技术背景
黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。性味苦,寒。归肺、心、胃经。具有清热解毒,凉散风热之功效。主要含有黄芩素、黄芩黄酮Ⅱ、黄芩苷、汉黄芩素、汉黄芩苷等成分。由于黄芩苷易被所含酶在一定温度下和湿度下酶解成苷元,沸水后煎煮,破坏了酶的活性,不致使黄芩苷类酶解,提取过程中杂质很多,除黄芩苷外的本品中的一些有效成分在受湿条件下不稳定,如黄芩药材遇水在酶的作用下氧化,颜色变绿。
黄色结晶,熔点223℃。淡黄色细针晶(甲醇),熔点223-225℃,[α]18D+123℃(c=0.2,吡啶-水);易溶于N,N-二甲基甲酰胺,吡啶中,可溶于碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中,但在碱液中不稳定,渐变暗棕色,微溶于热冰醋酸,难溶于甲酸、乙酸、丙酮,几乎不溶于水,乙醚、苯、氯仿等。
中国专利CN102266386公开了一种黄芩提取物及其制备方法和用途,提供了一种黄芩提取物,所述的黄芩提取物中含有黄芩苷的重量百分含量为82%~88%,用于鼻腔给药。
中国专利CN1961888公开了一种黄芩提取物冻干粉针剂。它以黄芩提取物单体为原料,配以碱性助溶剂、酰胺类助溶剂、抗氧剂,解决了黄芩素在水中难溶和在碱性水溶液中不稳定的问题,从而解决了难以制备稳定的注射用黄芩素、注射用黄芩苷以及注射用黄芩素与黄芩苷混合物冻干粉针的问题。
中国专利CN1268512公开了黄芩粉碎后,用乙醇渗漉提取,渗漉液回收乙醇后加水稀释,上树脂柱层析分离,用水及有机溶媒洗脱,收集有机溶媒洗脱液,回收溶媒,即得黄芩提取物。
中国专利CN1919256公开了一种黄芩提取物质量标准及其含量测定方法。本发明的质量标准及其测定方法是在2005年版中国药典基础上的改进,提出的新标准为黄芩苷含量85-91%,黄芩素、汉黄芩素和汉黄芩苷三者含量之和为6-12%。
中国专利CN1634217公开了金银花和黄芩提取物与对乙酰氨基酚的复方药剂及其制备方法,一种金银花和黄芩提取物与对乙酰氨基酚的复方药剂,该药剂是口服或静脉给药的含金银花和黄芩有效成分与对乙酰氨基酚的组合药物。
中国专利CN1739616公开了一种黄芩提取物眼用制剂,由黄芩或其提取物与辅料制作成的。黄芩加水煎煮,合并滤液,浓缩至适量,用盐酸调PH调至1.0-2.0,80℃保温,静置,滤过,沉淀加适量水搅匀,用40%NaOH水溶液调节PH调至7.0,加等量乙醇,搅拌使溶解,滤过,滤液用盐酸调PH调至1.0-2.0,65℃保温静置,滤过,沉淀依次用适量的水及不同乙醇洗至pH值至7.0,挥尽乙醇,减压干燥,即得。
中国药典涉及该内容时,所公开的方法也需要浓缩,加入大量的乙醇主要是除杂,提高黄芩提取物的纯度。本发明对现有方法进行改进,本发明不需要进行浓缩,直接将黄芩苷提取出来,是采用PH梯度除杂,取得更好的效果。
目前,上述方法在制备黄芩提取物时,需要加入大量的乙醇,不仅费时费力,成本高,而且容易对环境造成大量的污染。另外,上述制备方法相对比较复杂,对操作环境要求较高。为此,本发明对现有制备工艺进行改进,有效解决上述问题。
发明内容
本发明目的在于提供一种黄芩提取物的制备方法,该方法不仅制备工艺简单,省略浓缩的过程,而且制作成本低,对环境污染小,制备过程中不需要用到大量的乙醇。
本发明所述的黄芩提取物,制备方法包括以下步骤:
黄芩药材切片或粉碎成粉末,称取黄芩切片或粉末置于多功能提取罐中,待溶液沸腾后加入黄芩煎煮3次,第一次加6-10倍的水煎煮20-60分钟,第二次 加4-10倍的水煎煮20-60分钟,第三次加4-10倍的水煎煮20-60分钟,煎液合并过200目滤布,滤液置搪瓷调酸罐,用盐酸浓度调pH调至1.0-2.0,60-90℃保温30-90分钟,去掉上清液,过滤,取沉淀物加6-12倍量水搅匀,用40%NaOH水溶液,调节pH至7.0,过滤,取滤液置搪瓷调酸罐,用盐酸调pH至1.0-2.0,60-90℃保温60分钟,去掉上清液,沉淀至滤带滤布,挤干水分,真空干燥箱烘干,用万能粉碎机粉碎过80目筛,即得。
优选的,本发明的提取方法,包括以下步骤:
黄芩粉碎成粗粉后,称取黄芩粗粉置多功能提取罐中(待沸腾后加入黄芩),加水煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水,水煎煮30分钟,第三次加6倍的水,水煎煮30分钟,煎液过200目滤布(双层),滤液合并,加入20%氢氧化钠调节PH7.0,加酸回调PH6.5-7.0,除杂,溶液置搪瓷调酸罐,用浓盐酸调PH调至1.6,80℃保温30分钟,去掉上清液,得到沉淀,水洗,得沉淀。
取沉淀加10倍量水搅匀,用20%NaOH水溶液,PH调至7.0,搅拌使溶解,滤过置搪瓷调酸罐,用浓盐酸调PH调至1.6,80℃保温30分钟,过滤,沉淀依次用适量的水及不同浓度的乙醇洗至pH7.0,挥干乙醇,真空干燥箱烘干,用万能粉碎机粉碎过80目筛,即得。
其中,本发明的黄芩药材经切制成后,不局限于1.0-1.5cm片,还可以粗粉,中粉,药材蒸制与不蒸制。
本发明所用的酸包括但不局限于盐酸,还可以是硫酸,磷酸等。
本发明所用的碱包括但不限于氢氧化钠,还可以是碳酸钠,碳酸氢钠等。
本发明的黄芩提取物是经过科学筛选得到的,其筛选过程如下:
1、提取工艺研究
1.1以提取时间、粗碎与不粗碎、蒸与不蒸进行研究,以黄芩苷的转移率为指标。
表1
表中,蒸与不蒸,是指在提取前,对药材进行蒸制。
实验结果显示,选用水作为提取溶剂,提取效果最好。
1.2对炮制的方法、加水量、提取的时间、盐酸浓度对黄芩苷的转移率进行研究。
表2
实验结果显示:蒸与不蒸没有差别,优选的方案为:称取黄芩切片或粉末置于多功能提取罐中,待溶液沸腾后加入黄芩煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水煎煮30分钟,第三次加6倍的水煎煮30分钟,滤液置搪瓷调酸罐,用盐酸浓度调pH调至1.0-2.0,80℃保温60分钟,去掉上清液,过滤,取沉淀物加6-12倍量水搅匀,用40%NaOH水溶液,调节pH至7.0,过滤,取滤液置搪瓷调酸罐,用盐酸调pH至1.0-2.0,60℃保温60分钟,去掉上清液,沉淀至滤带滤布,挤干水分,真空干燥箱烘干,用万能粉碎机粉碎过80目筛,即得。
用盐酸调pH用2摩尔盐酸浓度优于其他浓度。
以上的药材的加水量,也并不局限于12倍、10倍、8倍、6倍,也可以15倍、9倍、13倍、11倍、7倍,提取的时间也可以90min,45min等系列时间, 不局限于以上的时间。盐酸浓度并不局限于1mol,2mol,5mol,还可以3mol,4mol 1.5mol,2.5mol等系列浓度。
1.3考察浓缩与不浓缩:
采用煎煮液浓缩精制黄芩苷,不浓缩及以及用乙醇除杂或者采取乙醇除杂技术,对工艺进行优化。
1.3.1考察浓缩工艺的影响:
方案1:称取黄芩切片或粉末置于多功能提取罐中,待溶液沸腾后加入黄芩煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水煎煮30分钟,第三次加6倍的水煎煮30分钟,浓缩相对密度1.05,用盐酸浓度调pH调至1.0-2.0,80℃保温60分钟,去掉上清液,过滤,取沉淀物,测定含量。
方案2:称取黄芩切片或粉末置于多功能提取罐中,待溶液沸腾后加入黄芩煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水煎煮30分钟,第三次加6倍的水煎煮30分钟,用盐酸浓度调pH调至1.0-2.0,80℃保温60分钟,去掉上清液,过滤,取沉淀物,测定含量。
1.3.2、在制备过程中,考察不用乙醇与用乙醇的差别:
方案1:称取黄芩切片或粉末置于多功能提取罐中,待溶液沸腾后加入黄芩煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水煎煮30分钟,第三次加6倍的水煎煮30分钟,合并滤液,用盐酸浓度调pH调至1.0-2.0,80℃保温60分钟,去掉上清液,过滤,取沉淀物,沉淀加适量水搅匀,用40%NaOH水溶液调节PH调至7.0,加等量乙醇,搅拌使溶解,滤过,滤液用盐酸调PH调至1.0-2.0,65℃保温静置,滤过,沉淀依次用适量的水及不同乙醇洗至pH值至7.0,挥尽乙醇,减压干燥,即得。
方案2:称取黄芩切片或粉末置于多功能提取罐中,待溶液沸腾后加入黄芩煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水煎煮30分钟,第三次加6倍的水煎煮30分钟,合并滤液,用盐酸浓度调pH调至1.0-2.0,80℃保温60分钟,去掉上清液,过滤,取沉淀物,沉淀加适量水搅匀,用40%NaOH水溶液调节PH调至7.0,搅拌使溶解,滤过,滤液用盐酸调PH调至1.0-2.0,65℃保温静置,滤过,沉淀依次用适量的水及不同乙醇洗至pH值至7.0,挥尽乙醇,减压干燥,即得。
表3
|
黄芩苷转移率 |
溶化性 |
浓缩 |
55% |
合格 |
不浓缩 |
65% |
合格 |
用乙醇 |
50% |
合格 |
不用乙醇 |
67% |
合格 |
由以上实验结果可知,料液采取不浓缩,黄芩苷的转移率大于料液浓缩的黄芩苷的转移率,
用40%NaOH水溶液调节PH调至7.0,不加等量乙醇,转移率高于加加等量乙醇。
黄芩提取物采用乙醇的精制的工艺如下:
30kg黄芩粉碎成粗粉后,称取黄芩粗粉置多功能提取罐中(待沸腾后加入黄芩),加热煎煮3次,第一次加8倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水,水煎煮30分钟,第三次加6倍的水,水煎煮30分钟,煎液过200目滤布(双层),滤液合并,浓缩适量置搪瓷调酸罐,用浓盐酸调PH调至1.6,80℃保温30分钟,过滤,取沉淀加10倍量水搅匀,用20%NaOH水溶液,PH调至7.0,加适量乙醇,搅拌使溶解,滤过置搪瓷调酸罐,用浓盐酸调PH调至1.6,60℃保温30分钟,过滤,沉淀依次用适量的水及不同浓度的乙醇洗至pH7.0,挥干乙醇,真空干燥箱烘干,用万能粉碎机粉碎过80目筛,即得。
表4、乙醇用量的考察
乙醇量 |
黄芩苷含量 |
黄芩苷转移率 |
溶化性 |
等量 |
88% |
45% |
合格 |
70%等量 |
87% |
50% |
合格 |
50%等量 |
86% |
55% |
合格 |
30%等量 |
82% |
65% |
合格 |
0 |
79% |
75% |
合格 |
由于制剂在制备过程中需要加入如淀粉、糊精之类药用辅料,而通过乙醇的量减少,使得黄芩苷的转移率的提高,从而节约大量的资源,得到意想不到的效果。
通过一系列优选,得到本发明最优选的制备方法,步骤如下:
方案1、黄芩粉碎成粗粉后,称取黄芩粗粉置多功能提取罐中(待沸腾后加入黄芩),加热煎煮3次,第一次加10倍的水煎煮25分钟,第二次加8倍的水,水煎煮30分钟,第三次加6倍的水,水煎煮30分钟,煎液过200目滤布(双层),滤液合并,用浓盐酸调PH调至1.6,80℃保温30分钟,去掉上清液,得到沉淀。
取沉淀加10倍量水搅匀,用20%-40%NaOH水溶液,PH调至7.0,搅拌使溶解,滤过置搪瓷调酸罐,用浓盐酸调PH调至1.6,60℃保温30分钟,过滤,沉淀依次用适量的水及不同浓度的乙醇洗至pH7.0,挥干乙醇,真空干燥箱烘干,用万能粉碎机粉碎过80目筛,即得。
方案2、黄芩粉碎成粗粉后,称取黄芩粗粉置多功能提取罐中(待沸腾后加入黄芩),加水煎煮3次,第一次加10倍的水煎煮25分钟,第二次加6倍的水,水煎煮30分钟,第三次加6倍的水,水煎煮30分钟,煎液过200目滤布(双层),滤液合并,加入碱调节PH7.0,加酸回调PH6.5-7.0,除杂,溶液置搪瓷调酸罐,用浓盐酸调PH调至1.6,80℃保温30分钟,去掉上清液,得到沉淀,水洗,得沉淀。
本发明通过对提取方法的改进,不仅简化制备工艺,降低成本,减少对环境的污染,而且本发明还有效提高有效成分黄芩苷的转移率。