CN104558361B - 一种亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于多环芳烃分离富集技术领域，具体涉及一种多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法及应用。填料采用分子印迹技术制备，具体为以多环芳烃类化合物作为模板分子，在功能单体、交联剂、引发剂、致孔剂的存在下发生聚合反应，在反应过程中引入辅助单体，反应完成后经氧化反应获得亲水性的高选择性的多环芳烃分子印迹固相萃取填料；使用所述多环芳烃分子印迹固相萃取填料制成固相萃取柱。通过引入亲水基团，使得填料表面亲水性显著提高，减弱了填料对其它亲脂性多环芳烃物质的吸附作用,提高了吸附选择性；同时，表面亲水性的改变显著提高了水体与填料之间的浸润作用，易于实现水体中多环芳烃的分离富集。

Description

一种亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法及 应用

技术领域

本发明属于多环芳烃分离富集技术领域，具体涉及一种多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法及应用。

背景技术

多环芳烃是一类含有两个或两个以上苯环或杂环的有机化合物，它作为一类典型性的持久性有机污染物，广泛存在于水体、大气、土壤、生物体等环境中。多环芳烃主要产生于人类的工农业生产及日常生活活动中，并能够很快进入到大气、土壤、河流等环境系统中，然后经河流和大气的搬运最终进入海洋。多环芳烃物理化学性质稳定、难降解，易在人体与生物体内富集，具有强烈的致癌、致畸、致突变效应，对人类健康和海洋生物产生极大危害。多环芳烃是国际社会广泛关注的污染物之一，早在1979年美国环保局已将16种多环芳烃列入“优先污染物”黑名单中，我国也将7种多环芳烃列入“中国环境优先控制污染物”黑名单中。近年来，伴随着人类生产活动的加快以及海上溢油事故的频发，我国和全球的环境水体中经常有高浓度的PAHs被检出。

目前富集环境水体中PAHs常用的方法是液液萃取和固相萃取。液液萃取技术不仅仅需要特定的装置来完成萃取、浓缩过程，而且在这些过程中还会消耗大量的有毒有害溶剂。然而，采用固相萃取技术却可以消除这些缺点。固相萃取技术具有操作简单、溶剂消耗少以及样品回收率高等优点，已广泛应用于环境水体中痕量有机污染物的分离富集过程。目前固相萃取技术常用的吸附剂主要有C₁₈、C₈、硅藻土、硅胶以及氧化铝等，但是上述吸附剂依据待测物的极性进行分离，对于极性相近的有机污染物缺乏选择性，因此上述吸附剂难以适用于复杂基体如环境水体中多环芳烃的分离。分子印迹聚合物具有构效预定性、特异识别性和广泛实用性等特点，分子印迹技术集分离与富集于一体的特点，能够提高分析的选择性和灵敏度,此外分子印迹聚合物具有很强的稳定性,可以抵抗检测的恶劣环境，因此分子印迹聚合物是环境水体中多环芳烃分离富集理想的固相萃取填料。

目前，已有文献报道所合成的多环芳烃分子印迹固相萃取填料对多环芳烃具有较好的吸附性、较为满意的回收率，此种情况说明分子印迹技术在多环芳烃分离富集中具有较好的可行性。然而，在目前的研究和应用中仍然存在诸多不足，主要表现为以下两个方面：

(1)多环芳烃分子具有较强的亲脂性，然而以目前方法所合成的多环芳烃分子印迹聚合物均为强亲脂性高分子材料，使得大部分多环芳烃分子会由于强的亲脂性非特异性的吸附到印迹聚合物表面，从而导致印迹材料选择性降低甚至丧失。

(2)现有的多环芳烃分子印迹固相萃取填料由于亲脂性强而导致憎水性较强，因而水体样品无法与填料充分浸润，大大降低了多环芳烃吸附效率以及延长了处理样品的时间。

发明内容

为了解决传统分子印迹固相萃取填料存在的上述技术问题，本发明提供一种亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法和应用。

本发明实现上述目的的技术解决方案如下：

一种亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料：填料采用分子印迹技术制备，具体为以多环芳烃类化合物作为模板分子，在功能单体、交联剂、引发剂、致孔剂的存在下发生聚合反应，在反应过程中引入辅助单体，反应完成后经氧化反应获得亲水性的高选择性的多环芳烃分子印迹固相萃取填料；

所述多环芳烃分子模板分子为萘、苊、苊烯、苊萘嵌戊烷、芴、蒽、菲、芘、荧蒽、苯并[a]蒽、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、苯并[e]芘、茚苯[1,2,3-cd]芘、二苯并[a，h]蒽、苯并[ghi]苝（二萘嵌苯）中的一种或几种；

所述功能单体为2-乙烯基吡啶（2-VP）、4-乙烯基吡啶（4-VP）、甲基丙烯酸等（MAA）、甲基丙烯酸甲酯（MMA）、4-乙烯苯基硼酸中的一种或几种；

所述交联剂为二乙烯基苯（DVB）、乙二醇双甲基丙烯酸酯（EGDMA）、丙烯酸三甲氧基丙烷三甲基酯（TRIM）、N,N’-亚甲基双丙烯酰胺中的一种或几种；

所述引发剂为2,2’-偶氮二异丁腈（AIBN）或2,2’-偶氮二（2,4-二甲基戊腈）（ADVN）；

所述致孔剂为丙酮、氯仿、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、正丙醇、二氯甲烷、正丁醇、苯、氯苯、对二甲苯、甲苯、四氯化碳、环戊烷、环己烷、正戊烷、正己烷、正庚烷或异辛烷；

所述辅助单体为甲基丙烯酸缩水甘油酯。

所述模板分子与功能单体的摩尔比例为1:1-1:5-1:10，功能单体与辅助单体的摩尔比例为1:1-1:5，交联剂与模板分子的摩尔比例为5:1-15:1-30:1，引发剂与功能单体的摩尔比例为1:2-1:5-1:10，致孔剂的体积用量与交联剂的摩尔比例为1:1-4:1。

一种亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法：填料采用分子印迹技术制备，具体为以多环芳烃类化合物作为模板分子，在功能单体、交联剂、引发剂、致孔剂的存在下发生聚合反应，在反应过程中引入辅助单体，反应完成后经氧化反应获得亲水性的多环芳烃分子印迹固相萃取填料。

进一步的说，

(1)按上述比例将模板分子、功能单体、致孔剂混合后避光放置1h-3h，然后再加入辅助单体、交联剂和引发剂混合，混合后经超声振荡溶解均匀后，并通入10-60min的氮气,待用；

(2)将上述步骤(1)的溶液置于55-80℃恒温油浴锅中反应12-24小时，生成聚合物；

(3)将上述获得的聚合物粉碎成10-120μm粒径大小的粉末，粉碎后的粉末采用非极性溶剂进行洗脱，洗脱后经索氏提取24-48h除去模板分子，室温下风干得到分子印迹聚合物微粒；而后向分子印迹聚合物微粒中加入体积分数10-20%的高氯酸水溶液，在室温下避光搅拌12-24小时，然后依次用乙醇、丙酮洗涤，室温下风干得到高选择性、高键合容量多环芳烃分子印迹固相萃取填料。

所述步骤（3）中非极性溶剂为丙酮、氯仿、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、正丙醇、二氯甲烷、正丁醇、苯、氯苯、对二甲苯、甲苯、四氯化碳、环戊烷、环己烷、正戊烷、正己烷、正庚烷或异辛烷。

一种多环芳烃分子印迹固相萃取填料的应用，使用所述多环芳烃分子印迹固相萃取填料制成固相萃取柱。

所述固相萃取柱在选择性分离、富集环境中多环芳烃的应用，具体为：所述由多环芳烃分子印迹固相萃取填料制成的固相萃取柱在选择性分离、富集环境中多环芳烃的应用。

进一步的说，所述对水体中多环芳烃的高选择性分离富集，具体为：

(1)固相萃取柱的装填

将多环芳烃分子印迹固相萃取填料加入到带有聚四氟乙烯筛板(20μ m)的固相萃取柱中，然后加入上筛板压紧；

(2)固相萃取柱的活化

依次使用环己烷、乙酸乙酯以及乙腈活化固相萃取柱，并且保证活化结束后固相萃取柱仍然湿润；

(3)固相萃取柱的上样

用聚四氟乙烯管和聚乙烯连接头将固相萃取柱与蠕动泵相连，将样品溶液上样；

(4)固相萃取柱的淋洗

使用超纯水淋洗柱体，淋洗结束后通入些许空气使柱体尽可能的干燥；

(5)固相萃取柱的洗脱

依次使用甲醇和乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液；

(6)浓缩和定容

将洗脱液于30-50℃恒温吹氮浓缩至全干，然后用1mL乙腈定容，并通过0.22μm有机相滤膜过滤，清液中目标物含量使用高效液相色谱检测。

本发明所具有的优点：通过引入亲水基团，使得填料表面亲水性显著提高，减弱了填料对其它亲脂性多环芳烃物质的吸附作用,提高了吸附选择性；同时，表面亲水性的改变显著提高了水体与填料之间的浸润作用，易于实现水体中多环芳烃的分离富集。

多环芳烃属非极性物质且亲脂性强，传统的多环芳烃分子印迹固相萃取填料的表面存在大量的苯环以及烷基结构，它们能够非特异性地吸附脂溶性物质，从而大大降低了填料对多环芳烃的吸附选择性；此外，苯环及烷基等非极性结构增强了填料表面的疏水性，使得水体样品与固相萃取填料不能充分浸润，这一缺点显著延长了水体样品的处理时间。基于此，本发明合成出一种适用于选择性吸附多环芳烃的亲水性分子印迹固相萃取填料。通过引入亲水基团，使得填料表面亲水性显著提高，而填料的内部仍然保留有适合目标分子进出的分子印迹空穴。这种表面亲水性的改变减弱了填料对其它亲脂性物质的吸附作用,提高了吸附选择性；同时，表面亲水性的改变显著提高了水体与填料之间的浸润作用，易于实现水体中多环芳烃的分离富集。

附图说明

图1为本发明实施例1提供的分辨尺寸为500nm的亲水性分子印迹聚合物填料电子显微镜照片；

图2为本发明实施例1提供的亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取柱应用于环境水体样品前处理的方法示意图；

图3为本发明实施例1提供的采用本发明亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取柱对不同目标物回收情况对比图；

图4为本发明实施例9提供的四种不同分子印迹聚合物对菲的平衡等温吸附曲线图；

图5为本发明实施例9提供的模板（以菲为例）与亲水性分子印迹聚合物的Scatchard关系图。

具体实施方式

实施例1

以本发明分离富集水体中菲为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱的制备

将1mM菲和1mM4-乙烯基吡啶溶解于30mL德二氯甲烷溶液中，避光放置1小时。加入1mM甲基丙烯酸缩水甘油酯、5mM二乙烯基苯、0.5mM偶氮二异丁腈，超声使其溶解。向所得溶解液中通入10min氮气后密封，70℃恒温油浴锅中反应24小时。将得到的聚合物粉碎、研磨，所得聚合物置于滤纸筒内，以二氯甲烷为洗脱剂，索氏提取48h除去模板分子菲。将所得印迹聚合物室温下风干得到分子印迹聚合物微粒，备用。采用静态键合吸附法测定所得印迹聚合物对菲的最大键合容量为602.02μg/g。

将上述聚合物微粒放置到单口烧瓶中，加入体积分数10%的高氯酸水溶液，在室温下避光搅拌24小时。分别使用乙醇、丙酮洗涤三遍，室温下风干得到高选择性、强亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料。采用静态键合吸附法测定所得改性后的印迹聚合物最大键合容量为1.98mg/g。所得印迹材料形貌如图1所示。

称取100mg多环芳烃分子印迹固相萃取填料加入到容量为3mL的带有聚四氟乙烯筛板(20μm)的固相萃取柱中，加入上筛板压紧。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的菲

采用所得固相萃取柱分离富集水体中菲的步骤参照图2进行。具体过程如下：

依次采用2mL环己烷、2mL乙酸乙酯以及2mL乙腈活化固相萃取柱，并且保证活化结束后固相萃取柱仍然湿润。

准确称取2.922g分析纯NaCl于100mL容量瓶中，分别加入浓度为0.001mol/L的萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并[a,h]蒽、西维因、速灭威、4,4’-二氯联苯的乙腈溶液10μL，加入50mL超纯水超声处理2min，定容，静置，由蠕动泵将100mL清液以30mL/min的泵速通过固相萃取柱。

以相同泵速泵入30mL超纯水淋洗柱体，淋洗结束后通入空气以使柱体保持干燥。

采用10mL甲醇冲洗后采用乙酸乙酯进行洗脱，控制溶液过柱速度不超过10mL/min，收集乙酸乙酯洗脱液。

将盛有洗脱液的玻璃试管放置到氮吹仪上，设定50℃恒温吹氮浓缩至全干。采用1mL乙腈定容，采用0.22μm有机相滤膜过滤所得试液，清液中目标物含量利用高效液相色谱进行定量。采用菲分子印迹固相萃取柱对不同多环芳烃目标物回收情况见图3。

结果：亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取柱对水体样品中的菲具有专一选择性的分离和富集能力，对水体样品中菲的回收率为106.14%，相对标准偏差为3.28%。

实施例2

以本发明分离富集水体中蒽为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱的制备方法除模板分子改为蒽以外，其余步骤请参照实施例1中步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的蒽

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例3

以本发明分离富集水体中芘为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱制备方法除模板分子改为芘、甲基丙烯酸缩水甘油酯的用量改为5mM以外，其余步骤请参照实施例1中步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的芘

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例4

以本发明分离富集水体中屈为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱制备方法除模板分子改为屈，其余步骤请参照实施例1中步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的屈

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例5

以本发明分离富集水体中苯并[k]荧蒽为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱制备方法除模板分子改为苯并[k]荧蒽，4-乙烯基吡啶、甲基丙烯酸缩水甘油酯与二乙烯基苯的用量分别改为5mM、5mM与15mM以外，其余步骤请参照实施例1步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的苯并[k]荧蒽

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例6

以本发明分离富集水体中苯并[a]芘为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱制备方法请参照实施例1中步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的苯并[a]芘

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例7

以本发明分离富集水体中茚并[1,2.3-cd]芘为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱制备方法除模板分子改为茚并[1,2.3-cd]芘、4-乙烯基吡啶、甲基丙烯酸缩水甘油酯与二乙烯基苯的用量分别改为10mM、10mM与30mM以外，其余步骤请参照实施例1步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的茚并[1,2.3-cd]芘

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例8

以本发明分离富集水体中二苯并[a.h]蒽为例。其操作步骤如下：

（1）亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备

亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料以及固相萃取柱制备方法除模板分子改为二苯并[a.h]蒽以外，其余步骤请参照实施例1中步骤（1）。

（2）采用所得固相萃取柱分离富集水体中的二苯并[a.h]蒽

采用所得固相萃取柱分离富集水体中多环芳烃的方法请参照实施例1中步骤（2）。

实施例9

多环芳烃分子印迹固相萃取填料对模板分子（以菲为例）吸附性能研究，其操作步骤如下：

（1）分子印迹聚合物与非印迹聚合物的制备：

为了评价所制备的分子印迹聚合物对模板分子菲的分子识别性能，合成了非印迹聚合物，其制备方法与上述实施例中的多环芳烃分子印迹固相萃取填料相类似，仅不添加模板分子。

（2）分子印迹聚合物对菲的吸附性能研究：

将菲配制成不同浓度的溶液，通过对比改性前、改性中、改性后的分子印迹聚合物与改性后的非分子印迹聚合物对相同浓度菲的不同吸附结果，来评价其吸附性能。

①吸附量的测定

准确称取0.05g四种聚合物各7组，每组3个平行样，分别置于10mL带盖玻璃管中。向玻璃管中逐个准确加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mmol/L的菲的0.5mol/L NaCl水溶液2mL，置于振荡器上室温振荡24小时，离心（9000r/min）后使用0.22μm有机相滤膜过滤，清液中目标物含量使用高效液相色谱检测。

根据公式Q=（C_o-C）×V/m，通过计算吸附前后溶液浓度的变化得出聚合物吸附量Q。公式中，Q为平衡吸附量（μmol/g）；C_o与C分别表示底物的初始浓度和平衡浓度（mmol/L）；V表示溶液的体积（mL）；m为聚合物的质量（g）。

②最大吸附量的计算

根据Scatchard公式，B_bound/C=(B_max-B_bound)/K_d=-(1/K_d)×B_bound+B_max/K_d，以B_bound/C对B_bound作图，从所得直线的斜率和截距可以得出K_d和B_max。对于理想的分子印迹聚合物，聚合物对目标物有较强的选择性键合，所以K_d值越小说明聚合物对菲的选择性键合作用越强，分离效果越明显。

③色谱条件

色谱柱SunFire-C18（3.5μm，2.1×150mm），流动相为乙腈：水=20:80，流速0.4mL/min，检测波长250nm，进样量10μL，柱温40℃。

④分子印迹聚合物对菲的吸附性能研究结果（见图4、图5）

图4为三种分子印迹聚合物与非分子印迹聚合物对菲的平衡等温吸附曲线图。由图4可以看出，随着分子印迹聚合物亲水性能的逐渐增强，分子印迹聚合物对菲的特异性吸附能力逐渐减弱，当聚合物表面的环氧基经氧化开环后聚合物的亲水性能达到最大，但与之相对应的吸附能力达到最低。然而非分子印迹聚合物的吸附能力比其余三种分子印迹聚合物均要低，说明分子印迹聚合物能够特异性吸附菲，进一步印证了分子印迹聚合物的印迹效应。

图5为模板菲与亲水性分子印迹聚合物的Scatchard关系图。由图5的斜率和截距计算可以得出，K_d=0.02mmol/l，B_max=2.73mg/g。上述计算结果说明，聚合物引入亲水基团后，聚合物表面亲水能力明显增强，而聚合物内部仍然为疏水结构，并且保留有适合目标分子进出的分子印迹空穴。当水溶液中的多环芳烃（如菲）接触到聚合物表面时，其所具备的亲脂性能够克服表面亲水基团的排斥作用通过扩散通道进入到聚合物内部被保留。这种表面亲水性的改变减弱了填料对其它亲脂性物质的吸附作用,提高了吸附选择性；同时，表面亲水性的改变显著提高了水体与填料之间的浸润作用，易于实现水体中多环芳烃的分离富集。因此本发明中的亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料对多环芳烃有着显著的选择性吸附能力，能够很好的满足在复杂环境水体体系中对多环芳烃选择性分离、富集和痕量检测的要求。

Claims (8)

1.一种亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料，其特征在于：填料采用分子印迹技术制备，具体为以多环芳烃类化合物作为模板分子，在功能单体、交联剂、引发剂、致孔剂的存在下于55-80℃恒温油浴锅中12-24小时发生聚合反应，在反应过程中引入辅助单体，反应完成后经氧化反应获得亲水性的高选择性的多环芳烃分子印迹固相萃取填料；

所述多环芳烃分子模板分子为萘、苊、苊烯、苊萘嵌戊烷、芴、蒽、菲、芘、荧蒽、苯并[a]蒽、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、苯并[e]芘、茚苯[1,2,3-cd]芘、二苯并[a，h]蒽、苯并[ghi]苝(二萘嵌苯)中的一种或几种；

所述功能单体为2-乙烯基吡啶(2-VP)、4-乙烯基吡啶(4-VP)、甲基丙烯酸等(MAA)、甲基丙烯酸甲酯(MMA)、4-乙烯苯基硼酸中的一种或几种；

所述交联剂为二乙烯基苯(DVB)、乙二醇双甲基丙烯酸酯(EGDMA)、丙烯酸三甲氧基丙烷三甲基酯(TRIM)、N,N′-亚甲基双丙烯酰胺中的一种或几种；

所述引发剂为2,2′-偶氮二异丁腈(AIBN)或2,2′-偶氮二(2,4-二甲基戊腈)(ADVN)；

所述致孔剂为丙酮、氯仿、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、正丙醇、二氯甲烷、正丁醇、苯、氯苯、对二甲苯、甲苯、四氯化碳、环戊烷、环己烷、正戊烷、正己烷、正庚烷或异辛烷；

所述辅助单体为甲基丙烯酸缩水甘油酯。

2.按权利要求1所述的多环芳烃分子印迹固相萃取填料，其特征在于：所述模板分子与功能单体的摩尔比例为1:1-1:5-1:10，功能单体与辅助单体的摩尔比例为1:1-1:5，交联剂与模板分子的摩尔比例为5:1-15:1-30:1，引发剂与功能单体的摩尔比例为1:2-1:5-1:10，致孔剂的体积用量与交联剂的摩尔比例为1:1-4:1。

3.一种权利要求1所述的亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法，其特征在于：填料采用分子印迹技术制备，具体为以多环芳烃类化合物作为模板分子，在功能单体、交联剂、引发剂、致孔剂的存在下发生聚合反应，在反应过程中引入辅助单体，反应完成后经氧化反应获得亲水性的多环芳烃分子印迹固相萃取填料。

4.按权利要求3所述的亲水性多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法，其特征在于：

(1)按上述比例将模板分子、功能单体、致孔剂混合后避光放置1h-3h，然后再加入辅助单体、交联剂和引发剂混合，混合后经超声振荡溶解均匀后，并通入10-60min的氮气,待用；

(2)将上述步骤(1)的溶液置于55-80℃恒温油浴锅中反应12-24小时，生成聚合物；

(3)将上述获得的聚合物粉碎成10-120μm粒径大小的粉末，粉碎后的粉末采用非极性溶剂进行洗脱，洗脱后经索氏提取24-48h除去模板分子，室温下风干得到分子印迹聚合物微粒；而后向分子印迹聚合物微粒中加入体积分数10-20％的高氯酸水溶液，在室温下避光搅拌12-24小时，然后依次用乙醇、丙酮洗涤，室温下风干得到高选择性、高键合容量多环芳烃分子印迹固相萃取填料。

5.按权利要求3所述的多环芳烃分子印迹固相萃取填料的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中非极性溶剂为丙酮、氯仿、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、正丙醇、二氯甲烷、正丁醇、苯、氯苯、对二甲苯、甲苯、四氯化碳、环戊烷、环己烷、正戊烷、正己烷、正庚烷或异辛烷。

6.一种权利要求1所述的多环芳烃分子印迹固相萃取填料的应用，其特征在于：使用所述多环芳烃分子印迹固相萃取填料制成固相萃取柱。

7.按权利要求6所述的多环芳烃分子印迹固相萃取填料的应用，其特征在于：所述固相萃取柱在选择性分离、富集环境中多环芳烃的应用，具体为：所述由多环芳烃分子印迹固相萃取填料制成的固相萃取柱在选择性分离、富集环境中多环芳烃的应用。

8.按权利要求6所述的多环芳烃分子印迹固相萃取填料的应用，其特征在于：所述对水体中多环芳烃的高选择性分离富集，具体为：

(1)固相萃取柱的装填

将多环芳烃分子印迹固相萃取填料加入到带有聚四氟乙烯筛板(20μm)的固相萃取柱中，然后加入上筛板压紧；

(2)固相萃取柱的活化

依次使用环己烷、乙酸乙酯以及乙腈活化固相萃取柱，并且保证活化结束后固相萃取柱仍然湿润；

(3)固相萃取柱的上样

用聚四氟乙烯管和聚乙烯连接头将固相萃取柱与蠕动泵相连，将样品溶液上样；

(4)固相萃取柱的淋洗

使用超纯水淋洗柱体，淋洗结束后通入些许空气使柱体尽可能的干燥；

(5)固相萃取柱的洗脱

依次使用甲醇和乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液；

(6)浓缩和定容

将洗脱液于30-50℃恒温吹氮浓缩至全干，然后用1mL乙腈定容，并通过0.22μm有机相滤膜过滤，清液中目标物含量使用高效液相色谱检测。