CN104388363B - 一种有机垃圾除臭、减量复合菌及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种有机垃圾除臭、减量复合菌及其制备方法，主要由以下重量份数的原料混合制备而成：枯草芽孢杆菌10～20份，地衣芽孢杆菌10～25份，酿酒酵母10～25份，硝化细菌5～15份，植物乳杆菌8～20份，脱氮硫杆菌10～20份，链霉菌15～30份和绿色木霉10～25份，将各菌种分别接种至装有培养基的摇瓶中活化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。本发明用于有机垃圾除臭、减量，相比现有技术，生产投资小，生产成本低，纯绿色环保、处理功效高、适应性广，使用方便，且可以变废为宝。
Description
技术领域
本发明涉及生物工程微生物发酵技术领域，尤其涉及一种有机垃圾除臭、减量复合菌及其制备技术。
背景技术
垃圾是人们日常生活和生产过程中产生的废弃物，由于排出量大且成分复杂多样，在减量、除臭的处理问题上给人们带来了很大的困难。目前处理生活垃圾的技术主要有卫生填埋、焚烧和堆肥等，其中堆肥技术是有机垃圾无害化、减量化和资源化的关键技术，而微生物是堆肥发酵的主体。
此外，利用微生物进行除臭无疑是最环保的，它是通过生物氧化作用分解消除臭味源，除臭范围广泛，并且通过生物菌种平衡作用来抑制厌氧菌或别的有害菌的数量，使其无法产生臭味。通过微生物和有益菌类等来分解掉有机物、杜绝有机物产生氨和硫化氢(臭味)以及有害菌的生成与繁殖。
微生物除臭剂与传统化学产品比较。每种化学产品都是针对性强的产品，当遇有复杂的其他化学基质时，便会失效；使用化学产品之后，在垃圾中总有化学残留物，它可能带来副作用或新的污染；使用化学产品可掩盖臭味，却不能改变臭味的生成或阻止其散发。微生物除臭技术是利用自然分解和在分解过程中的积极生化作用，不会产生上述问题。
微生物除臭剂与传统生物净化剂相比。微生物除臭技术可以极大祛除臭味，使有机物质迅速新陈代谢，减小固体物质体积，快速净化被污染物质。
微生物脱臭法具有传统方法所不可比拟的优越性,如处理效率高、无二次污染、所需的设备简单、易操作、费用低廉、管理维护方便等,其发展潜力和应用前景是相当广泛的。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种投资小、处理成本低、绿色环保、处理效果好的有机垃圾除臭、减量复合菌，从而消除上述背景技术中缺陷。
本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种投资小、处理成本低、绿色环保的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其制备得到的复合菌处理有机垃圾具有绿色环保、处理效果好的优势，从而消除上述背景技术中缺陷。
为解决上述第一个技术问题，本发明的技术方案是：
一种有机垃圾除臭、减量复合菌，主要由以下重量份数的原料混合制备而成：
为解决上述第二个技术问题，本发明的技术方案是：
一种有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，包括以下步骤：
分别将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、硝化细菌、植物乳杆菌、脱氮硫杆菌、链霉菌和绿色木霉的菌种进行高密度培养，首先接种至装有体积比为15～30％的培养基的摇瓶中活化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后按照枯草芽孢杆菌10～20份，地衣芽孢杆菌10～25份，酿酒酵母10～25份，硝化细菌5～15份，植物乳杆菌8～20份，脱氮硫杆菌10～20份，链霉菌15～30份和绿色木霉10～25份的重量比，混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。
作为一种优选的技术方案，所述枯草芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖18～22g/L、蛋白胨12～18g/L、氯化钠3～7g/L和牛肉膏0.2～0.8g/L，在培养温度为36～40℃,摇瓶转速180～220rpm培养20～32h；
将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为玉米粉10～15g/L、葡萄糖3～8g/L、豆饼粉18～22g/L、鱼粉3～8g/L、碳酸钙5～9g/L、硫酸铵0.8～1.2g/L、磷酸氢二钾0.1～0.5g/L、硫酸镁0.1～0.3g/L和硫酸锰0.1～0.3g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养20～32h，至发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的枯草芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述地衣芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的地衣芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨8～12g/L、牛肉膏1～5g/L和氯化钠3～7g/L，在培养温度为36～40℃,摇瓶转速180～220rpm培养20～32h；
将活化培养好的地衣芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为豆饼粉13～17g/L、玉米粉13～17g/L、磷酸氢二钾0.05～0.15g/L、磷酸二氢钾0.05～0.15g/L和氯化钙2～6g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养20～32h，至发酵罐中地衣芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的地衣芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述酿酒酵母的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为YPD培养基，在培养温度为28～32℃,摇瓶转速140～180rpm培养20～30h；
将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖15～30g/L、玉米浆3～10g/L、磷酸氢二钾2～15g/L、硫酸铵0.5～5g/L和尿素1～10g/L，在培养温度为28～32℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养28～40h，至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml，然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述硝化细菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的硝化细菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为亚硝酸钠0.1～1g/L、硫酸镁0.01～0.1g/L、氯化锰0.005～0.02g/L、磷酸氢二钾0.1～1g/L、无水碳酸钠0.5～1.5g/L、氯化钙0.01～0.1g/L、磷酸二氢钠0.1～0.5g/L，在培养温度为26～30℃,摇瓶转速80～120rpm培养4～7天；
将活化培养好的硝化细菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为亚硝酸钠0.1～1g/L、硫酸镁0.01～0.1g/L、氯化锰0.005～0.02g/L、磷酸氢二钾0.1～1g/L、无水碳酸钠0.5～1.5g/L、氯化钙0.01～0.1g/L、硫酸铵1～10g/L、硫酸亚铁0.0001～0.001g/L、磷酸二氢钠0.1～0.5g/L，在培养温度为26～30℃,发酵罐搅拌转速90～150rpm培养5～8天，至发酵罐中硝化细菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的硝化细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述植物乳杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的植物乳杆菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为MRS培养基，在培养温度为35～38℃,静置培养20～30h；
将活化培养好的植物乳杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖15～30g/L、蛋白胨5～20g/L、酵母粉1～10g/L、磷酸氢二钾1～10g/L、乙酸钠1～10g/L和硫酸镁0.01～0.1g/L，在培养温度为35～38℃,发酵罐静置培养18～28h，至发酵罐中植物乳杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的植物乳杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述脱氮硫杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的脱氮硫杆菌菌种接种至装有体积比为15～30％活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为硝酸钠1～10g/L、乙酸钠5～20g/L、硫酸镁0.05～0.5g/L、硫代硫酸钠5～20g/L、磷酸二氢钾0.5～5g/L、硫酸铵0.05～0.5g/L，在培养温度为26～30℃,静置培养3～7天；
将活化培养好的脱氮硫杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为硝酸钠1～10g/L、乙酸钠5～20g/L、硫酸镁0.05～0.5g/L、硫代硫酸钠5～20g/L、磷酸二氢钾0.5～5g/L、硫酸铵0.05～0.5g/L、氯化锰0.005～0.02g/L、磷酸氢二钾0.1～1g/L、氯化钙0.01～0.1g/L、硫酸亚铁0.0001～0.001g/L，在培养温度为26～30℃,发酵罐静置培养5～10天，至发酵罐中脱氮硫杆菌含量≥108个/ml，然后将发酵得到的脱氮硫杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述链霉菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的链霉菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为察氏培养基，在培养温度为28～32℃,摇瓶转速140～180rpm培养30～45h；
将活化培养好的链霉菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10～30g/L、玉米浆0.5～5g/L、豆饼粉5～25g/L、磷酸氢二钾2～15g/L、硫酸镁0.05～0.5g/L，在培养温度为28～32℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养32～40h，至发酵罐中链霉菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的链霉菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
作为一种优选的技术方案，所述绿色木霉的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养温度为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；
将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，接种量为体积比1～3％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖8～12g/L、玉米芯5～6g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、硫酸镁0.1～0.5g/L、磷酸二氢钾18～22g/L、酵母膏8～12g/L、硫酸亚铁3～7mg/L、硫酸锌1.0～1.8mg/L、氯化钴3.5～4.0mg/L和硫酸锰1.2～1.8mg/L，在培养温度为28～30℃,发酵罐搅拌转速140～180rpm，扩大培养68～84h，至发酵罐中绿色木霉含量≥108个/ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
以上各菌种的制备不分先后顺序，可以同时制备后混合得到所述复合菌。
本发明的复合菌中的各菌种相互协同，各菌种在进行复配以前均做过拮抗实验，结果证明这些菌种之间相互没有拮抗性。
本发明中的枯草芽孢杆菌是淀粉酶和蛋白酶的重要生产菌，枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；对弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害细菌有很强的抑制作用；枯草芽孢杆菌菌体自身合成淀粉酶、蛋白酶等酶类，可以将有机垃圾中的淀粉类、蛋白质类等大颗粒物质彻底分解，达到垃圾减量除臭的目的。
本发明中的地衣芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性，能分解有机垃圾中的淀粉、蛋白质和脂类物质。该菌还能产生抗活性物质，能抑制致病菌的生长繁殖。
本发明中的酿酒酵母是一种典型的兼性厌氧微生物，在有氧气和没有氧气存在的条件下都能够存活。它能分解利用环境中的糖类代谢产生酸性物质，可有效抑制致病菌生长，酵母菌对于促进其它的有效微生物(如乳酸菌、链霉菌)增殖所需要的基质(食物)的生产提供重要的给养保障。
本发明中的硝化细菌可以将垃圾中的氨或铵盐氧化转变为硝酸盐，减少氨气的排放。经复合菌处理后的有机垃圾还可作为有机肥施入土壤中，增加植物可利用的氮素营养。
本发明中的植物乳杆菌是厌氧菌，它能够使常态下不易分解的木质素和纤维素等变得容易分解，并且消除未分解有机物产生的种种污染，在有机物发酵分解上发挥突击队的重要作用，它将未腐熟的有机物质转化成对动植物有效的养份。植物乳杆菌的另一个重要作用，就是能够抑制连作障碍产生的致病菌增殖。
本发明中的脱氮硫杆菌也是一种厌氧菌。它可将垃圾中的亚硝酸盐、有害气体(硫化氢等)等转变成无害的氮气、硫酸盐等物质，起到氧化硫化物和脱氮的作用。
本发明中的链霉菌可以利用垃圾中的淀粉、蛋白质等有机物做食物，产生出各种抗生物质，可以直接抑制病原菌。它提前获取有害霉菌和细菌增殖所需要的基质，从而抑制它们的增殖，并创造出其它有益微生物增殖的生存环境。另外，被链霉菌分解的物质容易被植物吸收，从而增强植物对各种病害的抵抗性和免疫性。
本发明中的绿色木霉能产生多种具有生物活性的酶系，如：纤维素酶、几丁质酶、木聚糖酶等。绿色木霉是产纤维素酶活性最高的菌株之一，所产生的纤维素酶可以降解垃圾中的纤维类物质(如：落叶、废旧衣物、各种菜叶等)，效果非常好，又是一种资源丰富的拮抗微生物，在生物防治中具有重要的作用，具有保护和治疗双重功效，可有效防治土传性病害。
由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
本发明的有机垃圾除臭、减量复合菌，主要由以下重量份数的原料混合制备而成：枯草芽孢杆菌10～20份，地衣芽孢杆菌10～25份，酿酒酵母10～25份，硝化细菌5～15份，植物乳杆菌8～20份，脱氮硫杆菌10～20份，链霉菌15～30份和绿色木霉10～25份，本发明的复合菌中的各菌种相互协同，其中的枯草芽孢杆菌分泌的淀粉酶活性最高，其次为蛋白酶、脂肪酶，而地衣芽孢杆菌分泌的蛋白酶活性最高，绿色木霉分泌的纤维素酶活性最高，其次为木聚糖酶、几丁质酶，这三种菌产生的酶系可以将有机垃圾中的蛋白质、淀粉、脂肪、纤维素、木质素进行彻底分解，转化成植物易吸收利用的小分子物质，从而达到垃圾减量的目的；复合菌中添加的硝化细菌和脱氮硫杆菌主要是因为它们可以将氨、铵盐、硫化物等臭味物质转化成无味的氮气、硫酸盐等；复合菌中添加的植物乳杆菌、酵母菌和链霉菌主要是因为它们不仅可以产生多种酸性物质,形成不利于腐败微生物生活的酸性环境，从根本上降解分解时产生恶臭气体的物质，还可以活化土壤，为植物提供营养。
本发明将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、硝化细菌、植物乳杆菌、脱氮硫杆菌、链霉菌和绿色木霉的菌种进行高密度培养后制备成的休眠体微生物干粉，根据其用途采用合理配比，混合得到的有机垃圾除臭、减量复合菌，可将垃圾中的蛋白质、淀粉、脂肪、纤维素、木质素进行彻底分解，转化成植物易吸收利用的小分子物质。这些有益微生物及其代谢产物还可以分解氨、胺盐、硫化物、酚类等具恶臭味的有害物质。有机垃圾通过本发明的复合菌中的各菌种之间的相互协同作用，既达到了减量除臭的目的，又可以变废为宝，生产生物有机肥。
本发明用于有机垃圾除臭、减量，相比现有技术，生产投资小，生产成本低，纯绿色环保、处理功效高、适应性广，使用方便，且可以变废为宝。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
一种有机垃圾除臭、减量复合菌，由以下重量份数的原料混合制备而成：
实施例2
一种有机垃圾除臭、减量复合菌，由以下重量份数的原料混合制备而成：
实施例3
一种有机垃圾除臭、减量复合菌，由以下重量份数的原料混合制备而成：
实施例4
分别将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、硝化细菌、植物乳杆菌、脱氮硫杆菌、链霉菌和绿色木霉的菌种进行高密度培养，首先接种至装有体积比为20％的培养基的摇瓶中活化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后按照枯草芽孢杆菌10～20份，地衣芽孢杆菌20份，酿酒酵母20份，硝化细菌10份，植物乳杆菌15份，脱氮硫杆菌15份，链霉菌20份和绿色木霉18份的重量比，混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。
实施例5
分别将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、硝化细菌、植物乳杆菌、脱氮硫杆菌、链霉菌和绿色木霉的菌种进行高密度培养，首先接种至装有体积比为25％的培养基的摇瓶中活化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后按照枯草芽孢杆菌20份，地衣芽孢杆菌25份，酿酒酵母25份，硝化细菌15份，植物乳杆菌20份，脱氮硫杆菌20份，链霉菌30份和绿色木霉25份的重量比，混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。
实施例6
A、制备枯草芽孢杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖20g/L、蛋白胨15g/L、氯化钠5g/L和牛肉膏0.5g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速200rpm培养28h；
将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为玉米粉12g/L、葡萄糖5g/L、豆饼粉20g/L、鱼粉5g/L、碳酸钙7g/L、硫酸铵1.0g/L、磷酸氢二钾0.3g/L、硫酸镁0.2g/L和硫酸锰0.2g/L，在培养温度为38℃,发酵罐搅拌转速200rpm培养28h，至发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的枯草芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
B、制备地衣芽孢杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的地衣芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L和氯化钠5g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速200rpm培养28h；
将活化培养好的地衣芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为豆饼粉15g/L、玉米粉15g/L、磷酸氢二钾0.1g/L、磷酸二氢钾0.1g/L和氯化钙4g/L，在培养温度为38℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养28h，至发酵罐中地衣芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的地衣芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
C、制备酿酒酵母的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为YPD培养基，在培养温度为30℃,摇瓶转速160rpm培养26h；
将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖20g/L、玉米浆5g/L、磷酸氢二钾10g/L、硫酸铵3g/L和尿素5g/L，在培养温度为30℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养32h，至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml，然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
D、制备硝化细菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的硝化细菌菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为亚硝酸钠0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锰0.01g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、无水碳酸钠1.0g/L、氯化钙0.5g/L、磷酸二氢钠0.3g/L，在培养温度为28℃,摇瓶转速100rpm培养6天；
将活化培养好的硝化细菌菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为亚硝酸钠0.5g/L、硫酸镁0.05g/L、氯化锰0.01g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、无水碳酸钠1.0g/L、氯化钙0.05g/L、硫酸铵5g/L、硫酸亚铁0.001g/L、磷酸二氢钠0.3g/L，在培养温度为28℃,发酵罐搅拌转速120rpm培养6天，至发酵罐中硝化细菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的硝化细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
E、制备植物乳杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的植物乳杆菌菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为MRS培养基，在培养温度为6℃,静置培养26h；
将活化培养好的植物乳杆菌菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖20g/L、蛋白胨15g/L、酵母粉5g/L、磷酸氢二钾5g/L、乙酸钠5g/L和硫酸镁0.5g/L，在培养温度为36℃,发酵罐静置培养22h，至发酵罐中植物乳杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的植物乳杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
F、制备脱氮硫杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的脱氮硫杆菌菌种接种至装有体积比为20％活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为硝酸钠5g/L、乙酸钠15g/L、硫酸镁0.3g/L、硫代硫酸钠15g/L、磷酸二氢钾3g/L、硫酸铵0.3g/L，在培养温度为28℃,静置培养5天；
将活化培养好的脱氮硫杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为硝酸钠5g/L、乙酸钠15g/L、硫酸镁0.3g/L、硫代硫酸钠15g/L、磷酸二氢钾2.5g/L、硫酸铵0.3g/L、氯化锰0.02g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、氯化钙0.1g/L、硫酸亚铁0.001g/L，在培养温度为28℃,发酵罐静置培养8天，至发酵罐中脱氮硫杆菌含量≥108个/ml，然后将发酵得到的脱氮硫杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
G、制备链霉菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的链霉菌菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为察氏培养基，在培养温度为30℃,摇瓶转速160rpm培养38h；
将活化培养好的链霉菌菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖20g/L、玉米浆2g/L、豆饼粉15g/L、磷酸氢二钾10g/L、硫酸镁0.3g/L，在培养温度为30℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养38h，至发酵罐中链霉菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的链霉菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
H、制备绿色木霉的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为20％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养温度为30℃、摇瓶转速160rpm，活化培养38h；
将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为60％发酵培养基的发酵罐内，接种量为体积比2％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10g/L、玉米芯5g/L、氯化钙0.4g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾20g/L、酵母膏10g/L、硫酸亚铁5mg/L、硫酸锌1.5mg/L、氯化钴3.8mg/L和硫酸锰1.5mg/L，在培养温度为30℃,发酵罐搅拌转速160rpm，扩大培养72h，至发酵罐中绿色木霉含量≥108个/ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
分别将以上制备得到的各菌种的休眠体微生物干粉，按照枯草芽孢杆菌16份，地衣芽孢杆菌18份，酿酒酵母18份，硝化细菌12份，植物乳杆菌10份，脱氮硫杆菌16份，链霉菌18份和绿色木霉18份的重量比，混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。
实施例7
A、制备枯草芽孢杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为18％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖20g/L、蛋白胨16g/L、氯化钠6g/L和牛肉膏0.6g/L，在培养温度为40℃,摇瓶转速200rpm培养24h；
将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为玉米粉12g/L、葡萄糖4g/L、豆饼粉22g/L、鱼粉4g/L、碳酸钙7g/L、硫酸铵0.9g/L、磷酸氢二钾0.2g/L、硫酸镁0.2g/L和硫酸锰0.2g/L，在培养温度为40℃,发酵罐搅拌转速200rpm培养30h，至发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的枯草芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
B、制备地衣芽孢杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的地衣芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为18％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨9g/L、牛肉膏4g/L和氯化钠4g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速220rpm培养24h；
将活化培养好的地衣芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为豆饼粉14g/L、玉米粉14g/L、磷酸氢二钾0.15g/L、磷酸二氢钾0.15g/L和氯化钙3g/L，在培养温度为38℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养24h，至发酵罐中地衣芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的地衣芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
C、制备酿酒酵母的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为18％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为YPD培养基，在培养温度为289℃,摇瓶转速180rpm培养28h；
将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖22g/L、玉米浆6g/L、磷酸氢二钾12g/L、硫酸铵0.8g/L和尿素8g/L，在培养温度为29℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养36h，至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml，然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
D、制备硝化细菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的硝化细菌菌种接种至装有体积比为18％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为亚硝酸钠0.8g/L、硫酸镁0.8g/L、氯化锰0.02g/L、磷酸氢二钾0.8g/L、无水碳酸钠0.9g/L、氯化钙0.1g/L、磷酸二氢钠0.2g/L，在培养温度为28℃,摇瓶转速100rpm培养6天；
将活化培养好的硝化细菌菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为亚硝酸钠0.6g/L、硫酸镁0.6g/L、氯化锰0.02g/L、磷酸氢二钾0.6g/L、无水碳酸钠1.2g/L、氯化钙0.05g/L、硫酸铵6g/L、硫酸亚铁0.001g/L、磷酸二氢钠0.2g/L，在培养温度为28℃,发酵罐搅拌转速120rpm培养6天，至发酵罐中硝化细菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的硝化细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
E、制备植物乳杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的植物乳杆菌菌种接种至装有体积比为18％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为MRS培养基，在培养温度为36℃,静置培养30h；
将活化培养好的植物乳杆菌菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖22g/L、蛋白胨12g/L、酵母粉4g/L、磷酸氢二钾4g/L、乙酸钠6g/L和硫酸镁0.6g/L，在培养温度为36℃,发酵罐静置培养28h，至发酵罐中植物乳杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的植物乳杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
F、制备脱氮硫杆菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的脱氮硫杆菌菌种接种至装有体积比为18％活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为硝酸钠6g/L、乙酸钠12g/L、硫酸镁0.2g/L、硫代硫酸钠12g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸铵0.2g/L，在培养温度为28℃,静置培养5天；
将活化培养好的脱氮硫杆菌菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为硝酸钠4g/L、乙酸钠12g/L、硫酸镁0.2g/L、硫代硫酸钠12g/L、磷酸二氢钾0.2g/L、硫酸铵0.15g/L、氯化锰0.01g/L、磷酸氢二钾0.4g/L、氯化钙0.8g/L、硫酸亚铁0.001g/L，在培养温度为28℃,发酵罐静置培养8天，至发酵罐中脱氮硫杆菌含量≥108个/ml，然后将发酵得到的脱氮硫杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
G、制备链霉菌的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的链霉菌菌种接种至装有体积比为18％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为察氏培养基，在培养温度为29℃,摇瓶转速180rpm培养36h；
将活化培养好的链霉菌菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖15g/L、玉米浆2g/L、豆饼粉12g/L、磷酸氢二钾10g/L、硫酸镁0.2g/L，在培养温度为29℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养36h，至发酵罐中链霉菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的链霉菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
H、制备绿色木霉的休眠体微生物干粉：
将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养温度为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；
将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为55％发酵培养基的发酵罐内，接种量为体积比1.5％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10g/L、玉米芯6g/L、氯化钙0.3g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾18g/L、酵母膏9g/L、硫酸亚铁6mg/L、硫酸锌1.2mg/L、氯化钴3.6mg/L和硫酸锰1.6mg/L，在培养温度为29℃,发酵罐搅拌转速180rpm，扩大培养72h，至发酵罐中绿色木霉含量≥108个/ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
分别将以上制备得到的各菌种的休眠体微生物干粉，按照枯草芽孢杆菌18份，地衣芽孢杆菌18份，酿酒酵母18份，硝化细菌12份，植物乳杆菌12份，脱氮硫杆菌16份，链霉菌19份和绿色木霉20份的重量比，混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。
对比实验例1
采用实施例6制备得到的复合菌在垃圾场做减量、除臭实验。
首先选用四条垃圾道(130吨/天左右垃圾量)做实验，分成两组：实验组和空白对照组两组，每组两条垃圾道。
实验组连续8天，在每条垃圾传送口以喷洒方式(尽量均匀)投放用水稀释后的复合菌。空白对照组不添加复合菌。堆肥生产完全按照垃圾场常规工艺进行。经过一个周期(8天)的实验，实验组的垃圾在1-2天后，温度迅速升至40-50℃(环境温度为6-8℃)，发酵很快，在开始20小时之后，渗滤液开始渗出，垃圾臭味直线下降至微臭。垃圾堆高从发酵前的1.4米左右降至60厘米左右，沉降率约57％；
空白对照组的垃圾要在3-4天后开始升温，温度为28-32度左右，臭味大，发酵不彻底，堆高从发酵前的1.4米左右降至1.2米左右，沉降率约14％。
两组的实验结果见表1。其中臭气浓度采用三点比较式臭袋法(GB/T14675)测定，氨采用次氯酸钠-水杨酸分光光度法(GB/T14679)测定，硫化氢采用亚甲蓝分光光度法(GB/T11742)测定，采样时将橡胶管埋入垃圾堆体中。
表1
Claims (10)
1.一种有机垃圾除臭、减量复合菌，其特征在于由以下重量份数的原料混合制备而成：
枯草芽孢杆菌 10～20份，
地衣芽孢杆菌 10～25份，
酿酒酵母 10～25份，
硝化细菌 5～15份，
植物乳杆菌 8～20份，
脱氮硫杆菌 10～20份，
链霉菌 15～30份，
绿色木霉 10～25份。
2.一种有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
分别将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、硝化细菌、植物乳杆菌、脱氮硫杆菌、链霉菌和绿色木霉的菌种进行高密度培养，首先接种至装有体积比为15～30%的培养基的摇瓶中活化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后按照枯草芽孢杆菌10～20份，地衣芽孢杆菌10～25份，酿酒酵母10～25份，硝化细菌5～15份，植物乳杆菌8～20份，脱氮硫杆菌10～20份，链霉菌15～30份和绿色木霉10～25份的重量比，混合得到所述有机垃圾除臭、减量复合菌。
3.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述枯草芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖18～22g/ L、蛋白胨12～18g/L、氯化钠3～7g/L和牛肉膏0.2～0.8g/L，在培养温度为36～40℃,摇瓶转速180～220rpm培养20～32h；
将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为玉米粉10～15g/L、葡萄糖3～8g/L、豆饼粉18～22g/L、鱼粉3～8g/L、碳酸钙5～9g/L、硫酸铵0.8～1.2g/L、磷酸氢二钾0.1～0.5g/L、硫酸镁0.1～0.3g/L和硫酸锰0.1～0.3g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养20～32h，至发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的枯草芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
4.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述地衣芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的地衣芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨8～12g/L、牛肉膏1～5g/L和氯化钠3～7g/L，在培养温度为36～40℃,摇瓶转速180～220rpm培养20～32h；
将活化培养好的地衣芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为豆饼粉13～17g/L、玉米粉13～17g/L、磷酸氢二钾0.05～0.15g/L、磷酸二氢钾0.05～0.15g/L和氯化钙2～6g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养20～32h，至发酵罐中地衣芽孢杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的地衣芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。
5.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述酿酒酵母的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的酿酒酵母菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为YPD培养基，在培养温度为28～32℃,摇瓶转速140～180rpm培养20～30h；
将活化培养好的酿酒酵母菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为葡萄糖15～30g/L、玉米浆3～10g/L、磷酸氢二钾2～15g/L、硫酸铵0.5～5g/L和尿素1～10g/L，在培养温度为28～32℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养28～40h，至发酵罐中酿酒酵母含量≥109个/ml，然后将发酵得到的酿酒酵母单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
6.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述硝化细菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的硝化细菌菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为亚硝酸钠0.1～1g/L、硫酸镁0.01～0.1g/L、氯化锰0.005～0.02g/L、磷酸氢二钾0.1～1g/L、无水碳酸钠0.5～1.5g/L、氯化钙0.01～0.1g/L、磷酸二氢钠0.1～0.5g/L，在培养温度为26～30℃,摇瓶转速80～120rpm培养4～7天；
将活化培养好的硝化细菌菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为亚硝酸钠0.1～1g/L、硫酸镁0.01～0.1g/L、氯化锰0.005～0.02g/L、磷酸氢二钾0.1～1g/L、无水碳酸钠0.5～1.5g/L、氯化钙0.01～0.1g/L、硫酸铵1～10g/L、硫酸亚铁0.0001～0.001g/L、磷酸二氢钠0.1～0.5g/L，在培养温度为26～30℃,发酵罐搅拌转速90～150rpm培养5～8天，至发酵罐中硝化细菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的硝化细菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
7.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述植物乳杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的植物乳杆菌菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为MRS培养基，在培养温度为35～38℃,静置培养20～30h；
将活化培养好的植物乳杆菌菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为葡萄糖15～30g/L、蛋白胨5～20g/L、酵母粉1～10g/L、磷酸氢二钾1～10g/L、乙酸钠1～10g/L和硫酸镁0.01～0.1g/L，在培养温度为35～38℃,发酵罐静置培养18～28h，至发酵罐中植物乳杆菌含量≥109个/ml，然后将发酵得到的植物乳杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
8.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述脱氮硫杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的脱氮硫杆菌菌种接种至装有体积比为15～30%活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为硝酸钠1～10g/L、乙酸钠5～20g/L、硫酸镁0.05～0.5g/L、硫代硫酸钠5～20g/L、磷酸二氢钾0.5～5g/L、硫酸铵0.05～0.5g/L，在培养温度为26～30℃,静置培养3～7天；
将活化培养好的脱氮硫杆菌菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为硝酸钠1～10g/L、乙酸钠5～20g/L、硫酸镁0.05～0.5g/L、硫代硫酸钠5～20g/L、磷酸二氢钾0.5～5g/L、硫酸铵0.05～0.5g/L、氯化锰0.005～0.02g/L、磷酸氢二钾0.1～1g/L、氯化钙0.01～0.1g/L、硫酸亚铁0.0001～0.001g/L，在培养温度为26～30℃,发酵罐静置培养5～10天，至发酵罐中脱氮硫杆菌含量≥108个/ml，然后将发酵得到的脱氮硫杆菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
9.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述链霉菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的链霉菌菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为察氏培养基，在培养温度为28～32℃,摇瓶转速140～180rpm培养30～45h；
将活化培养好的链霉菌菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3%，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10～30g/L、玉米浆0.5～5g/L、豆饼粉5～25g/L、磷酸氢二钾2～15g/L、硫酸镁0.05～0.5g/L，在培养温度为28～32℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养32～40h，至发酵罐中链霉菌含量≥107个/ml，然后将发酵得到的链霉菌单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
10.如权利要求2所述的有机垃圾除臭、减量复合菌的制备方法，其特征在于所述绿色木霉的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：
将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为15～30%的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养温度为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；
将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为50～70%发酵培养基的发酵罐内，接种量为体积比1～3%，所述发酵培养基的配方为葡萄糖8～12g/L、玉米芯5～6g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、硫酸镁0.1～0.5g/L、磷酸二氢钾18～22g/L、酵母膏8～12g/L、硫酸亚铁3～7mg/L、硫酸锌1.0～1.8mg/L、氯化钴3.5～4.0mg/L和硫酸锰1.2～1.8mg/ L，在培养温度为28～30℃,发酵罐搅拌转速140～180rpm，扩大培养68～84h，至发酵罐中绿色木霉含量≥108个/ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。
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