CN104352624B - 蒙药芯芭正丁醇提取物在制备防治糖尿病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种蒙药芯芭正丁醇提取物在制备预防、治疗糖尿病药物中的应用,属于医药领域。本发明同时也公开了蒙药芯芭正丁醇提取物在制备预防、治疗糖尿病药物中的应用、芯芭正丁醇提取物制备方法及芯芭正丁醇提取物中所含有的各种活性成分可接受的载体、赋形剂或稀释剂组成的药物组合物。药理实验研究证明:剂量为250mg/kg的芯芭正丁醇提取物具有降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖的作用,与正常对照组相比具有较强的降血糖作用,与阳性药盐酸二甲双胍组相比具有相似的降血糖药理作用。本发明的实验研究结果为芯芭蒙药材的合理应用提供了有力的实验支持。
Description
技术领域
本发明涉及蒙药芯芭的新用途,具体的说是蒙药芯芭正丁醇提取物在制备防治糖尿病药物中的应用。
背景技术
糖尿病是由于胰岛素生成减少或胰岛素利用不足造成高血糖的一种慢性内分泌代谢性疾病。持续的高血糖可导致感染、心脏病变、脑血管病变、肾功能衰竭、双目失明和下肢坏疽等并发症而成为糖尿病致死致残的主要原因。目前,治疗糖尿病的西药主要有胰岛素分泌促进剂如格列本脲,胰岛素增敏剂如罗格列酮和二甲双胍,α-葡萄糖苷酶抑制剂如阿卡波糖及二基肽酶-VI抑制剂等,但这些药物长期应用常引起不同程度的低血糖、溶血性贫血、消化道反应、肝肾损害等副作用,而且糖尿病在医疗和生活质量方面的高昂代价使得人们越来越关注糖尿病的替代治疗。多年临床研究发现很多药用植物有较好的降血糖作用,研究较多的具有降血糖活性的植物药包括:苦瓜、葫芦巴、人参、胭脂仙人掌、芦荟、越桔、奶蓟、大蒜和洋葱等。据报道,单味药降糖的有效成分主要分为生物碱、黄酮、皂苷、多糖等,而且同一味蒙中药所含的降血糖成分往往不仅仅是一种成分,事实上传统医药治疗糖尿病的优势不仅在于降血糖,更重要的是通过辨证论治的方法采用综合措施解除患者临床症状,防治多种慢性并发症,延长糖尿病患者的寿命,充分体现了蒙中药多角度、多途径、多环节降血糖作用。因此,开发疗效明确、副作用小的中蒙药和天然药物已成为国内外在防治糖尿病方面研究的热点。
蒙药芯芭为蒙医专用药,蒙药名“芯玛芭”或“阿拉坦-阿给”,为达乌里芯芭(Cymbaria dahuricaL.,俗名大黄花、白蒿茶)或蒙古芯芭(Cymbaria mongolica Maxim.,俗名光药大黄花)的干燥全草。达乌里芯芭分布于我国黑龙江(龙江、安达),内蒙古(满洲里、海拉尔、官村、九峰山、东科后旗、包头),河北(小五台山、北京)等省区,蒙古芯芭分布于内蒙古(九峰山),河北(小五台山),山西(蒲州、中阳、离山、太原、兴县),陕西(武功、蒲城、潼关、吴堡、绥德、黄龙山),甘肃(兰州),青海(亨堂、西宁)等省的干燥山坡地带。两者资源均非常丰富。蒙药芯芭已有几百年的应用历史,其味微苦,性凉,具有祛风去湿、利尿、止血的功效,用于黄水疮、胎毒症、皮肤瘙痒、阴囊瘙痒、阴道瘙痒症、肿块、“奇哈”、外伤出血等症治疗。在四味芯芭散、八味芯芭散等经典蒙药处方中做主药或配方使用,在民间也有单独煎汤或炒碳外用治疗黄水疮、皮肤瘙痒等,还可与黄柏合用水煎服治疗鼻衄等。蒙药芯芭主要含有黄酮、环烯醚萜、碳水化合物、桂皮酸衍生物等化合物。据文献报道,将芯芭黄酮类提取物进行了兔血压和离体肠管实验,结果显示芯芭黄酮类成分能显著提高兔血压,且持续时间较长,提高后血压较平稳;芯芭提取物还对大白鼠离体回肠有较明显的增强自发性收缩作用;另外,芯芭具有较强的抗氧化作用。在国家中医药管理局主持的“全国第四次中药资源普查”项目实施过程中,走访调查发现,内蒙古西部民间有利用芯芭治疗糖尿病患者尿频、尿急的案例,历史悠久且疗效确切。因此,有必要对芯芭这一民间传统疗效进一步探讨研究,旨在开发疗效确切、副作用小的新型治疗糖尿病药物。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蒙药芯芭正丁醇提取物在制备预防、治疗糖尿病药物中的应用。
技术解决方案
本发明一公开了蒙药芯芭正丁醇提取物在制备预防、治疗糖尿病药物中的应用。
本发明二公开了蒙药芯芭正丁醇提取物的制备方法。
本发明三公开了含有治疗有效量的芯芭正丁醇提取物和药学上可接受的药用载体组成的口服制剂或胃肠外给药制剂。
为实现上述目的,本发明公开了如下的技术内容:
蒙药芯芭正丁醇提取物在制备预防、治疗糖尿病药物中的应用。所述的预防、治疗糖尿病指的是降低患有糖尿病的高血糖水平,且其降糖水平接近于盐酸二甲双胍降血糖水平,减少并发症的发生。
本发明进一步公开了芯芭提取物的制备方法为:
(1)取芯芭(蒙古芯芭或达乌里芯芭)干燥全草,粉碎,过20目筛,所得粗粉用10倍量、8倍量和6倍量的70%乙醇热回流提取3次,每次2h,合并滤液,减压回收溶剂至干,残渣即为芯芭乙醇提取浸膏。
(2)将上述所得乙醇浸膏用3~5倍体积的蒸馏水溶解,所得水溶液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。每种萃取溶剂萃取次数为3~5次,萃取至萃取液颜色无明显变化为止,每次萃取剂用量与乙醇浸膏水溶液等体积。将所得的各萃取液减压回收溶剂至干,并分别加入等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,每种萃取液萃取至无明显变化为止,得到即为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三部分的萃取浸膏。
本发明的方法是用70%乙醇为溶剂,采用回流方法对芯芭进行提取,得到芯芭乙醇提取浸膏加蒸馏水溶解,按一定的比例加入石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取浸膏。用此方法制备芯芭正丁醇提取液具有以下的优点:
(1)工艺操作简单、方便。
(2)获得大量的芯芭正丁醇提取物。
本发明所述的药物为含有治疗有效量的芯芭正丁醇提取物和药学上可接受的药用载体组成的口服制剂或胃肠外给药制剂。所述药物为含有30~90mg(一般以成人体重为60公斤计算,相当于0.5mg/kg~1.5mg/kg)的芯芭正丁醇提取物。
本发明所述的芯芭正丁醇提取物通常是以药物组合物的形式服用,可口服或非口服给药,或者以和药学上可接受的载体、赋形剂及其他添加剂形成的化合物(如片剂、缓释制剂、胶囊剂、注射剂、溶液剂)安全地口服或非口服给药。当口服给药时,组合物可配成片剂、糖衣剂或胶囊。为制备口服药物组合物可采用乳糖或淀粉做载体,明胶、羟甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等是合适的结合剂或成颗剂。作为崩解剂可选用淀粉或微晶纤维素,常以滑石粉、胶体硅胶、硬脂酸甘油酯、硬脂酸钙或镁等作为合适的抗粘合剂和润滑剂。例如,可通过压制湿颗粒来制备片剂。活性成分与载体以及选择性地与一份崩解添加剂组成混合物,该混合物与粘合剂的含水溶液、醇性或含水醇性溶液在合适的设备中进行颗粒化,干燥颗粒随后加入其它的崩解剂、润滑剂和抗粘剂将此混合物压片。本发明的系列化合物可以注射剂形式给药,虽然剂量依治疗对象、给药方式、症状及其他因素而改变。当非肠道给药时,本发明的组合物被制成注射制剂。
本发明的芯芭正丁醇提取物在较宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用的剂量可在每公斤体重大约0.5mg~1.5mg的范围内。在成人治疗中,剂量范围最好是在0.5mg/kg~1.3mg/kg,一次或几次服用。实际服用的化合物剂量应该由医生根据有关的情况来决定,这些情况包括被治疗者的身体状态、选择的给药途径、年龄、体重、患者对药物的个体反应、患者症状严重程度等,因此上述剂量范围并不是以任何方式限制本发明范围。
药理实验研究证明:剂量为250mg/kg的芯芭正丁醇提取物具有降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖的作用,与正常对照组相比具有较强的降血糖作用,与阳性药盐酸二甲双胍组相比具有相似的降血糖药理作用。本发明的实验研究结果为芯芭蒙药材的合理应用提供了有力的实验支持。
附图说明
图1为本发明蒙药芯芭萃取流程图;
图2为本发明芯芭正丁醇提取物降血糖实验流程图。
具体实施方式
下面结合实施例说明本发明,这里所述的实施例方案,不限制本发明,本领域的专业人员按照本发明的精神可以对其改进和变化,所述的这些改进和变化都应视为在本发明的范围内,本发明的范围和实质由权利要求来限定。所用的芯芭正丁醇提取物可采用本发明的方法提取制备也可以购买。
实施例1
蒙药芯芭正丁醇提取物药理作用的实验研究。
1.材料与方法
1.1动物 健康小鼠,雌性,体重为(35±3)g,由内蒙古大学实验动物中心提供。
1.2试剂与仪器 蒙药芯芭正丁醇提取物由本实验室自制。盐酸二甲双胍购于白云山汤明乐泰药业有限责任公司,批号:131101;四氧嘧啶购于Sigma公司;生理盐水购于山东齐都药业有限公司,批号:3B13112703。血糖测试仪及血糖试纸购于三诺生物传感股份有限公司。
1.3方法
1.3.1四氧嘧啶性糖尿病小鼠模型的制备
将70只健康小鼠经适应性喂养1周,禁食(不禁水)12h后,尾静脉快速注射新鲜配制的2%四氧嘧啶生理盐水溶液,剂量为70mg/kg;如尾静脉注射不成功,腹腔注射新鲜配制的1%四氧嘧啶生理盐水溶液,剂量为180mg/kg。上述小鼠经过60h自由饮食后,再经12h禁食(不禁水)后,从尾静脉取血用血糖仪测定血糖值,选取血糖值≥11.1mmol/L小鼠作为造模成功的糖尿病模型。另取8只小鼠作为正常对照组动物。
1.3.2动物分组与给药方法
将45只造模成功的糖尿病小鼠随机分为5组,每组9只,分别为模型组、阳性药对照组(盐酸二甲双胍),正丁醇低剂量组、正丁醇中剂量组和正丁醇高剂量组。分组后第一天,将芯芭正丁醇不同浓度提取物给正丁醇低剂量组、中剂量组和高剂量组小鼠灌胃,剂量分别是63mg/kg、125mg/kg和250mg/kg;将盐酸二甲双胍溶液给阳性药对照组小鼠灌胃,剂量为270mg/kg;而正常对照组和模型组小鼠灌胃相应体积的生理盐水;各组灌胃均是1次/d,连续3周。在整个实验期间观察小鼠的活动情况及死亡情况,并监测小鼠体重、摄食量和饮水量。结束时,禁食(不禁水)12h后,将小鼠眼球摘除取血,测定血糖并分离血清,最后处死小鼠。
1.4资料处理
实验结果的所有指标均以±s的形式表示,采用spss17.0统计软件对数据进行独立样本t检验,当P<0.05时,其差异有统计学意义。
2.结果
实验期间,正常对照组小鼠皮毛整齐、有光泽,反应灵敏,活动正常,摄食和饮水正常,无死亡情况发生,而经造模的小鼠明显精神萎靡,毛色发黄,无光泽,活动迟缓,摄食量和饮水量增加,尿量明显增加,而且出现烂尾、死亡情况,但芯芭正丁醇提取物高剂量组小鼠的摄食量与饮水量有所减少,尿量也减少,精神状态尚可。
不同剂量芯芭正丁醇提取液给予四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃3周后,实验结果发现,芯芭正丁醇高剂量组小鼠的血糖水平明显下降,与正常对照组相比较,其差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比较,其差异具有统计学意义(P<0.001)。通过本实验发现,剂量为250mg/kg的芯芭正丁醇提取物能够降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平,且其降糖水平接近盐酸二甲双胍降糖水平。因此得出实验结论:剂量为250mg/kg的芯芭正丁醇提取物具有降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖水平的作用,且其降糖水平接近盐酸二甲双胍的降糖水平。实验结果详见表1。
表1 蒙药芯芭提取物对四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖水平的影响(±s)
注:与正常对照组比较,△△ P<0.01,△△△ P<0.001;与模型组比较﹡ P<0.05,﹡﹡ P<0.01,﹡﹡﹡ P<0.001
四氧嘧啶制备糖尿病模型的机制:四氧嘧啶是自由基活性剂,其所产生的H2O2等负离子自由基能选择性地直接损伤胰腺B细胞的DNA,引起胰腺B细胞的死亡,胰岛素合成受阻,从而引起高血糖,导致动物实验性糖尿病。
实验结果表明,剂量为250mg/kg的芯芭正丁醇提取物能够降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平,且其降糖水平接近盐酸二甲双胍的降糖水平。据文献报道,蒙药芯芭目前已知含有的活性成分有黄酮类、环烯醚萜类、碳水化合物、桂皮酸衍生物等,且很多文献报道其他蒙、中药物中含有的黄酮类、环烯醚萜类化合物均有降血糖作用。蒙药芯芭正丁醇提取物的降糖作用可能是芯芭中含有的黄酮类或环烯醚萜类或二者兼而有之的活性成分和/或其他成分共同发挥作用的结果,发挥降糖作用的具体成分还有待于进一步研究。芯芭正丁醇提取物可能通过增加胰岛素分泌、胰岛素受体、胰岛素敏感性、葡萄糖转运子、糖的无氧酵解、不依赖胰岛素代谢等途径中的一种或几种达到降糖作用,或者/和通过减少对抗激素如胰高血糖素、生长激素等作用来改善多饮、多尿、多食等症状,纠正体内糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱,从而达到降糖目的。通过本实验,芯芭正丁醇提取物降低四氧嘧啶性糖尿病血糖的作用为芯芭的药理学作用提供实验依据,也为我国民族医药的发展和市场开发提供一定的实验基础。
实施例2
蒙药芯芭提取物的制备方法。
1.材料与方法
1.1材料 蒙药芯芭(蒙古芯芭或达乌里芯芭)采自内蒙古自治区包头市周边,样品经包头医学院药用植物教研室王振旺老师鉴定为玄参科植物蒙古芯芭;所用试剂(乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)均为分析纯。
1.2芯芭正丁醇提取物的制备过程:
(1)取芯芭干燥全草2kg,粉碎,并过20目筛,所得粗粉用10倍量、8倍量和6倍量的70%乙醇热回流提取3次,每次2h,合并滤液,减压回收溶剂至干,残渣即为芯芭乙醇提取浸膏,约为470g。
(2)将上述所得乙醇浸膏用3~5倍体积的蒸馏水溶解,所得水溶液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。每种萃取溶剂萃取次数为3~5次,萃取至萃取液颜色无明显变化为止,每次萃取剂用量与乙醇浸膏水溶液等体积。将所得到的各萃取液减压回收溶剂至干,并分别加入等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,每种萃取液萃取至无明显变化为止,得到即为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三部分的萃取浸膏40g、80g、150g。
实施例3
每片含10mg活性成分的片剂制备如下:
将芯芭正丁醇浸膏、淀粉和纤维素过筛,并充分混合,将聚乙烯吡咯烷酮溶液与上述的粉混合,过筛,制得湿颗粒于50℃干燥,将羟甲基淀粉钠盐、硬脂酸镁和滑石粉预先过筛,然后加入到上述的颗粒中压片。
实施例4
注射剂的制备如下:
使pH值为7.0~7.5过滤滤液浓度为6mg/ml,按每安瓶2毫升分装,冷冻干燥后即得注射剂。
实施例5
每囊含40mg芯芭正丁醇提取物胶囊的制备如下:
实施例6
取芯芭正丁醇浸膏2g,加入到已溶解4g三羟甲基氨基甲烷的注射用水440ml中,加入0.8gEDTA-2Na搅拌溶解,加入碳酸氢钠调节PH为7.5~9.0,补加水至500ml,加入2g活性炭,室温搅拌吸附30分钟,除炭,精滤,以每支2ml灌封、灭菌,即得芯芭正丁醇提取物注射液。
Claims (5)
1.蒙药芯芭正丁醇提取物在制备防治糖尿病药物中的应用,所述的蒙药芯芭正丁醇极性部位含量占芯芭干燥全草的6~8%,所述蒙药芯芭正丁醇极性部位制备方法如下:
(1)取芯芭干燥全草,粉碎,过20目筛;将芯芭药材粗粉用10倍量、8倍量、6倍量的70%乙醇热回流方法提取3次,合并滤液,减压回收溶剂至干,即得芯芭70%乙醇提取浸膏;
(2)将上述所得浸膏用3~5倍体积的蒸馏水溶解,所得水溶液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,每种萃取溶剂萃取次数为3~5次,萃取至萃取液颜色无明显变化为止,每次萃取剂用量与乙醇浸膏水溶液等体积,将所得到的各萃取液减压回收溶剂至干,即为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇部位浸膏。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的防治糖尿病的药物指的是具有降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖水平,且其降糖水平与二甲双胍降糖水平相似的药物。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的药物为含有蒙药芯芭正丁醇提取物以及药学上可接受的组分和/或载体。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的药物为含有蒙药芯芭正丁醇提取物以及药学上可接受的载体组成口服制剂或胃肠外给药制剂。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述的药物为含有30~90mg蒙药芯芭正丁醇提取物和药学上可接受的组分和/或载体。
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