CN104258378A - 一种glp-1类似物注射用缓释植入剂及其制备 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗Ⅱ型糖尿病的GLP-1类似物利拉鲁肽的注射用缓释植入剂及其制备方法，其特征在于将利拉鲁肽载入到由一定比例组成的高分子材料载体中，压缩成一定形状的植入剂，供植入注射，从而起到长效缓释作用。该缓释植入剂由主药利拉鲁肽和缓释辅料组成。缓释辅料主要为可生物降解且具有生物相容性的高分子共聚物。该缓释植入剂缓释期长达数天或数月，明显减少用药次数，提高了一种GLP-1类似物利拉鲁肽的生物利用度，降低了药物的毒副作用，有利于临床治疗。

Description

一种GLP-1类似物注射用缓释植入剂及其制备

技术领域：

本发明涉及一种治疗Ⅱ型糖尿病的注射用缓释植入剂，具体涉及一种含GLP-1类似物利拉鲁肽注射用缓释植入剂及制备方法。

背景技术：

糖尿病是一组以胰岛素分泌缺陷和/或胰岛素作用不足所致高血糖为特征的代谢紊乱，并与长期并发症显著相关，即众多器官的损害、功能障碍和功能衰竭，特别是肾脏、眼、神经、心脏和血管等，它分为Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病。目前糖尿病是一种全球性的高发病，根据国际糖尿病联盟2013统计，全球糖尿病患病人数为3.82亿，到2035年将达到5.92亿，增长55％。随着经济的发展，人们生活习惯的改变，近10年来我国的糖尿病发病率高速增长，中国已经取代印度，成为世界上糖尿病患者最多的国家。

利拉鲁肽为人胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物，与天然GLP-1分子结构相比有一个氨基酸差异，并增加了一个16碳棕榈酰脂肪酸侧链，但与天然人GLP-1有95％同源性，保留了天然GLP-1的功效，它可以结合并激活GLP-1受体，促进促进胰腺β细胞葡萄糖浓度依赖性地分泌胰岛素，同时以葡萄糖浓度依赖的模式降低过高的胰高糖素的分泌。由诺和诺德公司研制开发的利拉鲁肽注射剂已被证实在治疗Ⅱ型糖尿病方面具有良好效果，但需每日注射给药一次，使患者顺应性较差，因此将其制备成缓释植入制剂，给药频率显著减少，患者的接受程度大大提高。另外，它还消除了普通注射剂多次给药产生的体内药物浓度峰谷现象，可获得平稳长时间的有效浓度，降低了毒副作用，并且总给药剂量减少。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种能有效延长利拉鲁肽在体内作用时间的利拉鲁肽缓释植入制剂及其制备方法，该制剂能减少注射次数和药物耐受性，提高病人的适应性，方便临床使用和患者接受。另外，它还消除了普通注射剂多次给药产生的体内药物浓度峰谷现象可获得平稳长时间的有效浓度，降低了毒副作用，并且总给药剂量减少。

针对此问题，本发明制备了一种以GLP-1类似物为主药的注射用的缓释植入剂，其特征在于将GLP-1类似物载入到由一定比例组成的高分子材料载体中，压缩成一定形状的植入剂，供植入注射；所述制剂由利拉鲁肽和缓释辅料组成，缓释辅料主要为可生物降解且具有生物相容性的高分子共聚物。

本发明制备的注射用缓释植入剂，其形状为圆柱状；可径静脉、皮下、皮内、肌肉、腔内等方式植入注射，其延长作用时间的机理包括：使吸收减慢的自联作用；与白蛋白结合；对二肽基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ)和中性内肽酶(NEP)具有更高的酶稳定性，从而具有较长的血浆半衰期。其处方中利拉鲁肽的重量百分比为5-30％，高分子共聚物缓释辅料的重量百分比为70-95％；其高分子共聚物缓释辅料选自合成聚合物为乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)、聚丙交酯乙交酯(PLCG1:1)、聚乳酸(PLA3:1)、聚己内酯(PCL)等。

另外，本发明还提供了利拉鲁肽注射用缓释植入剂的制备方法，其工艺如下：

1称取缓释辅料至容器中，加一定量的有机溶剂溶解均匀；

2加入主药利拉鲁肽，搅拌；

3真空干燥，除去溶剂；

4将干燥后的固体组合物，根据需要塑造成特定形状；

5切割后射线灭菌备用。

附图说明：

图1，图2，图3，图4分别为各实施例植入剂中利拉鲁肽的每阶段释药量-时间曲线图。

具体实施方式：

本发明包含但不局限于以下实施例。

实施例1

10％利拉鲁肽，90％PLGA。其制备工艺如下：

精密称量利拉鲁肽600mg，在具塞锥形瓶中加入适量注射用水使之溶解；精密称量PLGA 5400mg，加150ml丙酮溶解，将上述两溶液混合，室温下放置过夜。涡旋震荡使其充分混合均匀，溶液为黏稠状透明液体，真空冷冻干燥，除去溶剂。将所得干燥物置热熔挤出机中，调节熔化温度为70℃，挤压成块状物，然后切割成直径为0.2cm，长度为1.0cm的圆柱状物，用钴⁶⁰灭菌，即得载药植入剂。

由本实施例制得利拉鲁肽注射用的缓释植入剂400支，每支含主药1.5mg。通过释放度的测定，对其缓释效果及临床用药安全性进行了考察。

体外释放度的测定 按中国药典2010年版释放度测定方法进行。选用1000ml生理盐水作为释放介质，温度设在(37±0.5)℃，转速为50r/min，由于植入剂密度比生理盐水小，故选用转篮法，保证制剂完全浸入释放介质中。设计取样时间为2、4、6、8、12、24h，之后每天取样一次，10d以后，每3d取样一次，在药物外形发生明显溶胀变形后，每隔1d取样一次。每次取样5ml，同时补充同体积的生理盐水。为防止因释放介质中药物浓度较高，而影响药物的释放，前10天，每1d换释放介质，10d后，每3d换一次释放介质。释放液经0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液20μL进液相色谱仪，测定峰面积，代入标准曲线计算浓度，得出每阶段释药量。其色谱条件为：色谱柱C₁₈50×2mm，流动相0.1％三氟醋酸溶液：含1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液(50:50)，流速1.0ml/min，在240nm处检测。结果见表1-2。

在600h内，植入剂中利拉鲁肽释放完全。

表1-2  植入剂中利拉鲁肽的每阶段释药量(μg)

体外释药规律的研究 为说明此植入剂中利拉鲁肽的释放规律，分别采用各种数学方程对释放曲线进行拟合，结果见表1-3。由表1-3可看出：本制剂中利拉鲁肽在不同的时间段释放行为基本相同，较符合Higuchi方程拟合，600h后，药物的释放几乎完全。整个植入剂的释放行为均较符合Higuchi方程。

表1-3  利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放曲线的3种拟合方程

实施例2

15％利拉鲁肽，85％PLCG。其制备工艺如下：

精密称量利拉鲁肽900mg，在具塞锥形瓶中加入适量使之溶解；精密称量PLCG5100mg，加140ml丙酮溶解，将上述两溶液混合，室温下放置过夜。涡旋震荡使其充分混合均匀，溶液为黏稠状透明液体，真空冷冻干燥，除去溶剂。将所得干燥物置热熔挤出机中，调节熔化温度为70℃，挤压成块状物，然后切割成直径为0.2cm，长度为1.0cm的圆柱状物，利用电子束灭菌，即得载药植入剂。

由本实施例制得利拉鲁肽注射用的缓释植入剂600支，每支含主药1.5mg。通过释放度的测定，对其缓释效果及临床用药安全性进行了考察。

体外释放度的测定 按中国药典2010年版释放度测定方法进行。选用1000ml生理盐水作为释放介质，温度设在(37±0.5)℃，转速为50r/min，由于植入剂密度比生理盐水小，故选用转篮法，保证制剂完全浸入释放介质中。设计取样时间为2、4、6、8、12、24h，之后每天取样一次，10d以后，每3d取样一次，在药物外形发生明显溶胀变形后，每隔1d取样一次。每次取样5ml，同时补充同体积的生理盐水。利拉鲁肽溶液在10d内都保持稳定，为防止因释放介质中药物浓度较高，而影响药物的释放，前10天，每1d换释放介质，10d后，每3d换一次释放介质。释放液经0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液20μL进液相仪色谱，测定峰面积，代入标准曲线计算浓度，得出每阶段释药量。其色谱条件为：色谱柱C₁₈50×2mm，流动相0.1％三氟醋酸溶液：含1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液(50:50)，流速1.0ml/min，在240nm处检测。结果见表2-2。

在540h内，植入剂中利拉鲁肽释放完全。

表2-2  植入剂中利拉鲁肽的每阶段释药量(μg)

体外释药规律的研究为说明利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放的规律，分别采用各种数学方程对释放曲线进行拟合，结果见表2-3。由表2-3可看出：本制剂中利拉鲁肽在不同的时间段释放行为基本相同，较符合Higuchi方程拟合，540h后，药物的释放几乎完全。整个植入剂的释放行为均较符合Higuchi方程。

表2-3  利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放曲线的3种拟合方程

实施例3

20％利拉鲁肽，80％PLA。其制备工艺如下：

精密称量利拉鲁肽1200mg，在具塞锥形瓶中加入300ml丙酮使之溶解；精密称量PLA4800mg，加100ml丙酮溶解，将上述两溶液混合，室温下放置过夜。涡旋震荡使其充分混合均匀，溶液为黏稠状透明液体，真空冷冻干燥，除去溶剂。将所得干燥物置热熔挤出机中，调节熔化温度为70℃，挤压成块状物，然后切割成直径为0.2cm，长度为1.0cm的圆柱状物，用钴⁶⁰灭菌，即得载药植入剂。

由本实施例制得利拉鲁肽注射用的缓释植入剂800支，每支含主药1.5mg。通过释放度的测定，对其缓释效果及临床用药安全性进行了考察。

体外释放度的测定 按中国药典2010年版释放度测定方法进行。选用1000ml生理盐水作为释放介质，温度设在(37±0.5)℃，转速为50r/min，由于植入剂密度比生理盐水小，故选用转篮法，保证制剂完全浸入释放介质中。设计取样时间为2、4、6、8、12、24h，之后每天取样一次，10d以后，每3d取样一次，在药物外形发生明显溶胀变形后，每隔1d取样一次。每次取样5ml，同时补充同体积的生理盐水。利拉鲁肽溶液在10d内都保持稳定，为防止因释放介质中药物浓度较高，而影响药物的释放，前10天，每1d换释放介质，10d后，每3d换一次释放介质。释放液经0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液20μL进液相色谱，测定峰面积，代入标准曲线计算浓度，得出每阶段释药量。其色谱条件为：色谱柱C₁₈50×2mm，流动相0.1％三氟醋酸溶液：含1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液(50:50)，流速1.0ml/min，在240nm处检测。结果见表3-2。

在750h内，植入剂中利拉鲁肽释放完全。

表3-2  植入剂中利拉鲁肽的每阶段释药量(μg)

体外释药规律的研究 为说明利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放的规律，分别采用各种数学方程对释放曲线进行拟合，结果见表3-3。由表3-3可看出：本制剂中利拉鲁肽在不同的时间段释放行为基本相同，较符合Higuchi方程拟合，750h后，药物的释放几乎完全。整个植入剂的释放行为均较符合Higuchi方程。

表3-3  利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放曲线的3种拟合方程

实施例4

30％利拉鲁肽，70％PCL。其制备工艺如下：

精密称量利拉鲁肽1800mg，在具塞锥形瓶中加入450ml丙酮使之溶解；精密称量PCL4200mg，加50ml丙酮溶解，将上述两溶液混合，室温下放置过夜。涡旋震荡使其充分混合均匀，溶液为黏稠状透明液体，真空冷冻干燥，除去溶剂。将所得干燥物置热熔挤出机中，调节熔化温度为70℃，挤压成块状物，然后切割成直径为0.2cm，长度为1.0cm的圆柱状物，用电子束灭菌，即得载药植入剂。

由本实施例制得利拉鲁肽注射用的缓释植入剂1200支，每支含主药1.5mg。通过释放度的测定，对其缓释效果及临床用药安全性进行了考察。

体外释放度的测定 按中国药典2010年版释放度测定方法进行。选用1000ml生理盐水作为释放介质，温度设在(37±0.5)℃，转速为50r/min，由于植入剂密度比生理盐水小，故选用转篮法，保证制剂完全浸入释放介质中。设计取样时间为2、4、6、8、12、24h，之后每天取样一次，10d以后，每3d取样一次，在药物外形发生明显溶胀变形后，每隔1d取样一次。每次取样5ml，同时补充同体积的生理盐水。利拉鲁肽溶液在10d内都保持稳定，为防止因释放介质中药物浓度较高，而影响药物的释放，前10天，每1d换释放介质，10d后，每3d换一次释放介质。释放液经0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液20μL进液相色谱仪，测定峰面积，代入标准曲线计算浓度，得出每阶段释药量，结果见表4-2。

在720h内，植入剂中利拉鲁肽释放完全。

表4-2  植入剂中利拉鲁肽的每阶段释药量(μg)

体外释药规律的研究 为说明利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放的规律，分别采用各种数学方程对释放曲线进行拟合，结果见表4-3。由表4-3可看出：本制剂中利拉鲁肽在不同的时间段释放行为基本相同，较符合Higuchi方程拟合，720h后，药物的释放几乎完全。整个植入剂的释放行为均较符合Higuchi方程。

表4-3  利拉鲁肽植入剂中利拉鲁肽释放曲线的3种拟合方程

Claims (8)

1.一种GLP-1类似物的注射用缓释植入剂，其特征在于将GLP-1类似物利拉鲁肽载入到由一定比例组成的高分子材料载体中，压缩成一定形状的植入剂，供植入注射；所述制剂由主药利拉鲁肽和缓释辅料组成，缓释辅料主要为可生物降解且具有生物相容性的高分子共聚物。

2.根据权利要求1所述制剂，其处方中利拉鲁肽的重量百分比为5-30％(w/w)，高分子共聚物缓释辅料的重量百分比为70-95％。

3.根据权利要求1所述制剂，其高分子共聚物缓释辅料选自合成聚合物为乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA1:1)、聚丙交酯乙交酯(PLCG)3:1、聚乳酸(PLA)、聚己内酯(PCL)等。

4.根据权利要求2或4所述制剂，其配方组成为：5-30％利拉鲁肽，70-95％PLGA，优选10％利拉鲁肽，90％PLGA。

5.根据权利要求2或4所述制剂，其配方组成为：5-30％利拉鲁肽，70-95％PLCG，优选15％利拉鲁肽，85％PLCG。

6.根据权利要求2或4所述制剂，其配方组成为：5-30％利拉鲁肽，70-95％PLA，优选20％利拉鲁肽，80％PLA。

7.根据权利要求2或4所述制剂，其配方组成为：5-30％利拉鲁肽，70-95％PCL，优选30利拉鲁肽，70％PCL。

8.根据权利要求1所述制剂，其制备缓释植入剂的方法为溶解法，即把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后真空冷冻干燥，去除溶剂，压制成型，切割，灭菌，即得含药植入剂。