CN104490970A - 一种治疗体癣的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

一种治疗体癣的药物组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种治疗体癣的药物组合物及其制备方法，该组合物由活性成分和药剂学上可以的辅料制备而成，所述的活性成分为三叶鬼针草原料的磷酸盐缓冲液浸提物。本发明由单味中药材提取制备而成，味少而效转，具有疗程短，见效快，疗效好等优点。

Description

一种治疗体癣的药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体而言，涉及一种治疗体癣的药物组合物及其制备方法。
背景技术
体癣是皮肤癣菌引起的除手、足、会阴和股部以外光滑皮肤上的浅部真菌感染。由于病菌侵入表皮后一般只寄生于角质层，所以只在局部引起轻度的炎症反应，初起为红丘疹或小水疱，继之形成鳞屑，再向周围逐渐扩展，中央则趋于消退，形成边界清楚的环形损害。而且边缘多为隆起，常可见丘疹、水疱，表面一般无渗液。
目前，对体癣的治疗还没有一种行之有效的治疗方法或者药物。西医治疗方面多采用化学制剂，如激素类药物，虽然但是见效快，但副作用大，且容易复发；而现有中药制剂需要较长的治疗周期，并且费用高，虽有一定的疗效，但起不到根本的治疗作用，给患者带来精神上和经济上带来沉重的负担。
发明内容
鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于通过对传统中药材进行深入研究，提供一种通过抑菌止痒达到治疗体癣的药物。
本发明的目的是这样实现的：
一种治疗体癣的药物组合物，由活性成分和药剂学上可以的辅料制备而成，其中所述的活性成分为三叶鬼针草原料的磷酸盐缓冲液浸提物。需要说明的是，本发明所述的三叶鬼针草原料为菊科植物三叶鬼针草Bidens pilosa L.的根。
优选地，如上所述治疗体癣的药物组合物为外用制剂，所述的外用制剂包括软膏剂、乳膏剂、凝胶剂。
本发明还提供了上述治疗体癣的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：称取三叶鬼针草的新鲜根，磨浆处理，所得浆液中加pH 7.2磷酸盐缓冲液，于40-55℃的水浴条件下搅拌浸提12-48h，过滤，滤渣弃掉，所得滤液经浓缩、干燥，得三叶鬼针草提取物，然后与药剂学上可以的辅料制备成外用制剂。
本发明通过动物试验研究发现，采用本发明的三叶鬼针草提取物软膏用药治疗九天后，大鼠染菌部位皮屑明显减少,红肿开始消退,少数出现出血性红斑,有的长出体毛,十四天后各组大鼠染菌部位情况均有好转。阳性对照组大部分明显好转,厚痂消失,鳞屑减少,但有两只在恢复过程中出现明显的溃烂情况,两三天后好转。总之，与空白对照组相比,无论从病变程度还是从病灶皮肤逆培养结果，各治疗组均有效抑制了石膏样毛癣菌株的生长，这预示着本发明的三叶鬼针草提取物具有较好的治疗体癣的生物活性。基于以上研究结果，本发明还提供一种制药用途，即：三叶鬼针草的磷酸盐缓冲液浸提物在制备抗石膏毛癣菌的药物中的用途。
与现有技术相比，本发明的药物组合物由单味中药材提取制备而成，味少而效转，具有疗程短，见效快，疗效好等优点，且为纯天然生药配伍，不会产生副作用、依赖性和抗药性。
具体实施方式
以下是本发明三叶鬼针草提取物及其外用制剂的制备实施例和效果试验例，对本发明做进一步的解释和说明，但这并非意味着本发明的保护范围受如下实施例的限制。
实施例1 三叶鬼针草提取物的制备
称取三叶鬼针草的新鲜根1kg，胶体磨磨浆处理，所得浆液中加1L的磷酸盐缓冲液(pH 7.2)，于50℃的水浴条件下搅拌浸提24h，用四层纱布过滤，滤渣弃掉，所得滤液经减压旋转蒸发、冷冻干燥得到72.5g固体，粉碎成细粉，过100目筛，得三叶鬼针草提取物。磷酸盐缓冲液(pH 7.2)的配制：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液175ml，加新沸过的冷水稀释至1L，摇匀，即得。
实施例2 软膏剂的制备
处方：
提取物            10g
尿素              50g
羧甲基纤维素   40g
丙三醇         200ml
丙二醇          50 ml
尼泊金乙酯          2g
水         加至1000g
制备工艺：将实施例1制备的三叶鬼针草提取物干粉溶于适量的水中，直至三叶鬼针草提取物完全溶解，然后将羧甲基纤维素与丙二醇、丙三醇混匀，加入到上述所得的提取物药液中，搅拌混匀，放置待溶胀成凝胶后，再加入含有尿素和尼泊金乙酯的水溶液中，加水至足量即可。
实施例3 软膏剂的制备
处方：
提取物            20g
尿素              50g
羧甲基纤维素   40g
丙三醇         200ml
丙二醇          50 ml
尼泊金乙酯          2g
水         加至1000g
制备工艺：将实施例1制备的三叶鬼针草提取物干粉溶于适量的水中，直至三叶鬼针草提取物完全溶解，然后将羧甲基纤维素与丙二醇、丙三醇混匀，加入到上述所得的提取物药液中，搅拌混匀，放置待溶胀成凝胶后，再加入含有尿素和尼泊金乙酯的水溶液中，加水至足量即可。
对比例 空白软膏的制备
处方：
尿素              50g
羧甲基纤维素   40g
丙三醇         200ml
丙二醇          50 ml
尼泊金乙酯          2g
水         加至1000g
制备工艺：将羧甲基纤维素与丙二醇、丙三醇混匀，加入到400mL水中，搅拌混匀，放置待溶胀成凝胶后，再加入含有尿素和尼泊金乙酯的水溶液中，加水至足量即可。
实施例4 沙氏培养基的制备和石膏样毛癣菌的培养
蒸馏水1000ml、蛋白胨lOg、葡萄糖20g、琼脂20g。将蛋白胨、葡萄糖、琼脂按比例称量后倒入预先洗净的三角烧瓶中，加入一定比例的蒸馏水，调pH值至5.5。用棉塞封住三角烧瓶瓶口，再用报纸包好瓶口并用橡皮筋扎好放入手提式蒸汽消毒器中，加热待消毒器内的空气排尽后关上排气阀，在115-120℃之间加热45min。45min后停止加热，待消毒器内压降为0个大气压时，打开阀门及锅盖，取出三角烧瓶。趁热在无菌实验室内(之前已紫外灯灭菌)，向每个培养皿(培养皿事先已干热灭菌) 中倒入约25ml培养基，并贴上标签，晾凉即得。在无菌条件下,用接种环将石膏样毛癣菌涂抹在实施例1制备的沙氏培养基上,放入恒温箱中37℃培养十天，十天后取出检查。
实施例5
Wistar大鼠，体质量250-300g, 雌雄各半，皮肤情况良好,体毛光滑。脱毛后观察24小时,使其皮肤恢复，确认皮肤无腐蚀性点状样渗血等损伤即可使用。将脱毛后的大鼠在脱毛处用手术刀刮伤皮肤直至有血渗出为度。取少量实施例1培养好的菌种,用刀片涂抹于创面上。用纱布包好,再用胶布缠绕以免挣脱。每日观察并且重复染菌直至第9天出现病变。所有接种了石膏毛癣菌菌株的大鼠均有不同程度的发病,接种后两到三天接种部位有轻度红肿,三到四天后有的出现少数红斑丘疹,随时间延长病情逐渐加重,红斑逐渐扩大,五、六天后有的出现大量鳞屑,病情逐渐加重,有的形成厚痂皮,少数出现溃烂。八到十天左右病变逐渐达到高峰,但伴有溃烂、出血的极期病灶较少。接种成功后取皮屑置载玻片上滴加10% KOH少许,以盖玻片覆盖后在火焰上微热,软化角质,盖上盖玻片,显微镜下观察,有丝状石膏毛癣菌菌株。菌株粗细不一,有分枝。小分生孢子产多,呈卵圆形,散在或聚集在一起。偶可见到呈棒状、壁薄、表面光滑的大分生孢解子。
成功染菌后,病变程度按文献记载方法评分,用0、1、2、3、4分级表示,评分如下：无病变为0；少数红斑性丘疹或病变趋向痊愈,新生体毛长出者为1；红斑融合或呈岛状散在且周围发红者为2；红斑全面扩大,有大量鳞屑及厚皮者为3；伴有出血的极期病变为4。根据以上记录的大鼠病变程度，将大鼠分为五组(中药高、低剂量组、阳性对照组和空白对照组)，并给予如下相应的药物：
空白对照组：涂抹上述对比例制备的空白软膏；
阳性对照组：涂抹达克宁乳膏（西安杨森生产，规格2%）；
中药低剂量组：涂抹上述实施例2制备的三叶鬼针草提取物软膏；
中药高剂量组：涂抹上述实施例3制备的三叶鬼针草提取物软膏。
将各药剂分别涂于各组大鼠染菌部位,用纱布包好,并用胶布固定,第一周,每天上药两次,早晚各一次,第二周每天上药一次,观察病变愈合情况并记录。要判断是否痊愈还需做培养。用药十四天后将大鼠处死,取病灶部位皮肤,每只大鼠病灶处各取三块约3mm皮肤,放入70%乙醇中浸泡2-3分钟,杀死杂菌,经无菌盐水洗净后在无菌室中接种于沙氏培养基中,并标记。将培养皿放入恒温培养箱中37℃培养两周后,取出,观察石膏样毛癣生长情况。根据石膏样毛癣菌的特点,镜下观察,检查病灶部分皮肤内有无石膏样毛癣菌生长,以各组动物的平均病变程度和病灶皮肤逆培养石膏样毛癣菌株生长的阴性率作为判断药物疗效的指标。
采用本发明的三叶鬼针草提取物软膏用药治疗九天后，大鼠染菌部位皮屑明显减少,红肿开始消退,少数出现出血性红斑,有的长出体毛,十四天后各组大鼠染菌部位情况均有好转。阳性对照组大部分明显好转,厚痂消失,鳞屑减少,但有两只在恢复过程中出现明显的溃烂情况,两三天后好转。总之，与空白对照组相比,无论从病变程度还是从病灶皮肤逆培养结果，各治疗组均有效抑制了石膏样毛癣菌株的生长，这预示着本发明的三叶鬼针草提取物具有较好的治疗体癣的生物活性。染菌大鼠病灶皮肤逆培养结果见表1。
表1 大鼠病灶皮肤逆培养结果
组别 样本量 阴性 阳性 阴性率（%）
空白对照组 30 7 23 23.3
阳性对照组 30 26 4 86.7
中药低剂量组 30 22 8 73.3
中药高剂量组 30 25 5 83.3

Claims (5)

1.一种治疗体癣的药物组合物，由活性成分和药剂学上可以的辅料制备而成，其特征在于：所述的活性成分为三叶鬼针草原料的磷酸盐缓冲液浸提物。
2.根据权利要求1所述治疗体癣的药物组合物，其特征在于：所述的三叶鬼针草原料为三叶鬼针草的根。
3.根据权利要求1或2所述治疗体癣的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物为外用制剂，所述的外用制剂包括软膏剂、乳膏剂、凝胶剂。
4.一种根据权利要求3所述治疗体癣的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：称取三叶鬼针草的新鲜根，磨浆处理，所得浆液中加pH 7.2磷酸盐缓冲液，于40-55℃的水浴条件下搅拌浸提12-48h，过滤，滤渣弃掉，所得滤液经浓缩、干燥，得三叶鬼针草提取物，然后与药剂学上可以的辅料制备成外用制剂。
5.三叶鬼针草的磷酸盐缓冲液浸提物在制备抗石膏毛癣菌的药物中的用途。
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