CN104673801B - 一种肝癌基因ndc80及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物基因工程技术领域，具体公开了一种肝癌基因NDC80及其应用。本发明研究发现乙肝病毒感染肝细胞后，导致NDC80上调，上调后NDC80进一步使乙肝病毒继续扩增，从而形成正反馈，最终，高表达的NDC80促使肝细胞增殖癌变，引起肝癌发生。所以，本发明首次确定NDC80是乙肝病毒感染导致肝癌发生的关键因子，该基因有助于进一步了解癌症机制，为肝癌的防治提供新思路及策略。

Description

一种肝癌基因NDC80及其应用

技术领域

本发明涉及生物基因工程技术领域，具体涉及一种肝癌基因NDC80及其应用。

背景技术

原发性肝癌(HCC)是常见的恶性肿瘤，其发生率和死亡率分别占全球恶性肿瘤的第5位和第3位1，占我国恶性肿瘤的第3位和第2位，在部分地区和农村其死亡率已经上升到第一位。在全球范围内其发病率逐年上升，每年约新增加60余万病例，其中50%以上病例发生在中国。肝炎病毒感染是肝癌的主要危险因素，高达80%的肝癌归因于乙肝病毒或丙型肝炎病毒感染。在我国，则主要是乙肝病毒感染为主，90%肝癌患者有HBV感染或者HbsAg阳性。但是，目前对于乙肝病毒导致肝细胞癌变的具体机制并不清楚，因此，寻找并确定一种表达肝癌的基因，对于研究肝细胞癌变的具体机制、制定预防或治疗肝癌的方法有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肝癌基因。

本发明的另一个目的是提供一种肝癌基因的应用。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

一种肝癌基因NDC80，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。该基因的登录号为NC_000018.10。

发明人研究发现乙肝病毒感染肝细胞后，导致NDC80上调，上调后NDC80进一步使乙肝病毒继续扩增，从而形成正反馈，最终，高表达的NDC80促使肝细胞增殖癌变，引起肝癌发生。因此，本发明首次确定NDC80是乙肝病毒感染导致肝癌发生的关键因子。

在确定NDC80基因为乙肝病毒感染导致肝癌发生的关键因子后，本发明同时保护NDC80基因在作为预防或治疗乙肝病毒性肝癌的基因靶点中的应用。

进一步地，本发明还要求保护一种防或治疗乙肝病毒性肝癌的制剂，该试剂含有定量的抑制NDC80基因的抑制剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明通过研究首次发现NDC80是乙肝病毒感染导致肝癌发生的关键因子。首先，乙肝病毒感染肝细胞后，导致NDC80上调，上调后NDC80进一步使乙肝病毒继续扩增，从而形成正反馈，最终，高表达的NDC80促使肝细胞增殖癌变，引起肝癌发生。该基因有助于进一步了解癌症机制，为肝癌的防治提供新思路及策略。

附图说明

图1.相对正常肝组织，癌基因NDC80在原发性肝癌（HBV-）中表达上调，在原发性肝癌（HBV+）上调更加明显。

图2.干扰NDC80能抑制乙肝病毒活性。

图3.干扰NDC80能明显抑制肝癌细胞的增殖。

具体实施方式

下面结合说明书附图和具体实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的简单修改或替换，均属于本发明的范围，若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例中所述HBV阴性肝癌是指非乙肝病毒性肝癌，HBV阳性肝癌是指乙肝病毒性肝癌。

实施例1

一、免疫组织化学染色：分别对正常肝组织、HBV阴性肝癌组织、HBV阳性肝癌组织进行染色观察，详细步骤如下：

1.标本来源：分别从正常肝组织、HBV阴性肝癌组织、HBV阳性肝癌组织处收集得到用石蜡包埋的组织块，在显微镜下用薄片切片机将所有的组织块切成4mm的薄片，制成玻片；

2.脱蜡、水化：组织薄片在二甲苯中脱蜡后，再依据标准操作步骤利用分级的酒精（无水、95%、70%）将其水化；

3.抗原修复：将组织浸泡在EDTA（pH=8.0）中，在121℃下高压蒸汽处理5min，再用PBS冲洗3次，每次5min；

4.灭活酶：将经PBS冲洗后的组织放入3%的过氧化氢中，在室温下孵育15min，以阻断内源性过氧化物酶的活性；

5.抗原-抗体反应：在每张组织薄片上滴加一抗（以含有0.5%的BSA的PBS为稀释剂，NDC80抗体（sc-135934）按照1：100稀释），在4℃下孵育过夜，然后用缓冲液冲洗，除去游离抗体；

6.滴加二抗试剂（生物素化二抗工作液），加PBS反应30min；

7.使用试剂盒显色；

8.与苏木精进行对比染色，再依次序在酒精和二甲苯中脱水；

9.以PBS代替一抗作为阴性对照。

染色结果见图1中的A图，由免疫组织化学染色结果可知：正常肝组织很少表达NDC80蛋白，HBV阴性肝癌组织表达中等，HBV阳性肝癌组织表达最多。

二、Western Blot分析

利用商品化的试剂盒提取正常肝组织，HBV阴性肝癌组织和HBV阳性肝癌组织的蛋白，提取步骤按照试剂盒说明操作，粗略步骤如下：

1.将正常肝组织，HBV阴性肝癌组织和HBV阳性肝癌组织剪碎后置入裂解液中进行富集（HBV阳性肝癌组织设为实验组，HBV阴性肝癌组织，正常肝组织设为对照组，），加入0.5mM 原钒酸钠、1mM PMSF、1mg/ml抑肽酶、2ug/ml亮抑肽酶；

2.将裂解物于4℃下14000rpm离心10min；

3.将从癌症或非癌症组织中匀浆提取的组织样品加入到缓冲液中，加入0.2mMPMSF、1ug/ml抑肽酶、1ug/ml亮抑肽酶；

4. BCA试剂盒测定步骤3得到的各种上清液的蛋白浓度，并加入SDS-PAGE凝胶电泳进行western blot实验。

western blot检测结果见图1中的B图，由western blot检测结果可知：正常肝组织很少表达NDC80蛋白，HBV阴性肝癌组织表达中等，HBV阳性肝癌组织表达最多。

三、qRT-PCR定量分析

利用商品化的RNA提取试剂盒分别提取正常肝组织、HBV阴性肝癌组织、HBV阳性肝癌组织的RNA，然后用商品化的RT-PCR试剂盒定量分析各种组织的RNA，检测RNA含量所用PCR引物如下：

F:5’-CCTCTCCATGCAGGAGTTAAGA-3’；

R:5’-GGTCTCGGGTCCTTGATTTTCT-3’；

GAPDH-F:5’-GAGTCAACGGATTTGGTCGT-3’；

GAPDH-R-R:5’-GACAAGCTTCCCGTTCTCAG-3’；

RT-PCR的操作步骤按照RT-PCR试剂盒操作进行，检测结果见见图1中的C图，由RT-PCR检测结果可知：正常肝组织很少表达NDC80 mRNA，HBV阴性肝癌组织表达中等，HBV阳性肝癌组织表达最多。

由实施例1中的3项检测结果可知：相对正常肝组织，NDC80基因在原发性肝癌（HBV-）中表达上调，在原发性肝癌（HBV+）上调更加明显。

实施例2

本实施例用到HepG2.2.15细胞和shNDC80细胞共2种细胞，实验组为转染了siRNA的HepG2.2.1.5细胞（简称shNDC80细胞），对照组为HepG2.2.1.5细胞。

一、乙肝病毒DNA和cccDNA的检测

1、乙肝病毒DNA的检测：分别收集培养96h的HepG2.2.15细胞和shNDC80细胞以及其培养上清液；利用商品化的DNA提取试剂盒分别提取2种细胞的DNA，用RT-PCR检测2种HBV感染细胞的DNA。PCR 检测引物如下：

HBV-DAN-F:5’-ATGGAGAACACAACATCAGG-3’，

HBV-DNA-R:5’-GAGGCATAGCAGCAGGATG-3’；

GAPDH-F:5’-GAGTCAACGGATTTGGTCGT-3’，

GAPDH-R-R: 5’-GACAAGCTTCCCGTTCTCAG-3’。

检测结果见图2中的A图。

2、乙肝病毒cccDNA的检测

（1）用PBS冲洗两种细胞，4℃条件下，将两种细胞分别在裂解液（50mMTris，100MmNaCl，0.1%Trion X-100，5mM MgCl2，pH8.0）中裂解10min；

（2）在4℃下，离心2min，将细胞核从270g细胞质中分离；

（3）附加型DNA按照商品化的试剂盒操作从细胞核中提取；

（4）没有链酶蛋白酶的条件下，细胞在裂解液中裂解，另加0.25ml2.5M的KCl沉淀得到蛋白质-洗涤液复合物；

（5）摇晃以混合溶菌产物，离心除去细胞DNA；

（6）上清液中的病毒性cccDNA从等体积的苯酚中提取；

（7）HBVcccDNA用一种新的方法进一步净化。（该方法通过RT-PCR对HBVcccDNA进行定量）

（8）净化后的HBVcccDNA通过RT-PCR检测，PCR引物为：

HBV-cccDNA-F:5’-GTCTGTGCCTTCTCATCTGCC-3’，

HBV-cccDNA-R:5’-ACAGCTTGGAGGCTTGAACAG-3’

之后，按照RT-PCR试剂盒操作进行目标RNA的定量检测。

乙肝病毒的DNA和cccDNA的检测结果见图2中的A图，由图A结果分析可知，在HepG2.2.15 shNDC80细胞系中，干扰NDC80使RNA水平处于低表达。

二、HBsAg 、HBcAg的检测：通过免疫组织化学染色实验间接分析HepG2.2.1.5细胞和shNDC80细胞的HBsAg和HBcAg。具体步骤如下：

1.在4℃下，用4%多聚甲醛将转染细胞固定20min，在Triton X-100中通透；

2.在37℃下，用含有10%山羊血清的PBS孵化细胞；

3.在4℃下，用含有HBsAg(BM0064)或HBcAg(BM0060)的特定的鼠类单克隆抗体孵化细胞过夜；

4.滴加二抗试剂（生物素化二抗工作液），加PCS30min；

5.使用试剂盒显色；

6.与苏木精进行对比染色，再依次序在酒精和二甲苯中脱水；

7.以PBS代替一抗作为阴性对照。

染色结果见图2中的B图。

实施例3

一、细胞生长曲线

1.将HepG2.2.15细胞和shNDC80细胞分别用0.25%的胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液，转染了siRNA的HepG2.2.1.5细胞为实验组，未转染siRNA的HepG2.2.1.5为对照组；

2.用Freshney计数板对存活细胞计数：细胞浓度调整至1x10⁵/ml，即1ml细胞中大约有1x10⁵个细胞，置于12孔板中的3个孔内；

3.分别于24h、48h和72h后对存活细胞进行计数，并用平均值绘制细胞生长曲线。

结果见图3中的A图。

二、细胞活性测定

用MTS含量测定不同时间点的细胞活性：在96孔托盘中，通过MTS含量定量测定细胞活性。96孔托盘中，细胞密度为1 x 10³。培养24小时后，加入测试药物（测试药物为MTT，全称为 3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝），在37℃下，将培养液孵化不同的时间（0h，24h，48h，72h）。被治疗的细胞以1：10的比例浸在MTS试剂中，在培养基中培养4h。每个孔的吸收值用酶标仪测定，吸收波长设定为490nm。每个样品测定3次，做三次平行实验，并绘制扩散曲线。

测定结果见图3中的B图，从图B中可以看出，在shNDC80细胞系中，肝癌细胞增殖的数量很少，活性很低。

由实施例1-3的结果可知，NDC80是乙肝病毒感染导致肝癌发生的关键因子，该基因有助于进一步了解癌症机制，为肝癌的防治提供新思路及策略。

SEQUENCE LISTING

<110> 中山大学附属第三医院

<120> 一种肝癌基因NDC80及其应用

<130>

<160> 1

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 45125

<212> DNA

<213> NDC80基因序列

<400> 1

1 actgcgcgcg tcgtgcgtaa tgacgtcagc gccggcggag aatttcaaat tcgaacggct

61 ttggcgggcc gaggaaggac ctggtgtttt gatgaccgct gtcctgtcta gcagatactt

121 gcacggttta cagaaattcg gtccctgggt cgtgtcagga aactggaaaa aaggtgactg

181 aatgacatcg gattaacttt gtttctgcag agctgttctg gaggaagaaa gtgatggcgc

241 caatgactta aatttagagg tcctgaggcg atgttttggt gtttgtttgc tgttgggaga

301 agcctcgagg ccaaaactgt gcgaggcgct ggtttcacgg gatctattaa atttctagtg

361 gcaacgattt cccaaggagg aaaggggagg gcctggggga cactgatgag gagtggaggc

421 tcgggagagg aaacggggaa gaattgaagg gggcggaaag agatggacaa gagaggactc

481 gttgggtggg ttgcgtctga atactagtgt agcttcttat ggccgtgtag gactgcgtgt

541 agaagtcttc atcttaaatc atgagagcta cattctaagt ggagattaaa cgtggacaca

601 caggtgtgag tggaaaagtt gaatagatga acaagcgcat attgaagagg aaataggcgg

661 ccaaaatcaa gaagagtcta atcagtgtaa aagactaagg agtacccaga gaagtaaaag

721 gattgtcacc ttcctgaaag ccagggcagg acctgagaag gctgggtgca gagatgagac

781 aggatcaaaa gttttgtcaa tcatgtgtat cctaggagac aaatttttta gcagatgtga

841 agggagtgac ctgttaatgt ggtttgtaaa tggaggcagc ctatagacca ttttatggac

901 cggatgattt atccttgttg aaggggagat tgatgccaaa agggcagtaa ttgaggaaac

961 aatgggttaa ggacagagca ggagagattg acattaggaa aacagaataa ttccattctc

1021 tgaaaccaaa gaaaaggaaa cattttgagg tgaataagag aatttgaggt aatttttttg

1081 tcttcctatt gaaataggca cagccaacag cagtaatgtg gtctgggtaa cagacagggc

1141 tttagctacc acggataccc ttgtgaaggc aaaaaccgta acttactcgt ctttgcatct

1201 cctgcattgc ctagcacact cccctatata tatagtgggc agttaataaa tgtttatgtt

1261 gaatattttt aaatggaatt aaatagatgt tccttgcaaa tgagaacttc agtgtacatg

1321 aacaaaaaag agatacccca ggggaaagat gatgatcttg aagaaacaat gaaacctgac

1381 tgtctttctg tttaaggata aatagttgct taatgtacca tctctgtctg gaaagttttt

1441 tttaaatact gaattcgtga atgtaggtca taagcatgaa gcgcagttca gtttccagcg

1501 gtggtgctgg ccgcctctcc atgcaggagt taagatccca ggatgtaaat aaacaaggcc

1561 tctatacccc tcaaacgtga gtatttccct tgtggttcta atttgcatgc tttatcatct

1621 taggcaaaga aatcataaga aatagttaat ataaagatgt aatatgagtg atgtcttggt

1681 gaatcttgtc tgttcccagg ggtacctaat tttggatcaa tgaaatctaa aagtgggcat

1741 gatactctgc taggtgttgt ttgtgtcatt tgtttcacaa atttccaaag ccaaatgctt

1801 taccaggcac cccctaaaag gactgttaat tcttgttcag tactctctta tttttctctt

1861 ttattctaga gctacttgtt taagcaggct ctgtgctgta acttagagtt cactgagata

1921 tttccaatta gcaaagcttc aatcaaatca gagcaaaatt atttgctctc ataaggtata

1981 atatagtagc agcctacaaa acaccactcc tccgaactct ttcctcaaga tttgctggaa

2041 aaatatctga aagaacctgc tgtcataaac tatagttttt cattatgagt gattatcttc

2101 cagataagag aaggctattt gtaagccatt gtagagctgt ataattcttc tctagtaccg

2161 aggtacaagt tacttgctaa ctgtttttaa attacttgga tttacatagt atgagcctat

2221 gttactttta gaaatttgaa atatttatat atttttcctt ttgaatactg taaaccaaga

2281 aaatgtttgt gctgttatac attacttata ccaaaaaaag ttatgccttt aattgtatta

2341 gaagctaaaa ggtcaccatt gtcaatgttt ttttgcctgc agtttagata atgtaataag

2401 tgcagctaca ttctaataca gagcaggctc taaaaaaaaa aaatgtaaat gtggttaaga

2461 taatggaaat cataatgtag atagggtttt tgttctgcag agaagcaaaa gacttaaatc

2521 tgcataacaa gccttacctt tgaccatttt gtcttaactg gacttcctac ctacactttt

2581 ctttctcttg gtaaataagt gaaataagca gggaacagac aaacagcaca tgttctcata

2641 ggtggaagct aaaaaagttt atctcataga agtaaaaaat aaaatggatg ctagaggcta

2701 ggaagcatag ggagaagacg gaaataggga gagatctgtt aaaggacaca aaattatagc

2761 taaatgggag gaataagtcc tggtgttcat agcactgtat aatgactata gttaacaata

2821 atatattgta tagttttaaa tagctaggag aatattgact gttcccaaca aagaaatgat

2881 aaatgtttga gatgatggat atggtaatta ctctgatctg atcactgtac attatatgta

2941 tcacagcatc actgtgtacc ccataagtag gtacaattat gtgtcaattt ttaatttttt

3001 ctgttaataa tttaaaatca gaaagtaata ataataatga tatttaggcc tgaaagtatg

3061 ttctgtgtct ttgggctaca aattttctat cttgtacttt accttcaggg ttttttttta

3121 accttgtttt tactctttgg aaatgcaaat ttagggtaga aaatgtttag atagttatta

3181 aaaatgagat gagtaaaaca gaccctgctg aggttaaaac gaagactaaa tctaccaaag

3241 ggtacataca ccagagggac ctctgctggt cccccaacat tacaagcatt ataacttata

3301 gtaccatgtt tagcccatcc tatttataac agctttcatg actgctaaac atttttatga

3361 tttttgaatt atttttatag ctagtgggga agagttgttg gttctaatat atttctaaaa

3421 gtttcttgag ctaattttaa tttttatttt aaagagttgt tttctatttt tcttaaagca

3481 aagagaaacc aacctttgga aagttgagta taaacaaacc gacatctgaa agaaaagtct

3541 cgctatttgg caaaaggtaa ttatattttt cattagctct aataaaggga ttcttatagc

3601 catacgttgt tgccctcaga gaacaaatac attagatgac atggttcctt tcgagagaaa

3661 agttataatc tagttttcct ctgattttaa atggttaaaa ttttagttta catctgctgt

3721 agacagtgta gctaacacat tcagaccact atttcattgt tacaagtaaa tagttgattg

3781 aaaattctat acctagcttt cagacacggt ggagtcatcg cattttaaaa taaggagtgg

3841 ccaggcatgg tggccatgcc tgtaatccca gcgctttggg aggctttgct tgagtccagg

3901 agttcaagac cagcctgggc aacgtgacaa gaccctgact ccacattttt ttaattagcc

3961 aggcaggcat gcagaccagg tgcagtggct cacacctgta atcccagcac tttgggaggc

4021 tgagatggga ggctgagatg atcttgagtc caagagttcg agaccaccct gggcaacatt

4081 gcaagaccct gtctctacaa aaaaaaattt tttttaatga gccaggcttg tagaccgggt

4141 gtggtggctc acacctgtaa tcccagcact ttgggaggcc aaggcgggca gatcacttga

4201 gtccaggagt tcaagaccta gctgggcaat atggtgaaac cctgtctcta caaaaaatac

4261 aatgattagc cgggggcagt ggcacatgcc tgtagtccca tctacttgga aggctgaatc

4321 aggaggatca gttgaaccca ggaggtggag gttgcagtga gctgagatca taccactgaa

4381 ctccaccttg ggtgacagtg agactctgtc tcaaaaagaa acttttttca atttaaaaat

4441 tagccaagca tcatggtgca cgcctataat cctagctact caagaggctt aggcaggagg

4501 tttacttgag cccagaaggt cgaggctccg gtgagccagg ttagcaccac tgcactccag

4561 cctaggcaac agagaaacac cctgtctcaa aaaaataaat gtaaaatgag gaaacattat

4621 ctagtccaac attttagtca tttttacagt ctaaaagatt aatgagaact ccacagagct

4681 tttgttttat gggctatatc tgtcaaaatt aaccatagta gaaattaaaa ctgagaaaaa

4741 tttaaaatat gcattcaatt taaaataaca acccattaca tggtaacata aataacatgt

4801 tttcaacttt taaaaaacat attttcaaaa ataaaacaat ttcagtaaga agagtgacat

4861 tgttttacgt ttttgcaaat ctcttatggc ttaatagcag acagctagat tctaatactt

4921 gcttctgcat ttaatctgtt acaatatcat acatcatgtt accagcctct ggaaaactcc

4981 actgtacact tgagagattg aaaatgaaaa gagcaaataa catcttagtt ttatcataaa

5041 aatagttttg actgctcagt gatccttaga caacactttg agaacaacca tctatctgga

5101 gtaggtcagt ggttgtctag gctgcaggtt ggagaaggat taactgttaa ggggcataag

5161 gagactttgg gggatgatag aaatgctcat attttgattg gcataagtga cacaaatgcg

5221 tttattgtca aacttcatca aactgtatgc tttaaacagg cgcattttat tctaaacaaa

5281 ttatgtcaat aaaatagata cctttaaaaa aaagttcaac cccaaaatta agacaataaa

5341 ttatgttgtt gtctcaccaa aacaaaatat aactttaaga caaacctgtt tcttccattc

5401 ttttgaaaat atttagagat gaagtacttg tcacctttta aaaaagtctc tgccatgaaa

5461 ccaatttggt ttcattggtt taaacttcca tttttggtat ttatttcagt tgatgaaaaa

5521 tcttaaggta tttttgtaat gtaattcatc tcagagctaa actttagaga tgatagtaat

5581 tacaaaatct aatatttgtg gagcattcct ataggccaga cattgtttta agtgctttat

5641 ctatattaaa tctttcaatc aatcctcaga actgccctgt gagaaggtac tgatactgtc

5701 tgcgcttttt tttttttttt ttgagatgga gtctcgctct gtcgcccagg ctggaatgca

5761 gtggcgcgat ctcagctcac tgcaacctct gcctcgccag ttcaagcaat tctcctgcct

5821 cagcctcccg agtagctggg attacaggtg cctgccaaca cgtctggcta atttttttgt

5881 acttttagta gagacgaggt ttcaccatct tggccaggct ggtcttgaac tcctgacctc

5941 gtgatccacc gcctcagcct cccaaagtgc tgggattaca ggcatgagcc actgtgcctg

6001 gccaagtgtg tgtttattct tgcctcgttt tacatcctta tctttaactg ctgtaacctc

6061 atattttact cttcgttatt tgctcctttt ctctgcttta aataagagaa ttctgtttag

6121 ttataagaac gtaatgtttg atgttgatgt taaaatgcaa aactgccttg aaataattta

6181 gacttgatca cagaagcaaa tagttttaac tggctgttta aaaatatatt tccagaacta

6241 gtggacatgg atcccggaat agtcaacttg gtatattttc cagttctgag aaaatcaagg

6301 acccgagacc acttaatgac aaagcattca ttcagcagtg tattcgacaa ctctgtgagg

6361 tactttagga ttttaatcta aactgtgatt gttgtcatag gtattttcca ataattttcc

6421 attacaaaac gtttggtggt tcataaaaat tattgtagtt tcttacagaa aatggttatg

6481 cacataatgt gtccatgaaa tctctacaag ctccctctgt taaagacttc ctgaagatct

6541 tcacatttct ttatggcttc ctgtgcccct catacgaact tcctgacaca aagtttgaag

6601 aagaggttcc aagaatcttt aaagaccttg ggtatgtata tttcttatta gtttagagac

6661 atgactggca cacagagatg aaacaaatta aatcaatttg taaaaagttt gagttacaga

6721 aataatatgt tttaagatga ccactgtggg caatatatgt aggataaatt gaagagaaaa

6781 aaagcaactg cttacaaaaa aacaaataaa aattgctagt ggtagaagca agaaggatta

6841 acaaattgtt agtaactgat caagtttgat gatgggtaca gacggataaa atccactttt

6901 ctttgtttaa aaaaaaacta ctcgtagatt attacagagc aacagaagac agaatataaa

6961 gccctgaact gctgaagtga cagagaatag aaaagacaga ctggatacca cagattttac

7021 agaagccaaa aacaaaaaaa aacaggattc acgcctggtg aaaacagagt gtgatgaaat

7081 tgaaagtggg aagaatggat ttggaggtgt acatacatgt catttattgg gggtatattg

7141 aatttgaggg aacaaaagat gttttgggag agtagtccag catattggtt gtataggtca

7201 agttctgcag cttcggggat agatgtacaa agtaatctac agagaaatac acagagataa

7261 gatgactaag gatagaatcc taacatatct tacctctaaa caagtcaaga ctgagtgtgt

7321 atgtggaatt ttttaaatgt aacttcttga ttaaccatta tctttactaa attataataa

7381 cattaaatta gcttatgttt ttctgatttc tcataggtat ccttttgcac tatccaaaag

7441 ctccatgtac acagtggggg ctcctcatac atggcctcac attgtggcag ccttagtttg

7501 gctaatagac tgcatcaagg tatttgattt gttcttttga aatgtataca tgggaaaggg

7561 tttttttcct caaaaaaaat attttctctc ccagtctttt gacagtattc tcaaagtctg

7621 cttcagagtt ttcatttttc aaagcacatt tgattttaag tttttcaaac tattatcaca

7681 aggtaaaagg aagaaagtac caattgataa ggagattatt tattatcatg aggttttaca

7741 actcaaaaaa atgagtcaat aggaaattca ttttttattt tccctcatga aattcgtttt

7801 tacccttttt aattaaaatc catattcact gcaagaagtt tggagaatac agtgatataa

7861 ccataatctc caaactcaga caataacata aaatgtttcc ttgtgatatt ttgttttgtt

7921 ttgttttttg tttttgagag ggagtctcgc tgtgttgccc aggctggagt gcggtggcat

7981 gatctcagct cacttcaacc tccgcttccc aggttcaaga aattctcctg cctcagcctc

8041 ctgagtagct gggattacag gcatgcacca ccatgcctgg ctaattttct atttttagta

8101 gagacggggt tccaccatgt tagccaggct ggtctcaaac tcctgacctc aggtgatctg

8161 cccgcctcag cctcccaaag tgctgggatt acaggcctaa gccaccatga ccggcccctt

8221 gtgatatagt ttaaaagtgt gtgttgctgt gcaaagtact atatgtatgt tttttaaact

8281 tttgatacat accgacaaat ttttctctag aaaacttgta ccaattaaaa gctcaacaat

8341 gtttgagcat acccattttt ccaaactgtt agcattgttg ttttaaaatc tttatcaatt

8401 taggaggtga aaaatagctt gtttatatat aaatgtgtgt gtatatgtgt atatgtgtgt

8461 atgtatatat atttaaacaa tttatgtttt tatatggtta tttttctttt aacttgcttg

8521 tacatggttt ttcaggcaag ttttatttca cctttgcttt ttgccatgaa tttgaatctt

8581 tatatattaa acttactgat ggttttaata gttggcaaca caacaagcaa aaaaaattga

8641 cagctaattt tttcttattt acattttttg tttttaaagg tgaatttttt acatttatta

8701 taatatctac tcttctgatt tttttttgtg ttgatttgca agggtgccat tttgcaagtc

8761 aaaaatggtc gagtcagaga aattagttcc tctctatatg gtgcaagcaa tttttttctc

8821 tctctctttt tttttttaat ttcatgtgct gttttatctg ttcagaaatg tgagttttta

8881 tctaatttaa tgcagtctct ccttttgtag cttctgagtt tcctgtccta cttagtgcta

8941 gaattcctaa agctaatact gttcccctga cattgtcttg gccatcagca aggctttaac

9001 taaatgaagg caggcactgg gtatatggat tttgacccag gagccatgct ggtacataca

9061 gtaccaccca ttgtcaagag agtagaattc caatgccata gcccattaat aaaaatccaa

9121 gtttcattgg actttatata taacatttat gcattcaatt tgtctctccc cggtgatgcc

9181 catggacatt tgataactac ttttttggtc tcaccatcag attttttttt tttttttttt

9241 tttttttttt gagacgagtc tcactctgtc gcctgggctg gagtgcagtg gcacaatctc

9301 ggctcactgc aacctccacc tcccaggttc aaacagttct ctgcctcagc ctcccgagta

9361 gctgggatta taggcacccg ccatcacatc cggctaattt tttgtatttt tagtagagat

9421 ggggtttcac catcttggcc aggctggtct caaacttctg acctcgtgat ccgcccacct

9481 cagcctccca aagtgctggg attacaggca tgagccacca cgcccggccc tccaagccca

9541 ttatttaagt tggaatcccc tcctttttat attgctttgc atgatgtgat gtattaatcc

9601 gtgagagact gcaggtttct ttttctaatt ttctttctta cttaacataa gcctagaaat

9661 taagccacat ttaggaaggc cttttttcct ccccagtgtt ttttaaaaac aattttacaa

9721 attttctcgt agtattttgt atggcttctt tgtgctgtgt ttaaatctta attcatctcc

9781 aatttatttt agtataagaa agagaaggcc ttctttttta aataattcac tcatgtatca

9841 cagtcccatt tatggaaaaa ctgatattgg tcgggcactg tggctcatgc ctgtaatccc

9901 agcactttgg gaggctgagg caggtagatc acccgagatc agaagttaga gaccagcctg

9961 gccaacatga caaaacccca tctctactaa aaatacaaaa atattagccg ggtgtgatgg

10021 tgcatgccgt cccggctact tgggaagctg aggcacaaga atcatttgaa cccaggaggt

10081 ggaggttgca gtgagccgat atcacaccac tgcactgcag cctaggcaac agagcaaaac

10141 tccatctcaa aaataaataa tattttcccc acagttttga actgtcacta gtatgttctt

10201 aattaaacct atttctctga tctttttttt ctatccctgc ttcatgacca tactaattcc

10261 tgtcactttc taatatattt tatctagaag atgaacattc ttacttcttt tcacaatgtt

10321 agctattgtc gtatcctcac tctctaaatt attttttcag attttaacaa aatcttgtga

10381 ttttgttatt attgacataa cattgaattc atgatatata aggggaaatt tccatcctgt

10441 caatatttaa tcttgtcata tgggaaagtg ttaaatctca tttgttcatc ttttttgttc

10501 cttcattaag attttgtttt tgttttttcg ttctatggtg gttttttgtt tgtttgtttg

10561 tttgtttgtt tgtttgtttg ttttgaaaca gagtcttgct ttgttgccca ggctggaatg

10621 cagtggcatg atctcagctc actacaatct ccacctccca ggttcaagca attctcatgc

10681 ctcagcctcc caagtagcta ggattacagg tgcccaccac cacgcccagc taatttttgt

10741 attttcagta gagacagcgt gtcaccatgt tggccaggct gatcttgaac tcctgaccta

10801 aggtgatcca cctgcctcag cctcccaaag tgctgggatt acaagtgtga gccaccatgc

10861 ctggccatgt agttttctta atatcaaaca acatattttt tatcaatgcc atgtgttttg

10921 ttactatgat gaacagactc tcttttttta attctatttc catggtgatt attactaaaa

10981 gagttttttg tgtttactac ccttattgaa ttgctttatt acaactactg ttctcagttg

11041 atttctatta ctaaccactg tttttaaatt aaatattttt cattgtatcg tttagtatga

11101 tatattcagt agaagataat gttttgcatg ttgaagttta ttcactttta tcaaagaatg

11161 atctttgaag gttatcctat gcttttgcag gatgtattga gattattctt gttatcttga

11221 cctattgatc taatatgttg atttcctaat gacctctatt tgttcattgt ttattattca

11281 tttgttatgc tcctaaattg tttgttcatg ctttgtaaat aaactttgat ttcctatttc

11341 actatgcctc cttgcacaga acttggcaca taatcagtcc ttattacagt gtctaagtga

11401 taataattta gctaaagtta ctaagtcttc tctactaagg accataaata ggagggttgc

11461 atacacttca ggagcgtctt gttagccttt tggttagtga tcaaagtgga cttggacctg

11521 acttatccca gatccctctg tgtccttttc ctcctctgat gtttcacaat attaagaagt

11581 ggtgttagag tggaaaacgc cacctttcaa tgaaaacatg attcaaatct atacttttta

11641 tatctataat tacaggttga aactatttca accagtcttc ctagttcaca attcttcagt

11701 cctttcagta gtcttttcta tagctcttgg ggatctgtat gtccctgtgt aagactctcc

11761 ttgaatcttg caaagtagca agagttttca taaggccctt ggcaaggtga cagaagctgt

11821 ctttaccctg atgacaagat ataagattct gttccttatc ttgggttctg ccctacatgt

11881 ctttcagaca ttattaaatc tgtgtgttgg ccgggcgcag tagctcatgc ctgtaatccc

11941 aacactttgg gaggccaagg tgggtggatc acctgaggtc aggagttcga caccagcctg

12001 gccaatatag tgaaaccccg tctctactaa aaatgcaaaa attaggcata gtgacaggta

12061 cctgtaatcc cagctactca ggaggctgag gcaggagaat cgcttgaacc caggaagcgg

12121 aggttgcagt gagccgagat ctcagccact gcactccagc ctgggcgaca gagggagact

12181 ccgtctcaaa aaaaaaaaaa aaaatctgtc tgccacctga ggccttgtcg aaaaaagaca

12241 aggtagaaga cccagttgtt agagctcttc tgcatccgcc ttagataaac aaagaatctt

12301 ctgaatgcct ttagaatagg aaaggggtag cagggcaaac aactctaggc tgaggacatt

12361 gtctccctga gaaatcctgt atgcgaaacc ccattcttct tttatgtact cctaacgcat

12421 agtccttttc ttagaagtta gtattcttat acttagtgtt cattatacta ttagatacct

12481 attgatatct tggccaggtg cagtggctca tgatgcctgt tattcgctgc attttgggag

12541 gccaaggcgg gtggatcacc tgaggtcagg agttcgagac cagcctggcc aacatggtga

12601 aaccccgtct ctactgaaaa tataaaaatt agccaggcat ggtggctcat gcctgtaatc

12661 ccaggtactc cagaggggga gacaggagaa tcacctgaac ccaggaggca gaggttgcag

12721 tgagctgaga ttgcaccact gcactccatc ctgggtgaca aagtgagact ccgtctcaaa

12781 aaaaaaaaaa aatacatatt tatatctaga tatctctata tcaagataat agatattaat

12841 agataatata tttatatcta gtatatctgt gtttatatct acatttttat atatttatag

12901 taatttcatt taaattttct attttttcat gttttaaatg ttatgttttt aaaagaagat

12961 ataaaaacag gcattccaaa atggaatttc tatgccttaa aaacctttaa ctattttcct

13021 tttggcttgt caattttaac catctgaatg ttttgctata atttatgtta tcacttgcag

13081 tttaaactat tgtatttcta aagattttct attgtaaaat ttcatctaaa gttcatattg

13141 tacatactga aggagttact cgattaacat ttgagcacca gaattgagct caaagagaaa

13201 aattattatt ggctcacctt ttatgtggca attctgtttt ggattcttag ttaaagttgc

13261 attaaaatgt gtatatttgc acttactggg ttaataacag cataaaggtc aacatttttc

13321 tctgtagaac agaagtaaat atagagtcca tcctttctag atcctgaaga gtttagttac

13381 taaacaaaag ggttttgaaa ttatcgaaag gatacctgca aattgtttta ttcgaaagaa

13441 agtcaaaagt gttaatgttc aatataataa cctatcaaaa gagactttta gttacacaat

13501 aatgtaaatg cttctaaaat tgacactgaa aacagaattt gccaaaaaat gaaagttgtg

13561 tttttcagat caacttgctt ttcttgcttg tgtactaatt agatacatac tgccatgaaa

13621 gaaagctcac ctttatttga tgatgggcag ccttggggag aagaaactga agatggaatt

13681 atgcataata aggtaccatg tattatcata aactgtaata atgaattgcc ttgatattat

13741 tgtgtcacta ttggatttaa tacagatgcc cctcgactta tgatagagta ataaaccgac

13801 tgtaaggtga aaatatcatg tcaaaaatgc atttaataca cttaacctgc caaacgtcat

13861 agcttggcct agcctacctt aaacattctc agaacaatta aactagctta cagttgggca

13921 aaattaatct aacacaaagc gtattttata ataaagtatt gaatagctct tgtaatttat

13981 tgaatactat actaacagtg aaaaacaaaa aggttgtatg gatacttgaa ggatggtttc

14041 tactccattg cttttgcacc atcagaaagc tgaaaaatct gaagtcaaac catcgttaag

14101 tcagggattg tctgtatatt cttctgtaga gttgtttttt tgcttcctga aaacattata

14161 aatttgtttt ttttaatatt aatggatctg tttgaatcac attataattt cttaaaaata

14221 actaggcaca aaaatttgaa aattttaact aagtaaaaaa tggaagggga ttggaattaa

14281 atcataacat gttatatgtt atagacgtaa tgtttctttt cctcctttat gtcgtggaat

14341 gaagatatca gtattggcaa cattatttta atgtaattct ttgtcaacac aaaacataat

14401 aggttaagtc ttaagatatt gcacgtggat aggttgttta ttttgttttg acctttttca

14461 ttagacatat tgccccttag cccagagtcg ccacttccaa aagtggttga gataaaggaa

14521 acattaagat tatacattaa tacttcctag catacataaa aaactagtca tcacatgggc

14581 cacttagaag aaaaactatt ctctgttcta attctaacct tcattctttg aaacttttgt

14641 cacaaaagaa aagtggaaat aatttcagtc ccatctttta tgactgcctg ggatgtagtt

14701 caaagataca tcaactgact agtgttggca tcattgcctt tttcttttta acaaaaaata

14761 aacatgcgcc tttactactt caacaatgat cccagttgga aaggctccta gaaaaccttt

14821 gatcccaccc ttgagaaaat tatcctccca cattgcaata tgtatattgg gctgcctcta

14881 attacccctc agttttcacc caagtacatt acaacatcta ttaagtatta aatgtcttgc

14941 cagacacagt ggctcacacc tgtaattcta gcactttggg aggccgaggt gggcagattg

15001 cttgagctcc agagttcaag accagcctaa gcaacatggc gaaaccccat ctctgcaaaa

15061 agtacaaaaa ttagctgggt gtggtggtgc gtgcctgtgg tcccagctac ttgggaggct

15121 gaggctgcag gatcacttga gcccaggagg tcaaggctac agtgggccaa gatcatgtca

15181 ctgtactgca gcctgagtga caaagtgaga ccctgtctca aaaaaaaaag tgttaaatgt

15241 cttgacatcc atcctaaagg ttaaaaaatt attcttgctc tctgagctat tatagctatt

15301 atttcaaatg acaatatata gagaagcaca tgggaaacta taaagtactc tttgtaatta

15361 aagaaagttg tcagagtatc tggcttcaca agtttccgat actcagcttt gtgagtccac

15421 aaactcgata tttttaaacc tataagatca aaattgacca agcttaagga aactgattca

15481 gtcttaacca aattcacagc aactgatctg aaggagaatg aaaatgtatt aatttaccat

15541 cagtgataca cctttccagt tacaggaata ctcagactgc ctattcaggg tactcacttc

15601 aaggtcacct taataagcaa tgaattagca caaagggaat tggtttgtct tgagggatat

15661 ttacttcatc taaggtatgg aaaattctga tcatccattc ttgccttctc ataaagtcta

15721 cattctcagt gaccaaaaca tctcatgaat gcaaaatata gtgttatttt ctcttggata

15781 aatgttaaga attctagtat tgtactgttt agattgctac tcatcatgca attcattttt

15841 tagcctgaag ttacaatgta attgtagcct tcattaatta catttgggtt tttacaatta

15901 gaccttatca attcaattgg acttagatga tcagcagttt atttaaattt ttcatcaggt

15961 gctttattcc taaagatgat taagtttgtg cattttatgt tgaattacat ttattaataa

16021 gcttccctgt ttgtttgacc ttctcaaaat tctgaaggta tggctgtttt taaatattgc

16081 ctttatccaa atttaagtgt tattttatcc tcattattca tatttagaag tagcagacta

16141 aataagtcca tatagcataa ttatatagcc taggtttttg tctcttattt ataggttcat

16201 ctgactactt agtatttctg actatttttt aaattcaaat ataaatttcc acctagaaaa

16261 gtgaaacaga ccaaatagag aatcataact ttgtttctaa aatctgctta accccatagt

16321 tgtttttgga ctacaccata aaatgctatg agagttttat gagtggtgcc gacagctttg

16381 atgagatgaa tgcagagctg cagtcaaaac tgagtaagtg ttctcgttct tagggtgctt

16441 gcttttggtc atttcactct gctcatggag tggtaattta tttaccatat ccagtgttca

16501 tatgagctac ttactttaaa tgtatctgga tgcctactga tttttatctt tgtggtttct

16561 ttggtggaga gaagttaaac aaaaagaata ctagtgttgg agccagacct gagccataac

16621 atcttactgt ctgtggcgcc ttaataaaat acttgacctc ctgacaaagt gtagcagcag

16681 tagatgacag tataataaag tcataatata ccaaacatgc taccagaagc atagacaata

16741 attagcaaat gctattcctc ttgggggata atatccctac gttgtccttg cttactattt

16801 gagaaattaa agcaccaatt agtcaaaaga cctaaggtct ctttcaaaat ttgtggcaaa

16861 aagttaacaa gacattatac ttccaaatat gtaaggaaaa tctttttttt tttttactca

16921 tttacaacct agtgacatac agtatttact agataactct aaaacattcc agaggtatta

16981 ttttacattt tcattctttc tattgaaata gtcttgtata taaaatgcca aaatggaagg

17041 taaaatagat aaatggaggt gaagctattc ctccaacaat ggaatcaatc actttgccag

17101 tattatcaca aaagctgaaa gcattccctt atagtcccct gggattgtat cttcctgaag

17161 agtaaccagg acaatttcag cttgttcaca tgggaaaggg agcaaaataa atggctttgt

17221 tttaagagag gaaaatttag agtgatctaa gcatctaatg agtaatttga tatttctgta

17281 tataattaac caagcataaa aactgcattc atttattcaa ataaatattt tttgtatacc

17341 tactatgtgc cagccaccat ttaggcactg aggatacagt aatgaatagg ataaaaacct

17401 ctgcccttat gagcttacat tttagtagac agaaagagga aaataatgaa atgagcaact

17461 ttaagtcaaa tggtgataag cgctttggag aaaaatcaag caggacaagg agagtcgaag

17521 tacggtggag taatggaaag ggtttgctgt tttacaagga tgggatgtac ttcactaata

17581 gtgttttggg cagagaccag aaggaagtga gggagggagt aatggtgaaa acttgggaaa

17641 gaatgttcta ggcggatttg aggtcttaaa aagcttttgg attttgtctc cagaggattt

17701 atttaatgtg gatgctttta agctggaatc attagaagca aaaaacagag cattgaatga

17761 acagattgca agattggaac aagaaagaga aaaagaaccg gttagtaaac atgtttacac

17821 acttacttga gagctctttt agacttttgg gtgtccttgg atattagctg tctttatcaa

17881 aattttaaaa aatagattaa caaattaagc ttcttaaaag ttaaattttc acctagaaac

17941 tcccaatgaa aacatgtttg gtatctgtgg agccttgttt tcccttgcgg tctatcagtc

18001 ttagactaat ggtgctctgg atatgatgaa agattcttac ctacttacat aagatcaaaa

18061 gtacttttga acaaaggccc tgtgttatat acctctaggg agcattagtc acaagaagcc

18121 ctgagttttg gaggtagtgc aaaaggaatg gttaataaat gggtttatat agtatattgt

18181 atcctgagtt ttctaaaagc taaatattaa tatccagtta tctaacttta ttttctgcat

18241 tattagtgaa gcactcaaac tgttgttgta aaataccaga ttttaaatat ttgtgctttt

18301 tcaaccctag caattgtggt tttttttttt ttctatttca aactgacagt gtagtcccct

18361 tttagttctt ttgacttcct ctaaaaatga aaggaaaact caaatctacc tttctctaaa

18421 ataaatttaa ataatattgc tttactttaa aataaaatat ggaatggtta ttaagaataa

18481 ctaaagttat attcttttct cttaaagaat cgtctagagt cgttgagaaa actgaaggct

18541 tccttacaag gagatgttca aaagtatcag gcatacatga gcaatttgga gtctcattca

18601 gccattcttg accagaaatt aaatggtctc aatgaggaaa ttgctagagt aggtaagcag

18661 agctaatgct aaaagactgg gatgcgaacc tgtgtgggat ttgtcacatg taaaaacagc

18721 tttgttatcc atatcttttg ttgttctgtg gtacatgctt agagcaggct accaagtttt

18781 cagtgtgttt cgtatttgtt tcctaaggct gctgtcacaa atgatcacaa gtttggatgg

18841 cttaaaacaa cagaaatgta ttatcgcaca gttctagagg ctgttccagc agatctgcat

18901 ccctccaagg actcagggag gatctattcc ttgcctcttg cagcttttag tggctggcag

18961 cattactggg ctatgttcac atcactccga tctctgcctc catcttcaca ttgccttctc

19021 ctctgtgttt gtactctact acctgtgtga aatatctccc tctgcctcta tcttataagg

19081 acatttgaga tgagatttag ggcccacctg gataataata cagggctctc tcttcatctc

19141 aagatactta atcacatctg caaagaccct tttcccaaat aaggtaattt cacagtttcc

19201 agagatagaa ctttatatat ttaggtggcc attgttcaac ctactactcc ttacatgttt

19261 tcaagcattt ggctttttga agccaagaag gacccaacct aagaaaacat gctgcctgaa

19321 tatagaaata tataaaaatt ctatacaaat atatactgta ttccactttg tggttaataa

19381 gccagataaa ccagattctt ttgttttttt tgagatgaag tcttgctatt ttgcccaggc

19441 cagtctcgaa ctcctgggtt caaataatcc tcccacttca gtctcccacg tagctgggac

19501 tataataggt gggctccacc atgcttggct ctaataagcc agattcttga tgtctgcctg

19561 cctcagtctg ctataactgg ctatcctcca tcactaccgc ctaagcacct cagcagctga

19621 aactgattga aaatcaaaat taaagctgca agtactacag ttctcgggga aaagagcaac

19681 caaagaaagc tcttttatgt cttatgtctt gtaagcttac tttcataaac acagcaatct

19741 taatcataaa attctgtaaa acactatggc acatgcaatt gcttgattct tctgcagtgc

19801 ctgaaggaga gtaaagaaag gtatctgcaa gtcacagagc cactgggctg tacttttaaa

19861 aataaattta ttgacaacta tactgttttc ccaggacttt gcctacttct gtttgtttct

19921 tttgggattt tgctggctgt gtctgtccca catgggagtt gtatacatgg cccttaggat

19981 atttgattta actcttagtc tatggagtat tgattgtcaa ctcaagacta gtaattacca

20041 gggttatttg ctgaatctgt tttttttttc caaataactc tgatttatat atatatattg

20101 gatttgctct aaaccaactc tttaaatata ttaactactt tacacttggc ccctaatcaa

20161 tgtcctttgt ttattcttca tgatgacaaa gaagcttgga ctaaattatt attataataa

20221 tttttataat gcaattaatc aatacttttt tttttttttt ttgagatgta gtcttgctgt

20281 gtcacccagg ctgaagtgca gtggcaccat ctccgctcac tgcaacctcc gcctcccggg

20341 ttcaaataat tcttctgcct cagcctcctg agtagctggg attacaggtg cacgccacca

20401 tgcccggcta cttttttgta tttttagtag agacggggtt tcaccatgct ggccaggctg

20461 gtctcaaact cctgacctcg tgatccacct acctcggcct cccaaagtgc tgggattgca

20521 ggcgtgagcc acagcacccg gcctttaatc aatactttct aatactaata ctttatcttt

20581 cttgtcagca tatgatcaag agaattgtca tacatccttc ttgttcttgt gagaactttt

20641 tctgatagct gcaaactcag taggtgagag agaaatactt aatcatttgc cattccagag

20701 tgatttagtt tgagacatta attttataac tgttaatcta agatgttttt attctatgag

20761 tgtttgaact ttcttgatta tgtaaagcca ttcatggcat gagtggatga gacatattta

20821 aattttattt tgtttttgtt ttattttgtt tttttttttt tgagagacag agtgtcactc

20881 tgtcgcccag gctggagtag agtggctcaa tcttggctca ctgcaaccct cgcctccggg

20941 gttcaagcaa gtctcctccc tcagtttccc aagtagctgg gactacagga gtgcaccatc

21001 atgcccagct aattttcatt ttttttagta gagacagggt ttcactatat gttggccaag

21061 ctggtctcaa actcctgacc tcaggtgatc cacccgcctc agcctcccaa agtgctgggg

21121 ttacaggcat gagccaccac acccagccat aaattttata gatattatat gttgtggatt

21181 ttttgtgcag atgcctgtga taaatgcata aagttttact ttatctaacc atgaatttgc

21241 tttaagttca ctgtgttgca aataggttgt aacaaaccaa gataccaaaa taccaatcct

21301 ctccaccctt aggatgactc tcttgacccc ttagtcatcc tcatcctttt gtcccagcct

21361 gctataaaaa tgctaatcat gttcaatata ggccatgagt cacagaaggt tggaaaacac

21421 tattggtaaa cagagaaagc aaaaacctga ccagtttggt atggttatca ctgaaaatgt

21481 cagtaaaata tgaataaact ctggtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg

21541 tgtgtctttt tttttttttt ttgagtcaga ctcttactct gtcacccagc ctggagtgca

21601 atggcacgat ctcagttcac tgcaacttct gtctcctggg ttcaagcgat tttcctgcct

21661 cagcctccca agtagctggg accacagatg tgtgccacca cgcctggcta attttgtatt

21721 tttagtagag acagggtttc accatgttgg ccagactggt ttcgaactcc tgacctcagg

21781 tgatccaccc gcctctgcca taataagtct tatctcattt tttcacatag tataaattat

21841 attcttatgc aggactgcgt taagatccag tagttcttaa acaatgttac caaataacca

21901 catatcccaa aggcagacag tcttcacagt gtacttttac ctcattgaag ttgaagctgt

21961 tcctttacaa tatttttcca cttcaatgtg aagtagactg ttaaggtttc attaggggtt

22021 taattatgtg tccttttaaa gaaaaaatgg ttttgacaat tcttccacaa ttcacagttc

22081 tcagacaata actttttttg taaatcatat agtccaacta tgttttgaat aaccagatgc

22141 tctttagtag acgaaatctc tcaatgcaac tgtaataaat aagcatctgt atcctgattc

22201 ttatttatgg catctcatca tataccagta tatcctggaa ccaaagtaag atgattttcc

22261 tgtggatttc ctacaatcca cttatttgtt ttaaaacaga atatttccgt catttataat

22321 ttctgtttgg atgataattc tgaccaccac ctttttatga ctgcttgaag ctagcttatt

22381 ttattttatt ttactttatt ttattttatt ttccgggagt ctcactctgt ctcccaggct

22441 ggcgtgcagt ggtgcgatct cggctcacag cagcctccgc ctcccagatt caagtgattc

22501 acgtgcctca gccacccgag tagctgggat tacaggcatg cgccaccatg cccagctaat

22561 ttagtagaga cagggtttcg ccatgttggc caggctggtc tcgaactcct gacctcaggt

22621 gatccgcctg cctcagggct tcccaaagcg ctgggattac aggcgtgagc caccgcacct

22681 ggccattgaa gccaatttaa tcaactatta catactcttc aaatttgctt taaagcagtc

22741 actttactag aagtaacaag tgtactggct ttcttctgta aactgttggt aaccacaaga

22801 aggcaatcta ccacagctcc aagctcttct atcctcacca aataagctac aagttcactt

22861 gtacttctct taaaagttaa agctacattc aatgagcttt ttcagaaaaa aatcaacagt

22921 tttcctgctg aacaaaattt tggccattgt ttcatggtcc tgagaaacct tagaaaaaaa

22981 cccactatac tgtgatgatg ggttttctgt ttgggaagaa ccagaatcac tggaattaat

23041 caaatatgtg tgactcaact gtcatggctt aatttttcag gcaggtagcc tgcacaagtc

23101 agttcatttt ctcatttgcc gtggcacaat ccccacttct aggcaactgt tttttctgta

23161 acaagaattt agaaagggat gattaacttt ctgaaataga ctgccttatg tgctttaatc

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23281 cttcttaacc ttcttcatgt tgtattagtg aaattagaga tcctttttct aggaaggtca

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23401 catattctct taaatattgg caccttgggg tatcatggag cctcagccta gaatgtccct

23461 ttgtccccat gcagggccat tcaaatgtgg atgcatgcat gaacccagga ttcttaatgg

23521 cagtcattat ttatgaagcc acattttttt ttcatgtagt actttttgaa aaccattgca

23581 agctaatagg gaaataagtt tcttaacata aaactttaat tgtcctatct tccagaatgt

23641 tataaacaaa gtaagatcaa aagaattatc tcaaaaaatg agaatataca tacatatgta

23701 tatatatgac tttgaaattt atatatatat atgagacttg gaaattttta tatatactat

23761 aaaaacatat atataatata tataatatat atacacacat atatatgact tggaaattta

23821 gatatcttag ctctattaca tgatggcatc tgtttctttg taggaattga agatacatta

23881 aaaatttggt ttttttccaa cacagaacta gaatgtgaaa caataaaaca ggagaacact

23941 cgactacaga atatcattga caaccagaag tactcagttg cagacattga gcgaataaat

24001 catgaaagaa atgaattgca gcagactatt aataaattaa ccaaggacct ggaagctgaa

24061 caacagaagt tgtggaatga ggagttaaaa tatgccagag gcaaagaagc ggtatgtcat

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24181 aagaagtcag tgggtagagt aaattggctt aagaggtaaa acattagcat tgacatttta

24241 atgaaacact catcccttta tgtcaattca gtaacatccc aatttctctc aaatttaaga

24301 taagttatat ttcataaccc aatgaaaaag taaacaaaaa agtctctaaa actatgaaaa

24361 taatgttcat aggtcccact ccttttactc tgtagaagag gaaatgagtc cttcattcac

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24541 actcccatga aatgagacct ctaataaatg tttggtgtac agggtactga ggaaacatat

24601 agtacaccta gcccaaattt agtgtacatg gtgtggggag atggctgaga ggtttttaga

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24781 atatccagaa tctacaatga actcaaacaa atttacaaga aaaaaacaaa caaacccatc

24841 aaaaagtggg cgaaggacat gaacagacac ttctcaaaag aagacattta tgcagccaaa

24901 aaacacatga aaaaatgctc accatcactg gccatcagag aaatgcaaat caaaaccaca

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25081 gttcaaccat tgtggaagtc agtgtggcga ttcctcaggg atctagaact agaaatacca

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25201 aaagacccat gcacacatat gtttattgcg gcactattca caatagcaaa gacttggaac

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25381 ttggaaatca tcattctcag taaactattg caaggacaaa aaaccaaaca ccgcatattc

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25621 taatgtgcac attgtgcaca tgtaccctaa aacttaaagt ataataataa taaaaaataa

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26161 agtgagccaa gatcccacta ttgcactcca gcctgggcaa aaatagcaaa actctgtcta

26221 aaaaaaaaaa aataaagtta aagacagtaa ggattcaaag aagtaggtag attctgacaa

26281 cttagaggta gagcgaatga aacttgatga aagagggagg aagtggttgc cctgtctggc

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26521 atgggtaata cattaccaat ttagccaaca tttaatgtat aagtaataag cccaaaattt

26581 aatgtataag taatattgct tttgagatct aatgcatttt tggaaattgc aaattggtta

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26941 catttagaag aattagggtg ctatattagg ggaaagcctt tctgatgacc ttatttgaac

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27061 ttatcaatac agttaaaata acattttcag acataaatga ttatattcta cttattttgg

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27181 tcgtaatttc tttatctggc acttcaaaaa gtaaatttta gttaatatct aaatatggac

27241 tcttattcca agctgtcaga taaatggaag atagtagtac attacacacc aattgatagt

27301 cttaattatt ctgtaaattt aagtgttact aaaaccttat cttctttgta tattttaaaa

27361 ctgctactct tactgctaaa gattactgaa ttagtaaact actaaaaata ggtgtgatat

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27541 ggctagaaaa ttaaaactta ttcctaaagg tgctgagaat tccaaaggtt atgactttga

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27961 ctttacaagt tatagtgaaa agatcagttc ttcccatgta gcaaaaaaga ctctggagat

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28201 aagaaaattt ttaaatagct ctattgtaac ttgtcagtta tttatagatt ttagtatttg

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28321 taaagtcaaa agctatacat ttttcccttg agaattattc atttaacaag tatttattga

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28441 cctactttac cagagagaac agtttgtgag tggacagaca ttgattaaat caagctatag

28501 tcattttcaa tagaaaaaat acatccagta aacatttagt ctattactaa tctatctata

28561 gataggcagg cagagtttgc tcaccactgt tttgagtagt ttgacatggc tggtgcaaga

28621 aaataattac atgaatcaca ttcttgtaga aaagattaca caatgcaaaa agaagaatga

28681 atatgctcga ggagaaattt tgatttcatc tctagaaata gttttacata ataatagaac

28741 aataaaatag aatcaataag gtacaaagcc aagtgttata agtagtactt ggtgaaaagt

28801 tctttaagag atttgagagg ccgggcaagg tggctcaggc ctgtaatccc agcactttgg

28861 gaggcctaag tgggcagatc acgaggtcag gagttcgaga gcagcctggc caatatggtg

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29041 tgagccagga tcacgccact gcactccagc ctgggcaaca gagtgagatt ccatctcaaa

29101 aaaaaaaaac agagagagag attgaagagg ccattgcatc ttttgcaagg agcaggccaa

29161 aattaaaact cagcaataac ttcaaaagac ctacttaaaa cataatggca tatgggattt

29221 tatttcagca taatgaaatg ttttggaact ggaggtgatg gttactgtgt taaatgccac

29281 tgaattacac gctataattt tatgttaaac tttatgttta ttttatgttg tatgtttaat

29341 tgtatgttaa cgtcatttta acctaagtat ttcagtttaa ccattttaaa gtgtgaattt

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29461 taaacataag aaatacaggc agagaatcct aagactaaac agttgaaaag gattaagaga

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29581 aaaaatactg cagtaaacta agtgtacttg taaaatgttt aaataatagc aatgaatttc

29641 caggatagat gagcaaatct tgaattttgc aagtattcaa aaccaaaagc aggttatagt

29701 ctacacttac agaaatttga ttaaaaacta gttttgtttc tgtttgacag tatattagat

29761 ttaaaatgtt ataacttcag tttttctcca aaagtgactc ctcctatcac agtgtgtaga

29821 tgcttcagga gggatatttt gtaattaaat gttatatgtc acccacattc ctatgtattt

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29941 ataaaaaaat gggtttggag gatactttag aacaagtaag taataaaaca taaaaagtca

30001 taaaaagtga aaattagatt ttaaaaccta aaattaaaag ttatttatgg tttctgattg

30061 ctaaggaatt aattttttaa caaaactatg aaaaaatgag aattgggtat gctctcgaca

30121 gaaatatttg aagtaactta ttaagacatt taaacatcct agccttcaca catcacatat

30181 gatgaagcga gatgaaacta agtaaatttt ccttttttta atagagaagt gtctctaact

30241 tgagataatt taatattttt atactaaaag aggcttcaag tggctacctt gaaagtaggc

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30421 tttccaaaag tgaatttcag gtagtctctg cttctgagat ccttaatatc acctatatcc

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32401 gcataaagag acctaattca tttataaggc taatgtaggc ctcataccac aacatgacaa

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32581 gcctagtact gtaatagatg gtgatactag tacagtgcag catctgcctt tgtgaacttc

32641 attttaagtg ggaagatggg catgaaaaca atttcttcta tcatagcttt ttgtaatgtg

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32761 gatagctggg ctgagttgtg aataacaagt aggtgttggc caatggatac acagaaggat

32821 gctcatgttc atccacatgc atgcacacac acatacacct tgaggaccag agaccaagga

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33001 gccactacca aaaatataaa aattagctgg atgtagtggc atgcacctgt agtcccagct

33061 actctggagg ctgaggtggg agattgcttg agccctggag gtggaggctg cagtgagctg

33121 agattgtgcc actgcactcc agcctaggtg acaaagtgag accctttctc caaaaagaaa

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33361 attttagtaa tttcacactg ttggcctttt gaagaataga tgagaggtgc atgagacgag

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33601 ttggcagatg ggtatgtggt gatgttcttt accttgataa agaatataaa agagaagtat

33661 atagaagaga gaattgtagg ttgggatatg ctgagtttca ggtctctggg gcatcaaagt

33721 ggagaatgtc cagtaggcaa ttggagtcgg gcgggctata tgtatgtgtg tgtgtgtgtg

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33961 gaagttctgg ttacttgagt atctgttgtt gttattacaa gtgaatttaa aacaactcgt

34021 ttaacttgtt agttactgca gatataacat acctttagaa aaagttcttg gtgttagatc

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34141 ataataatag cttcactaaa tttgaacccc taaatttttt tttaatttca tatgtgtgta

34201 gaattatcct ttaaaaaaaa gtcagctatt tatacatttt actcttttgt gtttcctgca

34261 ggaaacagtt tcctcttggt atagctgaag aacattctct attaattgct gacatcaact

34321 ggtatcagca cttgccaaca ggaaatgaac ttgaaaaaca cttttttctt tcagttttgg

34381 tttcaactga tcttaaagtt caagctttaa caagattaaa tgtggttacc ttattacttt

34441 ttgaaggaat gcatgactat aatagcaaac atccaataaa attaatacaa acaattcttt

34501 tttaacattt tagaaaatga acatacaaat gaaaagctaa atagctgtag tagatatagt

34561 ctaaataaag ctagatttca aatccagagg caaaaattat ttatatatga ataaattgat

34621 ataacaatat taataatata taatatatat gagagcttaa aaagcactcc cacaacaact

34681 agtggaaaaa cagatattaa catcgttaac tttgaggttt ctttgaaatt aatttctctt

34741 tggagaataa taaagttttt ggacaaatga taagtgagag tccaaaagga ctagaagaaa

34801 taacattgtt cagttagttg attgataata taaaaactct ataacttgtt aaaatatctt

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34921 cagaaagcaa gagaagtgtg agaactctga aagaagaagt tcaaaagctg gatgatcttt

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35041 tcatgattgc ttgatgagtc acatattctg acatcaaaat caaaatcttt aagctatata

35101 tatcctataa tttgtatctt gggttagttt tctctgccaa agtttatcgt aaggagtcat

35161 tttattttgt tctttaaagg acatttttct ggattagggc tgttttacca tagaaaagga

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35281 actaaacaga atctctccta cctttttgta gagatttatt gttatgtact gctaaagcct

35341 gaaccccaat aaggtctttt gaatatgtag ttgcccacca agagtcattg taaactgact

35401 atcctggtca aattccaaag actgtttacg tgcaatctag aaggtgggta aaataaaaag

35461 actgattctt caacattcta ctgtctgacc agcattttac ttaaagtatt cagatgactc

35521 tattcattac cacttacaca attcatgtga aaattttaac tatgccaata ttttttactt

35581 atgtcaacaa agtattagga attgaaaact tttctctttg cctgtgttat atttaggacc

35641 tatttgtttt cttaaacggt gtgaaatgtt tagaaaatat accacataat atgatctaaa

35701 tgtgaaatat aagacattgg taatcatttt tcttttttca cacatcctcc atgacaatgc

35761 ttgagtttac tctctgacgc acttaaatga aaggttttat gatacttaat cttcacaaac

35821 cttagaaatg attaatttgg gctactttgc ctgtgcatag ttaatacatc tgtgaaataa

35881 ggacctagat aaggcttcct tgaagctcat gggaaaaaat cttaattaaa atattataaa

35941 atttcctgtt gttcagactg gaaaatactg ctgaatgaat cctatgcaag ctttttgaaa

36001 aggtcacatt tggtaaatac ttccaactca ccaaaaaact aaaaaacttc actactgaat

36061 tctagtcagt tgaccttggc gccctaaaaa ctgaaccaat tttatttagt ttctgcatct

36121 ttgagaataa agtgactttt taatttttta aaggaaaaag tattttttgt tcataatata

36181 aatactcatt agaaacaata gagactcgag agaaatgtat aaaatgggaa ctgaaatgta

36241 ccttataatc caccataatc ccatcactag aaacaatggt taaagtttag ggagtgtctt

36301 ccagatatac aaacatatat ttttttaatg gtaccaaatt atacatagtt tttcataatc

36361 tgtctttctc aagaaaagat atcatggata tcttttcata caaatgtaga gagagcaatc

36421 cttctattgt gtttttattt tacatatata catagtatat atatatatat atatatatat

36481 atatatataa cttatttagc tagcccctta ttaatttttt ccctaaattt tcaactgacc

36541 aataatgttg ctgtgaatat ctttgtatat ctttatgtat ttttccattc cttccctttg

36601 ataaatttct gaagcatcga attaaagttt atatatattt taaagcttat atatatttta

36661 aattttaata aatattttca aattaaaaaa taataaaatc accttttttt tttgagacag

36721 tgtctcgctc tgtcgctcag gctggaatgc aatggcacag tctcagctca ctgcaacctc

36781 cacctcctgg gttcaagcga ttctcatgtc tcagcctcat gagtaactgg gattacaggt

36841 gcatgccacc atgcccaact aatttttgta tttttagtag agatggggtt tcacctcgct

36901 ggccaggctg gtctcaaacc cttgacttca agtgatccac ccacctcaac ctcccaaagt

36961 gctgggatga cgggcatgag ccaccatgcc cagccgcatt tgtttttata atacaggatt

37021 cccaaaggag cactttaaag tctcttgcat gtaaaacagt aagcatcttg agaatacaaa

37081 tgatgcaacc tgattttatt taagtgcttt ttataattgt tttaaatcca cctagagtat

37141 acagaatgtg aatatcaaga aacccataac cgtgacttta tcctgatagg aagcagagga

37201 agaggatgaa aaatgtgcca gtgagcttga gtccttggag aaacacaagc acctgctaga

37261 aagtactgtt aaccaggggc tcagtgaagc tatgaatgaa ttagatgctg ttcagcggga

37321 gtaagtttat ctcaccaaga tttatacgtt tattttcaga ttattaattt aacagttcca

37381 taaaattaga tctattttta tttgctttaa tttatagtat acagctattt aggatggaaa

37441 gaatggtata tagaacttaa gtacaactgc ttataactcg agaactttcc ctatcaacag

37501 atacattctg ttagtattag agttactgtc caccaagaaa tcattaatcg ttagatctag

37561 ttaatacatg gcttttaatc cctgaaaaca acataaaaaa ttttaaatca attcaaataa

37621 atttggctgt tagtgaattt taataaaatt ccactaagct ttaataaatt ccactgagct

37681 catgttttta tttcctagaa attatgtata ttatatagta aaatgtaatt atactataaa

37741 ttatagtcag tctactataa cacagcatat gccttccaaa tagttaccat gctgtgcaaa

37801 atcatgccat aaaaatcaca ggacctacgg gaaaactgat attgaggcac agcactaaaa

37861 tttcatcagt agttaggctc agtggcacac acctgtagtc ccagctactc atgaggccga

37921 gacaggagaa tcacttgaga agttcaagaa gttcaaggcc atcctgggca ctatagcaag

37981 actccatctc taaaaaaatt aaaaactcca tcagtaacac atataaacaa aagataagaa

38041 tcaaacaaaa atgttagcac aatgatacac atacttaatg gctaagaaat acataatgct

38101 acaataaata tgggaccctt cataataaaa agacctctag tttgatttga gaaatgggca

38161 ttcagaaggc tgcagactga attactgtaa agaggtagaa agtgggttat ctgaagtggg

38221 atggaaattg caccatcagt actggatgca tgtggctcat tacatatgca gtgcactgag

38281 tagctgctgt acatttgatg tgtgtgctta gatgtgtgta ttcttttgca tctggattca

38341 gctgggtgcg gttttctgca ttcaccaggt atttctcagg aaagaaactg gcataagcaa

38401 acatgaaatt tgccagattg cgctcatatt tccaaacaaa cacaacagaa ctgcctatat

38461 attttgttgt atttcttaga agtactttat aatcaaatta tacgttgtca ggatctcgtc

38521 cttctcagtt tccctcacaa tttttaaaac ttacatagga aaaattttag ccacactata

38581 taataactac aactacaaac agtggcatcc tttctttaaa taattttctg tctctgtgta

38641 tataatgctc ttgagcaact tatataaaat caatatactg aacagttaat ccataggctc

38701 cgtgtacatt tatgtaaaat atacattttt taagtcttaa gttgccctca aataactgaa

38761 aaattttcta ttttgagatt gcaagtacaa gccttgtgaa agtcatttct cttcacttct

38821 ttatttgtag gccaagggga gaaaactcag ttgaggttta tttggcctgc aattttattg

38881 gttttaattt gaatttgaat tcctataagt aagacttcta ctcccccatt tgcaaatttt

38941 tgtcttgccc agaaagcatt tgagtttaca atccctttgg agactcagtt acaacccttc

39001 gctccaaagc tttatatgtt aaaacatggt gctcttttgt tttgttgctt gcaaaggatc

39061 tttgaaaatg tttatatttc tcttttaatt attgatagtg ggacctctac aaattataca

39121 tatagtatgc agcacataaa tcaatcacag tttggttttt ttgaatgtgg aaatgggaag

39181 tgagctaact agaacggatg tattaatttt tttcctggac aacttaaaca agagtttttg

39241 ttctacagat accaactagt tgtgcaaacc acgactgaag aaagacgaaa agtgggaaat

39301 aacttgcaac gtctgttaga gatggttgct acacatgttg ggtctgtaga ggtaagtatg

39361 tgatggtctt tcctacgttc taagaaaggt ttttaaaact ttgatacatt tctgctttct

39421 tccatataaa ttaaatgatg aattttattt ctatttaaag tatgatctgg caaaaattta

39481 tcagaagaat cttgtctagt gatgtggcaa cgtgatgcag gggaacactt gagcattttt

39541 tttttttttt tttttgagac ggagtttcac tctcatcacc caggctggag tccaatggca

39601 tggtctcaac tcactgcaac ctccacctcc caggttcaaa tgattctcct gtctcagcct

39661 cccaagtacc tgggattaca ggagcctgcc accacgccca gctaattttt gtatttttag

39721 tagagacagg gtttcatctt gttggccagg ctggtctcaa actcctgacc tcaggtgatt

39781 cacctgcctc ggcctcccaa agtgctggga ttacaggcgt gagccaccgc acccagccca

39841 cttgtgcatt ttataaagta atctattgta tttgcataaa caacatatga tgttatgtat

39901 tacaccaaca atgtataatg atgctatgcc aggccatgtt ctacatactg aaaacatatt

39961 agtacatttg aaaacttatc gtacatttag gatttcatta agcttaagat gaaagggcat

40021 atcttatgat gatcgttatt cctttctgtg atttcatata ggcacaaagt aaagtatttc

40081 aaaagtatga gttttattta cctcatcccc actcttcaca cagctaaagt tcaccaataa

40141 aactatccct ccaacctgct gcacagagcc ccagaagcta agataaattg ctgaactata

40201 aaattcttgg ttaatttatt aggtgataat atatttccag ttgagtatgg tttaagaaaa

40261 aaattcactt tatcatatta atagacttcc atttattgaa aacatgagca tgtgataccc

40321 tactacccat cctctcccct gaaagacatt gaactgctgc tttcttggtg ccaatggtct

40381 tcacttttta gtgtgaagaa ctaagaaaag catcctagat gctatgtcag aaaacgtggg

40441 ttctacccac tttctaattc aagcactaag tgtttctata accttgcctg atccttttca

40501 gccagtgtta ttcatctgaa ccataggaca aaaaattatc tgagtgatat gttctcattt

40561 tcccaatcat agtatacaat aattctattc tagatgcata agagaaaagt ttattcatag

40621 catacaattg atggcttagg ttgacagagc ctgtttttat gtgtcatttt acatctttga

40681 gtccttagtt tcttcatctg taaaaatgaa gcagttgtgc taaacagttg tgaacatcct

40741 tagcacctct gactttcttt tctttctttt tttttttttt tttttttttt tttttttttg

40801 agatagcctc actctgtcac ccaggcagta gtgcaatggc gcgatctcgg ctcactgcaa

40861 actcgcctcc caggttcaag ggattctcct gcctcagcct cccaagtagc tgggattaca

40921 ggcatgtgcc accatgcccg gccagtattt gtatttttag tggagacaga gtttcaccat

40981 gttggccagg ctggtctcaa actcctgacc tcaagtgatc tgcccacctc agcctcccaa

41041 agttctggga ttgcaggcat gagccactcg cctggcagtg attttctatt atctgcagct

41101 ctattgtctg tcctttgtta attcagtagt aacttatcac tagggatttg tgtgaagtaa

41161 tcacagttat caatgtttta atcagttaac ataaagctag atttgaaaac ctaatggtaa

41221 gttactatta ttttttagtt tctgtatagt ttggtgttat taggaaaatt agaccaaatt

41281 cagcaagcac taagcgctta ctttgcacta tgcaaaattt atgattaatc agtataaatt

41341 cttaatagct ttcataaaat atggaagaac catagaaagt caaacgagtg tggttccaat

41401 aaacaatatt tgttgaacag gatcaggcaa aatgaggaaa ctttacaatg agtaatcaag

41461 ttggactaaa gaaaacagag aggggggttt agatctaaag gtacttttag atggaatatt

41521 tttcttgtgg gacaaagtgt ttatttgagc agttcctggt tggagcccca taaaggtctc

41581 acatgtggct tgatgttcta gaccaggggt cagcaaacta caacctgcag gcccaattgg

41641 gcctacagcc ggcttttgta aataaagttt tattggagca cagccacctc atttgtttta

41701 gtatatcttt ggctggtttt gcactacagt ggcagaattg agcaattgtt aagaaaacca

41761 tctagactgc caagcctaaa gtagttatta tttgattctt tacagaaaaa ctttgctttt

41821 cctgtgagac acaaaatcac cttttttttc ttttttggtc tgtttaggca taccaagaat

41881 tattataaag ctgtaataac tagcacattg tagtattgat gcagaaagac cagtctctgt

41941 gattaagagt acagaaatag atgcatgagc atagacatga aatatatgtg agagaggcag

42001 tatttcagaa tagttggata aaatgaattg ttcaattaat gaagttggat ccctacctta

42061 aactctacac agaaatcagt tccagatgga ttcagaaatt aatgtgaggc taactttttt

42121 aacttttacg agaattataa gaaactatct ttatacttta ggggttgtaa atgagttctt

42181 aaattagaca caaaaagcac aaaccacaaa aaaattattt acaaatttac ctttcttaaa

42241 attaagatct tctctacatc aaaagacacg gaaagagagt ggaaagacaa gccacaaact

42301 gatagaagat gttttttaaa acacaactgg taaaagatta ccatccagat atacaatggc

42361 ctttgaaaaa taaataaatg gacgaaagat ttgaaggggc cccgaaaata tgtacatctg

42421 atatgtatca ataaaaataa ttattttact tgaatgagaa tttcacaaaa gaaccaaggt

42481 ggccaataaa catatgaaag tatatgtcat attccacact taagaaattg gcaaaaattt

42541 agtttgatca ttaccaaatg ccagcaagga tgtggagaaa tgggagttct aatttactgc

42601 tagcaactat gtaaattgat aaaataattt tagaaaacaa tttggtggct gggcacagtg

42661 ggtcatgcct gtaatcccag cactttggga ggccaaggct ggcggatcac aaggtcagga

42721 gatcgagacc atcctggcca acatggtgaa accccatctc tactaaaaat acaaaaatta

42781 gctgggtgtg gtggcacgtg cctgtaatcc cagctactta ggaggctgag gcacgagaat

42841 cgcttgaacc caggaggcag aggttgcagt gagccgagat cgcaccactg cactccagcc

42901 tggctacaga gcaagatgct gtctcaaaaa aagaaagaaa gaaagaaaga aagaaagaaa

42961 gaaagaaaga aaggaaggaa ggaaggaagg aaggaaggaa ggaaggaagg aaggaaggaa

43021 ggaaggaagg aaggaaggaa ggaaggaagg aagggaaaga aagaaagaaa gaaagaaaga

43081 aagaaagaaa gaaagaaaga aagaaagaaa gaaagaaaga aagaaagaaa gaaagaaaga

43141 aagaaataaa tttggcaatc cgaaaaacca actttcactc taggtatatt tgccctaaaa

43201 aaaatattta cactatatgc tagggggctg tactaggttg aatagtgccc cccgcaaaag

43261 tcatgtctat cctaaatcac agaaggtgag cttatttgga agtaggatct ttgcaaatgc

43321 ggttggttaa gatgaggtca tgttggatta gggtagcagt tggttaagat gaggtcatgt

43381 tggattaggg taggccctaa atctagtgac tggcatcctt acatgaagat cgtgtgcgga

43441 cagaggcgga tgctggggtg aagcagccgc atgctaagga acaccaagga ctgccaggag

43501 ccgccagcaa ctggggagag acgaagaagg attcttccct agagccttca gagagaccat

43561 ggccctgctg acgtcttgat ttcaaacttc cggcctccag agctgaaaga gtacatttct

43621 gttgttttaa gccacctagt ttgtggcaat ttgttacagt atcagtattt gaaatcgcaa

43681 aaaaatcaac aaaaacaaca agaaaaaata atgtggcatg ttagtttccc attgctaatg

43741 taacaaatta ccaccaacct aatggcttaa aacaacacaa atttgtcatc ttagagttat

43801 taaggttagt ctaaaatggg tccaaagggc tgtaatcttt ctggggcctt tgccagcttc

43861 tagaggccac ctacagtcct tggcttgtag ctccttcctt tatcattaaa gccagtgcat

43921 ggcatcttct ctcctctctg ccctctgctg ctgtccttaa attccttctc tgactctgac

43981 actggtgatt tcctcttcta aggacccacc tggatagtgc aggataatct ccttttctca

44041 agatccttaa cttagtcaca tctacagttt cttttgctat gtaagctaat agtcacaggt

44101 tcctttctgg aattagggca tggacatctt tggaaaggct attactcagc ctactatacc

44161 tgggaacaaa caaaacttca ttaccagcaa aataagtaaa tgttgatata ttcattctag

44221 aatactatgc agtacattga ataaactgca gccatatgta gtaacatgaa tgaattttaa

44281 aatactatat gaaaaagtca tagaacatta tatttaatat catttgataa atacgaaggt

44341 gaaaaccagg tactattaag tcaatatata tttagacatg tgtgtgtaat aaaggtataa

44401 tataaagaaa agcaaaacac cattcaggca agaggctata tcttggggag aaaaaagaag

44461 atacaattca gaaagggcac aaaaagagag cctatgtggt gaatacaaat atattctttt

44521 tacttttttt ttggagatag catcttgctc tgtgacacag gctggagtgc agtggtccaa

44581 tcttggctca ctgcaacctc cacttcccag cctcaggtga tctcctgcct cagcctcttg

44641 catagttgga attacaggca cacaccacca cacctggcta atttttgtat ttttagtaga

44701 gagggggttt tgccatgttg gtcaggctgg tctcaaactc ctgacctcaa gtgatccacc

44761 cacctcagcc tcataaagtg ctgggattgc aggagtgagc caccatgccc ggcccttttt

44821 attcttaact taaaaatgtt atcctcttgt ttgtaaattt tacaattaaa cattttaaaa

44881 gaaattaatt ttttttactt taacaattgt taattctctt cactagaaac atcttgagga

44941 gcagattgct aaagttgata gagaatatga agaatgcatg tcagaagatc tctcggaaaa

45001 tattaaagag attagagata agtatgagaa gaaagctact ctaattaagt cttctgaaga

45061 atgaagataa aatgttgatc atgtatatat atccatagtg aataaaattg tctcagtaaa

45121 gtgta

Claims (2)

1.乙肝病毒性肝癌基因NDC80在作为预防或治疗乙肝病毒性肝癌的基因靶点中的应用，其中NDC80的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.乙肝病毒性肝癌基因NDC80的抑制剂在制备预防或治疗乙肝病毒性肝癌的制剂中的应用，其中NDC80的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。