CN104530142B - 苹果叶多酚的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种苹果叶多酚的提取方法，包括以下步骤：1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；2)用乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH值，然后上大孔树脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为苹果叶多酚。本方法制得的苹果叶多酚纯度高，收率大。

Description

苹果叶多酚的提取方法
技术领域
本发明属于植物活性成分提取技术领域，具体涉及苹果叶多酚的提取方法。
背景技术
苹果叶为蔷薇科植物苹果的叶，性味苦寒，凉血解毒。我国是世界上最大的苹果生产国，产量占世界总产量的40％，其中辽宁、河北、山西、陕西、甘肃、山东等为主要的苹果产地，仅陕西一省的苹果叶年产量就高达400万吨，大量苹果叶掉落腐烂，造成资源的极大浪费。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种苹果叶多酚的提取方法，该方法制得的苹果叶多酚纯度高，收率大。
本发明提供的技术方案是提供一种苹果叶多酚的提取方法，包括以下步骤：
1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
2)用乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH值，然后上大孔树脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为苹果叶多酚。
上述步骤2)中，苹果叶中含有蛋白质和碳水化合物，采用乙醇为溶媒，不利于蛋白质和碳水化合物的溶解，可减少杂质成分的溶出，对后续纯化有益。乙醇体积浓度为20～30％为佳，乙醇浓度过高会对蛋白质产生凝聚作用，使得蛋白质滞留在颗粒的内部孔道中，反而增加苹果叶多酚的扩散阻力，降低终产品的收率。乙醇浓度过低则杂质含量较大，影响终产品的纯度。
上述步骤4)中，pH值至4～5。
上述步骤4)中，乙醇的体积浓度为60～90％。
上述步骤4)中，合并液的上样流速为0.5BV/h；水洗流速为2.5～3BV/h，水的洗脱量为5～6BV；乙醇的洗脱流速为2～2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4～5BV。
与现有技术相比，本发明制得的苹果叶多酚纯度在98％以上，收率在10％以上，且色泽较浅。
具体实施方式
以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
实施例1
1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
2)用20～30v％乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4～5值，然后上DA201大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5～3BV/h，水的洗脱量为5～6BV；然后用60～90v％乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2～2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4～5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为11.1g苹果叶多酚。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.2％。
实施例2
1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
2)用20～30v％乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4～5值，然后上DA201大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5～3BV/h，水的洗脱量为5～6BV；然后用60～90v％乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2～2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4～5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到10.5g苹果叶多酚成品。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.0％。
实施例3
1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
2)用20～30v％乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4～5值，然后上DM301大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5～3BV/h，水的洗脱量为5～6BV；然后用60～90v％乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2～2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4～5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到10.8g苹果叶多酚成品。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.4％。
实施例4
1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
2)用20～30v％乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH至4～5值，然后上DM301大孔树脂柱，上样流速为0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速为2.5～3BV/h，水的洗脱量为5～6BV；然后用60～90v％乙醇洗脱，乙醇的洗脱流速为2～2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4～5BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，得到10.5g苹果叶多酚成品。经HPLC检测，成品中苹果叶多酚的纯度为98.1％。

Claims (3)

1.苹果叶多酚的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)取苹果叶清洗干净，干燥，粉碎，得到苹果叶干粉；
2)用体积浓度为20～30％的乙醇对苹果叶干粉进行超声浸提，离心，收集上清液，减压回收乙醇，得到粗提液；
3)将粗提液经孔径为3000道尔顿的膜过滤装置，收集第一次流出液，将第一次浓缩液过20000道尔顿的膜过滤装置，收集第二次浓缩液；
4)将第一次流出液和第二次浓缩液合并，调整pH值，然后上大孔树脂柱，先水洗柱，然后用体积浓度为60～90％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥，即为苹果叶多酚。
2.根据权利要求1所述的苹果叶多酚的提取方法，其特征在于：步骤4)中，pH值至4～5。
3.根据权利要求1所述的苹果叶多酚的提取方法，其特征在于：步骤4)中，合并液的上样流速为0.5BV/h；水洗流速为2.5～3BV/h，水的洗脱量为5～6BV；乙醇的洗脱流速为2～2.5BV/h，乙醇的洗脱量为4～5BV。
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"超声波辅助提取苹果叶多酚及其体外抗氧化性研究";王临宾;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》;20101215;E079-16 *

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