CN104592032A - 一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物化学领域，具体涉及一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及用途，所述2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，具有下列通式：，其中：n为2或3，R选自可以被1至3个相同或不同的取代基任选取代的烷基、卤素、羟基、芳基。本发明针对不对称单羰基姜黄素类似物技术领域进行大量实验研究，进行大量不对称单羰基姜黄素类似物设计、合成、药理活性筛选，得出本发明一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，并且本发明的具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物具有高效、广谱的抗炎用途。

Description

一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及用途

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及用途。

背景技术

炎症做为一类重要的病理过程在人体中十分常见，它本身是作为机体对于外来的或者异体的刺激的一类自身免疫应答。而当这种应答失调或者过分应答导致机体的自损伤时，就演变成了炎症。所以大多数的疾病都伴随着炎症的介导和发生，而炎症的介导和发生又使得疾病对于机体的损伤加重，如急性肺损伤、风湿性关节炎、糖尿病合并症、癌症、动脉粥样硬化、炎性肠病等。在这些过程中，促炎因子如TNF-α、IL-6、IL-1β等都起到了重要的作用。目前现有技术中针对炎症的治疗药物较多，也出现了大量的药物改进技术，其中针对姜黄素类似物的发明及研究，成为本领域技术人员的重要研究领域。

姜黄素是从姜科、天南星科中的一些植物的根茎中提取的一类化学成分，是植物界很稀少的具有二酮的色素，为二酮类化合物。具有抗肿瘤、抗炎和保护心血管等多种药理作用。美国NCI已经将其列为第三代防癌药来进行研究。但由于其具有β二酮的不稳定结构，因此其体内稳定性差，半衰期短，这极大地限制了它的临床应用。把β二酮结构的姜黄素改造为单羰基的姜黄素，除了能明显增加其稳定性外，也能够改善活性。因此，单羰基姜黄素类似物的设计、合成、药理活性筛选成为了姜黄素类似物研究的热点。到目前为止，单羰基姜黄素类似物的研究主要集中在对称单羰基姜黄素类似物的研究，而不对称单羰基姜黄素类似物的研究极少。在药物技术领域中，针对不对称单羰基姜黄素类似物的研究也有一定进展，例如专利号为CN201310149960.X的发明专利，公开了一类不对称单羰基姜黄素类似物在制备抗肿瘤药物中的应用，该发明针对不对称单羰基姜黄素类似物领域研究出10个新型不对称姜黄素类似物，并研究其对五种肿瘤细胞均表现了不同程度的抑制生长活性，虽然该发明针对不对称单羰基姜黄素类似物发明出10种新型化合物，但用途仅局限于抗肿瘤作用，针对抗炎作用未做研究。又例如专利号为201310501067.9的发明专利，公开了一类含烯丙基的单羰基姜黄素类似物在制备抗炎药物中的应用，该发明提供了具有抗炎作用的含烯丙基的单羰基姜黄素类似物，该发明的含烯丙基的单羰基姜黄素类似物既包括对称结构又包括不对称结构的单羰基姜黄素类似物，并未针对不对称单羰基姜黄素类似物进行抗炎作用的研究。

由此可见，能否发明出一系列不对称单羰基姜黄素类似物，并且该类似物具有高效、广谱抗炎作用，成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的为解决上述技术问题，提供一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及用途，针对不对称单羰基姜黄素类似物技术领域进行大量实验研究，进行大量不对称单羰基姜黄素类似物设计、合成、药理活性筛选，得出本发明一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，并且本发明的具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物具有高效、广谱的抗炎用途。

为达到上述技术目的，本发明的技术方案为：

一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，具有下列通式：

其中：n为2或3，R选自可以被1至3个相同或不同的取代基任选取代的烷基、卤素、羟基、芳基。

优选地，本发明一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物选自下列b1～b2任一化合物：

更优选地，本发明化合物选自b1或b2.

一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的用途，所述用途为治疗由炎症引起的肺损伤或由炎症细胞因子超出正常量表达和释放而导致的与炎症相关的疾病。

所述与炎症相关的疾病包括脓毒血症、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及相关综合征、骨关节炎、消化道炎症、多发性肌炎、皮肌炎、血管炎性综合征、痛风性关节炎、神经炎症、风湿性关节炎、化学性疼痛、炎性疼痛、肉芽肿、肉芽肿性血管炎、动脉炎、皮肤炎症、自身免疫性疾病、脂膜炎、腹膜后纤维化、肝炎、肺炎、胰腺炎、过敏性炎症、全身炎症反应综合症、败血症、感染性休克。

一种药物组合物，其特征在于，包括药用辅料和如上述所述的一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物。

一类含有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的制剂形式为注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、软膏剂、控释剂、缓释剂或纳米制剂的任一种。

一种上述所述药物组合物的用途，其特征在于，所述用途为治疗由炎症引起的肺损伤或由炎症细胞因子超出正常量表达和释放而导致的与炎症相关的疾病。

一种上述所述药物组合物的用途，所述与炎症相关的疾病包括脓毒血症、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、消化道炎症、多发性肌炎、皮肌炎、血管炎性综合征、痛风性关节炎、神经炎症、风湿性关节炎、化学性疼痛、炎性疼痛、肉芽肿、肉芽肿性血管炎、动脉炎、皮肤炎症、自身免疫性疾病、脂膜炎、腹膜后纤维化、肝炎、肺炎、胰腺炎、过敏性炎症、全身炎症反应综合症、败血症、感染性休克。

当使用于本专利的说明书与所附的权利要求书时，除非有相反的指定，否则下列术语具有所指示的意义：

“烷基”是指直链或支链的烃链基团，仅由碳与氢原子组成，不含有不饱和性，具有一至十二个碳原子，优选为一至八个碳原子或一至六个碳原子，且其通过单键连接至分子的其余部份，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1，1-二甲基乙基(叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基等。

“烷氧基”是指式-OR。基团，其中R为如上文定义的烷基，含有一至十二个碳原子。

“芳基”是指芳香族单环或多环烃环系统，仅由氢与碳组成，且含有6至19个碳原子，其中所述环系统可为部份饱和。芳基基团包括但不限于如芴基、苯基及萘基的基团。

“卤素”是指溴、氯、氟或碘。

根据本发明的其他的实施方案，本发明涉及一类具有急性肺损伤治疗作用的2-硝基单羰基姜黄素类似物及与炎症相关疾病的治疗药物，所述疾病的病因至少部分地是由炎症引起，所述疾病包括但不限于以下疾病：缓解类风湿关节炎、骨关节炎、脊柱关节病、痛风性关节炎、风湿性关节炎、各种慢性关节炎的急性发作期或持续性的关节肿痛症状；治疗非关节性的各种软组织风湿性疼痛，如肩痛、腱鞘炎、滑囊炎、肌痛及运动后损伤性疼痛；急性的轻、中度疼痛，如，手术后、创伤后、劳损后、原发性痛经、牙痛、头痛；缺血性再灌注，如，脑缺血再灌注、心肌缺血再灌注，动脉粥样硬化、肝炎、淋巴炎、肺炎、痢疾、阑尾炎。

附图说明

图1所示为本发明合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

图2A所示为本发明2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物对脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7巨噬细胞释放IL-6的抑制的活性图；

B所示为本发明2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物对脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7巨噬细胞释放TNF-α的抑制的活性图。

图3A所示为本发明化合物b2和b3抑制LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞释放IL-6的量效关系图；

B所示为本发明化合物b2和b3抑制LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞释放TNF-α的量效关系图。

图4A所示为本发明化合物b2的结构稳定性图谱；

B所示为本发明化合物b3的结构稳定性图谱。

图5A所示为实施例5中对照组大鼠、滴入LPS的大鼠、滴入LPS+b2的大鼠肺泡灌洗液的蛋白浓度图；

B所示为实施例5中对照组大鼠、滴入LPS的大鼠、滴入LPS+b2的大鼠肺泡灌洗液中中性粒细胞数占肺泡灌洗液中的总细胞数的数量百分数图；

C所示为实施例5中对照组大鼠、滴入LPS的大鼠、滴入LPS+b2的大鼠肺组织湿重/干重比图。

图6A所示为实施例6正常对照组大鼠肺泡腔微观图；

B所示为实施例6滴入LPS后大鼠肺泡腔微观图；

C所示为实施例6滴入LPS后，继续加入本发明化合物b2的大鼠肺泡腔微观图。

具体实施方式

下文将结合具体附图详细描述本发明具体实施例。应当注意的是，下述实施例中描述的技术特征或者技术特征的组合不应当被认为是孤立的，它们可以被相互组合从而达到更好的技术效果。

本发明2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物合成工艺及制备方法：

取0.12ml吗啉溶液加入到70ml无水甲醇中后，逐滴加入0.1mol环戊酮或环己酮，紧接着在室温下加入1.16mmol对甲基苯磺酸，成混合溶液，将其混合均匀后回流4h，所得到的溶液在真空中浓缩，得到纯度为60％～65％的烯胺粗品(I)，取3.0份烯胺粗品加入到15ml乙醇中，并加入1.0份2-硝基苯甲醇，回流5h，将得到的混合溶液用5％HCL溶液酸化处理至PH值为5～6，用盐水稀释，并用30ml乙酸乙酯进行萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并用无水硫酸镁干燥，过滤，并进行低压浓缩，将浓缩物再用硅胶柱层析纯化得到纯度为20％～80％中间体(II)，取0.37mmol中间体(II)和0.37mmol如图1所示的具有Ar-基团的某一种芳族醛，加入到10ml乙醇溶液中，逐滴加入20％氢氧化钠溶液，将该反应混合物在室温下搅拌10h，然后用10ml饱和的氯化铵水溶液进行萃取，并且将萃取物用30ml乙醇洗涤，将合并的有机层用盐水洗涤并用无水硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，将浓缩物再用硅胶柱层析纯化得到目标产物。

根据不同需要，-Ar为不同基团，具体如图1所示，可具体合成实施例1～11所述的化合物b1～b11共11种目标产物。

实施例1所合成的化合物b1的化学结构表征数据

化合物(b1)：2-(2-奈基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(naphthalen-2-ylmethylene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，60.0％yield，m.p 180.3-184.6oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.085(1H，d，J＝8.4Hz，H-3)，8.070(1H，s，H-β)，7.875-7.907(2H，m，H-4，H-5)，7.848-7.857(2H，m，H-β′，H-6)，7.800(1H，s，H-1′)，7.695(1H，d，J＝9.0Hz，H-5′)，7.668(1H，d，J＝7.2Hz，H-8′)，7.604(1H，d，J＝8.4Hz，H-3′)，7.516-7.541(3H，m，H-4′，H-6′，H-7′)，3.200(2H，t，J＝14.4Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.965(2H，t，J＝14.4Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).ESI-MS m/z：356.1(M+H)+.calcd for C23H17BrNO3 355.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例2所合成的化合物b2的化学结构表征数据

化合物(b2)：2-(3-羟基-4-甲氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(3-hydroxy-4-methoxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，59.5％yield，m.p 196.3-198.2oC.1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.299(1H，s，Ar-OH)，8.115(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.825-7.830(2H，m，H-4，H-6)，7.650-7.678(1H，m，H-5)，7.547(1H，s，H-β)，7.375(1H，s，H-β′)，7.162(1H，s，H-2′)，7.157(1H，d，J＝6.0Hz，H-6′)，7.040(1H，d，J＝9.0Hz，H-5′)，3.832(3H，s，Ar-OCH3)，2.995(4H，t，J＝13.6Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).13C NMR(600MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：194.6，149.6，148.9，146.6，141.5，134.7，134.2，133.5，130.6，130.1，130.0，128.1，126.3，124.7，124.1，117.0，112.2，55.6，26.0，25.2.ESI-MS m/z：352.2(M+H)+.calcd for C20H17NO5351.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例3所合成的化合物b3的化学结构表征数据

化合物(b3)：2-(2-氟-5-甲氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(2-fluoro-5-methoxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，77.9％yield，m.p 180.5-182.4oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.082(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.833(1H，s，H-β)，7.775(1H，s，H-β′)，7.666(1H，t，J＝14.4Hz，H-4)，7.567(1H，d，J＝6.0Hz，H-6)，7.528(1H，t，J＝15.6Hz，H-5)，7.065(1H，d，J＝9.0Hz，H-3′)，7.042(1H，s，H-6′)，7.036(1H，d，J＝7.2Hz，H-4′)，3.815(3H，s，5′-OCH3)，3.011(2H，t，J＝7.8Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.910(2H，t，J＝7.8Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).13C NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：195.0，157.3，155.6，149.1，140.6，139.0，133.1，131.5，130.7，129.5，129.2，126.7，125.1，116.6，116.4，116.2，115.2，56.0，26.7，26.0.ESI-MS m/z：375.9(M+Na)+.calcd for C20H16FNO4：353.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例4所合成的化合物b4的化学结构表征数据

化合物(b4)：2-(3-溴)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(3-bromobenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，Yellow powder，43.5％yield，m.p 143.2-144.2oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.086(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.838(1H，s，H-β)，7.708(1H，s，H-β′)，7.675(1H，t，J＝15.0Hz，H-4)，7.578(1H，d，J＝7.8Hz，H-6)，7.534(1H，t，J＝15.0Hz，H-5)，7.531(1H，s，H-2′)，7.515(1H，d，J＝7.8Hz，H-4′)，7.493(1H，d，J＝7.8Hz，H-6′)，7.313(1H，t，J＝15.6Hz，H-5′)，3.062(2H，t，J＝15.6Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.929(2H，t，J＝15.6Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).ESI-MS m/z：383.8(M+H)+.calcd for C19H14BrNO3：383.0。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例5所合成的化合物b5的化学结构表征数据

化合物(b5)：2-(4-烯丙氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(4-(allyloxy)benzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，59.0％yield，m.p 153.6-155.2oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.065(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.798(1H，s，H-β)，7.657(1H，t，J＝14.4Hz，H-4)，7.605(1H，s，H-β′)，7.587(1H，d，J＝7.2Hz，H-6)，7.549(2H，d，J＝8.4Hz，H-2′，H-6′)，7.512(1H，t，J＝15.0Hz，H-5)，6.978(2H，d，J＝8.4Hz，H-3′，H-5′)，6.029-6.093(1H，m，Ar-OCH2CH＝CH2)，5.435，5.323(2H，dd，J＝10.8Hz，Ar-OCH2CH＝CH2)，4.596(2H，d，J＝5.4Hz，Ar-OCH2CH＝CH2)，3.045(2H，t，J＝14.4Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.920(2H，t，J＝14.4Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).ESI-MS m/z：361.9(M+H)+.calcd forC22H19NO4：361.l。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例6所合成的化合物b6的化学结构表征数据

化合物(b6)：2-(2，4，6-三甲氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(2，4，6-trimethoxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，76.3％yield，m.p 166.4-168.7oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.0345(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.740(1H，s，H-β)，7.708(1H，s，H-β′)，7.620(1H，t，J＝15.0Hz，H-4)，7.543(1H，d，J＝7.8Hz，H-6)，7.483(1H，t，J＝15.6Hz，H-5)，6.146(2H，s，H-3′，H-5′)，3.855(3H，s，Ar-OCH3)，3.832(6H，s，Ar-OCH3)，2.761(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.640(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).ESI-MS m/z：395.9(M+H)+.calcd for C22H21NO6：395.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例7所合成的化合物b7的化学结构表征数据

化合物(b7)：2-(4-乙氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(4-ethoxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，54.6％yield，m.p 147.5-148.9oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.064(1H，d，J＝8.4Hz，H-3)，7.795(1H，s，H-β)，7.657(1H，t，J＝15.0Hz，H-4)，7.607(1H，s，H-β′)，7.587(1H，d，J＝7.8Hz，H-6)，7.546(2H，d，J＝8.4Hz，H-2′，H-6′)，7.510(1H，t，J＝15.0Hz，H-5)，6.951(2H，d，J＝8.4Hz，H-3′，H-5′)，4.073-4.108(2H，m，Ar-OCH2CH3)，3.045(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.918(2H，t，J＝14.4Hz，2H，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，1.442(3H，t，J＝14.4Hz，Ar-OCH2CH3).ESI-MS m/z：349.9(M+H)+calcd for C21H19NO4 349.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例8所合成的化合物b8的化学结构表征数据

化合物(b8)：2-(5-溴-2-乙氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(5-bromo-2-ethoxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，，79.3％yield，m.p 139.4-142.5oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.079(1H，d，J＝8.4Hz，H-3)，7.935(1H，s，H-β)，7.821(1H，s，H-β′)，7.665(1H，t，J＝14.4Hz，H-4)，7.573(1H，d，J＝3.0Hz，H-6)，7.566(1H，s，H-6′)，7.536(1H，t，J＝15.6Hz，H-5)，7.420(1H，d，J＝9.0Hz，H-4′)，6.805(1H，d，J＝9.0Hz，H-3′)，4.069-4.104(2H，m，Ar-OCH2CH3)，3.002(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.892(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，1.470(1H，t，J＝13.8Hz，Ar-OCH2CH3).ESI-MS m/z：427.9(M+H)+.calcd for C21H18BrNO4427.0。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例9所合成的化合物b9的化学结构表征数据

化合物(b9)：2-(3-乙氧基-4-羟基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(3-ethoxy-4-hydroxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

Y黄色粉末，40.0％yield，m.p 212.9-214.1oC.1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：9.766(1H，s，Ar-OH)，8.114(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.823-7.833(2H，m，H-4，H-6)，7.663(1H，t，J＝15.0Hz H-5)，7.541(1H，s，H-β)，7.453(1H，s，H-β′)，7.270(1H，s，H-2′)，7.196(1H，d，J＝8.4Hz，H-6′)，6.899(1H，d，J＝8.4Hz，H-5′)，3.836(3H，s，Ar-OCH3)，3.039(2H，t，J＝8.4Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.987(2H，t，J＝8.4Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).ESI-MS m/z：352.1(M+H)+.calcd for C20H17NO5351.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例10所合成的化合物b10的化学结构表征数据

化合物(b10)：2-(2，5-二甲氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环戊酮

(2E，5E)-2-(2，5-dimethoxybenzylidene)-5-(2-nitrobenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，57.4％yield，m.p 174.6-177.8oC.1H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ(ppm)：8.125(1H，d，J＝7.8Hz，H-3)，7.808-7.843(2H，m，H-4，H-6)，7.773(1H，s，H-β)，7.672(1H，t，J＝14.4Hz，H-5)，7.582(1H，s，H-β′)，7.115(1H，s，H-6′)，7.063(1H，d，J＝9.0Hz，H-3′)，7.038(1H，d，J＝9.0Hz，H-4′)，3.832(3H，s，2′-OCH3)，3.758(3H，s，5′-OCH3)，3.030(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-)，2.961(2H，t，J＝15.0Hz，Cyclopentanone-CH2-CH2-).ESI-MS m/z：366.0(M+H)+.calcd for C21H19NO5365.1。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例11所合成的化合物b11的化学结构表征数据

化合物(b11)：2-(2，4，6-三甲氧基)-5-(2-硝基)-二苄烯基环己酮

(2E，5E)-2-(2-nitrobenzylidene)-5-(2，4，6-trimethoxybenzylidene)cyclopentanone

黄色粉末，80.7％yield，m.p 184.2-188.6oC.1H NMR(600MHz，CDC13)δ(ppm)：8.010(1H，d，J＝8.4Hz，H-3)，7.927(1H，s，H-β)，7.706(1H，s，H-β′)，7.621(1H，t，J＝14.4Hz，H-4)，7.477(1H，t，J＝15.6Hz，H-5)，7.365(1H，d，J＝7.8Hz，H-6)，6.147(2H，s，H-3′，H-5′)，3.847(3H，s，4′-OCH3)，3.820(6H，s，2′-OCH3，6′-OCH3)，2.587(2H，t，J＝10.8Hz，Cyclohexanone-CH2CH2CH2-)，2.464(2H，t，J＝10.8Hz，Cyclohexanone-CH2CH2CH2-)，1.656-1.697(2H，m，Cyclohexanone-CH2CH2CH2-).ESI-MS m/z：409.9(M+H)+.calcd forC23H23NO6 409.2。如图1所示为本实施例合成的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的化学结构表征数据。

实施例12本发明2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞释放炎症因子的抑制的活性的测试

将本发明实施例1～11制备出的化合物刺激RAW 264.7巨噬细胞释放炎症因子(TNF-α和IL-6)，抑制的方法测试了化合物的体外初步抗炎活性，具体方法如下：1.2×106个RAW264.7巨噬细胞用DMEM培养液培养于37℃，24小时后更新培养液，并加入受测化合物(终浓度为10μM)预处理2小时，再用0.5μg/mL的LPS继续处理22小时，收集培养液用ELISA法检测TNF-α和IL-6含量；收集细胞检测总蛋白浓度，ELISA结果用相应的总蛋白浓度相除较准，以LPS对照组的TNF-α和IL-6含量定标为100；每个化合物重复测试3次，计算平均值和误差值。测试时用阳性药物C66做对照。化合物对TNF-α和IL-6释放的抑制活性见图2所示为本发明2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物对脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞释放IL-6和TNF-α的抑制的活性图。

由图2可知，本发明实施例1～11制备出的2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物b1～b11都具有较好的抑制IL-6和TNF-a释放的活性；而对比化合物活性不佳，不具有药用前景。大部分有效化合物对LPS刺激的IL-6释放有减少作用，具体而言，活性明显远优于先前报道的具有抗炎作用的姜黄素类似物C66的化合物包括：b2、b3、b6、b7、b8、b9、b10、b11；可强烈抑制IL-6和TNF-a释放活性的是化合物b2和b3。

实施例13实施例2和3制备出的b2和b3抑制LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞释放IL-6和TNF-α的量效关系测试

进一步测试了实施例2和3制备出的b2和b3抑制LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞释放TNF-α和IL-6的量效关系，方法：同实施例12。实验数据见图3。化合物b2和b3对TNF-α和IL-6的抑制活性均具有较好的量效关系。见图3所示为本发明化合物b2和b3抑制LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞释放IL-6和TNF-α的量效关系。

实施例14实施例2和3制备出的b2和b3的结构稳定性测试

将实施例2和3制备出的b2和b3溶解于5％的DMSO溶液中，取一定量复溶于PH＝7.4的磷酸盐缓冲溶液中，分别在时间点0、5、10、15、20和25分钟测定溶液425nm处的紫外吸收曲线。实验数据见图4。待测活性化合物b2和b3在0-25分钟内紫外吸收曲线拟合良好，说明化合物b2和b3具有较好的结构稳定性。

实施例15实施例2制备出的b2缓解急性肺损伤大鼠生理学变化测试

用0.5％羧甲基纤维素钠与化合物b2制成混悬液，于造模前连续灌胃给药7天。各组大鼠乙醚麻醉后暴露气管，除对照组外，其余各组气管内缓慢滴入50μl 5mg/kg LPS，造成大鼠急性肺损伤，对照组以相同的方式滴入等量生理盐水，缝合伤口，建立急性肺损伤模型。动物造模24h后，按照5ml/k(g的剂量腹腔注射10％的水合氯醛麻醉老鼠，开胸结扎左肺，右肺用1ml生理盐水进行支气管肺泡灌洗，收集灌洗液，相同操作重复3次。

肺泡灌洗液收集后，4℃1000rpm离心5分钟，取上清液，测肺泡灌洗液的蛋白浓度，如图5A数据。肺泡灌洗液离心后，用50ul生理盐水重悬沉淀，混匀后取20ul用细胞计数仪Standard计数肺泡灌洗液中的总细胞数，并Wright-Gimesa染色分类计数肺泡灌洗液中中性粒细胞数，计算肺泡灌洗液中中性粒细胞数占肺泡灌洗液中的总细胞数的数量百分比，如图5B所示。此外，取右肺上叶，滤纸吸去组织上的水分后称取湿重，放入60℃烘烤48h以上，直到其重量不在发生变化为止，称取干重，计算肺组织湿重/干重比(W/D)，如图5C数据所示，可判断肺水肿程度。实验数据见图5所示化合物b2缓解急性肺损伤大鼠生理学变化，三种实验结果均表明化合物b2在生理学上可有效缓解大鼠急性肺损伤。

实施例16实施例2制备出的b2缓解急性肺损伤中肺组织的病理学变化测试

实验数据见图6化合物b2缓解急性肺损伤中肺组织的病理学变化，正常对照组大鼠肺泡腔清晰如图6A，结构完整，壁光滑；气管滴注LPS造成急性肺损伤模型后，肺泡壁明显水肿、增厚，炎症细胞浸润增加如图6B；给予化合物b2治疗后细胞水肿、增厚显著减弱，且炎症细胞浸润明显减少如图6C，与正常组差别不大。

综上所述，在本发明中，由本发明实施例12可知，先用化合物对LPS刺激RAW 264.7巨噬细胞释放炎症因子(TNF-α和IL-6)抑制的模型进行了化合物体外抗炎活性的初筛，本发明的有效2-硝基取代的单羰基姜黄素类似物都具有较好的抗炎活性，由本实施例12可知，化合物b2和b3两个化合物抗炎活性尤为明显。因此，本发明将这两个化合物进行了抑制LPS刺激巨噬细胞释放炎症因子的量效关系试验，详见实施例13，由实施例12可知化合物b2和b3对TNF-α和IL-6的抑制基本都具有较好剂量依赖性。在研究化合物对炎症因子作用的同时，我们进行了化合物的稳定性实验，详见实施例14，由实施例14可知活性化合物b2和b3溶解于5％的DMSO溶液中，25分钟内结构基本稳定。最后综合实施例1～14实验结果，本发明选取了化合物b2进行了动物体内急性肺损伤的治疗作用。我们检测了损伤动物的生理学变化，详见实施例15，实验结果表明：化合物b2可有效降低肺泡灌洗液的蛋白浓度和减少灌洗液中总细胞及中性粒细胞数量以及显著降低急性肺损伤导致的湿干重比值增加，这表明姜黄素类似物则能缓解LPS导致的肺水肿。此外，实施例16中表明在LPS造成的急性肺损伤模型中，肺泡壁明显水肿、增厚，炎症细胞浸润增加。我们利用H&E染色技术进一步观察到应用活性化合物b2后，肺泡壁增厚显著减弱，且炎症细胞浸润明显减少，与正常组差别不大。

实施例17

一类含有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的药物组合物，该药物组合物包括有效成分和药用辅料，所述有效成分为2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及其可药用盐中的几种或几种组成，所述2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物具有下列通式：

其中：n为2或3，R选自可以被1至3个相同或不同的取代基任选取代的烷基、卤素、羟基、芳基。

有效成分优选为下列b1～b2中的一类或几种化合物：

本发明的药物组合物可与现已上市的抗炎药物联合使用，制备得到的防治炎症疾病类药物的组合物，已上市的抗炎药物包括各种甾体类抗炎药物和非甾体类抗炎药物；药学上可接受的盐是这样一些盐，它们保持母体化合物的理想的生物活性，并且没有给予不希望的毒理学作用，这样的盐的例子包括与无机酸形成的盐，如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸等；与有机酸形成的盐，如乙酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸等；以及由元素阴离子形成的盐，如氯、溴和碘；

本发明药物组合物中的药用辅料指药学领域常规的药物载体，包括但不限于任何被美国食品药物管理局批准为可接受用于人或家畜的佐剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等张剂、溶剂或乳化剂。

本发明的制剂包括那些适于口服、直肠、局部、口腔、舌下、肠胃外(例如，皮下、肌肉、静脉内)以及经皮给药的制剂，尽管在任何给定的情况下，最适宜的路线将取决于所治疗的病症的性质和严重性以及取决于所使用的特定活性化合物的性质。

由本发明上述实施例可知，本发明提供一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物及用途，针对不对称单羰基姜黄素类似物技术领域进行大量实验研究，进行大量不对称单羰基姜黄素类似物设计、合成、药理活性筛选，得出本发明一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，并且本发明的具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物具有高效、广谱的抗炎用途。本发明还提供一类含有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的药物组合物，该药物组合物具有高效、广谱的抗炎用途。

上述详细说明是针对发明的可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明的等效实施或变更，均应当包含于本发明的专利范围内。

另外，本领域技术人员还可在本发明权利要求公开的范围和精神内做其它形式和细节上的各种修改、添加和替换。当然，这些依据本发明精神所做的各种修改、添加和替换等变化，都应包含在本发明所要求保护的范围之内。

Claims (8)

1.一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，其特征在于，具有下列通式：

其中：n为2或3，R选自可以被1至3个相同或不同的取代基任选取代的烷基、卤素、羟基、芳基。

2.根据权利要求1所述的一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物，其特征在于，选自下列b1～b11任一化合物：

3.一类如权利要求1～2任一项所述的具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的用途，其特征在于，所述用途为治疗由炎症引起的肺损伤或由炎症细胞因子超出正常量表达和释放而导致的与炎症相关的疾病。

4.根据权利要求3所述的一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的用途，其特征在于，所述与炎症相关的疾病包括脓毒血症、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、消化道炎症、多发性肌炎、皮肌炎、血管炎性综合征、痛风性关节炎、神经炎症、风湿性关节炎、化学性疼痛、炎性疼痛、肉芽肿、肉芽肿性血管炎、动脉炎、皮肤炎症、自身免疫性疾病、脂膜炎、腹膜后纤维化、肝炎、肺炎、胰腺炎、过敏性炎症、全身炎症反应综合症、败血症、感染性休克。

5.一种药物组合物，其特征在于，包括药用辅料和如权利要求1～2任一项所述的一类具有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物。

6.根据权利要求5所述的一类含有2-硝基单边取代的不对称单羰基姜黄素类似物的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的制剂形式为注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、软膏剂、控释剂、缓释剂或纳米制剂的任一种。

7.一种如权利要求5～6任一项所述的药物组合物的用途，其特征在于，所述用途为治疗由炎症引起的肺损伤或由炎症细胞因子超出正常量表达和释放而导致的与炎症相关的疾病。

8.根据权利要求7所述的一种如权利要求5～6任一项所述的药物组合物的用途，其特征在于，所述与炎症相关的疾病包括脓毒血症、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、消化道炎症、多发性肌炎、皮肌炎、血管炎性综合征、痛风性关节炎、神经炎症、风湿性关节炎、化学性疼痛、炎性疼痛、肉芽肿、肉芽肿性血管炎、动脉炎、皮肤炎症、自身免疫性疾病、脂膜炎、腹膜后纤维化、肝炎、肺炎、胰腺炎、过敏性炎症、全身炎症反应综合症、败血症、感染性休克。