CN104558156A - 一种从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法，可有效解决既从血浆中提取回收人血白蛋白和提高得率的问题，其解决的技术方案是，该方法包括以下步骤：血浆的合并与融化、组分I+II+III的制作和压滤、组分IV的制作和压滤、组分V的制作和压滤、组分V沉淀溶解过滤、组分V精制纯化、超滤透析浓缩、配制、巴氏灭活、除菌灌装、孵放和检定，所述的组分IV的制作和压滤，在制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.80～5.90，加入-15℃以下的体积浓度为95%乙醇，使最终乙醇体积浓度达到40%，发明生产工艺更加流畅简洁，并且提高了人血白蛋白得率，经济和社会效益巨大。

Description

一种从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法

技术领域

本发明涉及生物制药，特别是一种从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法。

背景技术

人血白蛋白是人体血液中最主要的一种功能性蛋白质，其主要的生理功能为调节人体渗透压和新陈代谢中物质运输，在治疗因烧伤等原因引起了体液大量流失方面具有非常重要的作用，此外，人血白蛋白还起着营养供给、运输及解毒和对其它血浆蛋白的胶体保护和稳定的作用。

目前世界上各血液制品生产厂家大多采用低温乙醇法生产人血白蛋白，此类技术为低温乙醇分级沉淀技术，通过有效控制蛋白质沉淀的五个因素：pH值、温度、蛋白质浓度、离子强度、乙醇浓度来逐级沉淀血浆中的不同蛋白质，一般分离人血白蛋白的步骤为先从血浆中去除组分Ⅰ，再去除组分Ⅱ＋Ⅲ，然后去除组分Ⅳ，最后沉淀提取组分Ⅴ即人血白蛋白。在原材料血浆日益紧张的今天，尽管各个生产企业采取了各种方法提高收率，比如合并血浆时冲洗各种与之接触的器皿；或用大量的平衡液冲洗滤板等等措施，从而降低各个过程的损失提高收率，但这些措施仅是从减少损失的前提下进行的，而且操作麻烦，成本高。因此，如何有效解决从血浆中提高回收人血白蛋白得率是本领域技术人员非常关心，需要解决的技术问题。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法，可有效解决既从血浆中提取回收人血白蛋白和提高得率的问题。

本发明解决的技术方案是，该方法包括以下步骤：血浆的合并与融化、组分I+II+III的制作和压滤、组分IV的制作和压滤、组分V的制作和压滤、组分V沉淀溶解过滤、组分V（简称FV）精制纯化、超滤透析浓缩、配制、巴氏灭活、除菌灌装、孵放和检定，所述的组分 IV 的制作和压滤，在制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.80～5.90，加入-15℃以下的体积浓度为95%乙醇，使最终乙醇体积浓度达到40%，其它步骤均与现有技术相同或相近似，由此可知，本发明的创新之处核心在于组分IV的制作和压滤。

本发明采用上述技术方案，首先由于在FI+II+III上清液中提高了溶液的Na+浓度，增加人血白蛋白的溶解性；其次因降低溶液的蛋白含量，从而减少了人血白蛋白的共沉，降低了损失，因此在人血白蛋白关键步骤组分IV制作中使得人血白蛋白收率得以大大提高，再者将FI沉淀并入FII+III一块提取，减少了步骤，从而减少了一步损失，是生产工艺更加流畅简洁，并且提高了人血白蛋白得率，经济和社会效益巨大。

附图说明

图1为本发明的工艺流程图。

具体实施方式

以下结合工艺流程图和实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

由附图给出，本发明在实施中，是由以下步骤给出：

（1）、血浆的合并与融化：破袋后并入清洁的融浆罐内，开启融浆罐，搅拌及融浆温控器，在水温＜35℃，使融浆罐内血浆融化，温度保持在0℃～4℃；

（2）、组分I+II+III的制作和压滤分离：计量合并后血浆体积，用pH4.0醋酸缓冲液调节混合血浆pH值6.85～6.95，打开循环冷却系统给血浆降温，待血浆降温至0℃后，加入-15℃以下的95%(V/V)的乙醇；加入乙醇速度≤60L/h，使制品最终乙醇浓度达到20%（v/v），在加入乙醇过程中，温度始终不得高于0℃，最终血浆温度控制在-5.0～-5.5℃，乙醇加完后继续搅拌2小时以上，保持溶液pH为6.85～6.95；再向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2～4kg，搅拌均匀（一般搅拌30分钟），在温度-4.5℃～-5.5℃、压力0.20MPa下压滤，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用20%（v/v）的乙醇组分I+II+III（又称FI+II+III）平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液，得到组分I+II+III上清液；

20%（v/v）的乙醇组分I+II+III平衡液是由95%（v/v）的乙醇210L、枸橼酸钠3.8Kg、NaCl 4.6Kg、加注射用水至1000L制成，用pH4.0 HAc-NaAc缓冲液调整平衡液pH为6.85～6.95，平衡液温度-4.5～-5.5℃；

（3）、组分IV的制作和压滤分离：步骤（2）制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.80～5.90，加入-15℃以下的95%（v/v）乙醇，使乙醇浓度达到体积比40%（v/v），加乙醇速度≤80L/h，在加入乙醇过程中温度控制在-2.0℃以下，边加乙醇边降温，使组分I+II+III上清液最终温度控制在-5.0～-5.5℃，乙醇加毕继续搅拌2小时，保持pH为5.80～5.90（否则应矫正至此范围内）；向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2～4kg，搅拌30分钟后开始压滤，压滤的过程中，工作压力控制在0.2MPa之内，滤液温度控制在-4.5℃～-5.5℃，压滤后，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用40%乙醇组分Ⅳ平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液中，得组分Ⅳ上清液（又称FⅣ上清液）；

所述的40%乙醇组分Ⅳ平衡液是由95%乙醇溶液420L、枸橼酸钠3.0Kg和NaCl 4.0Kg加注射用水至1000L制成，用pH 4.0HAc-NaAc缓冲液调整平衡液pH 5.80～5.90，温度-4.5℃～5.5℃；

（4）组分FV制作与分离：步骤（3）制备的Ⅳ上清液用2mol/L HAc-40%乙醇（v/v）溶液缓慢调整pH值为4.75～4.85，滴加时速度小于200ml/min，边加边降温，最终温度控制在-8～-9℃，滴加完毕后继续搅拌1小时，保持pH为4.75～4.85（否则应矫正至此范围内），静置2小时以上压滤，压滤过程中，工作压力0.20MPa，滤液温度控制在-5.0℃以下，压滤后，用提前预冷的洁净压缩空气吹出压滤机内的残留液，收集沉淀，得组分Ⅴ；

所述的40%乙醇（v/v）组分Ⅴ平衡液是由95%乙醇（v/v）420L加注射用水至1000L搅拌均匀制成，降温至-8～-9℃；

（5）组分V精制纯化：

①组分V沉淀用5倍体积（V/V）的8%乙醇（v/v）溶液搅拌溶解，沉淀完全溶解后，测量组分V溶液pH为4.50～4.70，在温度-2.5～-3.5℃继续搅拌2～3小时，压滤；

②压滤：压滤过程中搅拌不停，压滤完后，用低温冷空气吹出滤器内液体，至出气泡后停止，再用组分V平衡液冲洗滤板，冲洗液并入到过滤液中得到纯化液；

所述的组分V平衡液为质量浓度12%的乙醇溶液pH值4.50～4.70，降温至-2.5～-3.5℃；

（6）超滤：

①搅拌：用1M碳酸氢钠调整纯化液pH值至7.0～7.2；

②将纯化液超滤浓缩至蛋白浓度100～150g/L，用5倍的9g/L的氯化钠溶液等体积透析，再用3倍的注射用水透析得到白蛋白原液，将白蛋白原液超滤浓缩至蛋白质含量210g/L以上，用注射用水洗涤超滤膜，收集洗膜液，并入上述白蛋白原液中即为人血白蛋白原液（取样进行原液检测）；

（7）半成品配制：

测定人血白蛋白原液中蛋白质含量，按每克蛋白质160毫摩尔称取辛酸钠，按每克蛋白质120～130毫摩尔称取氯化钠，称取后用注射用水溶解，加入人血白蛋白原液，再将人血白蛋白原液稀释至蛋白质浓度195～200g/L，用pH4.0醋酸缓冲液或1mol/L碳酸氢钠调整pH值6.8～7.0；

（8）巴氏灭活分装孵化：

将步骤（7）制备的蛋白质浓度195～200g/L的人血白蛋白原液进行60℃、10小时灭活病毒，灭活后除菌分装和孵放，孵放过程保持温度30～32℃，孵放≥14天，进行二次灯检，合格品即为人血白蛋白成品，得率为2.93～2.94%，包装入库。

本发明在具体实施中，还可由以下实施例给出。

实施例1

本发明在具体实施中，包括以下步骤：

（1）、血浆的合并与融化：破袋后并入清洁的融浆罐内，开启融浆罐，搅拌及融浆温控器，在水温＜35℃，使融浆罐内血浆融化，温度保持在2℃～3℃；

（2）、组分I+II+III的制作和压滤分离：计量合并后血浆体积，用pH4.0醋酸缓冲液调节混合血浆pH值6.85～6.95，打开循环冷却系统给血浆降温，待血浆降温至0℃后，加入-16℃的95%乙醇（v/v）；加入乙醇速度55L/h，使制品最终乙醇浓度达到体积比20%（v/v），在加入乙醇过程中，温度始终不得高于0℃，最终血浆温度控制在-5.2～-5.3℃，乙醇加完后继续搅拌2.5小时，保持溶液pH为6.7～7.2；再向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2.5～3.5kg，搅拌均匀（一般搅拌30分钟），在温度-4℃～-5℃、压力0.20MPa下压滤，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用20%乙醇（v/v）组分I+II+III（又称FI+II+III）平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液，得到组分I+II+III上清液；

（3）、组分IV的制作和压滤分离：步骤（2）制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.8～5.9，加入-16℃质量浓度95%乙醇，使乙醇浓度达到体积比40%（v/v），加乙醇速度75L/h，在加入乙醇过程中温度控制在-2.0℃以下，边加乙醇边降温，使组分I+II+III上清液最终温度控制在-5.2～-5.3℃，乙醇加毕继续搅拌2小时，保持pH为5.8～5.9（否则应矫正至此范围内）；向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2.5～3.5kg，搅拌30分钟后开始压滤，压滤的过程中，工作压力控制在0.2MPa之内，滤液温度控制在-4.7℃～-4.8℃，压滤后，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用质量浓度40%乙醇组分Ⅳ平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液中，得组分Ⅳ上清液（又称FⅣ上清液）；

（4）组分FV制作与分离：步骤（3）制备的Ⅳ上清液用2mol/L HAc-40%乙醇（质量浓度）溶液缓慢调整pH值为4.75～4.85，滴加时速度小于200ml/min，边加边降温，最终温度控制在-8.2～-8.8℃，滴加完毕后继续搅拌1小时，保持pH为4.75～4.85（否则应矫正至此范围内），静置3小时，压滤，压滤过程中，工作压力0.20MPa，滤液温度控制在-6.0℃，压滤后，用提前预冷的洁净压缩空气吹出压滤机内的残留液，收集沉淀，得组分Ⅴ；

（5）组分V精制纯化：

①组分V沉淀用5倍体积（V/V）的质量浓度8%的乙醇溶液搅拌溶解，沉淀完全溶解后，测量组分V溶液pH为4.50～4.70，在温度-2.8～-3.2℃继续搅拌2～3小时，压滤；

②压滤：压滤过程中搅拌不停，压滤完后，用低温冷空气吹出滤器内液体，至出气泡后停止，再用组分V平衡液冲洗滤板，冲洗液并入到过滤液中得到纯化液；

（6）超滤：

①搅拌：用1M碳酸氢钠调整纯化液pH值至7.05～7.10；

②将纯化液超滤浓缩至蛋白浓度120～130g/L，用5倍的9g/L的氯化钠溶液等体积透析，再用3倍的注射用水透析得到白蛋白原液，将白蛋白原液超滤浓缩至蛋白质含量210g/L以上，用注射用水洗涤超滤膜，收集洗膜液，并入上述白蛋白原液中即为人血白蛋白原液（取样进行原液检测）；

（7）半成品配制：

测定人血白蛋白原液中蛋白质含量，按每克蛋白质160毫摩尔称取辛酸钠，按每克蛋白质120～130毫摩尔称取氯化钠，称取后用注射用水溶解，加入人血白蛋白原液，再将人血白蛋白原液稀释至蛋白质浓度196～198g/L，用pH4.0醋酸缓冲液或1mol/L的碳酸氢钠调整pH值6.85～6.95；

（8）巴氏灭活分装孵化：

将步骤（7）制备的蛋白质浓度196～198g/L的人血白蛋白原液进行60℃、10小时灭活病毒，灭活后除菌分装和孵放，孵放过程保持温度30.5～31.5℃，孵放≥14天，进行二次灯检，合格品即为人血白蛋白成品，得率为2.93～2.94%，包装入库。

实施例2

本发明在实施中，还可由以下步骤实现：

（1）、血浆的合并与融化：破袋后并入清洁的融浆罐内，开启融浆罐，搅拌及融浆温控器，在水温＜35℃，使融浆罐内血浆融化，温度保持在0℃～4℃；

（2）、组分I+II+III的制作和压滤分离：计量合并后血浆体积，用pH4.0醋酸缓冲液调节混合血浆pH值6.85，打开循环冷却系统给血浆降温，待血浆降温至0℃后，加入-15℃以下的质量浓度为95%的乙醇；加入乙醇速度≤60L/h，使制品最终乙醇浓度达到体积比20%（v/v），在加入乙醇过程中，温度始终不得高于0℃，最终血浆温度控制在-5.0℃，乙醇加完后继续搅拌2小时以上，保持溶液pH为6.85；再向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2kg，搅拌均匀（一般搅拌30分钟），在温度-4.5℃、压力0.20MPa下压滤，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用质量浓度20%的乙醇组分I+II+III（又称FI+II+III）平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液，得到组分I+II+III上清液；

（3）、组分IV的制作和压滤分离：步骤（2）制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.8，加入-15℃以下的质量浓度95%乙醇，使乙醇浓度达到体积比40%（v/v），加乙醇速度≤80L/h，在加入乙醇过程中温度控制在-2.0℃以下，边加乙醇边降温，使组分I+II+III上清液最终温度控制在-5.0℃，乙醇加毕继续搅拌2小时，保持pH为5.8（否则应矫正至此范围内）；向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2kg，搅拌30分钟后开始压滤，压滤的过程中，工作压力控制在0.2MPa之内，滤液温度控制在-4.5℃，压滤后，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用质量浓度40%乙醇组分Ⅳ平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液中，得组分Ⅳ上清液（又称FⅣ上清液）；

（4）组分FV制作与分离：步骤（3）制备的Ⅳ上清液用2mol/L HAc-40%乙醇（v/v）溶液缓慢调整pH值为4.8，滴加时速度小于200ml/min，边加边降温，最终温度控制在-8.5℃，滴加完毕后继续搅拌1小时，保持pH为4.8（否则应矫正至此范围内），静置2小时以上压滤，压滤过程中，工作压力0.20MPa，滤液温度控制在-5.0℃以下，压滤后，用提前预冷的洁净压缩空气吹出压滤机内的残留液，收集沉淀，得组分Ⅴ；

（5）组分V精制纯化：

①组分V沉淀用5倍体积（V/V）的体积浓度8%的乙醇溶液搅拌溶解，沉淀完全溶解后，测量组分V溶液pH为4.50，在温度-3℃继续搅拌2～3小时，压滤；

②压滤：压滤过程中搅拌不停，压滤完后，用低温冷空气吹出滤器内液体，至出气泡后停止，再用组分V平衡液冲洗滤板，冲洗液并入到过滤液中得到纯化液；

（6）超滤：

①搅拌：用1M碳酸氢钠调整纯化液pH值至7.0～7.2；

②将纯化液超滤浓缩至蛋白浓度110g/L，用5倍的9g/L的氯化钠溶液等体积透析，再用3倍的注射用水透析得到白蛋白原液，将白蛋白原液超滤浓缩至蛋白质含量210g/L以上，用注射用水洗涤超滤膜，收集洗膜液，并入上述白蛋白原液中即为人血白蛋白原液（取样进行原液检测）；

（7）半成品配制：

测定人血白蛋白原液中蛋白质含量，按每克蛋白质160毫摩尔称取辛酸钠，按每克蛋白质120～130毫摩尔称取氯化钠，称取后用注射用水溶解，加入人血白蛋白原液，再将人血白蛋白原液稀释至蛋白质浓度195～200g/L，用pH4.0醋酸缓冲液或1mol/L的碳酸氢钠调整pH值6.8～7.0；

（8）巴氏灭活分装孵化：

将步骤（7）制备的蛋白质浓度195～200g/L的人血白蛋白原液进行60℃、10小时灭活病毒，灭活后除菌分装和孵放，孵放过程保持温度30～32℃，孵放≥14天，进行二次灯检，合格品即为人血白蛋白成品，得率为2.93～2.94%，包装入库。

实施例3

本发明在具体实施中，还可由以下步骤实现：

（1）、血浆的合并与融化：破袋后并入清洁的融浆罐内，开启融浆罐，搅拌及融浆温控器，在水温＜35℃，使融浆罐内血浆融化，温度保持在2～3℃；

（2）、组分I+II+III的制作和压滤分离：计量合并后血浆体积，用pH4.0醋酸缓冲液调节混合血浆pH值6.9，打开循环冷却系统给血浆降温，待血浆降温至0℃后，加入-17℃质量浓度为95%的乙醇；加入乙醇速度60L/h，使制品最终乙醇浓度达到体积比20%（v/v），在加入乙醇过程中，温度始终不得高于0℃，最终血浆温度控制在-5.3℃，乙醇加完后继续搅拌2小时以上，保持溶液pH为6.9；再向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各3kg，搅拌均匀（一般搅拌30分钟），在温度-5.3℃、压力0.20MPa下压滤，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用20%的乙醇组分I+II+III（又称FI+II+III）平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液，得到组分I+II+III上清液；

（3）、组分IV的制作和压滤分离：步骤（2）制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.9，加入-17℃质量浓度95%乙醇，使乙醇浓度达到体积比40%（v/v），加乙醇速度80L/h，在加入乙醇过程中温度控制在-3.0℃，边加乙醇边降温，使组分I+II+III上清液最终温度控制在-5.3℃，乙醇加毕继续搅拌2小时，保持pH为5.9（否则应矫正至此范围内）；向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各3kg，搅拌30分钟后开始压滤，压滤的过程中，工作压力控制在0.2MPa之内，滤液温度控制在-5.3℃，压滤后，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用质量浓度40%乙醇组分Ⅳ平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液中，得组分Ⅳ上清液（又称FⅣ上清液）；

（4）组分FV制作与分离：步骤（3）制备的Ⅳ上清液用2mol/L HAc-40%乙醇（质量浓度）溶液缓慢调整pH值为4.85，滴加时速度190ml/min，边加边降温，最终温度控制在-9℃，滴加完毕后继续搅拌1小时，保持pH为4.85（否则应矫正至此范围内），静置2小时以上压滤，压滤过程中，工作压力0.20MPa，滤液温度控制在-7.0℃，压滤后，用提前预冷的洁净压缩空气吹出压滤机内的残留液，收集沉淀，得组分Ⅴ；

（5）组分V精制纯化：

①组分V沉淀用5倍体积（V/V）的体积浓度8%的乙醇溶液搅拌溶解，沉淀完全溶解后，测量组分V溶液pH为4.6，在温度-3.0℃继续搅拌2.5小时，压滤；

②压滤：压滤过程中搅拌不停，压滤完后，用低温冷空气吹出滤器内液体，至出气泡后停止，再用组分V平衡液冲洗滤板，冲洗液并入到过滤液中得到纯化液；

（6）超滤：

①搅拌：用1M碳酸氢钠调整纯化液pH值至7.1；

②将纯化液超滤浓缩至蛋白浓度125g/L，用5倍的9g/L的氯化钠溶液等体积透析，再用3倍的注射用水透析得到白蛋白原液，将白蛋白原液超滤浓缩至蛋白质含量215g/L，用注射用水洗涤超滤膜，收集洗膜液，并入上述白蛋白原液中即为人血白蛋白原液（取样进行原液检测）；

（7）半成品配制：

测定人血白蛋白原液中蛋白质含量，按每克蛋白质160毫摩尔称取辛酸钠，按每克蛋白质120～130毫摩尔称取氯化钠，称取后用注射用水溶解，加入人血白蛋白原液，再将人血白蛋白原液稀释至蛋白质浓度198g/L，用pH4.0醋酸缓冲液或1mol/L的碳酸氢钠调整pH值6.9；

（8）巴氏灭活分装孵化：

将步骤（7）制备的蛋白质浓度198g/L的人血白蛋白原液进行60℃、10小时灭活病毒，灭活后除菌分装和孵放，孵放过程保持温度31℃，孵放14天，进行二次灯检，合格品即为人血白蛋白成品，平均得率为2.935%，包装入库。

本发明经多次试验，均取得了相同或相近似的结果，其得率稳定在2.95-2.97%之间，均得率为2.96%，如将三批血浆每批平均一分为二，分别采用现有方法和本发明方法来制备人血白蛋白，结果如下表：

批号	原工艺回收率*	改进后回收率*
			1	2.88%	2.97%
2	2.85%	2.95%
			3	2.87%	2.96%

*回收率：100ml血浆收获多少克目标蛋白。

而且由于在工艺中特别是把组分Ⅰ并于组分Ⅱ、Ⅲ中一起沉淀，不再先分离出组分Ⅰ，再去除组分Ⅱ＋Ⅲ，然后去除组分Ⅳ，大大简化了工艺步骤，从而减少了人血白蛋白的损失，有利于人血白蛋白产率的提高；而且在组分Ⅳ制作时，在组分I+Ⅱ+Ⅲ滤液中，加入1/10体积的 0℃生理盐水，调整溶液pH值，添加乙醇至终浓度40%，既达到提高产率的目的，又使产品制备中实现节约原料和降低生产成本的目的，而且提高了生产效率，经试验和与原有工艺对比，其得率（回收率）明显高于现有方法，而且众所周知从血浆中提取人血白蛋白是非常复杂的，要想提高0.1‰都是非常不容易的，从上述实验资料中可以清楚的看出，本发明给出的方法比原工艺至少可提高0.5‰，甚而高达近1‰，这是非常了不起的创新性贡献，而且可节约成本20%以上，生产效率提高25%以上，有效解决实际中对人血白蛋白的需要，而且减少了生产中废料对环境污染原污染，经济和社会效益巨大。

Claims (3)

1.一种从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法，包括血浆的合并与融化、组分I+II+III 的制作和压滤、组分 IV 的制作和压滤、组分 V 的制作和压滤、组分 V 沉淀溶解过滤、FV精制纯化、超滤透析浓缩、配制、巴氏灭活、除菌灌装、孵放和检定，其特征在于，所述的组分 IV 的制作和压滤，在制备的组分I+II+III上清液中按体积比加入1/10体积的0℃生理盐水，用pH4.0醋酸缓冲液调整溶液pH值至5.80～5.90，加入-15℃以下的体积浓度为95%乙醇，使最终乙醇体积浓度达到40%。

2.根据权利要求1所述的从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法，其特征在于，加入-15℃以下的体积浓度为95%乙醇的速度为≤80L/h，在加入乙醇过程中温度控制在-2.0℃以下，边加乙醇边降温，使组分I+II+III上清液最终温度控制在-5.0～-5.5℃，乙醇加毕继续搅拌2小时，保持pH为5.80～5.90；向每千升溶液中加入硅藻土和珍珠岩各2～4kg，搅拌30分钟后开始压滤，压滤的过程中，工作压力控制在0.2MPa之内，滤液温度控制在-4.5℃～-5.5℃，压滤后，用洁净压缩冷空气吹出压滤机中残留液体，再用40%乙醇组分Ⅳ平衡液冲洗，冲洗液并入到滤液中，得组分Ⅳ上清液。

3.根据权利要求2所述的从血浆中提取人血白蛋白提高得率的方法，其特征在于，所述的40%乙醇组分Ⅳ平衡液由95%乙醇溶液420L、枸橼酸钠3.0Kg和NaCl 4.0Kg加注射用水至1000L制成，用pH 4.0HAc-NaAc缓冲液调整平衡液pH 5.80～5.90，温度-4.5℃～5.5℃。