CN104297396B

CN104297396B - 一种黔曲hplc指纹图谱建立方法

Info

Publication number: CN104297396B
Application number: CN201310295223.0A
Authority: CN
Inventors: 康兴东; 杨伟庆; 吴永忠; 习锦山; 刘立鼎
Original assignee: JIANGXI POZIN PHARMACEUTICAL Co Ltd
Current assignee: Jiangxi Puzheng Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2013-07-15
Filing date: 2013-07-15
Publication date: 2016-02-24
Anticipated expiration: 2033-07-15
Also published as: CN104297396A

Abstract

一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，涉及中药制剂质量控制领域。称取黔曲粉末0.5-1.5g，置平底烧瓶中，加入甲醇约30-80ml，回流提取1-4小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过；照高效液相色谱法建立指纹图谱。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明采用高效液相建立标准指纹图谱，通过多指标成分控制产品质量，能更有效的保证产品质量的长期稳定性，进而保障疗效的安全性和有效性，更有利于监控产品的质量。具有快捷、稳定、精密度高、重现性强及适用范围广等优点，有利于全方位的控制黔曲的质量稳定性。

Description

一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法

技术领域

本发明涉及中药制剂质量控制领域，具体属于一种高效液相色谱法对黔曲指纹图谱的建立方法。

背景技术

黔曲收载于卫生部颁标准《中药成方制剂》第二册，由广藿香、莱菔子、青皮、牵牛子、茯苓、枳实（炒）、甘草、香附（醋炒）、紫苏、山楂（炒）、陈皮等共二十四味药材发酵制成的制剂。黔曲具有健脾开胃，理气导滞，清暑化湿的功效，用于食积饱胀，胸闷腹痛，不思饮食，暑湿感冒。随着现代药的高速发展，尤其是在中药的有效成分绝大多数没有明确的现阶段，现行的黔曲的质量控制标准已不能真实反映黔曲的内在品质及批与批之间产品质量的一致性。

发明内容

本发明的目的是针对上面所述的缺陷，提供一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，该方法用高效液相色谱法对黔曲的多种指标成分进行检测，获得指纹图谱，用于评价和控制黔曲的质量，确保黔曲的安全性和有效性。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的。

一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，称取黔曲粉末0.5-1.5g，置平底烧瓶中，加入甲醇约30-80ml，回流提取1-4小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过；照高效液相色谱法建立指纹图谱；

所述高效液相色谱法的色谱条件为：ODSC₁₈（4.6mm×250mm，5μm）；流动相A为乙腈；流动相B为0.05%-0.2%的磷酸水溶液；检测波长240-280nm；柱温：20-30℃；流速：0.7-0.9ml/min；洗脱程序为梯度洗脱程序。

最佳的，一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：

(a)供试品溶液制备：称取黔曲粉末1g，置平底烧瓶中，加入50ml甲醇回流提取2小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

(b)色谱条件：依利特ODSC₁₈（4.6mm×250mm，5μm）；流动相A为乙腈；流动相B为0.1%的磷酸水溶液；检测波长272nm；柱温：25℃；流速：0.8ml/min；洗脱程序为梯度洗脱程序；

(c)测定：吸取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到黔曲的指纹图谱。

所述微孔滤膜是用0.45μm的微孔滤膜。

所述梯度洗脱程序的体积比浓度为：

洗脱时间流动相A的比例流动相B的比例

0min5%95%

5min5%95%

12min12%88%

52min50%50%

60min70%30%

70min100%0%

75min100%0%

所述黔曲指纹图谱中有10个特征共有峰，图谱总长度为75min。

使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2004版对所述指纹图谱进行相似度评价，其相似度应大于0.950。

指纹图谱相似度计算参数设置为：时间宽度为0.5秒；校正方式采用多点校正，校正色谱峰的匹配点为共有峰。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

a.将前述方法建立的黔曲指纹图谱与相应的对照谱进行相似度评价，其相似度大于0.900，能有效的表征产品质量，更有利于监控产品的质量。

b.本发明采用高效液相建立标准指纹图谱，通过多指标成分控制产品质量，能更有效的保证产品质量的长期稳定性，进而保障疗效的安全性和有效性。

c.本发明具有快捷、稳定、精密度高、重现性强及适用范围广等优点，有利于全方位的控制黔曲的质量稳定性。

附图说明

图1为12批黔曲指纹图谱叠加图。

图2为黔曲对照指纹图谱图。

具体实施方式

实施例1。

仪器：LC-10ATvp系列高效液相色谱仪。

试药：黔曲由江西普正制药有限公司提供；流动相乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

供试品溶液制备：称取黔曲粉末1g，置平底烧瓶中，加入50ml甲醇回流提取2小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。

色谱条件：依利特ODSC₁₈（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：流动相A为乙腈；流动相B为0.1%的磷酸水溶液；检测波长272nm；柱温：25℃；流速：0.8ml/min。洗脱程序为梯度洗脱程序。

梯度洗脱程序的体积比浓度为：

时间（min）	乙腈（%）	0.1%磷酸（%）
			0	5	95
5	5	95
			12	12	88
52	50	50
			60	70	30
70	100	0
			75	100	0

测定：吸取供试品溶液10μm注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到黔曲的指纹图谱。

实施例2。

采用实施例1的方法测定12个不同批次黔曲供试品溶液进行测定（批号：20090601、20090602、20090701、20090801、20090901、20091001、20091101、20091102、20091201、20091202、20100101、20100201）。

使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2004版对12批次的黔曲进行相似度评价，得到12批次的黔曲相似度计算结果与黔曲对照指纹图谱。

12批次黔曲指纹图谱相似度计算结果

批号	相似度
		20090601	0.994
20090602	0.996
		20090701	0.996
20090801	0.995
		20090901	0.995
20091001	0.996
		20091101	0.995
20091102	0.997
		20091201	0.997
20091202	0.996
		20100101	0.996
20100201	0.996

Claims

1.一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，称取黔曲粉末0.5-1.5g，置平底烧瓶中，加入甲醇30-80ml，回流提取1-4小时，滤过，临用前用微孔滤膜滤过；照高效液相色谱法建立指纹图谱；

所述高效液相色谱法的色谱条件为：ODSC₁₈，4.6mm×250mm，5μm；流动相A为乙腈；流动相B为0.05%-0.2%的磷酸水溶液；检测波长240-280nm；柱温：20-30℃；流速：0.7-0.9ml/min；洗脱程序为梯度洗脱程序；

所述梯度洗脱程序中流动相A与流动相B的体积比浓度为：0min：5%，95%；5min：5%，95%；12min：12%，88%；52min：50%，50%；60min：70%，30%；70min：100%，0%；75min：100%，0%。

2.根据权利要求1所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：

(b)色谱条件：依利特ODSC₁₈，4.6mm×250mm，5μm；流动相A为乙腈；流动相B为0.1%的磷酸水溶液；检测波长272nm；柱温：25℃；流速：0.8ml/min；洗脱程序为梯度洗脱程序；

所述梯度洗脱程序中流动相A与流动相B的体积比浓度为：0min：5%，95%；5min：5%，95%；12min：12%，88%；52min：50%，50%；60min：70%，30%；70min：100%，0%；75min：100%，0%；

3.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述微孔滤膜是用0.45μm的微孔滤膜。

4.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述黔曲指纹图谱中有10个特征共有峰，图谱总长度为75min。

5.根据权利要求1或2所述的一种黔曲HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2004版对所述指纹图谱进行相似度评价，其相似度应大于0.950；指纹图谱相似度计算参数设置为：时间宽度为0.5秒；校正方式采用多点校正，校正色谱峰的匹配点为共有峰。