CN104544389A - 一种打瓜汁保健饮料及其医药用途和制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及从打瓜(Citrullus？lanatus.convar？megulaspemus(L.))汁中制备的保健饮料及其制备方法、医药用途。本发明所述打瓜汁经过酶解得到酶解产物，其制备方法如下：步骤1.取打瓜原料，洗净；步骤2.将打瓜榨汁；步骤3.酶解：使用酶对打瓜汁进行酶解；步骤4.灭酶处理：酶解结束后将打瓜汁灭酶；其中，步骤2所述将打瓜榨汁后，根据需要，还可加入护色剂。

Description

一种打瓜汁保健饮料及其医药用途和制备方法
技术领域：
本发明涉及从打瓜(Citrullus lanatus.convar megulaspemus(L.))汁中制备的保健饮料及其制备方法、医药用途。
背景技术：
打瓜Citrullus lanatus.convar megulaspemus L.，又名籽瓜。属葫芦科西瓜属普通西瓜种的栽培变种，主要分布于新疆、内蒙古和甘肃等地，其中甘肃所产的品质最佳。全国打瓜年产量数百万吨，但均用于取籽，然而占总质量近93％的瓤、皮被废弃扔掉，不仅造成资源浪费，而且污染农田环境。据史料记载，“打瓜入心脾胃，肉有降心脾胃热，止消渴”，该功效已被众多消费者所认同。打瓜含有丰富的蛋白质、脂肪、维生素B、D等营养物质，多做日常食用，是人们普遍喜爱的美味食品。已广泛用于食品、医药、日化及纺织行业，具有重要的经济开发价值。
本发明在系统研究打瓜汁中的有效成分及理化性质的基础上，利用复合酶水解的方法，发现了具有降血糖、调血脂作用的打瓜汁提取物，并通过系统地条件优化研究，发明了一种打瓜汁饮料。
同时，我们发现打瓜汁提取物，具备降血糖、调血脂作用，因此：有望在增强人体免疫力、抗疲劳、延缓衰老、改善心脑血管供血不足、护肤美容以及活血脉、降血脂、降胆固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循环方面的药物、功能食品和食品中得到广泛应用。
发明内容：
本发明的目的在于，提供从打瓜(Citrullus lanatus.convar megulaspemus(L.))汁中制备的具有医药用途的保健饮料。
本发明还包括本发明打瓜汁保健饮料的制备方法：打瓜汁经过复合酶酶解得到，优选的复合酶组成为果胶酶：纤维素酶(2:1)。
本发明还包括本发明的打瓜汁保健饮料的医药用途：具备降血糖、调血脂作用，因此：有望在增强人体免疫力、抗疲劳、延缓衰老、改善心脑血管供血不足、护肤美容以及活血脉、降血脂、降胆固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循环方面的药物、功能食品和食品中得到广泛应用。
为此，本发明提供一种打瓜汁饮料，所述饮料含有打瓜汁经过酶解得到酶解产物，以及 根据需要，还可含有配制饮料所需要的添加剂。
本发明所述打瓜汁经过酶解得到酶解产物，其制备方法如下：
步骤1，取打瓜原料，洗净；
步骤2，将打瓜榨汁；
步骤3，酶解：使用酶对打瓜汁进行酶解；
步骤4，灭酶处理：酶解结束后将打瓜汁灭酶；
其中，步骤2所述将打瓜榨汁后，根据需要，还可加入护色剂。
优选的，本发明所述打瓜汁经过酶解得到酶解产物，其制备方法如下：
步骤1清洗和挑选： 
打瓜原料必须清洗和挑选，以清除污物，再用高锰酸钾溶液浸泡1min。
步骤2破碎和打浆： 
破碎打瓜应符合所采用的榨汁工艺要求。果浆粒度不宜过粗，以2～6毫米为佳。
步骤3护色：
选用复合护色剂进行护色处理，护色剂添加量为0.15％，组成为0.05％柠檬酸+0.1％异抗坏血酸钠。
步骤4酶解：
复合酶添加量0.15％(其中果胶酶0.1％，纤维素酶0.05％。果胶酶：纤维素酶＝2:1)，酶解温度50℃，酶解时间2h，酶解pH＝4.5。
步骤5灭酶处理： 
酶解结束后将打瓜汁放在85℃～95℃的水浴灭酶，灭酶时间6min～8min。加入复合稳定剂(黄原胶0.03％、海藻酸钠0.04％、CMC-Na0.10％)，混合均匀后3000r/min离心机离心15min，取上清液，即得。
上述得到的打瓜汁经过酶解得到酶解产物经过调配即可得到本发明的打瓜汁饮料。调配方法包括：将上述得到的打瓜汁经过酶解得到酶解产物，必要时加入矫味剂，或加入水混合均匀得到。如加入赤藓糖醇，柠檬酸作为矫味剂等。
本发明的打瓜汁饮料，经过感官评价，色香味俱全，评价方法如下：
感官评价方法：
由十位专业人员组成感官评价小组，对打瓜汁产品组织形态、滋味、色泽和香味进行全面评价，满分100分，评价方法如表1。
表1产品评价方法
产品质量指标 
1感官指标
根据GB/T21733-2008，对打瓜汁饮料的感官指标进行评价。
打瓜汁色泽呈淡淡的浅黄色，透光性较好，组织状态分布细腻均匀，无肉眼可见杂质，打瓜汁香味浓郁。
2理化指标
根据GB/T5009.11，GB/T5009.12，GB/T5009.13测定打瓜汁保健饮料中的砷、铅、铜含量。
打瓜汁中可溶性固形物含量≤10％；总酸含量0.25％；总砷(以As)含量≤0.2mg/l；铅(Pb)含量≤0.05mg/l；铜(Cu)含量≤2.0mg/l。
3微生物指标 
表2微生物检测结果
本发明采用的有关添加剂如护色剂，稳定剂，矫味剂等均为筛选获得的，筛选过程如下：
护色剂筛选： 
选用复合护色剂进行护色处理，护色剂添加量为0.15％，组成为0.05％柠檬酸+0.1％异抗坏血酸钠。
1.单一护色剂对打瓜汁褐变度的影响
1.1不同浓度的柠檬酸对打瓜汁褐变度的影响
图1不同浓度的柠檬酸对打瓜汁褐变度的影响
图1显示，未经过任何护色剂处理的打瓜汁的褐变度为1.06，经过柠檬酸处理的打瓜汁样品褐变度明显降低，处理浓度不同，褐变度改变程度也不同；随着柠檬酸浓度的增加，褐变度持续降低，浓度过大后，褐变度又有少许上升，可能是又引起了某些物质的改变，以0.06％最好，此时褐变度为0.72。
1.2不同浓度的异抗坏血酸钠对打瓜汁褐变度的影响
1-2不同浓度的异抗坏血酸钠对打瓜汁褐变度的影响
由图2中结果表明：低浓度的异抗坏血酸钠就可对打瓜汁的褐变度有明显的影响。随着异抗坏血酸钠浓度的增加，褐变度基本保持持平，当异抗坏血酸钠的浓度达0.10％时，褐变度为0.69，褐变的抑制效果最好。
1.3不同浓度的EDTA对打瓜汁褐变度的影响
图3不同浓度的EDTA对打瓜汁褐变度的影响
由图3可知，高浓度的EDTA抑制效果较好，褐变度快速下降，当EDTA的使用浓度达0.04％时，褐变度可降低到0.64，但食品添加剂使用标准中规定，EDTA作为添加剂使用时，浓度不能超过0.05g/kg，因此考虑到食品安全性的问题，在实际生产中没有选择添加EDTA作为护色剂。
1.4不同浓度的NaCl对打瓜汁褐变度的影响
图4不同浓度的NaCl对打瓜汁褐变度的影响
由图4可以看出，不同浓度的NaCl对打瓜汁的褐变度有一定的抑制作用，随着NaCl浓度的上升，打瓜汁褐变度减小，但抑制效果不明显，其次因为NaCl会稍许改变打瓜汁的口感，因此复合护色剂的选择上，没有考虑选择NaCl。
2复合护色剂对打瓜汁褐变度的影响
以试验确定的各护色剂最佳浓度，比较其对打瓜汁褐变度抑制效果，结果见表1-3。
表1-3不同护色剂对打瓜汁褐变度的最佳护色效果对比
由试验结果可知，各护色剂处理后的打瓜汁的褐变度均低于对照组，其中0.04％EDTA处理的浓缩汁的褐变度最小，抑制打瓜汁褐变效果最佳，NaCl处理的褐变度最大，但使打瓜汁略带咸味，出于全面考虑，决定对柠檬酸和异抗坏血酸钠进行复配使用。
2.1护色剂的复合 
选择抑制效果较好的护色剂，设计相应的浓度，柠檬酸和异Vc钠进行复合，筛选出打瓜汁褐变的最佳护色剂组合，结果见表1-4和表1-5。
表1-4复合护色剂处理正交试验因素水平表
序号 A柠檬酸/％ B异Vc钠/％
1 0.04 0.08
2 0.05 0.10
3 0.06 0.12
表1-5复合护色剂处理结果与分析表
试验号 A B 褐变度
1 1 1 0.895
2 1 2 0.834
3 1 3 0.906
4 2 1 0.823
5 2 2 0.601
6 2 3 0.692
7 3 1 0.690
8 3 2 0.681
9 3 3 0.925
试验结果显示：根据各复配护色剂的护色效果效果，筛选出最优组合为A2B2，重复试验验证以A2B2组合抑制打瓜汁褐变效果较好，即：0.05％柠檬酸+0.1％异抗坏血酸钠。
3小结
1)添加柠檬酸、异抗坏血酸钠、EDTA和NaCl均能对打瓜汁的褐变有抑制作用，可改善打瓜汁的色泽，但EDTA、NaCl在实际生产中不建议采用。
2)复合护色剂添加的最佳工艺参数：复合护色剂添加量0.15％，组成为0.05％柠檬酸+0.1％异抗坏血酸钠。
在以上操作条件下得到的打瓜汁产品呈淡淡的浅黄色，透光性较好，组织状态分布细腻均匀，打瓜汁香味浓郁。
复合酶筛选： 
复合酶添加量0.15％(其中果胶酶0.1％，纤维素酶0.05％。果胶酶：纤维素酶＝2:1)，酶解温度50℃，酶解时间2h，酶解pH＝4.5。
研究过程： 
1.可溶性固形物(Soluble solids content,SSC)含量测定
将处理好的打瓜汁在室温下用手持折光仪测定。
2果胶酶活力测定(采用分光光度法)
用pH 4.2磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液制备酶液，取适量酶液于50℃反应30min，用DNS显色，在550nm处测OD值，绘制半乳糖醛酸标准曲线。一个酶活力单位即为在50℃、pH4.8的条件下，每分钟催化底物生成1μg半乳糖醛酸所需的酶量(μg/min)。
3纤维素酶活力测定(采用分光光度法)
用4.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液制备酶液，取适量酶液于50℃反应20min，用DNS显色，在550nm处测OD值，绘制葡萄糖标准曲线。一个酶活力单位即为在50℃、pH4.8条件下，每小时催化底物生成1μmol葡萄糖所需的酶量(μmol/h)。
4相对粘度的测定：(奥氏粘度计)
相对粘度指与纯水粘度的比值，用奥氏粘度计测定30℃时10mL样品的流动时间t与相同条件下去离子水的流动时间t0，代入下式计算样品粘度，单位：mPa.s。式中η0为30℃ 时水的粘度，0.8007mPa.s；ρ0为30℃时水的密度，0.9957g/mL；ρ为30℃时样品的密度。
η＝η0ρt/ρ0t0
5出汁率的测定：
将制备好的打瓜汁摇匀后准确称取15g，于3000r/min转速下离心15min，取上清液后称重，每个样品进行3次重复。
出汁率(％)＝离心过滤后所得打瓜汁的质量/酶解前打瓜汁的质量×100％
6结果与分析 
1)不同酶种的酶活力
在果汁加工中，根据各种水果的主要组成以及植物细胞壁的主要构成，选用合适的外源酶制剂进行酶解，以提高水果的出汁率以及最终产品的品质如色泽稳定性﹑混浊稳定性﹑风味等。因此选择果胶酶，纤维素酶两种酶进行酶解，两种酶的活力测定结果见表2-2。
表2-2酶活力测定结果
2)果胶酶、纤维素酶的配比单因素试验
通过以前的研究和查阅资料表明，打瓜汁中果胶的含量高于纤维素，而且果胶引起的打瓜汁黏度更大，故试验设计果胶酶与纤维素酶比为4:1,3:1,2:1,1:1,1:2,1:3进行复合，复合酶的添加量为0.15％，酶解温度为50℃，酶解时间为2h，两小时后分别测定打瓜汁的粘度，其结果见表2-3。
表2-3果胶酶与纤维素酶的配比对粘度的影响
从表2-3可以得出，果胶酶:纤维素酶＝2:1，酶解效果比较好，对打瓜汁酱的黏度降低得多，故试验中选用果胶酶:纤维素酶＝2:1的复合酶，效果最佳。
7复合酶处理单因素试验
1)酶解温度对打瓜汁出汁率的影响
分别称取6份100g的打瓜汁，用柠檬酸和pH计调节pH至5.0，复合酶添加量为打瓜汁重量的0.15％，混匀后放在温度梯度为30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃的恒 温水槽中，均保持120min,然后测定打瓜汁出汁率的含量。
图5酶解温度对打瓜汁出汁率的影响
果胶酶、纤维素酶最适温度一般在35℃-60℃，在此范围内每增5℃,其活性增加一倍,但是温度过高时会导致酶很快失活。由图5可知，酶解温度在35℃～50℃范围内打瓜汁出汁率呈上升趋势，50℃之后不在增加，说明复合酶的最适温度在50℃附近，所以初步确定酶解温度在50℃左右效果较好，将此温度范围用于后面的正交试验。
2)酶解时间对打瓜汁出汁率的影响
分别称取6份100g的打瓜汁，用柠檬酸和pH计调节pH至5.0，复合酶添加量为打瓜汁重量的0.15％，混匀后放在50℃的恒温水槽中分别保持1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h，然后测定打瓜汁出汁率，结果如2-2所示。
图6酶解时间对打瓜汁出汁率的影响
由图6可知，在1h～2.5h范围内，随着酶解时间的延长，打瓜汁出汁率逐渐增加，2.5h之后不再增加并有所减少，可能是打瓜汁暴露时间过长造成某些营养物质的损失，有些固形物分解破坏，所以可初步确定复合酶处理时间为1.5h～2.5h效果较好，所以将此酶解时间范围用于后面的正交试验。
3)复合酶添加量对打瓜汁出汁率的影响
分别称取6份100g的打瓜汁，用柠檬酸和pH计调节pH至5.0，复合酶添加量分别为打瓜汁重量的0.05％、0.10％、0.15％、0.20％、0.25％、0.30％，混匀后放在50℃的恒温水槽中分别保持2h，然后测定打瓜汁出汁率，结果如2-3所示。
图7酶添加量对打瓜汁出汁率的影响
由图7可知，复合酶添加量在0.05％～0.15％范围内时，随着浓度的增加，打瓜汁出汁率也逐渐增加，0.15％之后不在增加，说明果胶已基本被酶解，初步确定复合酶最佳添加量在0.15％～0.25％，所以将此复合酶的添加范围用于后面的正交试验。
4)酶解pH值对打瓜汁出汁率的影响
分别称取6份100g的打瓜汁，复合酶添加量均为打瓜汁重量的0.15％，混均后用柠檬酸和pH计调节pH值分别至3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5混匀后放在50℃的恒温水槽中均保持2h，然后测定不同pH值酶解时所得打瓜汁出汁率，结果如2-4所示。
图8酶解时的pH值对打瓜汁出汁率的影响
由图8可知，pH值在3.0～4.5之间时，随着pH值的增加，打瓜汁出汁率逐渐增加，pH值4.5之后不再上升，并有逐渐下滑趋势，初步确定酶解效果较好的pH值为4.0～5.0，所以将此pH值范围用于后面的正交试验。
5)复合酶处理正交试验
依据上述单因素试验的结果，设计酶解温度、酶解时间、复合酶添加量和酶解pH四个因素，采用四因素三水平正交试验对酶解试验进行优化，因素水平表和正交试验结果见表2-5和表2-6。
表2-5复合酶处理正交试验因素水平表
表2-6复合酶正交试验结果与分析
试验号 A B C D 出汁率/％
1 1 1 1 1 85.8
2 1 2 2 2 86.3
3 1 3 3 3 85.2
4 2 1 2 3 83.1
5 2 2 3 1 84.3
6 2 3 1 2 85.3
7 3 1 3 2 85.6
8 3 2 1 3 84.7
9 3 3 2 1 84.5
K1 85.767 84.833 85.267 84.867  
K2 84.233 85.100 84.633 85.733  
K3 84.933 85.000 85.033 84.333  
R 1.534 0.267 0.634 1.400  
在生产打瓜汁时，打瓜的出汁率是决定打瓜汁品质的重要指标。由表2-5、可知，试验设定的4个因素对复合酶处理结果影响主次顺序为：A>D>C>B，即酶解温度>酶解pH>酶添加量>酶解时间。其中酶解温度对打瓜汁出汁率影响显著，酶解时间影响较小。研究表明，在工艺条件A1B2C1D2，即酶解温度为50℃，酶解时间为2h，复合酶添加量为打瓜汁重量的0.15％，酶解pH为4.5时可以使打瓜汁出汁率达到最大值86.3％。
8小结
1)添加果胶酶和纤维素酶对打瓜汁进行酶解，能较显著提高打瓜汁的出汁率。
2)酶解打瓜汁的最佳工艺参数：复合酶添加量0.15％(其中果胶酶0.1％，纤维素酶0.05％。果胶酶：纤维素酶＝2:1)，酶解温度50℃，酶解时间2h，酶解PH＝4.5。
在以上操作条件下得到的打瓜汁产品出汁率高，呈淡淡的浅黄色，透光性较好，组织状态分布细腻均匀。
灭酶处理： 
酶解结束后将打瓜汁放在85℃～95℃的水浴灭酶，灭酶时间6min～8min。
稳定性的调控 
复合稳定剂的最佳组合：黄原胶0.03％、海藻酸钠0.04％、CMC-Na0.10％。
1测定方法
1.1出汁率的测定 
将制备好的打瓜汁摇匀后准确称取15g，于3000r/min转速下离心15min，取上清液后称重，每个样品进行3次重复。
出汁率(％)＝离心过滤后所得打瓜汁的质量/酶解前打瓜汁的质量×100％
1.2离心沉淀率的测定：
将制备好的打瓜汁摇匀后准确称取15g，于3000r/min转速下离心15min，倒去上清液后，称取离心管底部的沉淀物重量，每个样品进行3次重复。
离心沉淀率(％)＝离心后沉淀物重量/离心样品重量×100％
1.3微生物指标测定
细菌总数测定：平皿计数法。
细菌总数是指水样在一定条件下培养后(培养基成分，培养温度和时间、pH、需氧性质等)所得1mL水样所含菌落的总数。
大肠菌群的测定：多管发酵法。
总大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，具有指示菌的一般特征。
5稳定剂筛选： 
2结果与分析 
2.1稳定剂处理单因素试验
本试验采用0.15％的相同添加量，对黄原胶、海藻酸钠、琼脂、果胶和CMC-Na六种稳定剂的稳定效果进行单因素试验，在相同的条件下测定沉淀率，评价各种稳定剂的稳定效果，结果见表3-3。
表3-3单一稳定剂对饮料稳定性的影响
2.2复合稳定剂的稳定效果
以单因素优选出的黄原胶、CMC-Na和海藻酸钠3种稳定剂作为3个因素，总添加量控制在0.20％左右，进行L9(34)正交试验，确定复合稳定剂的最优配比，以沉淀率为评价指标，沉淀率越小稳定性效果越好。因素水平表及正交试验结果分析分别见表3-4和表3-5。
表3-4稳定剂用量取值表
表3-5稳定剂配比正交试验结果
由表3-5中极差(R)大小可知，在所选定的3种稳定剂中，影响复合饮料稳定性的主次顺序为A>B>C，即黄原胶>CMC-Na>海藻酸钠。从表5正交试验9号可知其沉淀率为5.18％，而单独使用黄原胶时，其用量为0.15％时，其沉淀率仍然达到5.95％，这说明复合稳定剂具有较好的稳定效果。从表5的直观分析可得出最优组合A3B3C1。即黄原胶0.03％、海藻酸钠0.04％、CMC-Na0.10％。此组合没有出现在上述9个处理中，按照该组合稳定剂的配比进行3次重复试验，产品沉淀率的平均值为4.89％。
打瓜汁的调配 
1甜味剂的选择 
赤藓糖醇，作为一种新型的甜味填充剂，是天然零热量(<0.2kcal/g)的甜味剂，它具有优良的口感特性(蔗糖甜度的70～80％，甜度柔和，口感清凉，可明显掩盖打瓜汁的蒸煮味)和良好的口服高耐受性，不影响血糖和血浆胰岛素浓度(适合糖尿病人使用)，将其用于饮料生产中，产生的良好的粘度和清凉的口感是其他糖醇类产品不能给予的。出于打瓜降血糖降血脂的功能考虑，我们选择了赤藓糖醇作为打瓜汁中蔗糖的替代品，并对其进行感官评定来确定最佳添加量。
2酸味剂的选择 
柠檬酸具有温和爽快的酸味，广泛用于饮料的酸味调节，我们通过感官评定确定了其最佳添加量为0.15％的柠檬酸。
.4小结
4.1复合稳定剂的最佳组合：黄原胶0.03％、海藻酸钠0.04％、CMC-Na0.10％。
4.2调配时添加5％的赤藓糖醇和0.15％的柠檬酸。 
4.3均质压力采用30MPa，温度60℃。
在以上操作条件下得到的打瓜汁产品呈淡淡的浅黄色，透光性较好，组织状态分布细腻均匀，无肉眼可见杂质，打瓜汁香味浓郁，口感清凉。
本发明还包括打瓜汁饮料在制备具备降血糖、调血脂作用的药物或保健食品中的应用。
本发明的打瓜汁饮料，经过药物疗效实验证明具有优良的治疗效果，药效试验如下：
1.调血脂作用 
1.1造模 取正常小鼠60只，其中10只饲喂普通饲料，其余50只饲喂高脂饲料，饲喂4周。高血脂小鼠随机分为模型组,辛伐他汀(7mg·kg-1)组,打瓜汁高中低剂量组(200mg·kg-1、150mg·kg-1和100mg·kg-1)，每组小鼠10只。每天灌胃给药1次,对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续4周。
1.2数据收集 于每周周末给药后禁食12h，后眼眶采血，血液3000r/min离心10分钟，取上层血清并保存于-80℃冰箱中备用。最后一次采血过后对各组取完血的小鼠进行解剖，快速摘取小鼠的肝脏，并检查各组织外观病变情况。同时各组取部分小鼠肝脏制作石蜡包埋切片以观察肝脏组织病理学变化情况。测定血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、超氧化物歧化酶(SOD)的值。
1.3数据处理
1.3.1体重(图9)
注：与正常组相较，P＜0.01，(n＝10)
1.3.2总胆固醇(图10)
注：与正常组相较，P＜0.01，(n＝6)
1.3.3甘油三酯(图11)
注：与正常组相较，P＜0.01，(n＝6)
1.3.4超氧化物歧化酶(图12)
注：与正常组相较，P＜0.01，(n＝6
1.3.5肝脏切片(图13)
正常组
模型组
阳性组
高剂量组
中剂量组
低剂量组
通过本次试验，可以证明打瓜汁具有明显的降血脂活性，其本身对小鼠体重增长没有影响，但可显著降低小鼠血清中总胆固醇和甘油三酯的含量，并提高小鼠血清中超氧化物歧化酶的活力。其中以中剂量组的效果最为明显。在分析本次试验结果中，可以发现打瓜汁还具有明显的保护肝脏细胞的作用，这一活性可以在将来的实验中进行定量分析。
2.降血糖作用 
2.1.1实验动物 昆明种小鼠，200只，雄性。 
2.1.2四氧嘧啶配制 称取四氧嘧啶72mg，用0.9％生理盐水溶解并定容至10ml,现配现用且应避光低温保存。
2.1.3链脲佐菌素配制 称取链脲佐菌素150mg，用0.1mol/L柠檬酸钠缓冲液(pH4.4)溶解并定容至10ml,现配现用且应避光低温保存。
2.2造模
2.2.1对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响取正常小鼠60只，其中50只腹腔注射四氧嘧啶(72mg·kg-1),72h后检测血清葡萄糖水平,选用血糖值在10-30mmol·L-1者作究。小鼠随机分为对照组,模型组,格列本脲(2.5mg·kg-1)组,打瓜汁高中低剂量组(200mg·kg-1、150mg·kg-1和100mg·kg-1)，每组小鼠10只。每天灌胃给药1次,对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续4周。
2.2.2对链脲佐菌素糖尿病小鼠的影响取正常小鼠70只，其中60只腹腔注射链脲佐菌素(150mg·kg-1),72h后检测血清葡萄糖水平,选用血糖值在10-25mmol·L-1者作究。小鼠随机分为对照组,模型组,格列本脲(2.5mg·kg-1)组,打瓜高中低剂量组(200mg·kg-1、150mg·kg-1和100mg·kg-1)，每组小鼠10只。每天灌胃给药1次,对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续4周。
2.2.3对正常小鼠血糖的影响取正常小鼠40只,随机分为对照组,格列本脲 (2.5mg·kg-1)组和打瓜汁高中低剂量组(200mg·kg-1、150mg·kg-1和100mg·kg-1)，每组小鼠各10只。对照组给予等体积生理盐水,药物或蒸馏水每日灌胃给药1次,连续7d。
2.3数据收集
2.3.1血糖 每7天小鼠尾静脉取血，用血糖仪进行检测。
2.3.2糖耐量 在第末次测定完小鼠血糖后给予质量浓度200g/L的葡萄糖溶液灌胃(0.01mL/g)，测定0h、0.5h、2h的血糖值，计算血糖曲线下面积。血糖曲线下面积＝1/2×(0小时血糖值﹢0.5小时血糖值)×0.5﹢1/2×(2小时血糖值﹢0.5小时血糖值)×1.5＝0.25×(0小时血糖值﹢4×0.5小时血糖值﹢3×2小时血糖值)。
2.4数据处理
2.4.1体重(图14)
2.4.2血糖(图15)
2.4.3糖耐量
打瓜汁具有比较明显的降血糖作用，可以明显降低四氧嘧啶与链脲佐菌素所致的高血糖模型血糖和糖耐量，并且对正常血糖无明显影响。
综上所述，我们发现打瓜汁提取物，具备降血糖、调血脂作用，因此：有望在增强人体免疫力、抗疲劳、延缓衰老、改善心脑血管供血不足、护肤美容以及活血脉、降血脂、降胆固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循环方面的药物、功能食品和食品中得到广泛应用。
附图说明：
图1不同浓度的柠檬酸对打瓜汁褐变度的影响
图2不同浓度的异抗坏血酸钠对打瓜汁褐变度的影响
图3不同浓度的EDTA对打瓜汁褐变度的影响
图4不同浓度的NaCl对打瓜汁褐变度的影响
图5酶解温度对打瓜汁出汁率的影响
图6酶解时间对打瓜汁出汁率的影响
图7酶添加量对打瓜汁出汁率的影响
图8酶解时的pH值对打瓜汁出汁率的影响
图9体重
图10总胆固醇
图11甘油三酯
图12超氧化物歧化酶
图13肝脏切片，分别为：
A:正常组
B:模型组
C:阳性组
D:高剂量组
E:中剂量组
F:低剂量组
图14:体重
A:四氧嘧啶
B:链脲佐菌
C:正常血糖
图15:血糖
A:四氧嘧啶
B:链脲佐菌
C:正常血糖
具体实施方式：
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
实施例1：打瓜汁保健饮料的制备
打瓜清洗和挑选，清除污物，再用高锰酸钾溶液浸泡1min消毒。破碎打瓜，榨汁，果浆粒度2～6毫米。添加0.05％柠檬酸+0.1％异抗坏血酸钠作为复合护色剂，护色剂添加量为0.15％。采用0.15％复合酶(果胶酶：纤维素酶＝2:1重量比)酶解，酶解温度50℃，酶解时间2h，酶解pH＝4.5。酶解结束后将打瓜汁放在85℃～95℃灭酶6min～8min。加入复合稳定剂(黄原胶0.03％、海藻酸钠0.04％、CMC-Na0.10％)，混合均匀后3000r/min离心机离心15min，取上清液。添加5％的赤藓糖醇和0.15％的柠檬酸，调配，均质(均质压力采用30MPa，温度60℃，二次均质)，95～100℃杀菌10～15分钟，罐装，即得。

Claims (9)

1.一种打瓜汁饮料，含有打瓜汁经过酶解得到酶解产物，以及根据需要，还可含有配制饮料所需要的添加剂。
2.根据权利要求1所述的饮料，其特征在于，所述打瓜汁经过酶解得到酶解产物，其制备方法如下：
步骤1，取打瓜原料，洗净；
步骤2，将打瓜榨汁；
步骤3，酶解：使用酶对打瓜汁进行酶解；
步骤4，灭酶处理：酶解结束后将打瓜汁灭酶；
其中，步骤2所述将打瓜榨汁后，根据需要，还可加入护色剂。
3.根据权利要求1所述的饮料，其特征在于，所述打瓜汁经过酶解得到酶解产物，其制备方法如下：
步骤1打瓜原料用水清洗，再用高锰酸钾溶液浸泡1min，
步骤2洗净的打瓜破碎后榨汁，榨汁后的果浆粒度为2～6毫米，
步骤3选用复合护色剂进行护色处理，护色剂其添加的重量为打瓜汁重量的0.15％，护色剂为柠檬酸和异抗坏血酸钠的混合物，两者重量比例为1:2，
步骤4使用复合酶对打瓜汁进行酶解，复合酶添加的重量为打瓜汁重量的0.15％，所述复合酶为果胶酶和纤维素酶的混合物，两者重量比例为2:1，酶解温度50℃，酶解时间2h，酶解pH＝4.5，
步骤5酶解结束后将酶解的打瓜汁放在85℃～95℃的水浴灭酶，灭酶时间6min～8min，加入复合稳定剂，所述复合稳定剂为黄原胶，海藻酸钠，CMC-Na的混合物，黄原胶，其添加的重量为打瓜汁重量的0.03％、海藻酸钠，其添加的重量为打瓜汁重量的0.04％、CMC-Na其添加的重量为打瓜汁重量的0.10％，混合均匀后3000r/min离心机离心15min，取上清液，即得。
4.根据权利要求1所述的饮料，其特征在于，打瓜汁经过酶解得到的酶解产物，经过调配即可得到权利要求1所述的打瓜汁饮料。
5.根据权利要求4所述的饮料，其特征在于，所述调配方法包括：将打瓜汁经过酶解得到的酶解产物，必要时加入矫味剂，或加入水混合均匀得到。
6.根据权利要求5所述的饮料，其特征在于，所述矫味剂为赤藓糖醇，柠檬酸。
7.根据权利要求6所述的饮料，其特征在于，包括打瓜汁经过酶解得到的酶解产物，赤藓糖醇，柠檬酸。
8.根据权利要求7所述的饮料，其中赤藓糖醇，其添加的重量为打瓜汁重量的5％，柠檬酸，其添加的重量为打瓜汁重量的0.15％。
9.权利要求1所述的打瓜汁饮料在制备具备降血糖、调血脂作用的药物或保健食品中的应用。
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