CN104274502A - 一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法、产品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法、产品;主要方法步骤:取圆齿野鸦椿植物体、切碎、50℃烘干、粉碎;取植物体粉未,经蒸馏水冷凝回流提取3次,每次3小时,过滤合并得滤液,用正丁醇萃取滤液,萃取3次,合并正丁醇萃取液,旋转蒸发浓缩,得浸膏S即为本发明所提供的产品。该提取分离方法简单,资源丰富,提取物在抗炎和抑制毛细血管渗透性方面作用显著,显著高于地塞米松注射液。
Description
技术领域
本发明专利属于植物活性物质的提取方法、产品及应用领域,特别涉及一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法、产品。
背景技术
野鸦椿系省沽油科野鸦椿属(Euscaphis)植物,作为我国民间一种传统的中草药,已经有良好的药用基础及悠久的历史,主要治疗胃痛、跌打损伤、风湿疼痛、眩晕、泻疾、痢疾。2009年8期《时珍国医国药》发表了李先辉等《野鸦椿提取物抗炎镇痛效应的研究》、2013年15期《当代医学》发表了刘迪栋等《野鸦椿水提物对大鼠慢性肝纤维化的影响》;据相关报道,野鸦椿叶的水提物对于急性非特异性炎症具有显著抑制作用,并呈现剂量依赖效应,而对于免疫性炎症,野鸭椿枝叶水提物也具有明显的抑制作用,具有重要的实际应用意义,但没有活性物质或化合物提取的的方法报道;同时野鸦椿没有进行大规模的人工繁育与栽培,资源缺少,药用开发缺少资源支撑。
圆齿野鸦椿( Euscaphis konishii)系省沽油科野鸦椿属(Euscaphis)植物,别名鸡肫子、鸡眼睛、狗头椒;圆齿野鸦椿与野鸦椿同属,但有关圆齿野鸦椿与野鸦椿是否具有同样的药用价值较少人研究; 2002年4期《天然产物研究与开发》发表了董玫等《野鸦椿的植物化学成分研究》、2004年4期《天然产物研究与开发》发表了董玫等《野鸦椿酯类化合物抗炎症活性与结构的研究》报道了其枝叶甲醇提取物分离得到6个脂类化合物的结构及作用。但还没有人对其水提物进行分离研究,水提物的活性、提取方法及应用领域也没有人进行研究,特别是水提物在抗炎作用方面,专利及文献均没有相关的报道。发明人所在的课题组已突破了人工育苗技术,并进行了大规模的人工繁育栽培,为其药用价值的开发奠定了坚实的物质基础。
炎症是人类常见病症之一,对人民身体健康产生巨大的影响,针对这一常见现象,研究从圆齿野鸦椿植物体内水提分离、筛选具有高效抗炎作用的化合物的方法、产品和抑制炎症的应用十分重要。
发明内容
本发明的目的是提供一种从圆齿野鸦椿植物体内水提、分离筛选具有高效抗炎作用的化合物的方法、产品和抑制炎症的应用,而且要提取物原料便宜、得率高、成本低、效果好。
本发明的目的是以如下方式实现的:
一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法,其主要步骤
A. 取圆齿野鸦椿植物体、切碎、50℃烘干、粉碎得A粉未;
B. 取A粉未,装入蒸馏水冷凝回流提取装置,加入等体积的蒸馏水,经蒸馏水冷凝回流提取3次,每次3小时,过滤,合并得B滤液;
C. 取B滤液,用3倍体积的正丁醇萃取,萃取3次,合并正丁醇萃取液,旋转蒸发浓缩,得浸膏S或进一步干制品,即为本发明所提供的一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物。
上述高效抗炎作用化合物的提取方法,其所用的圆齿野鸦椿植物体包括各种器官,是枝、叶、杆、根、花、种皮、种子的一种或多种混合。
上的述的一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法,其圆齿野鸦椿优选原料器官为种皮,高效抗炎作用化合物S得率在36-40%。
一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物,是采用上述方法所获得的浸膏S或进一步干制品。
采用上述提取分离方法简单,实用,而且原材料圆齿野鸦椿可以大量人工培育,资源丰富,提取物S在抗炎和抑制毛细血管渗透性方面作用显著,抑制率可达67.19%和65.8%,均高于目前医疗中大量使用阳性照药品地塞米松注射液(62.7%和57.1%),副作用小。特别是优选原料器官种皮,是圆齿野鸦椿生产的附产品,产量高、成本低、得率高、效果好
实施例1
取圆齿野鸦椿果皮,烘干,粉碎;经蒸馏水冷凝回流提取3次,每次3小时过滤,合并滤液,然后再用3倍正丁醇萃取,萃取3次,合并正丁醇萃取液,旋转蒸发浓缩,得水提正丁醇浸膏S,S即为本发明所提供的一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物。S得率在36-40%。
以S为药,并依照民间用药量折算,10-20g/成人,各自计算配置供试药。
采用小鼠耳肿胀法测定效应物对炎症的抑制作用;选取雄性小鼠340只,体重18-22g,随机分成34组,每组10只;每种试验药物分成大剂量和小剂量进行试验,以等体积的生理盐水作为空白对照,以地塞米松作为阳性对照药物;每天灌胃给药一次,每次0.2ml/10g,连续灌胃给药1周;末次给药30min后,用微量加样器在小鼠右耳正反两面各滴加10μl二甲苯致炎,左耳作对照为非致炎耳。给药后1个小时,将小鼠颈椎脱臼处死,沿耳廓基部剪下两耳,用直径8mm的打孔器在左右耳的同一部位打下圆形耳片,电子天平分别称重;以左耳与右耳的质量差作为耳肿胀度,同时利用公式计算肿胀抑制率:
耳肿胀度=右耳重量-左耳重量;
肿胀抑制率=(对照组肿胀度-给药组肿胀度)/对照组肿胀度×100%来计算出最终的抑制率,结果如表1。
表1 S对小鼠耳肿胀的作用
组别 | 剂量(mg/kg) | 耳肿胀度(mg) | 抑制率(%) |
空白 | 等量生理盐水 | 4.45 ±0.85 | — |
阳性 | 25 | 1.66±0.3*** | 62.7 |
S | 20 | 1.46±0.58*** | 67.19 |
注:实验组与空白组比较,*表示显著(P<0.05),**表示非常显著(P<0.01),***表示极显著(P<0.001);
阳性对照药品选择地塞米松。
毛细血管通透性实验,在滴加二甲苯后,给小鼠尾部静脉注射伊文思蓝,每只0.25ml(0.2%溶液)。再将称量后各鼠的右耳浸泡于4ml35%的丙酮水溶液中,48小时后取出浸出液,经离心后在波长590nm处比色,测量各组的OD值,并根据计算小鼠耳廓染料渗出抑制率:
小鼠耳廓染料渗出抑制率=(对照组渗出量(OD值)-试验组渗出量(OD值))/对照组渗出量(OD值)×100%来计算出最终的抑制率,结果如表2。
表2 S对小鼠毛细血管通透性的作用
组别 | 剂量(mg/kg) | OD值 | 抑制率(%) |
空白 | 等量生理盐水 | 0.345±0.074 | — |
阳性 | 25 | 0.148±0.013*** | 57.1 |
S | 20 | 0.118±0.044*** | 65.8 |
注:实验组与空白组比较,*表示显著(P<0.05),**表示非常显著(P<0.01),***表示极显著(P<0.001);
阳性对照药品选择地塞米松注射液。
实施例2
如实施例1方法,以圆齿野鸦椿的杆为材料,获得提取物S,抗炎作用效果如实施例1。
实施例3
如实施例1方法,以圆齿野鸦椿的根为材料,获得提取物S,抗炎作用效果如实施例1。
实施例4
如实施例1方法,以圆齿野鸦椿的夏初的枝叶为材料,该枝叶包括枝叶及花器,获得提取物S,抗炎作用效果如实施例1。
实施例5
如实施例1方法,以圆齿野鸦椿的种皮为材料,获得提取物S,抗炎作用效果如实施例1。
实施例6
如实施例1方法,以圆齿野鸦椿冬季的枝叶为材料,该枝叶包括枝叶及其所附着的种皮、种子,获得提取物S,抗炎作用效果如实施例1。
Claims (4)
1.一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法,其特征是:
A、取圆齿野鸦椿植物体、切碎、50℃烘干、粉碎得A粉未;
B、取A粉未,装入蒸馏水冷凝回流提取装置,加入等体积的蒸馏水,经蒸馏水冷凝回流提取3次,每次3小时,过滤,合并得B滤液;
C、取B滤液,用3倍体积的正丁醇萃取,萃取3次,合并正丁醇萃取液,旋转蒸发浓缩,得浸膏S或进一步干制品,即为本发明所提供的一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物。
2.根据权利要求1所述高效抗炎作用化合物的提取方法,其特征是所用的圆齿野鸦椿植物体包括各种器官,是枝、叶、根、花、种皮、种子的一种或多种混合。
3.根据权利要求1或2所述的一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物的提取方法,其特征是圆齿野鸦椿原料优选器官为种皮,S得率在36-40%。
4.一种圆齿野鸦椿高效抗炎作用化合物产品,其特征是采用权利要求1方法所获得的浸膏S或进一步干制品。
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