CN104523883A - 一种组合物及其应用、及包括该组合物的药物、食品、饮品或保健品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物领域，具体涉及一种组合物及其应用、及包括该组合物的药物、食品、饮品或保健品。该一种组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓原果汁30～100份，桑葚原果汁6～20份，覆盆子(红树莓)原果汁4～12份。本发明的组合物通过复配，使蔓越莓、桑葚和覆盆子(红树莓)在治疗泌尿道感染方面的效果相互增强，显示了良好的复配效果，经动物实验证明，该组合物能对小鼠上行实验性泌尿道感染具有良好的防治作用。
Description
技术领域
本发明涉及药物领域，具体涉及一种组合物及其应用、及包括该组合物的药物、食品、饮品或保健品。
背景技术
泌尿道感染(urinary tract infections，UTIs)是指大量病原微生物直接侵入尿路，在尿液中生长繁殖，并侵犯尿路粘膜或组织而引起损伤。它是泌尿道系统的常见病和多发病，更是成年女性的常见感染之一，患病率可达60％，易复发。尽管当今抗菌药物研究迅猛发展，品种不断更代，但泌尿道感染的发病率仍居高不下，且不断面临新的挑战，抗生素的滥用、免疫抑制剂的应用导致一些原来非致病菌引起的感染不断增加，都影响了治疗的效果。人类的UTIs表现多种多样，可能是无症状菌尿，也可能是局限于膀胱上皮的膀胱炎，严重者可导致累及肾实质的急性肾盂肾炎。同时，泌尿道反复不断感染，病情迁延，可发展为慢性肾盂肾炎，是一种较严重的形式，除尿道刺激症状外，还出现全身症状。
当前治疗泌尿道感染多采用复方磺胺甲基异恶唑、氧氟沙星、左氧氟沙星、喹诺酮类、氨曲南等药物消炎治疗，但这类西药对肝肾及消化道副作用均较大，细菌极易产生多重耐药性晚期出现肾功能不全，可危及患者生命。
因此，提供一种组合物用于预防和/或治疗泌尿道感染具有现实意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种组合物及其应用、及包括该组合物的药物、食品、饮品或保健品。该组合物治疗泌尿道感染、效果明显、具有良好口感且无毒副作用。
其特征是在于，其由以下重量份比的原料组成：蔓越莓原果汁30～100份，桑葚原果汁6～20份，覆盆子(红树莓)原果汁4～12份。
本发明提供的组合物中各原料成分可以是蔓越莓、桑葚、覆盆子的压榨原汁，也可以是它们的冻干粉、浓缩物或有效成分的提取物，该浓缩物和提取物的功效量应与原汁功效成分份量相等。值得一提的是，压榨原汁可以包括果肉和果汁，也可以根据产品需要滤去果肉只保留果汁，上述方案均在本发明的保护范围之内。
蔓越莓汁、桑葚汁、覆盆子(红树莓)汁分别用新鲜的蔓越莓、桑葚、覆盆子(红树莓)以清水洗净，然后进行打浆、压榨、静置、离心等物理方式，制得蔓越莓原果汁，桑葚原果汁和覆盆子(红树莓)原果汁。
在本发明的一些实施例中，其由以下重量份比的原料组成：蔓越莓原果汁50～80份，桑葚原果汁9～15份，覆盆子(红树莓)原果汁8～12份。
在本发明的一些实施例中，其由以下重量份比的原料组成：蔓越莓原果汁80份，桑葚原果汁12份，覆盆子(红树莓)原果汁9份。
本发明还提供了上述组合物在制备预防和/或治疗泌尿道感染的药物、食品、饮品或保健品中的应用。
本发明还提供了一种预防和/或治疗泌尿道感染的药物，包括上述组合物和药学上可接受的辅料。
本发明还提供了一种预防和/或治疗泌尿道感染的保健品，包括上述组合物和保健品中可接受的辅料。
在本发明的一些实施例中，保健品的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、汤剂、膏剂、露剂、口服液剂、滴丸剂、糖浆剂。
本发明还提供了一种预防和/或治疗泌尿道感染的食品，其特征在于，包括上述的组合物和食品中可接受的辅料或佐剂。
本发明提供的食品包括：饼干、糕点、粉糊、冲泡颗粒等，本发明在此不做限定。凡是食品领域可接受的产品形式均在本发明的保护范围内。
本发明还提供了一种预防和/或治疗泌尿道感染的饮品，包括上述组合物和饮品中可接受的辅料或佐剂。
本发明提供的饮品包括：果汁、浓缩液、茶饮料等，本发明在此不做限定。凡是饮品领域可接受的产品形式均在本发明的保护范围内。
本发明的组合物通过复配，使蔓越莓、桑葚和覆盆子(红树莓)在治疗泌尿道感染方面的效果相互增强，显示了良好的复配效果，动物实验显示，对小鼠上行实验性泌尿道感染具有显著防治作用。
蔓越莓(Cranberry，Vaccinium macrocarpon)是越桔属植物，为北美传统三大水果之一(另外两种是葡萄和蓝莓)。相关研究显示，蔓越莓能明显地减缓尿道中的细菌生长，有效地减少泌尿道感染的复发率，使尿菌症出现次数减少近一半，可能会成为排尿正常的泌尿道感染患者有效的自我预防措施。研究表明，蔓越莓含有的酚类化合物，能有效地防止耐药性及非耐药性大肠杆菌附着于泌尿系统的组织内膜上。这些生物活性要归功于蔓越莓中丰富的浓缩鞣酸，也就是已知的原花青素(OPAC)，它们是发挥抗细菌粘附活性的化合物，特别是在泌尿道。与其他含鞣酸的食物，如葡萄和可可相比，蔓越莓中的原花青素具有独特的分子结构，能与细菌纤毛的外源性凝集素相接触，使细菌不能与细胞受体结合而随尿液流出，从而抑制耐药性及非耐药性大肠杆菌吸附到泌尿道壁，发挥泌尿道保健作用。蔓越莓防止细菌粘附的作用效力，在食用后2h就可显示，其保健功效可以在尿液内持续达10h。因此，蔓越莓不但可作为天然抗生素，灭活病菌，减少抗生素的使用，也可降低产生耐药性细菌的潜在风险，有效地遏止抗生素滥用的危害。
覆盆子为蔷薇科悬钩子属植物华东覆盆子Rubus chingii Hu的干燥未成熟果实.。味甘、酸，性温。归肾、膀肤经。具有益肾，固精，缩尿等作用。临床上用于肾虚遗尿，小便频数，阳痪早泄，遗精，滑精等。覆盆子主要含有萜类、黄酮、挥发油等成分，药理作用表明其具有改善学习记忆能力、抗诱变、延缓衰老、促进淋巴细胞增殖、温肾助阳等作用。
桑葚又名桑果、桑枣、葚子等，为桑科植物桑树的成熟果穗，大多为红紫色或黑色椭圆形聚合果，长约1～2.5cm，汁浓似蜜，甜酸清香，营养成分丰富，已被国家卫生部列为“既是食品又是药品”的“药食同源”农产品之一。桑葚入药，始载于唐朝的《唐本草》。中医认为桑葚味甘性寒，人心肝、肾经，有滋阴补血作用，并能治阴虚津少、失眠等。另据许多古典中医文献记载：利五脏关节，通血气，安魂镇神，降压消渴，令人聪目，变白不老，解中酒毒等功效。现代医学临床证明：桑甚有很好的滋补心、肝、肾，及养血祛风的功效。对降脂和减轻神经衰弱、动脉硬化、性功能衰弱、耳聋眼花、须发早白、内热消渴、血虚便秘、风湿关节疼痛均有显著疗效。可用于治疗慢性肝炎、高血压、高血脂、糖尿病、再生障碍性贫血、胃肠道疾病(胃溃疡、十二指肠溃疡、慢性胃炎、结肠炎等)、老年便秘和睡眠障碍、血虚所致的头晕耳鸣、脑震荡后遗症、眼疾等。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1示复配果汁对小鼠肾脏感菌数的影响；
图2示复配果汁对小鼠膀胱感菌数的影响；
图3示肾脏组织评分；
图4示肾脏组织HE染色组织切片(200倍)；其中图4(A)示对照组；图4(B)示模型组；图4(C)示诺氟沙星组；图4(D)示低浓度组；图4(E)示中浓度组；图4(F)示高浓度组；
图5示膀胱组织评分；
图6示膀胱组织HE染色组织切片(200倍)；其中图6(A)示对照组；图6(B)示模型组；图6(C)示诺氟沙星组；图6(D)示低浓度组；图6(E)示中浓度组；图6(F)示高浓度组。
具体实施方式
本发明公开了一种组合物及其应用、及包括该组合物的药物、食品、饮品或保健品，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的一种组合物及其应用、及包括该组合物的药物、食品、饮品或保健品中所用原料及辅料、佐剂均可由市场购得。
具体的，本发明中所述蔓越莓原果汁、所述桑葚原果汁、所述覆盆子(红树莓)原果汁可由市场购买或按照传统方式压榨水果得到。
更具体的，所述蔓越莓汁、桑葚汁、覆盆子(红树莓)汁分别用新鲜的蔓越莓、桑葚、覆盆子(红树莓)以清水洗净，然后进行打浆、压榨、静置、离心等物理方式，制得蔓越莓原果汁，桑葚原果汁和覆盆子(红树莓)原果汁；值得一提的是，压榨原汁可以包括果肉和果汁，也可以根据产品需要滤去果肉只保留果汁，上述方案均在本发明的保护范围之内。
值得注意的是，本发明所述蔓越莓原果汁、所述桑葚原果汁、所述覆盆子(红树莓)原果汁可以为原汁，也可以为蔓越莓、桑葚和覆盆子(红树莓)的冻干粉、浓缩物或有效成分的提取物，所述浓缩物和所述提取物的功效量应与所述原汁功效成分份量相等。
实施例1：组合物的制备
本实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓原果汁70份，桑葚原果汁12份，覆盆子(红树莓)原果汁9份。蔓越莓汁、桑葚汁、覆盆子(红树莓)汁分别用新鲜的蔓越莓、桑葚、覆盆子(红树莓)(购于市场)以清水洗净，然后进行打浆、压榨、静置、离心等操作，制得蔓越莓原果汁，桑葚原果汁和覆盆子(红树莓)原果汁。
实施例2：组合物的制备
实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓原果汁80份，桑葚原果汁8份，覆盆子(红树莓)原果汁6份。
实施例3：组合物的制备
实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓原果汁55份，桑葚原果汁20份，覆盆子(红树莓)原果汁12份。
实施例4：组合物的制备
实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓原果汁50份，桑葚原果汁15份，覆盆子(红树莓)原果汁12份。
实施例5：组合物的制备
本实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓浓缩汁4份，桑葚浓缩汁6份，覆盆子(红树莓)浓缩汁2份。其中，蔓越莓浓缩汁采用8倍浓缩原果汁得到，桑葚浓缩汁采用3倍浓缩原果汁得到，覆盆子(红树莓)浓缩汁采用6倍浓缩原果汁得到。
实施例6：组合物的制备
本实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓浓缩汁12份，桑葚浓缩汁2份，覆盆子(红树莓)浓缩汁1.5份。其中，蔓越莓浓缩汁采用2.5倍浓缩原果汁得到，桑葚浓缩汁采用3倍浓缩原果汁得到，覆盆子(红树莓)浓缩汁采用8倍浓缩原果汁得到。
实施例7：组合物的制备
本实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓浓缩汁8份，桑葚浓缩汁6份，覆盆子(红树莓)浓缩汁0.5份。其中，蔓越莓浓缩汁采用8倍浓缩原果汁得到，桑葚浓缩汁采用3倍浓缩原果汁得到，覆盆子(红树莓)浓缩汁采用8倍浓缩原果汁得到。
实施例8：组合物的制备
本实施例所述蔓越莓复方组合物，其由以下重量份的原料组成：蔓越莓浓缩汁10份，桑葚浓缩汁4份，覆盆子(红树莓)浓缩汁1份。其中，蔓越莓浓缩汁采用10倍浓缩原果汁得到，桑葚浓缩汁采用3倍浓缩原果汁得到，覆盆子(红树莓)浓缩汁采用8倍浓缩原果汁得到。
实施例9：药效学试验
1实验目的
建立小鼠泌尿道感染模型，观察实施例6至8所述蔓越莓复方组合物的原料制成的口服液对实验性小鼠泌尿道感染的防治作用。
2实验材料
2.1实验样品
按照实施例6至8制备的蔓越莓复合物的原料，按照配比混合后得到试验样品。
2.2阳性对照物
阳性对照物：诺氟沙星胶囊样品，批号：20140602，湖南中和制药有限公司生产。
2.3试剂及药品
大肠杆菌(O111B4标准菌株)来自湘潭市人民医院病理科；戊巴比妥钠购自Sigma公司。
2.4实验动物
C57BL/6雌性小鼠，清洁级，质量20±2g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司；许可证号：SCXK(湘)2011-0003。
2.5实验仪器
AEU-210电子分析天平(长沙湘仪天平仪器公司)、TS-200B恒温摇床(上海天星实验仪器制造有限公司)、QYC 2112ROCKING INCUBATOR大摇床(上海福玛实验设备有限公司；SW-CJ-1FD超净工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司)、UV-120-02型紫外-可见分光光度计(日本岛津)、ROTINA 35R冷冻离心机(德国Heraeus公司)、EG 1150C组织包埋机(德国Leica公司)、TP1020自动脱水机(德国Leica公司)、RM2235石蜡切片机(德国Leica公司)、DMILLED 2000倒置显微镜(德国Leica公司)、动物饲养设备、灌胃针、留置针、解剖器械等。
3试验方法
3.1建立小鼠UTIs动物模型及药物干预
小鼠禁水24h，戊巴比妥钠40mg/kg体重麻醉，置超净工作台中，轻按腹部使其排尽余尿，75％酒精对小鼠泌尿道局部消毒后，用镊子将尿道口一侧皮肤呈45～60度角提起，将无菌的24G静脉留置针的套管缓缓插入尿道，直到膀胱底部，立即将连有0.25ml注射器的套管针内芯插入套管，并缓缓注入大肠杆菌(O111B4标准菌株)菌液20μL(6×108个)，注射完毕迅速抽出注射针头，用小镊子轻轻夹住尿道口约20s，预防菌液从尿道口流出。接种后各组小鼠禁水4h，再恢复正常饮水和进食。
将上述制备好的UTI模型小鼠，随机分为UTI模型组(灌胃给等体积0.5％CMC)、诺氟沙星治疗组(灌胃诺氟沙星50mg/kg)、实施例6至8制得的组合物，剂量分别为1.25ml/kg、2.5ml/kg和7.5ml/kg。同时设正常对照组，正常小鼠麻醉后膀胱内注入等量灭菌生理盐水，其余处理同UTI模型，灌胃给等体积0.5％CMC。各组造模后当天开始给药，每日给药1次，连续8d。实验分组及处理见表1所示。
3.2数据处理及结果判定
3.2.1复配果汁对肾脏和膀胱脏器指数的影响
将处理后的各组小鼠称体重后放血处死，分离膀胱和肾脏并称重，按下式计算肾脏和膀胱指数：肾脏指数＝肾脏重量(mg)/体重(g)；膀胱指数＝膀胱重量(mg)/体重(g)。
表1指出了复配果汁对肾脏和膀胱脏器指数的影响。通过结果分析可以发现，模型组小鼠的肾脏和膀胱脏器指数显著升高(P<0.05或P<0.01)；而阳性药诺氟沙星具有极显著的逆转作用(P<0.01)，几乎达到正常水平。与模型组相比，实施例6至8制得的组合物能够一定程度地降低肾脏和膀胱脏器指数，呈剂量依赖关系，尤其高浓度组具有统计学意义(P<0.05)。
表1 不同组别对UTI小鼠泌尿系统脏器指数的影响(x±s)
UTI模型组与对照组比较:##P<0.01；各给药组与UTI模型组比较:*P<0.05，**P<0.01；下同。
3.2.2实施例6至8制得的组合物对肾脏和膀胱脏器感菌数目的影响
在无菌条件下，每组所有的小鼠取左右肾脏、一半的小鼠取膀胱，用手术刀将肾脏纵向切为两半，左右肾脏各取一半称重后加5ml灭菌生理盐水匀浆；膀胱称重后用无菌眼科剪将膀胱剪碎，加1ml灭菌生理盐水匀浆。将匀浆液10倍连续稀释2个稀释度，将原匀浆和稀释的匀浆分别取50μL滴入琼脂平皿培养基，用灭菌L型玻璃棒在此平皿上均匀铺开，置37℃培养箱中培养24h后，进行菌落形成数(colony formation unit，CFU)计数。每只动物的菌落数以每克湿组织所能培养出的CFU计算。
如图1所示，实施例6至8制得的组合物对肾脏感菌数的影响。如图2所示，实施例6至8制得的组合物对膀胱感菌数的影响。由图1和图2可知，与模型组相比，诺氟沙星给药可使实验性泌尿道感染模型小鼠的肾脏和膀胱中大肠杆菌的数量均极显著下降(P<0.01)；实施例6至8制得的组合物均能显著减少UTI小鼠肾脏内和膀胱中的大肠杆菌菌落形成数(P<0.05或P<0.01)，从而对UTIs小鼠的肾脏和膀胱的感菌有一定的抑制效果。
3.2.3肾脏和膀胱组织学检查
每组小鼠的另一半肾脏以及一半的小鼠膀胱进行组织学检查，组织用10％福尔马林液固定后包埋切片、HE染色。光学显微镜下观察小鼠肾脏和膀胱的炎症反应。炎症的分级简述如下：0级；正常；1级：局部炎症(细胞渗出或水肿)；2级：更严重的局部炎症，伴有中度水肿；3级：有多发性炎症细胞浸润；4级：大范围炎症和组织坏死；5级：弥散的组织坏死，均有广泛的炎性细胞渗出。
图3为小鼠肾脏组织评分结果。与正常组小鼠相比，模型组小鼠肾脏组织肾盂到髓质有比较严重的局部炎症，并伴有一定程度的水肿。而灌胃中、高剂量的复配果汁能够显著地改善肾脏组织的炎症状况(P<0.05)。
图4为小鼠肾脏组织病理学切片。光学显微镜观察发现，在正常对照组中，小鼠的肾血管球和肾小囊结构清晰完整，没有炎细胞的出现，肾小管的细胞清晰，胞质丰满，细胞体型正常，无破损，管腔内无蛋白质样物质渗出，血管无瘀血。UTI模型组小鼠肾盂黏膜下和间质均存在大量炎细胞，伴有炎症细胞浸润，肾盂黏膜较明显充血、水肿，表明UTI阳性组小鼠有明显的肾盂肾炎病理表现。经过诺氟沙星治疗后，UTI模型组小鼠肾盂肾炎症状明显减轻，多数的病理特征基本与正常对照组相似，少数显示肾盂黏膜充血、水肿，有少数炎细胞。灌胃实施例6至8制得的组合物组小鼠的肾脏病理改变较模型组有好转，炎症症状得到缓解；实施例6、7组的治疗作用较弱，肾盂黏膜下和间质有一定量的炎细胞存在，而实施例8可使UTI小鼠肾盂肾炎的病理表现明显减轻，肾小管和肾小囊结构清晰完整，细胞体型较正常，有很少量炎细胞的出现。
图5为小鼠膀胱组织评分结果。各组小鼠的膀胱组织结构清晰整齐，没有出现较严重的炎症和水肿现象。仅仅模型组小鼠与正常组小鼠相比膀胱组织伴有较轻微的局部炎症和水肿。
图6为小鼠膀胱组织病理学切片，光学显微镜观察发现各组膀胱均未见明显的炎症反应。
总的来看，UTI小鼠的肾脏和膀胱的脏器指数均比正常对照组显著增加，其中肾脏指数被影响更为明显，呈极显著差异；经过诺氟沙星治疗后，UTI小鼠的肾脏和膀胱指数均显著下降，实施例6、7组对UTI小鼠肾脏指数有一定的抑制作用，实施例8组能使UTI小鼠肾脏指数明显降低，造成的原因可能是缓解肾脏局部水肿和减轻炎症所致。在实施例6至8制得的组合物对实验性小鼠泌尿系感染模型肾脏和膀胱组织学的影响方面，UTI模型组小鼠肾盂存在明显和易观察的炎症反应和水肿现象；灌胃实施例6、7制得的组合物对模型组小鼠治疗作用较弱，诺氟沙星和实施例8制得的组合物均能显著缓解肾脏中的炎症反应和减轻肾盂肾炎的病理表现，均呈现显著性差异，但诺氟沙星的抑制效果更好。膀胱的组织学检查发现就算是模型组小鼠也并未显示出明显的炎症反应，可能是由于膀胱的肌层不易被细菌侵袭和大肠杆菌感染UTI主要是上行感染即与肾脏致病有关，但是通过膀胱脏器感菌数目分析发现，膀胱中确实有大量的大肠杆菌存在，导致膀胱重量以及相关指数的增加。因此，实施例6至8制得的组合物尤其是实施例8制得的组合物能对小鼠上行实验性泌尿道感染具有显著防治作用。
将实施例1-5制备的组合物进行上述动物实验，结果与实施例6至8制得的组合物的效果相近。
综合上述实验结果表明，本发明提供的组合物能够有效预防和/或治疗泌尿道感染。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种组合物，其特征是在于，其由以下重量份比的原料组成：蔓越莓原果汁30～100份，桑葚原果汁6～18份，覆盆子原果汁4～12份。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其配方如下：蔓越莓原果汁50～80份，桑葚原果汁9～15份，覆盆子原果汁8～12份。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其配方如下：蔓越莓原果汁80份，桑葚原果汁12份，覆盆子原果汁9份。
4.根据权利要求1至3任一项所述的组合物，其特征在于，所述蔓越莓原果汁、所述桑葚原果汁、所述覆盆子原果汁为原汁、冻干粉、浓缩物或有效成分的提取物，所述浓缩物和所述提取物的功效量应与所述原汁功效成分份量相等。
5.根据权利要求1至4任一项所述的组合物在制备预防和/或治疗泌尿道感染的药物、食品、饮品或保健品中的应用。
6.一种预防和/或治疗泌尿道感染的药物，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所述的组合物和药学上可接受的辅料。
7.一种预防和/或治疗泌尿道感染的保健品，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所述的组合物和保健品中可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的保健品，其特征在于，其剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、汤剂、膏剂、露剂、口服液剂、滴丸剂、糖浆剂。
9.一种预防和/或治疗泌尿道感染的食品，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所述的组合物和食品中可接受的辅料或佐剂。
10.一种预防和/或治疗泌尿道感染的饮品，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所述的组合物和饮品中可接受的辅料或佐剂。
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