CN104497336B - 一种黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种黄鲫蛋白抗菌肽‑纳米氧化锌膜的制备方法,所述方法包括如下顺序步骤:配制黄鲫蛋白抗菌肽溶液,加入海藻酸钠,磁力搅拌充分溶解,逐滴加入氯化钙溶液,滴加完毕后加入甘油,搅匀;加入纳米氧化锌,持续搅拌,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀,烘箱干燥成膜;在膜表面喷涂氯化钙溶液进一步交联,然后经漂洗、干燥,即得所述黄鲫蛋白抗菌肽‑纳米氧化锌膜。本发明采用纳米技术制备黄鲫蛋白抗菌肽‑纳米氧化锌抗菌膜,抗菌性能优良,且稳定性好,制备方法简单、成本低,制备方法简单、成本低,且不需要使用聚丙烯等聚合物,环保、安全性,大大提高了黄鲫抗菌肽的应用价值,奠定了其在纳米抗菌包装中的应用基础。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜的制备方法。
(二)背景技术
食品包装是食品加工和品质保证的重要技术,在包装材料中添加一定抗菌剂(称作抗菌包装)通过直接接触方式杀死或者抑制包装材料表面附着的微生物,而且对食品中残存微生物也有抑制其生长、繁殖或者直接杀灭作用。特别在一些食品安全事件大范围爆发后,消费者的食品安全意识不断提高,在食品安全感心理因素影响下,人们更青睐于“无添加”或者“少添加”食品添加剂类食品。因此,抗菌包装被称作是最环保和健康的一种食品包装技术,而上世纪90代初新兴发展起来的纳米技术在抗菌包装中的应用,更是极大地推动了食品抗菌包装的快速发展。
中国专利CN101628645A提供了一种抗菌BOPP/PP食品复合包装膜,CN102152575A提供了一种食品包装用抗菌防雾膜,均为多层结构,制备工艺复杂,成本较高,不适宜批量生产。
黄鲫蛋白抗菌肽具有广谱抗菌性、优异的体外抗氧化作用。但是,水溶性的黄鲫蛋白抗菌肽成膜性、稳定性以及与包装塑料等材料混溶性差,限制了其在食品包装材料中的应用价值。
中国专利CN103667407A公开了一种多肽-锌金属配合物,提示将多肽与锌金属配合可提高其抗菌性能,但如何提高多肽的成膜性和稳定性,提高其在食品包装材料中的应用范围,还有待于进一步研究。
(三)发明内容
本发明目的是解决现有技术中黄鲫蛋白抗菌肽难以成膜、稳定性、混溶性差的不足,提供一种黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜的制备方法。
本发明采用的技术方案是:
一种黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜的制备方法,所述方法包括如下顺序步骤:
(1)配制质量浓度为10~20mg/mL的黄鲫蛋白抗菌肽溶液,加入质量为溶液中黄鲫蛋白抗菌肽质量2~5倍的海藻酸钠,磁力搅拌使之充分溶解;黄鲫蛋白抗菌肽制备方法可参考专利CN102051398A;
(2)逐滴加入质量百分浓度为5~10%的氯化钙溶液,滴加完毕后加入甘油,搅拌均匀;黄鲫蛋白抗菌肽溶液、氯化钙溶液、甘油体积用量之比为20~50:1~2:1~2;
(3)加入纳米氧化锌至其终质量浓度为3~5mg/mL,持续搅拌10~15min,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀(膜厚度一般控制在0.5~1.0mm),然后置45~50℃烘箱干燥12~18h成膜;
(4)在膜表面喷涂质量百分浓度为5~10%的氯化钙溶液进行进一步交联,然后用水漂洗2~3次,再置45~50℃烘箱干燥12~18h,即得所述黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜。
具体的,所述纳米氧化锌由如下方法制得:取摩尔浓度为0.1~0.5mol/L的氯化锌溶液,逐滴加入等体积的氢氧化钠溶液,溶液中氢氧化钠的摩尔浓度为氯化锌摩尔浓度的2倍,磁力搅拌使之混匀,混合液在60~65℃水浴下加热2~3h后,室温放置12~15h,过滤去除滤液,将滤饼置60~70℃烘箱中烘干48~56h,即得所述纳米氧化锌粉末。
优选的,所述方法如下:
(1)配制质量浓度为10mg/mL的黄鲫蛋白抗菌肽溶液,加入海藻酸钠,磁力搅拌使之充分溶解,溶液中黄鲫蛋白抗菌肽与海藻酸钠质量之比为3:7;
(2)将质量百分浓度为5%的氯化钙溶液逐滴加到上述溶液中,紧接着加入甘油,混匀;黄鲫蛋白抗菌肽溶液、氯化钙溶液、甘油体积用量之比为30:1:1;
(3)加入纳米氧化锌至其终质量浓度为4mg/mL,持续搅拌10min,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀(膜厚约0.5~1.0mm),然后放45℃烘箱干燥12h成膜;
(4)用5%氯化钙溶液喷涂到膜表面进一步交联(此处氯化钙溶液用量与步骤(2)中氯化钙用量相同),用去离子水漂洗3次,再放入45℃烘箱中干燥12h,得到所述黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜。
氧化锌(USFDA,21CFR182.8991)是美国食品和药物管理局(FDA)认定安全的化学物质,允许在食品工业中使用,纳米氧化锌除有抗菌作用外,还可以作为食品补锌助剂,对人体生长发育起着重要作用。本发明将纳米氧化锌和食品成膜剂海藻酸钠与黄鲫蛋白抗菌肽复合用于制备抗菌膜,大大提高了黄鲫蛋白抗菌肽的成膜性。本发明中纳米氧化锌和氯化钙用量必须严格控制,若加入纳米氧化锌太多,会影响成膜连续性和拉伸性;若氯化钙加入过多,则成膜后很硬,脆性增加。
本发明采用纳米技术制备黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌抗菌膜,抗菌性能优良,且膜连续性和拉伸性好、稳定性好,制备方法简单、成本低,且不需要使用聚丙烯等聚合物,环保、安全,大大提高了黄鲫抗菌肽的应用价值,奠定了其在纳米抗菌包装中的应用基础。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1:
1、制备纳米氧化锌
取摩尔浓度为0.1mol/L氯化锌100mL,逐滴加入摩尔浓度为0.2mol/L氢氧化钠溶液100mL(磁力搅拌,100rpm),混合液在60℃水浴下加热2h,室温放置12h,过滤去除滤液,将滤饼放60℃烘箱中烘干48h,得到纳米氧化锌。
2、制备黄鲫蛋白抗菌肽
(1)将黄鲫去内脏洗净切小块,用组织捣碎机搅碎均匀,制成鱼肉糜,取鱼肉糜50g,加入200g去离子水,得混合液;
(2)用6mol/L盐酸和6mol/L氢氧化钠溶液调节鱼糜与水混合液pH至2.0,并保持恒定;
(3)将55000U的胃蛋白酶加入到混合液中,在保持酶解温度37℃的条件下,酶解2.4小时;
(4)升温至95~100℃加热进行钝化灭酶,灭酶时间10分钟;
(5)冷却至4℃以下,进行离心处理10分钟,速度7000r/min;
(6)过滤,取中间滤液冻干,即得所述黄鲫蛋白抗菌肽。
3、黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜制备
(1)配制质量浓度为10mg/mL的黄鲫蛋白抗菌肽溶液30ml,加入0.7g海藻酸钠,磁力搅拌(100rpm)使之充分溶解;
(2)将1ml质量百分浓度为5%的氯化钙溶液逐滴加到上述溶液中,紧接着加入1ml甘油,混匀;
(3)将128mg纳米氧化锌加到上述溶液中,持续搅拌10min,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀(膜厚约0.5mm),然后放45℃烘箱干燥12h成膜;
(4)用1ml的5%氯化钙溶液喷涂到膜表面进一步交联,用去离子水漂洗三次,再放入45℃烘箱中干燥12h,得到所述黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜。
按照GB/T 21866-2008(抗菌涂料(漆膜)抗菌性测定法和抗菌效果)方法检测制得的黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜抗菌性能,结果该黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜24小时的抗菌性能大于99.00%,抗菌耐久性能大于95.00%,符合抗菌涂料(漆膜)Ⅰ级标准。而且,黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜稳定性高,在常温下膜的保质期可达24个月以上,该膜可用于0~40℃范围食品保鲜。
实施例2:
1、制备纳米氧化锌
同实施例1。
2、制备黄鲫蛋白抗菌肽
同实施例1。
3、黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜制备
(1)配制质量浓度为10mg/mL的黄鲫蛋白抗菌肽溶液40ml,加入0.8g海藻酸钠,磁力搅拌(100rpm)使之充分溶解;
(2)将1.5ml质量百分浓度为5%的氯化钙溶液逐滴加到上述溶液中,紧接着加入1.5ml甘油,混匀;
(3)将160mg纳米氧化锌加到上述溶液中,持续搅拌10min,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀(膜厚约0.6mm),然后放45℃烘箱干燥12h成膜。
(4)用1.5ml的5%氯化钙溶液喷涂到膜表面进一步交联,用去离子水漂洗三次,再放入45℃烘箱中干燥12h,得到所述黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜,与实施例1相比,膜的可塑性稍差。
按照GB/T 21866-2008方法检测制得的黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜抗菌性能,结果该黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜24小时抗菌率性能大于90.00%,抗菌耐久性能大于85%,符合抗菌涂料(漆膜)Ⅱ级标准。在常温下,该抗菌膜的保质期达到12个月,可在0~40℃范围用于食品保鲜。
实施例3:
1、制备纳米氧化锌
同实施例1。
2、制备黄鲫蛋白抗菌肽
同实施例1。
3、黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜制备
(1)配制质量浓度为10mg/mL的黄鲫蛋白抗菌肽溶液30ml,加入1.2g海藻酸钠,磁力搅拌(100rpm)使之充分溶解;
(2)将1.0ml质量百分浓度为5%的氯化钙溶液逐滴加到上述溶液中,紧接着加入1.0ml甘油,混匀;
(3)将96mg纳米氧化锌加到上述溶液中,持续搅拌10min,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀(膜厚约0.6mm),然后放45℃烘箱干燥12h成膜。
(4)用1.5ml的5%氯化钙溶液喷涂到膜表面进一步交联,用去离子水漂洗三次,再放入45℃烘箱中干燥12h,得到所述黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜,与实施例1相比,膜较硬,连续性差。
按照GB/T 21866-2008方法检测制得的黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜抗菌性能,结果该黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜24小时抗菌率性能低于90.00%,抗菌耐久性能低于85%。在常温下,该抗菌膜的保质期达到12个月。
Claims (1)
1.一种黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜的制备方法,所述方法包括如下顺序步骤:
(1)配制质量浓度为10mg/mL的黄鲫蛋白抗菌肽溶液,加入海藻酸钠,磁力搅拌使之充分溶解,溶液中黄鲫蛋白抗菌肽与海藻酸钠质量之比为3:7;
(2)逐滴加入质量百分浓度为5%的氯化钙溶液,滴加完毕后加入甘油,搅拌均匀;黄鲫蛋白抗菌肽溶液、氯化钙溶液、甘油体积用量之比为30:1:1;
(3)加入纳米氧化锌至其终质量浓度为4mg/mL,持续搅拌10min,将溶液倾倒至干净的玻璃盘中,用玻璃涂布器刮匀,然后置45℃烘箱干燥12h成膜;所述纳米氧化锌由如下方法制得:取摩尔浓度为0.1~0.5mol/L的氯化锌溶液,逐滴加入等体积的氢氧化钠溶液,溶液中氢氧化钠摩尔浓度为氯化锌的2倍,磁力搅拌使之混匀,混合液在60~65℃水浴下加热2~3h后,室温放置12~15h,过滤去除滤液,将滤饼置60~70℃烘箱中烘干48~56h,即得所述纳米氧化锌;
(4)在膜表面喷涂质量百分浓度为5%的氯化钙溶液进行进一步交联,然后用水漂洗3次,再置45℃烘箱干燥12h,即得所述黄鲫蛋白抗菌肽-纳米氧化锌膜。
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