸肌醇、胰岛素、干扰素、安茴酰牛扁碱、肉豆蔻酸异丙酯、激肽释放酶抑制剂，酮基布洛芬、凝固因子、润肤剂、乳清蛋白、羊毛甾醇、LH-RH、亚麻酸、亚油酸、氯苯咪吲哚、去氧安定、甲氟喹、锑酸甲基葡胺、倍他咪松-戊酸盐、蛋氨酸、氨甲喋呤、胞壁酰二肽、萘普生、Natriumchromoglycat，、亚硫酸钠、硝基安定、谷维素、氧化毒素、PEG、青霉胺、青霉素、戊烷脒、过氧化角鲨烷、保泰松、多聚A，E，聚乙烯羧酸乙酯、氢泼尼松、伯喹、黄体酮、萘心安、蛋白质、蛋白水解产物、Pyrenzepen、吡咯型谷氨酸、吡咯羧酸、放射性同位素、类视黄素、蓖麻油、RNA，Salbunatol，水杨酸盐、东莨菪碱、胰泌素、血清白蛋白、芝麻油、α-谷甾醇、康力龙、硬脂酰谷氨酸、硬脂酰胺、豆甾醇、链霉素、毒毛旋花子苷、蔗糖二硬脂酸酯、甜扁桃油、超氧物歧化酶、茶碱、溴化双噻甲哌啶、维生素E、Tretinoid、喘速宁、三乙醇胺、水杨酸三乙醇胺、马来酸三甲波亭、胰蛋白酶、泛醌、尿激酶、菌苗、香荚兰醛、凡士林Codex，后叶加压素、长春花碱酰胺、维生素、酒石酸醛。

通过透析、凝胶层析、浮选、离心和超速离心或去垢剂吸收等方法可将非应所含物质进行分离。方法的选用决定于所制备脂质体的种类。这些方法均为专业人员所熟悉。

但是非应所含物质的分离并不重要，多数情况下可以不需要分离，如果脂质体制剂用作润肤剂。

如果下列脂质体作为药物制剂或医用目的，则非应包括的物质的分离是重要的。

现根据实施例详尽说明本发明。

实施例1

在一个由市场上出售的普通实验室混合器中，将3g磷脂（含80%磷脂酰胆碱），0.1g硬脂酸钠盐和10g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌30分钟，在很短时间后，加入的磷脂膨胀，形成pH约为6的高稠度均匀的膨胀相，再用水稀释后，由该胶滞体制备脂质体制剂。

实施例2

在一个实验室混合器中，将0.1g油酸钾、0.8g油酸和10g Phospho-lipon^R100（高浓缩磷脂酰胆碱）和去除矿物质的100g水在50℃下强烈搅拌30分钟，在很短时间后，加入的磷脂膨胀，形成pH约为7的均匀粘稠的膨胀相。

实施例3

在一个实验室混合器中，将10g浓缩的磷脂（80%磷脂酰胆碱），0.1g油酸钾和0.8g油酸和100g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌20分钟。经很短时间后，加入的磷脂膨胀，形成均匀粘稠的膨胀相，pH值6.5。

实施例4

在一个实验室混合器中，将0.1g硬脂酸钠、0.4g硬脂酸和3g Phospholipon^R100H（全水合、高浓度磷脂酰胆碱）和100g去除矿物质的水在80℃下强烈搅拌，经很短时间后，加入的磷脂膨胀，形成高粘稠的均匀的膨胀相，pH为8.5。

实施例5

在一个实验室混合器中，将0.2g棕榈酸钾和15g Phospholipon^R100（高度浓缩的磷脂酰胆碱）和100g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌10分钟，经很短时间后，由膨胀的磷脂形成均匀粘稠的膨胀相，pH为6.5。

实施例6

在一个实验室混合器中，将0.2g棕榈酸、0.1g三乙醇胺、15gPhospholipon^R100（高度浓缩的磷脂酰胆碱）和100g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌10分钟，在很短时间后，磷脂膨胀，形成均匀粘稠的膨胀相，pH为7.5。

实施例7

在一个实验室混合器中，将0.1g油酸钾和10g磷脂（含80%磷脂酰胆碱）和100g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌，在很短时间后，加入的磷脂膨胀，形成均匀粘稠的膨胀相，pH为7.5。

实施例8

在一个实验室混合器中，将0.1g油酸钾和10g磷脂（含50（重量）%磷脂酰胆碱）和100g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌30分钟。加入的磷脂迅速膨胀，形成均匀粘稠的膨胀相，pH为5.7。

实施例9

在一个实验室混合器中，将0.2g棕榈酸钾，15g Phospholipon^R100（浓缩磷脂酰胆碱），2g飞廉（Distel）油和100g去除矿物质的水在50℃下强烈搅拌10分钟，经很短时间后，加入的磷脂膨胀，形成均匀粘稠的膨胀相，pH为6.5。

实施例10

在一个实验室混合器中，将3.5g Lipacide（酰基化骨胶原水解产物），0.2g氢氧化钾，1g磷脂（含80%（重量）磷脂酰胆碱）和5.5g去除矿物质的水在60℃下强烈搅拌5分钟，接着磷脂膨胀，膨胀相的pH为6。它们可直接用作化妆品的洗剂。

实施例11

在一个实验室混合器中，将3.5g Lipacide PCO（酰基化骨胶原水解产物），0.3g氢氧化钾和6g磷脂（含80%（重量）磷脂酰胆碱）和10g去除矿物质的水在60℃下强烈搅拌10分钟，在很短时间后膨胀，膨胀相的pH为7。它们可以用作乳脂的基本材料。

实施例12

在一个无菌实验室混合器中，将10.5g Lipacide PCO（酰基化骨胶原水解产物），0.4g氢氧化钠、3.0g磷脂（含80%（重量）磷脂酰胆碱）和283g去除矿物质的水在60℃下强烈搅拌10分钟，在很短时间后形成膨胀相，pH为6，并能用作化妆品的洗剂。

按实施例2-12形成的本发明的水制剂可用水稀释转化为脂质体制剂。

以下的实施例介绍直接通过膨胀相制备脂质体制剂。

实施例13

在一个适合的混合器中，将0.5g柠檬酸、0.3g氢氧化钠、10g无水葡萄糖和100g去除矿物质的水强烈搅拌，并在室温下将30g Phospholipon 100（高度浓缩的磷脂酰胆碱）均匀地分布在该溶液中，pH为6.5，形成的脂质体的平均粒径为100nm。

实施例14

在一个混合器中，先将143g 10%的氢氧化钠溶液，100g Lipacide PCO（酰基化骨胶原水解产物），375g磷脂（含80%（重量）磷脂酰胆碱）和4081g去除矿物质的水强烈搅拌30分钟，再继续与300g 15%的氯化钠溶液充分混合。

形成的脂质体制剂，其粒径约为129nm，pH为6.4。该脂质体制剂非常适用于化妆品，也可用作护肤剂和类似用途的基本材料。为了提高保存的稳定性，该制剂可用1g Kathon CG保存。

实施例15

在一个混合器中，先将4.4g的10%氢氧化钠溶液，6g磷脂、22.5g Phosal 80和264g去除矿物质的水强烈搅拌30分钟，使之均匀混合，再与2.7g氯化钠充分混合。

形成的脂质体制剂适用于作化妆品，例如可用作护肤剂和洗发剂。制剂的pH为6.1，因此对皮肤很适宜。平均粒径为120nm。为了较长期地保存，制剂中可加0.06g Kathon CG保存。

实施例16

在一个适合的混合器中，先将1.3g 10%氢氧化钠溶液，1.5g磷脂、22.5 Phosal 80和272g去除矿物质的水强烈搅拌60分钟，再继续与2.7g氯化充分混合。

形成的脂质体制剂，其pH为6.3，平均粒径为150nm，适用于作化妆品。制剂可用0.06g Kathon CG保存。

实施例17

在一个混合器中，先将2g 10%氢氧化钠溶液，6g磷脂、22.5g Phosal 80和267g去除矿物质的水强烈地均匀混合60分钟。然后，再加2.7g氯化钠。

在加氯化钠后，脂质体制剂的pH为5.6，平均粒径为134nm。制剂最适合用于皮肤，也可用于化妆品。可用0.06g Kathon CG保存。

Claims

1、一种在熔胀促进剂存在下将磷脂在水中搅拌混合制备磷脂水制剂的方法，其特征在于所述溶胀促进剂是pH5-7的饱和或不饱和有机羧酸和与强碱生成的该羧酸盐的混合物，用量按制剂总重量计，溶胀促进剂为1-30(重量)%，磷脂为20-50(重量)%，余量为水。

2、按权利要求1的方法，其特征在于所用饱和或不饱和的有机羧酸含有10-22个碳原子，及其碱盐，铵盐或胺盐。

3、按权利要求1的方法，其特征在于采用通式（Ⅰ）的骨胶原羧酸水解产物及其碱盐：

式中，R¹表示氢或含有1-22个碳原子的饱和或不饱和酰基;

R²表示骨胶原氨基酸的侧链;

R³表示氢或碱离子;

n表示1-10的整数。

4、按权利要求1的方法，其特征在于使用酪蛋白、角蛋白的羧酸水解产物或酰基化水解产物或羟基脯氨酸的0-酰基衍生物。

5、按权利要求1至4之一的方法，其特征在于以制剂总重量计使用1-10（重量）%的溶胀促进剂。

6、按权利要求1至5之一的方法，其特征在于在水中混合磷脂时，还另加0-20（重量）%（以制剂总重量计）的磷酸胆碱、乙酸钠、氯化钠、氯化钙、Na₂HPO₄、NaH₂PO₄、NaHCO₃、胆碱盐酸盐，或它们的混合物，它们可以与磷脂同时加入水中或在加磷脂后再加入水中，制成制剂水溶液。

7、按权利要求1至6之一方法制备的制剂用于形成脂质体，其特征在于用水稀释至含有0.1-20（重量）%（以制剂总重量计）的脂质体。

8、按权利要求7的应用，其特征在于制剂所包括的组份可在磷脂与水混合时或用水稀释制剂前搅拌加入，使脂质体中含有亲水或亲脂物质。