CN104672310A - 一种盐酸万古霉素的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种盐酸万古霉素的制备方法，包括：在万古霉素粗提取液加入除盐酸外的其它酸成盐，再加入与水互溶的有机溶剂结晶，然后将晶体用水溶解后通过阴离子交换树脂转换为盐酸盐。该方法可以有效地将万古霉素从粗提取溶液中结晶出来，以提高万古霉素纯度，并减少盐酸对设备的腐蚀，节省设备投资并延长设备使用期限。

Description

一种盐酸万古霉素的制备方法

技术领域

本发明属于医药提取精制领域，具体而言，涉及一种盐酸万古霉素的制备方法。

背景技术

万古霉素是一种广泛使用的抗生素，在临床上使用其盐酸盐作为注射药物。

为制得万古霉素的盐酸盐，需要通过离子交换、脱色、色谱分离、超滤、纳滤、结晶、溶解、冷冻干燥等多种提取精制手段。其中结晶过程可以提高万古霉素纯度，去除部分色素等杂质，但因万古霉素盐酸盐晶体生长缓慢，结晶过程易受杂质干扰，结晶难度较大，仅仅通过离子交换和脱色的粗提取液很难结晶出来。同时盐酸盐结晶过程中盐酸和盐酸盐对不锈钢设备有很强的腐蚀作用，普通不锈钢设备如晶体分离使用的离心机、干燥使用的干燥盘等均会被不同程度地腐蚀。

发明内容

为解决万古霉素盐酸盐结晶难度大及结晶、分离、干燥过程的后续操作设备易被腐蚀的问题，本发明提出了通过在粗提取液中加入非盐酸的无机或有机酸，提高万古霉素与其所成盐类的结晶能力，以达到在提高万古霉素纯度的同时能够易操作、降低腐蚀的目的。

本发明的盐酸万古霉素的制备方法，包括以下步骤：

1）在万古霉素粗提取液中加入除盐酸以外的其它酸成盐；

2）将步骤1）形成的万古霉素的非盐酸盐从溶液中结晶出来；

3）将步骤2）得到的晶体溶解为水溶液，然后通过阴离子交换树脂将其转为盐酸盐。

上述步骤1）加入的酸包括但不限于硫酸、磷酸等无机酸，或醋酸、丙酸等有机酸。本发明大量实验，通过多次实验验证发现，其它盐类结晶效果均优于盐酸盐结晶，其中硫酸盐结晶效果尤佳。加酸成盐的pH范围为1.0～3.0。

结合酸的价格、常用程度、后处理难度等综合因素，我们认为硫酸是结晶最合理的酸性原料。

上述步骤2）采用与水互溶的有机溶剂作为结晶时的加入溶剂加入到万古霉素盐溶液中，使用甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮等均得到很好的晶体，其中优选的有机溶剂为乙醇。在实施过程中，可在以下条件下结出良好的晶体，甲醇2～6倍结晶液体积，乙醇为1.5～5.5倍结晶液体积，异丙醇为1.2～5倍结晶液体积，丙酮为1.0～4.5倍结晶液体积，超过该用量，晶体质量会大幅度降低，而加入有机溶剂量不足时则可能无法结出晶体。更优选的加量为甲醇3～4倍结晶液体积，乙醇为2.5～3.5倍结晶液体积，异丙醇为2.2～3.2倍结晶液体积，丙酮为2～3倍结晶液体积，此条件下结晶收率与晶体质量均较好。

结晶过程万古霉素盐溶液的pH可在1.0至3.0之间，优选的pH值为1.5～2.5。结晶前的万古霉素盐溶液中的万古霉素浓度在2.0～30.0％（w/v，单位g/mL，即100mL溶液中含有2.0～30.0g万古霉素，下同）范围间可以得到良好的结晶，优选的浓度为10.0～15.0％。

结晶的起始温度可在25～60℃范围，以30～40℃结晶效果最佳。结晶终点温度可在0～30℃，以15～25℃最佳。结晶温度降低速度对晶体的颗粒大小、杂质去除效果有影响，超过5℃/小时晶体质量较差，但过慢的降温速度又会导致结晶操作时间过长，因此选择在0.5～5℃/小时作为降温范围，更优选为2.0～3.0℃/小时。特别的情况下，起始温度可以与终点温度一致，实际操作时在恒定的温度下缓慢加入有机溶剂结晶，也可得到晶体。

上述步骤3）在转为盐酸盐前，需将结晶所得的晶体用水溶解，1.0％～20.0％（w/v，单位g/mL，即100mL溶液中含有1.0～20.0g万古霉素）范围的万古霉素浓度均可顺利转为盐酸盐，优选的浓度为2.0～5.0％。转盐酸盐所用的树脂为阴离子交换树脂，我们尝试的树脂包括717树脂（即201×7树脂）、D293树脂、D301FD树脂均可有效地将溶液转为盐酸盐，以上树脂包括了阴离子交换树脂的主要两个分类：弱碱性阴离子交换树脂和强碱性阴离子交换树脂。不同的树脂用量略有不同，均可在溶液中所含万古霉素重量的2～10倍（此处倍数指树脂体积（mL）∶万古霉素重量（g））顺利地将溶液转为盐酸盐。优选的倍数为4～6倍。

此外，以上方法在实际应用中需与所采用的前期提取手段相结合，例如在前期提取的离子交换处理后、脱色前加入需要的酸，即进行上述步骤1）；再经脱色、超滤纳滤后用需要的酸调节pH后进行结晶操作，即上述步骤2）。具体方法可参考实施例。

本发明的盐酸万古霉素制备方法与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

1.能达到从粗提取的万古霉素溶液中结晶的积极效果，而不必使用更多手段纯化到更高纯度后结晶。

2.制备过程可以避免加入盐酸结晶，从而结晶分离、干燥等过程使用的设备不受盐酸或盐酸盐的腐蚀，起到降低投资，延长设备使用期限的积极效果。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

实施例1

取经离子交换吸附后解吸的万古霉素解吸液10L，其中含万古霉素5135mg/L，加入硫酸调节pH至3.0，过脱色柱脱色，超滤并纳滤至500mL，检测其中万古霉素含量为10115mg/L。快速搅拌下再次加入硫酸调pH至2.0，升温至35℃并保持该温度，加入1500mL95％乙醇，加入前期没有晶体析出时乙醇加入速度较快，待有少量晶体析出后降低乙醇加入速度，同时降低搅拌速度。待乙醇加完后以2.5℃/小时的速度降温至15℃，并在该温度下低速搅拌1小时，抽滤分离出晶体并用100mL75％乙醇洗涤晶体，得晶体39.3g。

将晶体加水溶解至1.5L，缓慢流过200mL已经处理为氯型的D301FD树脂，晶体水溶液加完后用400mL水将树脂中的万古霉素溶液顶出，得到体积1.9L，含万古霉素39.1g的万古霉素盐酸盐溶液。

以上溶液经冷冻干燥后得到合格盐酸万古霉素成品。

实施例2

结晶前的操作与实施例1完全相同，所得万古霉素结晶前的溶液保持28.0℃，12小时内尽可能均匀地加入1200mL异丙醇，加入过程维持低速搅拌。待异丙醇加完后继续低速搅拌1小时，抽滤分离出晶体并用100mL75％异丙醇洗涤晶体，得晶体37.6g。

将晶体加水溶解至1.4L，缓慢流过180mL已经处理为氯型的717树脂，晶体水溶液加完后用360mL水将树脂中的万古霉素溶液顶出，得到体积1.75L，含万古霉素37.3g的万古霉素盐酸盐溶液。

以上溶液经冷冻干燥后得到合格盐酸万古霉素成品。

Claims (10)

1.一种盐酸万古霉素的制备方法，包括以下步骤：

1）在万古霉素粗提取液中加入除盐酸以外的其它酸成盐；

2）将步骤1）形成的万古霉素的非盐酸盐从溶液中结晶出来；

3）将步骤2）得到的晶体溶解为水溶液，然后通过阴离子交换树脂将其转为盐酸盐。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）所述的其它酸为硫酸、磷酸、醋酸或丙酸。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）加酸成盐的pH范围为1.0～3.0。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）通过在万古霉素的非盐酸盐溶液中加入与水互溶的有机溶剂来结晶，结晶前溶液中万古霉素含量为5.0％～30.0％。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤2）结晶加入的有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或丙酮。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤2）各有机溶剂加入量为：甲醇为2～6倍结晶液体积；乙醇为1.5～5.5倍结晶液体积；异丙醇为1.2～5倍结晶液体积；丙酮为1.0～4.5倍结晶液体积。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）结晶过程起始温度为25～60℃；结晶过程终点温度为0～30℃；结晶过程降温速度为0.5～5℃/分钟。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3）晶体用水溶解后的万古霉素浓度为1.0％～20.0％。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3）所述阴离子交换树脂为717树脂、D293树脂或D301FD树脂。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3）的阴离子交换树脂用量按制备1克万古霉素需要用2～10mL的阴离子交换树脂计。