CN104231166B - 一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种仿生分子印迹复合膜制备方法，属环境材料制备技术领域。特指以再生纤维素膜为基底，青蒿素（artemisinin）作为模板分子，丙烯酰胺（AM）为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA）为交联剂，结合多巴胺生物仿生原理，将表面功能单体改性的二氧化硅纳米颗粒镶嵌于膜材料表面，采用两步温度聚合的方法，制备仿生青蒿素分子印迹复合膜的方法。静态吸附实验用来研究了制备的印记膜的吸附平衡、动力学和选择性识别性能。结果表明利用本发明获得的青蒿素印迹膜具有较高的吸附能力和优越的青蒿素分子识别渗透性能。

Description

一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法

技术领域

本发明涉及一种仿生青蒿素分子印迹复合膜及其制备方法和应用，属于材料制备技术领域。

背景技术

青蒿素（artemisinin）是我国科学家从菊科蒿属植物青蒿中提取，并获得国际承认的具有自主知识产权的强效抗疟特效药，已成为世界卫生组织推荐的药品。随着对青蒿素类药物药理的作用研究的不断深入，证实青蒿素类药物具有抗疟、抗孕、抗纤维化、抗血吸虫、抗弓形虫、抗心律失常和抗肿瘤细胞毒性等作用。因此，青蒿素具有广阔的开发前景和重大的科学研究价值。青蒿素的提取分离方法主要是水蒸气蒸馏、有机溶剂浸提、索氏提取、超声波提取、微波辅助提取、超临界流体提取，而采用分子印迹复合膜分离提纯青蒿素的方法鲜有报道。

多巴胺(dopamine)是一种常见的神经传递物质，其电化学行为己被研究者广泛研究。同时，多巴胺溶液可以与一系列固体基体相接触发生反应，在其表面形成聚多巴胺膜。多巴胺可以通过强有力地共价和非共价作用聚合和附着在各种各样的无机和有机表面。多巴胺的邻苯二酚基团被氧化，生成具有邻苯二醌化合物。多巴胺和多巴胺醌之间发生反歧化反应，残生半醌自由基，然后偶合成交联键，同时在集体材料表面形成紧密黏附的交联复合层。多巴胺通过发生类似海洋贻贝黏液固化的反应稳定附着在固体材料表面，其与基体超强黏附行为的机理还有待进一步的研究，但目前已有的研究结果表明，多巴胺在固体材料表面黏附行为的作用机理来自于邻苯二酚与氨基官能团与材料的表面间的共价和非共价的相互作用。PDA表面改性的材料可以作为一个多功能的次级反应平台，用于细胞黏附、蛋白质固定、生物矿物形成、纳米颗粒固定、分子筛膜的制备方面的应用。

分子印迹技术(MIT)是模拟自然界中如：酶与底物、抗体与抗原等的分子识别作用，以目标分子为模板分子制备对该分子具有特异选择性识别功能的高分子印迹聚合物(MolecularlyImprintedPolymers，MIPs)的一种技术：即选用能与模板分子产生特定相互作用的功能性单体，在模板分子周围与交联剂进行聚合，形成三维交联的聚合物网络，最后通过物理化学等方法除去模板分子，就获得了具有对模板分子具有特殊亲和性及识别性孔穴的功能性高分子。表面分子印迹技术通过把分子识别位点建立在基质材料的表面，从而有利于模板分子的脱除和再结合，较好的解决了传统分子印迹技术整体还存在的一些严重缺陷，如活性位点包埋过深，传质和电荷传递的动力学速率慢，吸附-脱附的动力学性能不佳等。

将分子印迹技术与膜分离技术结合产生的分子印迹聚合膜(MolecularImprintedMembrane，MIM)的开发应用是最具吸引力的研究之一。分子印迹聚合物膜(MIM)兼具分子印迹及膜分离技术的优点，一方面，该技术便于连续操作，易于放大，能耗低，能量利用率高，是“绿色化学”的典型;另一方面，它克服了目前的商业膜材料如超滤、微滤及反渗透膜等无法实现单个物质选择分离的缺点，为将特定分子从结构类似的混合物中分离出来提供了可行有效的解决途径;另外，与传统的分子印迹微球材料相比，分子印迹膜具有材料更稳定，抵抗恶劣环境能力更强，扩散阻力小，形态规整，不需要研磨等繁琐的制备过程等独特的优点。七十年代以来，膜分离技术发展迅速，已广泛用于食品、医药、微生物、化学化工、原子能等领域。膜分离法耗能少，效率高，将有可能取代精馏工艺。多孔膜的各种用途主要依赖于它的孔性，即孔径大小及其分布、孔隙率、溶剂对膜的渗透性、膜对溶质分子的截留性以及耐溶剂性能等。

发明内容

本发明以以多巴胺仿生原理为基础，结合分子印迹原理，制备出青蒿素分子印迹复合膜。

本发明以再生纤维素膜（RCM）为基底，青蒿素（artemisinin）作为模板分子，丙烯酰胺（AM）作为功能单体，二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂，结合多巴胺仿生原理，将表面功能单体改性的二氧化硅（SiO₂）纳米颗粒镶嵌于膜表面，制备仿生分子印迹复合膜（MICM）的方法。

本发明的技术方案如下：

一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，按以下步骤进行：

（1）SiO₂纳米颗粒的制备：

首先，配制溶液A：将氨水和乙醇溶于水中，于烧瓶中磁力搅拌；然后配置溶液B：将正硅酸乙酯（TEOS）和乙醇混合均匀。将溶液B快速加入A中，并尽量不要让溶液B接触瓶壁。一分钟后搅拌速度降低。用parafilm封住反应烧瓶口，室温下反应。用乙醇离心清洗三次，真空烘干，即得到SiO₂纳米颗粒。

（2）丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒的制备

首先，将（1）中得到的SiO₂纳米颗粒和3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）按照比例混合分散于无水甲苯中，反应，将得到的产物记为SiO₂-APTES，反应结束后，将所得SiO₂-APTES清洗后分散于新的无水甲苯中。然后，在上述SiO₂-APTES甲苯溶液中加入丙烯酰氯，用无水碳酸钾做催化剂，室温搅拌反应，得到丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒（SiO₂-AA），所得产物清洗后真空干燥备用。

（3）合成SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜

首先，将多巴胺溶解于Tris-HCl溶液中，然后将再生纤维素膜置于上述溶液中，多巴胺改性，使聚多巴胺层沉积在再生纤维素膜表面，将所得聚多巴胺改性膜（PDARCM）室温干燥备用；最后将（2）中制备的SiO2-AA和PDARCM与甲醇混合，超声后，将上述甲醇溶液置于高压反应釜反应。反应结束后，用乙醇将所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜清洗三次，真空烘干备用。

（4）合成仿生分子印迹复合膜

将青蒿素和丙烯酰胺溶解于乙醇中，超声震荡，使之充分溶解，然后将该混合物体系置于室温密闭静置，使其形成稳定的模板-单体复合物，然后向该体系加入二甲基丙烯酸乙二醇酯（EGDMA）、偶氮二异丁腈（AIBN）以及（3）中所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜。在氮气保护下反应，反应结束后，将产物充分洗涤，真空干燥至恒重制得仿生分子印迹复合膜。

作为对比，非印迹复合膜的制备方法除不加模板分子青蒿素之外，与上述方法相同。

最后将所制得的印迹膜进行选择渗透性能分析测试。

上述技术方案中所述的青蒿素，其作用为模板分子。

上述技术方案中所述的丙烯酰胺，其作用为功能单体。

上述技术方案中所述的乙二醇二甲基丙烯酸酯，其作用为交联剂。

上述技术方案中所述的无水碳酸钾作为酰胺化反应的催化剂。

上述技术方案中所述的再生纤维素膜，其作用为基底。

上述技术方案中所述的多巴胺，其作用为生物仿生黏附材料。

其中，步骤（1）中所述的溶液A中氨水、乙醇和水的体积比为8:16:24；所述烧瓶中磁力搅拌速度为1100rpm；所述溶液B中正硅酸乙酯和乙醇的体积比为9:1；所述溶液B与溶液A的体积比为1:1；所述一分钟后搅拌速度降低至500rpm；所述室温下反应时间为3小时。

其中，步骤（2）中所述的SiO₂纳米颗粒和3-氨丙基三乙氧基硅烷的比例为0.1g:2mL；所述的反应为在氮气保护下50^oC反应12小时。所述将SiO₂-APTES清洗为用甲苯离心清洗三次；所述SiO₂-APTES、甲苯与丙烯酰氯的比例为0.1g:50mL：1-2mL；所述SiO₂-APTES与催化剂无水碳酸钾的质量比为10:1，所述的室温搅拌反应条件为在氮气保护下室温搅拌反应10小时；所述将产物洗涤为产物用甲苯清洗三次，乙醇清洗三次。

其中，步骤（3）中所述的多巴胺浓度为2mg/L；Tris-HCl溶液的浓度为10mM，pH=8.5；所述改性为25^oC改性24小时；所述SiO2-AA、PDARCM和甲醇的比例为0.15g：3片：100mL；所述超声时间为10分钟；所述在高压反应釜中反应为75^oC反应24小时。

其中，步骤（4）中所述青蒿素、丙烯酰胺和乙醇的用量比例为1mmol:2mmol:100mL，所述室温密闭静置24h，所述混合物体系、二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮二异丁腈与步骤（3）中所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜的比例为100mL：2-6mmol：10mg：2片；所述在氮气保护下反应为，50^oC反应5小时，60^oC反应24小时；所述洗涤为用乙醇和去离子水充分洗涤；所述真空干燥温度为45^oC。

本发明的技术优点

（1）该产品由于印迹发生在SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜材料表面，避免了部分模板分子因包埋过深而无法洗脱的问题，获得的印迹膜机械强度高，耐高温，识别点不易破坏，大大地降低了非特异性吸附；

（2）利用本发明获得的青蒿素分子印迹膜具有热稳定性好，快速的吸附动力学性质，明显的青蒿素分子识别性能。

（3）本发明采用基于多巴胺生物仿生原理，在再生纤维素膜表面合成青蒿素仿生分子印迹复合膜。

有益效果

本发明制备了一种青蒿素分子印迹膜，并将印迹膜用于蒿甲醚中青蒿素的选择性识别和分离。该吸附剂对青蒿素具有选择性高，分离效果显著，重复使用次数多的优点。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明技术作进一步描述。

图1为制备仿生分子印迹复合膜的机理图，其中（a）为SiO₂-AA的制备路线，（b）为印迹复合膜的制备路线。

图2为SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜（a）、仿生分子印迹复合膜（b）的扫描电镜图。

具体实施方式

下面结合具体实施实例对本发明做进一步说明。

上述技术方案中所述的吸附性能分析测试方法具体为：

（1）静态吸附试验

取一定量的印迹膜加入相应测试溶液中，恒温水浴震荡，考察不同吸附溶液的初始浓度对复合膜的影响，吸附后完成后，未吸附的青蒿素分子浓度用HPLC测定，并根据结果计算出吸附容量(Q _e，mg/g)：

其中C ₀(mg/L)和C _e(mg/L)分别是吸附前后青蒿素的浓度，W(g)为吸附剂用量，V(mL)为测试液体积。

（2）选择渗透性试验

自制两个完全相同的带有磨口支管的玻璃池，将印迹膜或空白膜用夹子固定于两个玻璃池中间，组成H形渗透性装置，保证两池没有渗漏，一池中加入底物为青蒿素和蒿甲醚的乙醇溶液，另一池中加入乙醇溶剂，隔一定时间取样，测定透过聚合物膜的底物的浓度，并据此计算渗透量。

实施例1：

（1）SiO₂纳米颗粒的制备

首先，配制溶液A：将8mL的氨水、16mL乙醇和24mL水，置于烧瓶中，磁力搅拌（1100rpm）。然后配置溶液B：将5mL正硅酸乙酯（TEOS）与45mL乙醇，混合均匀。将溶液B快速加入A中，并尽量不要让溶液B接触瓶壁。一分钟后将搅拌速度降低至500rpm。用parafilm封住反应烧瓶口，室温下反应3小时。用乙醇离心清洗三次，真空烘干。

（2）丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒的制备

首先，将0.1g（1）中得到的SiO₂纳米颗粒和2mL3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）混合分散于50mL无水甲苯中，在氮气保护下50^oC反应12小时。反应结束后，将所得SiO₂-APTES用甲苯离心清洗三次，分散于50mL新的无水甲苯中。然后，在上述APTES-SiO₂甲苯溶液中加入1mL丙烯酰氯，用无水碳酸钾做催化剂，在氮气保护下室温搅拌反应10小时，得到丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒（SiO₂-AA），所得产物用甲苯清洗三次，乙醇清洗三次，真空干燥备用。

（3）合成SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜

首先，将多巴胺（2mg/L）溶解于10mMTris-HCl(pH=8.5)溶液中。然后将再生纤维素膜置于上述溶液中，25^oC多巴胺改性24小时，使聚多巴胺层沉积在再生纤维素膜表面，将所得聚多巴胺改性膜（PDARCM）室温干燥备用。最后将（2）中制备的SiO₂-AA（0.05g）和1片PDARCM置于30mL甲醇中，超声10分钟，将上述甲醇溶液置于高压反应釜75^oC反应24小时。反应结束后，用乙醇将所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜清洗三次，真空烘干备用。

（4）合成仿生分子印迹复合膜

将青蒿素和丙烯酰胺溶解于乙醇中，其中青蒿素、丙烯酰胺和乙醇的用量分别为1mmol，2mmol，100mL，超声震荡，使之充分溶解，然后将该混合物体系置于室温密闭静置24h，使其形成稳定的模板-单体复合物，然后按每100mL混合物向该体系加入2mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯（EGDMA）、10mg偶氮二异丁腈（AIBN）以及两片（3）中所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜。在氮气保护下，50^oC反应5小时，60^oC反应24小时。反应结束后，用乙醇和去离子水充分洗涤，45^oC下真空干燥箱干燥至恒重制得仿生分子印迹复合膜。作为对比，非印迹复合膜的制备方法除不加模板分子青蒿素之外，与上述方法相同。

1.静态吸附试验

分别称取印迹膜和非印迹膜各6份，分别放入到10个锥形瓶中，然后各加入10mL浓度为80、100、200、300、400、800mg/L的青蒿素乙醇溶液，在25^oC条件下恒温水浴震荡3h，吸附后完成后，用HPLC测定未吸附的青蒿素分子的浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明，青蒿素分子印迹膜的饱和吸附容量为53.72mg/g，明显高于非印迹膜的15.98mg/g。

2.选择性吸附试验

称取印迹膜5份，分别放入到5个锥形瓶中，然后各加入10mL浓度为80、200、300、400、800mg/L的青蒿素和蒿甲醚乙醇溶液，在25^oC条件下恒温水浴震荡3h，吸附后完成后，用HPLC测定未吸附的青蒿素和蒿甲醚分子的浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明，青蒿素分子印迹膜的饱和吸附容量为51.41mg/g，青蒿素分子印迹膜的饱和吸附容量为12.79mg/g，选择因子为4.02。

3.选择渗透性试验

自制两个完全相同的带有磨口支管的玻璃池，将印迹膜用夹子固定于两个玻璃池中间，组成H形渗透性装置，保证两池没有渗漏，一池中分别加入底物浓度为400mg/L的青蒿素和蒿甲醚的乙醇溶液，另一池中加入乙醇溶剂，取样时间分别为5、10、15、30、45、60、90、120、180min，测定透过聚合物膜的底物的浓度，并据此计算渗透量。

结果显示，在初始浓度为400mg/L的青蒿素和蒿甲醚乙醇溶液，取样时间分别为5、10、15、30、45、60、90、120、180min，测得空白样品池中青蒿素的浓度分别为10.36、18.01、22.19、28.52、33.15、36.06、41.37、48.05、51.99mg/L，测得蒿甲醚的浓度分别为39.42、63.05、82.48、96.26、109.06、130.71、143.99、156.13、169.07mg/g。

实验结果表明青蒿素分子印迹膜对青蒿素有特异识别和促进非青蒿素分子（蒿甲醚）渗透性能。

实施例2：

（1）SiO₂纳米颗粒的制备

首先，配制溶液A：将7mL的氨水、14mL乙醇和21mL水，置于烧瓶中，磁力搅拌（1100rpm）。然后配置溶液B：将6mL正硅酸乙酯（TEOS）与54mL乙醇，混合均匀。将溶液B快速加入A中，并尽量不要让溶液B接触瓶壁。一分钟后将搅拌速度降低至500rpm。用parafilm封住反应烧瓶口，室温下反应5小时。用乙醇离心清洗三次，真空烘干。

（2）丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒的制备

首先，将0.15g（1）中得到的SiO₂纳米颗粒和3mL3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）混合分散于50mL无水甲苯中，在氮气保护下50^oC反应12小时。反应结束后，将所得SiO₂-APTES用甲苯离心清洗三次，分散于50mL新的无水甲苯中。然后，在上述APTES-SiO₂甲苯溶液中加入2mL丙烯酰氯，用无水碳酸钾做催化剂，在氮气保护下室温搅拌反应12小时，得到丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒（SiO₂-AA），所得产物用甲苯清洗三次，乙醇清洗三次，真空干燥备用。

（3）合成SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜

首先，将多巴胺（2mg/L）溶解于10mMTris-HCl(pH=8.5)溶液中。然后将再生纤维素膜置于上述溶液中，25^oC多巴胺改性24小时，使聚多巴胺层沉积在再生纤维素膜表面，将所得聚多巴胺改性膜（PDARCM）室温干燥备用。最后将（2）中制备的SiO₂-AA（0.1g）和2片PDARCM置于70mL甲醇中，超声10分钟，将上述甲醇溶液置于高压反应釜75^oC反应24小时。反应结束后，用乙醇将所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜清洗三次，真空烘干备用。

（4）合成仿生分子印迹复合膜

将青蒿素和丙烯酰胺溶解于乙醇中，其中青蒿素、丙烯酰胺和乙醇的用量分别为1.5mmol，3mmol，150mL，超声震荡，使之充分溶解，然后将该混合物体系置于室温密闭静置24h，使其形成稳定的模板-单体复合物，然后按每100mL混合物向该体系加入4mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯（EGDMA）、10mg偶氮二异丁腈（AIBN）以及两片（3）中所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜。在氮气保护下，50^oC反应5小时，60^oC反应36小时。反应结束后，用乙醇和去离子水充分洗涤，45^oC下真空干燥箱干燥至恒重制得仿生分子印迹复合膜。作为对比，非印迹复合膜的制备方法除不加模板分子青蒿素之外，与上述方法相同。

1.静态吸附试验

分别称取印迹膜和非印迹膜各6份，分别放入到10个锥形瓶中，然后各加入10mL浓度为80、100、200、300、400、800mg/L的青蒿素乙醇溶液，在25^oC条件下恒温水浴震荡3h，吸附后完成后，用HPLC测定未吸附的青蒿素分子的浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明，青蒿素分子印迹膜的饱和吸附容量为52.11mg/g，明显高于非印迹膜的16.37mg/g。

2.选择性吸附试验

称取印迹膜5份，分别放入到5个锥形瓶中，然后各加入10mL浓度为80、200、300、400、800mg/L的青蒿素和蒿甲醚乙醇溶液，在25^oC条件下恒温水浴震荡3h，吸附后完成后，用HPLC测定未吸附的青蒿素和蒿甲醚分子的浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明，青蒿素分子印迹膜的饱和吸附容量为50.39mg/g，青蒿素分子印迹膜的饱和吸附容量为15.13mg/g，选择因子为3.33。

3.选择渗透性试验

自制两个完全相同的带有磨口支管的玻璃池，将印迹膜用夹子固定于两个玻璃池中间，组成H形渗透性装置，保证两池没有渗漏，一池中分别加入底物浓度为400mg/L的青蒿素和蒿甲醚的乙醇溶液，另一池中加入乙醇溶剂，取样时间分别为5、10、15、30、45、60、90、120、180min，测定透过聚合物膜的底物的浓度，并据此计算渗透量。

结果显示，在初始浓度为400mg/L的青蒿素和蒿甲醚乙醇溶液，取样时间分别为5、10、15、30、45、60、90、120、180min，测得空白样品池中青蒿素的浓度分别为12.34、21.24、26.31、31.42、35.17、39.02、46.17、51.02、53.21mg/L，测得蒿甲醚的浓度分别为36.36、63.95、84.16、93.30、106.13、129.11、141.28、149.92、164.12mg/g。

实验结果表明青蒿素分子印迹膜对青蒿素有特异识别和促进非青蒿素分子（蒿甲醚）渗透性能。

图1为制备仿生分子印迹复合膜的机理图，其中（a）为SiO₂-AA的制备路线，（b）为印迹复合膜的制备路线。

图2为SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜（a）、仿生分子印迹复合膜（b）的扫描电镜图；从图2中可以看出与SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜相比较，在合成印迹聚合物形成印迹膜后，再生纤维素膜表面粗糙不规则，有一层薄薄的印迹层，表明印迹成功。

Claims (6)

1.一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行：

（1）SiO₂纳米颗粒的制备：

首先，配制溶液A：将氨水和乙醇溶于水中，于烧瓶中磁力搅拌；然后配制

溶液B：将正硅酸乙酯和乙醇混合均匀；将溶液B快速加入A中，并尽量不要让溶液B接触瓶壁；一分钟后搅拌速度降低；用parafilm封住反应烧瓶口，室温下反应；用乙醇离心清洗三次，真空烘干，即得到SiO₂纳米颗粒；

（2）丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒的制备

首先，将（1）中得到的SiO₂纳米颗粒和3-氨丙基三乙氧基硅烷按照比例混

合分散于无水甲苯中，反应，将得到的产物记为SiO₂-APTES，反应结束后，将所得SiO₂-APTES清洗后分散于新的无水甲苯中；

然后，在上述SiO₂-APTES甲苯溶液中加入丙烯酰氯，用无水碳酸钾做催化剂，室温搅拌反应，得到丙烯酰胺表面改性SiO₂纳米颗粒，记为SiO₂-AA，所得产物清洗后真空干燥备用；

（3）合成SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜

首先，将多巴胺溶解于Tris-HCl溶液中，然后将再生纤维素膜置于上述溶液

中，多巴胺改性，使聚多巴胺层沉积在再生纤维素膜表面，将所得聚多巴胺改性膜（PDARCM）室温干燥备用；最后将（2）中制备的SiO₂-AA和PDARCM与甲醇混合，超声后，将上述甲醇溶液置于高压反应釜反应；反应结束后，用乙醇将所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜清洗三次，真空烘干备用；

（4）合成仿生分子印迹复合膜

将青蒿素和丙烯酰胺溶解于乙醇中，超声震荡，使之充分溶解，然后将该混

合物体系置于室温密闭静置，使其形成稳定的模板-单体复合物，然后向该体系加入二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮二异丁腈以及（3）中所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜；在氮气保护下反应，反应结束后，将产物充分洗涤，真空干燥至恒重制得仿生分子印迹复合膜。

2.根据权利要求1中所述的一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，其特

征在于，

步骤（1）中所述的溶液A中氨水、乙醇和水的体积比为8:16:24；

所述烧瓶中磁力搅拌速度为1100rpm；

所述溶液B中正硅酸乙酯和乙醇的体积比为9:1；

所述溶液B与溶液A的体积比为1:1；

所述一分钟后搅拌速度降低至500rpm；

所述室温下反应时间为3小时。

3.根据权利要求1中所述的一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，其特

征在于，

步骤（2）中所述的SiO₂纳米颗粒和3-氨丙基三乙氧基硅烷的比例为0.1g:2mL；

所述的反应为在氮气保护下50^oC反应12小时；

所述将SiO₂-APTES清洗为用甲苯离心清洗三次；

所述SiO₂-APTES、甲苯与丙烯酰氯的比例为0.1g:50mL：1-2mL；

所述SiO₂-APTES与催化剂无水碳酸钾的质量比为10:1；

所述的室温搅拌反应条件为在氮气保护下室温搅拌反应10小时；

所述将产物清洗为产物用甲苯清洗三次，乙醇清洗三次。

4.根据权利要求1中所述的一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，其特

征在于，

步骤（3）中所述的多巴胺浓度为2mg/L；Tris-HCl溶液的浓度为10mM，pH=8.5；

所述改性为25℃改性24小时；

所述SiO₂-AA、PDARCM和甲醇的比例为0.15g：3片：100mL；

所述超声时间为10分钟；

所述在高压反应釜中反应为75^oC反应24小时。

5.根据权利要求1中所述的一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，其特

征在于，

步骤（4）中所述青蒿素、丙烯酰胺和乙醇的用量比例为1mmol:2mmol:100mL；

所述室温密闭静置24h；

所述混合物体系、二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮二异丁腈与步骤（3）中所得SiO₂纳米颗粒负载再生纤维素复合膜的比例为100mL：2-6mmol：10mg：2片；

所述在氮气保护下反应为，50^oC反应5小时，60^oC反应24小时；

所述洗涤为用乙醇和去离子水充分洗涤；

所述真空干燥温度为45^oC。

6.根据权利要求1中所述的一种仿生青蒿素分子印迹复合膜的制备方法，其特

征在于，将其用于青蒿素和蒿甲醚的混合乙醇溶液选择性识别和分离。