CN104248666A - 用于预防或改善胃肠道疾病的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及用于预防或治疗胃肠道疾病的包含选自柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的两种或多种草药的组合物，以及包含所述组合物的药物和功能性保健食品。本发明的组合物包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合，由此在与胃溃疡或十二指肠溃疡引起的粘膜损伤相关的胃肠道疾病的治疗中具有本领域技术人员不可预见的显著作用。由于本发明的组合物由天然材料制备从而对人体不产生任何毒性并具有很少的复发危险因此它们是期望的。因此，本发明的组合物能用作预防或治疗由酒精、压力、吸烟、药物等引起的多种胃肠道疾病的药物或功能性保健食品。
Description
发明背景
发明领域
本发明涉及用于预防或治疗胃肠道疾病的组合物。特别地，本发明涉及表现出显著改善作用的用于预防或治疗胃肠道疾病的组合物，所述组合物包含一系列传统上已知对胃肠道疾病的治疗有效的草药成分。
相关技术的描述
胃分泌强酸性液体胃酸以消化食物。在此期间，保护性粘膜表层帮助保护胃黏膜免受酸的作用。胃酸分泌过多或由多种因素引起的保护性粘膜表层的损伤产生炎症并伴随糜烂、发红、出血和水肿。当炎性损伤局限于粘膜时，将其称为胃炎，并且当损伤变得更严重以穿透粘膜下层和肌肉层时，将其称为胃溃疡。由类似因素引起的炎症和溃疡还可存在于与胃直接连接的十二指肠中，并将胃溃疡和十二指肠溃疡统称为消化性溃疡。
胃炎和胃溃疡的致病因素主要分为诸如胃酸分泌过多的侵袭性因素的异常增加和诸如黏膜抵御胃酸作用的保护性因素的大幅减少。目前，开发了侵袭性因素抑制剂和保护性因素增强剂并用于胃溃疡的临床治疗。侵袭性因素的代表为胃酸、胃蛋白酶、酒精和吸烟、压力以及非甾体抗炎药和幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)感染等。减少的保护性因素包括胃粘膜结构或形状的缺陷、粘液和碳酸氢盐分泌的减少以及减少的前列腺素生成等。
对于由这些侵袭性因素引起的胃和十二指肠的炎症和溃疡的治疗，有必要抑制胃酸的分泌、刺激粘液的分泌、促进上皮细胞的再生、抑制幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)的增殖、给予抗炎药物等。胃炎和胃溃疡的最典型的治疗包括有效的抑制胃酸分泌的抗酸药、H2-受体拮抗剂(H2-RA)和质子泵抑制剂(PPI)和胃粘膜保护剂以及这些药物与用于幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)根除的抗生素的组合给药。然而，这些胃酸分泌抑制剂具有当停止药物的给药时疾病状态复发的缺点[Drug Intell.Clin.Pharm.,21：493,1987；Gut,30：449,1989；Yale J.Biol.Med.,65：649,1992]，并有报道称当长时间给予这些药物时，它们在体内累积并且即使在停止给药后仍持续它们的功效，或导致增厚胃壁的副作用。因此，当H2抑制剂和质子泵抑制剂仅用于抑制胃酸分泌的目的时，不能避免复发，并且基于慢性疾病的发展不建议其长期使用，其被认为是与消化性溃疡的治疗有关的最常见问题。
已知胃粘膜保护剂是促进粘膜组织再生至正常状态以补偿速释质子泵抑制剂的缺点的药物(Folia Pharmacol.Japan，92：389，1988)，并为用于胃炎治疗的重要成分。然而，这些毒品的缺点在于由于这些药物的相当慢的作用时间而应在长时间内大量服用它们。
尽管存在建议用于消化性溃疡的多种类型的治疗和使用所述药物的多种治疗策略，但是这些药物对消化性溃疡的病变不提供直接的治疗作用。这些药物仅运行以通过保护它们免受酸攻击而阻止病变的恶化，并且溃疡的根除仅依赖身体的自然愈合。为克服这些限制，应考虑长期使用所述药物的结果、其急性毒性或慢性毒性以及由此引起的副作用而开发用于消化性溃疡的治疗药物。
因此，亟需开发具有较短治疗时间和较低的消化性溃疡复发发生速度的治疗药物。因此，建议用于治疗胃炎治疗的各种草药提取物。
第1996-0021054号韩国专利公开披露了包含作为活性成分的艾蒿(Artemisia Spps)提取物用于胃肠道疾病治疗的组合物。开发该组合物作为名称为的商业药物并已经在市场上销售，为用于胃炎治疗的处方药。
柴胡(Bupleuri Radix)为阿尔泰柴胡(Bupleurum falcatum)或其变体的根，其为伞形科(umbelliferae family)的多年生草本植物[韩国药典(The Korean Pharmacopoeia)第9版，2007]，并在春季和秋季收集，从地上部分和土壤中移除并在日光下干燥。它的主要药理学作用包括抗炎作用、解热作用、利尿作用、抗溃疡作用、镇静作用和抗痉挛作用以及抗病原作用。
黄连(Coptis Rhizoma)是日本黄连(Coptis japonica)或其变体的根，其为毛茛科(Ranunculaceae family)的多年生草本植物[韩国药典(TheKorean Pharmacopoeia)第9版，2007]，并在秋季收集，并从叶片、根和土壤中移除。在日光下干燥之后，移除木栓层。它的主要药理学作用包括抗炎作用、抗溃疡作用、抗癌作用、抗辐射作用、抗菌作用和抗病原作用。
甘草(Glycyrrhizae Radix)是乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)、光果甘草(Glycyrrhiza glabra)或其变体的根和匍匐枝或从中移除周皮的那些，其为豆科(Leguminosae family)的多年生草本植物[韩国药典(The Korean Pharmacopoeia)第9版，2007]。在秋季收集根并在去除根和细根的枝之后切割所述根并在日光下干燥。它的主要药理学作用包括解毒作用、抗利尿作用、镇咳作用、抗炎作用、抗过敏作用、抗胃溃疡作用和保护肝脏作用。
已知柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)均具有抗溃疡作用，但作为用于预防或治疗胃肠道疾病的药物不具有足够的治疗作用。因此，亟需开发用于预防或治疗胃肠道疾病的更大程度改进的组合物。
因此，本发明者意识到应当开发用于由胃或十二指肠的粘膜损伤引起的胃肠道疾病的预防或治疗的组合物，并进行了许多努力以开发具有更优异功效的用于胃肠道疾病的预防或治疗的组合物，并发现与其单独使用相比，柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合表现出对胃肠道疾病的显著预防和治疗作用，其对于本领域技术人员而言是不可预见的，由此完成本发明。
发明概述
因此，本发明的一个目的是提供用于预防或治疗胃肠道疾病的包含作为活性成分的草药组合的有效组合物。
本发明的另一目的是提供包含用于预防或治疗胃肠道疾病的组合物的药物和功能性保健食品。
附图简述
图1和2是显示根据本发明的一个实施方案制备的草药提取物对双氯芬酸诱导的胃损伤的抑制作用的照片；
图3为染色组织的照片，其示出根据本发明的一个实施方案制备的草药提取物对由吲哚美辛的腹膜内注射诱导的胃损伤的预防作用；以及
图4为染色组织的照片，其示出根据本发明的一个实施方案制备的草药提取物对醋酸诱导的亚慢性胃损伤的治疗作用。
优选实施方案的详细描述
为完成上述目标，本发明提供了用于预防或治疗胃肠道疾病的包含选自柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(GlycyrrhizaeRadix)的两种或多种草药的组合物。
此外，本发明提供了包含所述组合物和药物可接受的载体或添加剂的药物。
此外，本发明提供了包含所述组合物和营养可接受的载体或添加剂的功能性保健食品。
在下文中，更详细地描述本发明。
发现本发明的用于预防或治疗胃肠道疾病的组合物包含已知具有抗溃疡作用的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合，从而表现出显著的预防和治疗作用，其对于本领域技术人员而言是不可预见的，由此完成本发明。
在一个方面中，本发明提供了用于预防或治疗胃肠道疾病的包含选自柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(GlycyrrhizaeRadix)的两种或多种草药的组合物。
在所述组合物中，柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的组成比不受特别限制。优选地，基于100重量份的柴胡(Bupleuri Radix)，组合物可包含10-30重量份的黄连(Coptis Rhizoma)和10-30重量份的甘草(Glycyrrhizae Radix)。
如本领域技术人员通常理解的，将构成本发明组合物的草药归为同一种类，并包括能用于预防或治疗胃肠道疾病的同一种类的任何草药。
可以草药的溶剂提取物的形式或以粉末状草药本身的形式或以干草药粉末的形式将柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)各自包含于组合物中。因此，类型或方法不受特别限制。通过提取它们各自或与水、有机溶剂或其组合全部一起提取来制备草药的溶剂提取物，其中有机溶剂可为C1-C4醇类、丙酮、氯仿、二氯甲烷、醚、乙酸乙酯、己烷或其组合，但不限于此。C1-C4醇可由甲醇、乙醇、丙醇和丁醇例示，且最优选为乙醇。
通过本领域技术人员已知的任何草药提取方法可制备柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的溶剂提取物，并可通过诸如热水提取、冷浸渍提取、回流冷提取或超声处理的提取方法，在10小时至80小时优选为2天至3天的时间内，在10℃至80℃优选在室温(25℃)下进行制备，并优选冷浸渍提取1次至5次。将获得的溶剂提取物减压过滤，并在20℃至100℃优选在室温(25℃)下使用旋转蒸发仪减压浓缩滤液并冷冻-干燥以获得最终的提取物。
本发明的包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合的组合物对于胃肠道疾病的预防或治疗是有效的，并且所述胃肠道疾病包括所有由胃和十二指肠的粘膜损伤引起的胃肠道疾病。胃肠道疾病可由诸如酒精、吸烟、压力、药物及其组合的多种因素引起，但不限与此。导致胃肠道疾病的药物的代表为非甾体抗炎药、类固醇等，但不限与此。非甾体抗炎药的代表为吲哚美辛、双氯芬酸、阿司匹林、对乙酰氨基酚、布洛芬、美洛昔康、萘普生等。
在下列实验例中说明本发明的组合物对胃肠道疾病的预防或治疗作用。具体地，将本发明包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合的组合物给予大鼠，胃溃疡由酒精、浸水束缚应激或非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导。结果，与非治疗组(对照组)相比，组合物治疗组表现出显著低的胃中溃疡指数，并且所述作用比广泛用作胃肠道疾病的草药治疗药物的更明显，这表明了对胃肠道疾病的预防作用。此外，在由直接应用醋酸诱导胃溃疡之后，长时间给予本发明包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合的组合物，然后检测前列腺素的抗溃疡作用和粘膜再生。结果，与非治疗组(对照组)相比，组合物治疗组表现出对胃肠道疾病的显著优异的治疗指数，并且所述作用比广泛用作胃肠道疾病的草药治疗药物的更明显，这表明了对胃肠道疾病的治疗作用。此外，将本发明的包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(GlycyrrhizaeRadix)中的两种或多种的组合的组合物的给药与柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的各自单独给药相比。结果，与各个草药提取物的单独给药相比，当它们各自均以相等剂量给药时，包含其两种或多种的组合的组合物的给药表现出对大鼠胃损伤的显著优异的抑制作用。结果表明本发明的组合物具有对胃肠道疾病的预防和治疗的协同作用。在本发明的组合物之中，发现与各个包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(GlycyrrhizaeRadix)中的一种草药的组合物以及包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种草药的组合物相比，包含全部的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的组合物具有协同作用。此外，本发明的组合物包含传统上长时间使用的安全认证的草药，因此几乎没有关于不期望的副作用和毒性的担忧，其允许出于预防胃肠道疾病目的的长期使用或治疗。
因此，在另一方面中，本发明提供了包含本发明的组合物和药物可接受的载体或添加剂的药物。
可通过各种途径向包括大鼠、小鼠、家畜和人类在内的哺乳动物给予药物，所述途径例如口服、直肠、静脉内、肌内、皮下，通过子宫内硬脑膜注射或通过脑室内注射。因此，可将药物配制成为本领域已知的标准药物制剂。可将药物配制成为口服制剂、注射制剂、栓剂、透皮制剂和经鼻制剂，但不限于此。可将其配制成为任何制剂，且优选配制成为液体制剂、混悬剂、粉末剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、乳剂、糖浆剂、气雾剂或诸如提取物的口服制剂。
在配制这样的制剂时，可添加各个制剂所需的药物可接受的载体或添加剂。在配制成为口服制剂时，可使用选自稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、甜味剂、稳定剂和防腐剂中的一种或多种作为载体，并可使用选自调味剂、维生素和抗氧化剂中的一种或多种作为添加剂。
载体和添加剂可为任何药物可接受的载体和添加剂。具体地，稀释剂的优选实例可包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、玉米淀粉、大豆油、微晶纤维素、山梨醇、木糖醇和甘露醇，润滑剂的优选实例可包括硬脂酸镁和滑石，且粘合剂的优选实例可包括聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基纤维素。此外，崩解剂的优选实例可包括羧甲基纤维素钙、羟基乙酸淀粉钠、聚丙烯酸钾和交联聚乙烯吡咯烷酮，甜味剂的优选实例可包括白糖、果糖、山梨醇和阿司帕坦，稳定剂的优选实例可包括羧甲基纤维素钠、β-环糊精、白蜂蜡和黄原胶，且防腐剂的优选实例可包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和山梨酸钾。
除这些成分之外，还可包含用于改善味道的已知添加剂，例如，诸如李子、柠檬、菠萝和香草调味料、天然果汁的天然调味剂，诸如叶绿酸和类黄酮的天然染料，诸如果糖、蜂蜜、糖醇和糖的甜味成分，或者也可以包含诸如柠檬酸和柠檬酸钠的酸化剂。
用于肠胃外给药的制剂的实例包括无菌水溶液剂、无水溶剂、混悬剂、乳剂、冻干剂和栓剂。对于无水溶剂和混悬剂的制剂，可使用丙二醇、聚乙二醇、诸如橄榄油的植物油或诸如油酸乙酯的可注射的酯。可使用witepsol、聚乙二醇、吐温61、可可脂、月桂酸酯或甘油明胶作为栓剂基质。
通过在维持对胃肠道疾病的治疗或预防作用的范围内改变草药成分的组成比可制备所述药物，并且以重量计，所述组合物可包含0.01％至80％，且优选为1％至50％的本发明的草药成分。
为获得胃肠道疾病的预防或治疗作用，基于溶剂提取物的干粉，可以每日剂量为0.01g/kg/天至10g/kg/天，优选为1g/kg/天至5g/kg/天来给予一次或若干次组合物的活性成分，且可依赖患者的年龄、性别、体重、饮食、分泌速度或患者服用的其它药物而适当地确定它。因此，应考虑有效的剂量范围而制备本发明的药物，且必要时可根据个体的需要和给予或监督组合物的给药的人的专业判断来调整具体的剂量方案，或可在预定的时间间隔内数次给予配制的制剂的各个剂量单位。
本发明的组合物还可用作用于胃肠道疾病的预防或治疗的功能性保健食品的原料。
因此，在另一方面中，本发明提供了包含本发明的组合物和营养可接受的载体或添加剂的功能性保健食品。
如本文使用的，术语“功能性保健食品”是指包含在韩国食品和药品监督管理局公告#2008-72的批准的成分列表上的成分的功能性保健食品，并且它们的功能性和安全性由2008年修订的保健功能食品法确定。
可将功能性保健食品配制成为本领域已知的典型功能性保健食品制剂。可以粉末、颗粒、片、丸、胶囊、悬浮液、乳液、糖浆、浸液(infusion)、液体、提取物、口香糖、茶、果冻或饮料的形式来制备保健功能食品。营养可接受的载体或添加剂可为通常用于本领域的剂型和制剂的任何载体或添加剂。
以重量计，基于食品的总重量，功能性保健食品可包含0.01％至15％，优选为0.2％至10％的构成本发明组合物的草药成分，基于100ml的饮料，功能性保健食品可包含0.1g至30g，优选为0.2g至5g的构成本发明组合物的草药成分。
饮料还可包含除上述草药成分之外的其它成分，其中其它成分可为用于常见饮料的各种调味剂或天然碳水化合物。上述天然碳水化合物的实例为诸如单糖的常规糖类(例如葡萄糖、果糖等)，二糖(例如麦芽糖、蔗糖等)，多糖(例如糊精、环糊精等)以及诸如木糖醇、山梨醇和赤藓糖醇的糖醇。对于其它的调味剂，可包含天然调味剂(例如taumatin、甜叶菊提取物等)和合成的调味剂(例如糖精、阿司帕坦等)。优选地，基于100ml的饮料，包含的所述天然碳水化合物的量为约1g至20g，优选为约5g至12g。
可在表现出对胃肠道疾病的预防或治疗作用的范围内以预定的时间间隔同时或相继给予本发明的药物和功能性保健食品中包含的两种或多种活性成分，即柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的组合。当意图以预定的时间间隔给予柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的两种或多种组合时，单独配制各个活性成分。当同时给予柴胡(BupleuriRadix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的两种或多种组合时，可将其均匀的混合物配制成为单一制剂或将它们单独配制，然后同时给予单独的制剂。
在下文中，参考下列实施例更详细地描述本发明。然而，这些实施例仅出于例示性的目的，并且本发明不意图受这些实施例的限制。
比较例1-3：柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的单一草药提取物的制备
从东方的医药贸易商购买干燥的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)，并用水洗涤以去除杂质，并将干草药用于提取物的制备。使用研磨机研磨柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)，并向各自为200g的上述草药中加入400ml的80％乙醇水溶液。在3天时间内在室温下进行两次冷浸渍过程以获得各个液体提取物。将各个液体提取物过滤，并在50℃下使用旋转蒸发仪减压浓缩，将溶剂完全去除并在真空干燥箱中干燥，随后研碎。最后，获得干燥的乙醇提取物、31g的柴胡(Bupleuri Radix)提取物(比较例1)、36g的黄连(Coptis Rhizoma)提取物(比较例2)和48g的甘草(Glycyrrhizae Radix)提取物(比较例3)。
实施例1-3：柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的两种组合提取物的制备
从东方的医药贸易商购买干燥的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)，并用水洗涤以去除杂质，并将干草药用于提取物的制备。使用研磨机研磨柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)，并向提取器中分别加入780g的柴胡(Bupleuri Radix)和180g的黄连(Coptis Rhizoma)(实施例1)、780g的柴胡(Bupleuri Radix)和180g的甘草(GlycyrrhizaeRadix)(实施例2)以及各自为500g的黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)(实施例3)。向各个草药的组合中加入2L的80％乙醇水溶液，并以与比较例1-3相同的方式进行提取、过滤、浓缩和干燥过程以获得干燥的乙醇提取物、165g的柴胡(Bupleuri Radix)-黄连(Coptis Rhizoma)提取物(实施例1)、192g的柴胡(Bupleuri Radix)-甘草(Glycyrrhizae Radix)提取物(实施例2)和210g的黄连(CoptisRhizoma)-甘草(Glycyrrhizae Radix)提取物(实施例3)。
实施例4：柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的复合提取物的制备
从东方的医药贸易商购买干燥的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)，并用水洗涤以去除杂质，并将干草药用于提取物的制备。
使用研磨机研磨柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)，并将6.5kg的柴胡(Bupleuri Radix)、1.5kg的黄连(Coptis Rhizoma)和1.5kg的甘草(Glycyrrhizae Radix)放入提取器中。向其中加入20L的80％乙醇水溶液，并以与实施例1-3相同的方式进行提取、过滤、浓缩和干燥过程以获得干燥的乙醇提取物，即1.6kg的柴胡(Bupleuri Radix)-黄连(Coptis Rhizoma)-甘草(GlycyrrhizaeRadix)提取物。
实验例1：对酒精诱导的胃损伤的抑制作用的试验(1)
在大鼠模型中，通过应用60％乙醇的150mM HCl诱导胃损伤，并评价实施例1-4制备的草药提取物的胃粘膜保护作用。乙醇直接刺激胃粘膜以引起粘膜下层肌肉层的出血和水肿，导致短暂的缺血。因此，诱导细胞死亡、粘膜中的ATP减少以及微循环衰竭。此外，盐酸发挥作用以刺激胃运动来引起急性胃炎。
从Charles River购买无特异病原(SPF)的，年龄为7周的雄性Sprague-Dawley大鼠，并在驯化一周之后，将重量为270g至280g的健康大鼠用于实验。将五只动物用于各个组并禁食20小时同时自由获取水。然后，以100mg/kg或200mg/kg的剂量口服给予实验动物各个提取物。1小时之后，口服给予各个动物1mL的60％乙醇的150mM HCl以诱导胃损伤，时间为1小时。在药物治疗之后1小时，通过CO2窒息处死大鼠以去除胃。将胃固定在1％的福尔马林中，并沿着胃大弯剖开。用肉眼观察胃损伤。检测胃溃疡的长度并计算胃溃疡指数。
首先，将比较例1-3的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的各个单一提取物，实施例1-3的包含两种草药的各个复合提取物以及实施例4的包含全部柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的复合提取物用作实验组以比较它们对急性酒精性胃炎的功效。使用水作为对照组，并在下表1中显示实验结果。
[表1]胃粘膜的总观察结果
| 切片 | 溃疡长度(mm) | 溃疡指数* |
| 水 | 137.42±47.53 | 177.34±51.23 |
| 柴胡提取物(50mg/kg) | 95.78±52.56 | 148.75±42.32 |
| 柴胡提取物(100mg/kg) | 83.44±57.33 | 121.54±47.58 |
| 柴胡提取物(200mg/kg) | 87.51±48.21 | 135.76±32.25 |
| 黄连提取物(50mg/kg) | 92.54±58.54 | 137.58±48.65 |
| 黄连提取物(100mg/kg) | 78.25±37.42 | 101.48±34.65 |
| 黄连提取物(200mg/kg) | 70.24±30.55 | 92.30±27.55 |
| 甘草(50mg/kg) | 85.87±42.65 | 128.44±58.24 |
| 甘草(100mg/kg) | 75.66±34.22 | 98.54±28.69 |
| 甘草(200mg/kg) | 64.56±47.52 | 82.49±32.68 |
| 柴胡-黄连提取物(50mg/kg) | 82.56±58.25 | 113.74±48.62 |
| 柴胡-黄连提取物(100mg/kg) | 38.34±52.42 | 51.24±38.32 |
| 柴胡-黄连提取物(200mg/kg) | 48.51±36.33 | 65.33±32.56 |
| 柴胡-甘草(50mg/kg) | 73.25±38.51 | 102.35±32.11 |
| 柴胡-甘草(100mg/kg) | 32.33±25.41 | 48.38±28.99 |
| 柴胡-甘草(200mg/kg) | 28.65±38.54 | 44.45±30.21 |
| 黄连-甘草(50mg/kg) | 68.54±48.57 | 92.84±32.40 |
| 黄连-甘草(100mg/kg) | 25.35±42.22 | 40.89±35.54 |
| 黄连-甘草(200mg/kg) | 27.24±33.91 | 38.75±28.33 |
| 柴胡-黄连-甘草(50mg/kg) | 52.43±25.96 | 75.89±28.34 |
| 柴胡-黄连-甘草(100mg/kg) | 20.20±18.21 | 30.85±18.96 |
| 柴胡-黄连-甘草(200mg/kg) | 15.84±20.44 | 26.51±21.57 |
*溃疡指数按如下方式记分：小于1mm，1分；1-2mm，2分；2-3mm，3分；3-4mm，4分；4-5mm，5分；大于5mm，10分。
如表1所示，发现与柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的单一提取物相比，实施例1-3的包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的两种或多种的复合提取物表现出显著优异的抗溃疡作用。此外，发现与柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的单一提取物以及包含它们的两种或多种的复合提取物相比，实施例4的包含全部的柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)的复合提取物表现出显著优异的抗溃疡作用。
因此，能够看出本发明的包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(CoptisRhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的草药复合提取物对胃肠道疾病具有显著的预防作用。
实验例2：对酒精诱导的胃损伤的抑制作用的试验(2)
基于实验例1的结果，将实施例4制备的草药提取物给予大鼠作为实验组，将(60mg的艾蒿提取物，Dong-A Pharmaceutical)给予大鼠作为比较例4，并给予水作为对照，以便评价实施例4制备的草药提取物的功效。以与实验例1相同的方式进行实验。在下列表2中示出结果。
[表2]胃粘膜的总观察结果
*溃疡指数按如下方式记分：小于1mm，1分；1-2mm，2分；2-3mm，3分；3-4mm，4分；4-5mm，5分；大于5mm，10分。
如表2所示，发现与目前用于胃肠道疾病的治疗的相比，实施例4的草药提取物对乙醇诱导的胃粘膜损伤具有显著的预防作用。
实验例3：对浸水束缚应激诱导的胃损伤的抑制作用的试验
为评价压力诱导的胃损伤的抑制作用，将浸水束缚应激诱导的模型用于进行功效试验。由压力产生的迷走神经的过多激活刺激胃酸分泌、胃酸运动或血流障碍，从而导致胃粘膜损伤。
从Charles River购买无特异病原(SPF)的，年龄为7周的雄性Sprague-Dawley大鼠，并在驯化一周之后，将重量为270g至280g的健康大鼠用于实验。将五只动物用于各个组并禁食20小时同时自由获取水。然后，口服给实验动物药物，并在30分钟之后将它们放置在压力箱中并将剑突浸入维持在21±1℃的水浴中。8小时之后，通过CO2窒息处死大鼠以去除胃。将胃固定在1％的福尔马林中并沿着胃大弯剖开。用肉眼观察胃损伤。检测胃溃疡的长度并计算胃溃疡指数。
将实施例4制备的草药提取物给予大鼠作为实验组，将(60mg的艾蒿提取物，Dong-A Pharmaceutical)给予大鼠作为比较例，给予水作为对照以比较它们的功效。在下表3中显示结果。
[表3]胃粘膜的总观察结果
*溃疡指数按如下方式记分：小于1mm，1分；1-2mm，2分；2-3mm，3分；3-4mm，4分；4-5mm，5分；大于5mm，10分。
如表3所示，发现与目前用于胃肠道疾病治疗的相比，实施例4的草药提取物对浸水束缚应激诱导的胃粘膜损伤具有显著优异的预防或治疗作用。
实验例4：对非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导的胃损伤的抑制作用的试验(1)
非甾体抗炎药抑制前列腺素(PG)的生物合成以诱导胃粘膜损伤。为评价对非甾体抗炎药诱导的胃损伤的预防和抑制作用，检验对双氯芬酸诱导的胃损伤的预防作用。
从Charles River购买无特异病原(SPF)的，年龄为7周的雄性Sprague-Dawley大鼠，并在驯化一周之后，将重量为270g至280g的健康大鼠用于实验。将五只动物用于各个组并允许自由获取水以进行功效试验。
为确认对非甾体抗炎药诱导的急性胃损伤的抑制作用，口服给予禁食20小时的实验动物药物。一小时之后，口服给予它们50mg/kg的双氯芬酸，并保持6小时以诱导胃损伤。通过CO2窒息处死大鼠以去除胃。将胃固定在1％的福尔马林中并沿着胃大弯剖开。用肉眼观察胃损伤。检测胃溃疡的长度并计算胃溃疡指数。此外，在图1和图2中示出胃损伤的照片。
给予实施例4制备的草药提取物作为实验组，给予(60mg的艾蒿提取物，Dong-A Pharmaceutical)作为比较例并给予水作为对照以比较它们的功效。在下表4中显示结果。
[表4]胃粘膜的总观察结果
*溃疡指数按如下方式记分：小于1mm，1分；1-2mm，2分；2-3mm，3分；3-4mm，4分；4-5mm，5分；大于5mm，10分。
如表4所示，发现与目前用于胃肠道疾病治疗的相比，实施例4的草药提取物对双氯芬酸诱导的急性胃粘膜损伤具有显著优异的治疗作用。图1和图2的照片显示通过实施例4的草药提取物和比较例4的的给药抑制了双氯芬酸诱导的胃壁损伤，并实施例4的草药提取物以浓度依赖性方式抑制了胃损伤。
实验例5：对非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导的胃损伤的抑制作用的试验(2)
为评价对非甾体抗炎药诱导的胃损伤的预防和抑制作用，检验对吲哚美辛诱导的胃损伤的预防作用。
在6天时间内每日一次口服给予实验动物药物，然后禁食24小时。此后，通过腹膜内注射给予它们70mg/kg的吲哚美辛，并保持7小时以诱导胃损伤。通过CO2窒息处死大鼠以去除胃。将胃固定在1％的福尔马林中并沿着胃大弯剖开。用肉眼观察胃损伤。检测胃溃疡的长度并计算胃溃疡指数并记录。从各个实验组采集血液，并分析血液中的NO(一氧化氮)、SOD(超氧化物歧化酶)和EGF(表皮生长因子)水平。
给予实施例4制备的草药提取物作为实验组，给予(60mg的艾蒿提取物，Dong-A Pharmaceutical)作为比较例并给予水作为对照以比较它们的功效。在下表5中显示结果。
此外，将胃组织固定并制备石蜡-包埋的切片并染色，随后在显微镜下观察并照相。在图3中示出照片。
[表5]对吲哚美辛诱导的急性胃损伤的预防作用
如表5所示，发现与目前用于胃肠道疾病治疗的相比，实施例4的草药提取物对通过腹膜内注射吲哚美辛诱导的胃粘膜损伤具有显著优异的预防作用。
图3的照片显示与正常组(A)相比，通过给予比较例1(C、D)和实施例4的草药提取物(E、F)能预防吲哚美辛诱导的胃壁损伤(B)，并实施例4的草药提取物以浓度依赖性方式抑制胃损伤。
实验例6：对醋酸诱导的亚慢性胃炎的治疗作用
能将通过直接应用醋酸诱导的胃溃疡模型用于检测长期使用药物之后由前列腺素产生的抗溃疡作用和粘膜再生。该模型与在通过肉眼检查根除溃疡病变之后的4个月至5个月内具有高复发率的临床定义的慢性胃溃疡非常相似，且该模型对检验对慢性胃溃疡的治疗作用非常有用。
从Charles River购买无特异病原(SPF)的，年龄为7周的雄性Sprague-Dawley大鼠，并在驯化一周之后，将重量为270g至280g的健康大鼠用于实验。将五只动物用于各个组并允许自由获取水，并在非禁食条件下用乙醚麻醉。然后，进行剖腹手术以暴露胃。使用微量注射器将50L的醋酸注射进入前幽门区域的浆膜层，并用棉线封闭腹腔。在诱导溃疡3天之后，在14天时间内每天一次口服给予所述药物。最终给药之后，使大鼠禁食24小时，并通过CO2窒息致死大鼠以去除胃。将胃固定在1％的福尔马林中并沿着胃大弯剖开。用肉眼观察胃损伤。检测胃溃疡的长度并计算胃溃疡指数并记录。从各个实验组采集血液并分析血液中的NO、SOD和EGF水平。
给予实施例4制备的草药提取物作为实验组，给予(60mg的艾蒿提取物，Dong-A Pharmaceutical)作为比较例并给予水作为对照以比较它们的功效。在下表6中显示结果。
此外，将胃组织固定并制备石蜡-包埋的切片并染色，随后在显微镜下观察并照相。在图4中显示照片。
[表6]对醋酸诱导的亚慢性胃炎的治疗作用
如表6所示，发现实施例4的草药提取物对醋酸诱导的亚慢性粘膜损伤具有显著优异的治疗作用。此外，图4的照片显示与正常组(A)相比，通过给予实施例4的草药提取物(E、F)和比较例1(C、D)能预防醋酸诱导的胃壁损伤(B)，且实施例4的草药提取物以浓度依赖性方式抑制胃损伤。
制备例1：片剂的制备
根据下列组成，通过湿法制粒法和干法制粒法将实施例4制备的草药提取物用于制备颗粒，然后制片以制备用于口服给药的片剂。
制备例2：胶囊剂的制备
根据下列组成，将实施例4制备的草药提取物装入胶囊中以制备胶囊剂。
制备例3：软膏剂的制备
根据下列组成，将实施例4制备的草药提取物用于制备软膏剂。
制备例4：注射制剂的制备
根据下列组成，将实施例4制备的草药提取物用于制备注射制剂。
制备例5：液体制剂的制备
根据下列组成，将实施例4制备的草药提取物用于制备液体制剂。
制备例6：粉末制剂的制备
根据下列组成，混合实施例4制备的草药提取物并将其装入密封囊中以制备粉末剂。
草药提取物 0.2g
乳糖 1.5g
滑石 0.5g
制备例7：丸剂的制备
将100mL的蜂蜜加热并过滤，并将该步骤重复三或四次，并加热直至其变粘稠并形成黄色线状物，但在冷却之后不粘在手指上。可使用水、板栗油和醋代替蜂蜜。向加热的蜂蜜中加入5g的实施例4制备的草药提取物并揉合。使用药丸制造机将混合物制成具有相同尺寸的球以制备丸剂。在凉爽和干燥处干燥制备的丸剂，然后密封并在凉爽和避光处储存。
制备例8：混悬剂的制备
向100mL的水中加入0.1g的实施例4制备的草药提取物以及聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、膨润土或聚山梨醇酯80作为混悬剂，并通过搅拌混合。根据标准制备方法将作为甜味剂的糖精钠、糖浆、白糖、蜂蜜或D-麦芽糖醇与其混合以制备混悬剂。
制备例9：透皮制剂的制备
通过下列标准方法将实施例4制备的草药提取物用于制备透皮制剂。
制备例10：口香糖的制备
根据下列组成和含量，通过标准方法将实施例4制备的草药提取物用于制备口香糖。
制备例11：饮料的制备
根据下列组成和含量，通过标准方法将实施例4制备的草药提取物用于制备饮料。
制备例12：糖果的制备
根据下列组成和含量，通过标准方法将实施例4制备的草药提取物用于制备糖果。
用纯净水稀释20％的草药提取物和80％结晶乳糖醇的混合物，并放入平底锅中。将一批在高温板上首先加热直至所有物质成为可溶的。随后，将一批转移至真空蒸煮器并另外加热。形成的混合物在相对低的温度下形成粘块。将糖浆从蒸煮器中转移至后板，并硬化以适用于滚动脱落。通过脱落滚筒提供硬块。将糖果成型以具有可接受的质量。制备例13：液体制剂的制备
洗涤650g的柴胡(Bupleuri Radix)、150g的黄连(Coptis Rhizoma)和150g的甘草(Glycyrrhizae Radix)并放入提取器中。向其中加入10,000mL的水，并在100℃浓缩约3小时以获得液体提取物。将由4kg的大米制成的蒸熟米饭、1kg的传统nuruk和5kg的母液均匀混合，并向其中加入液体提取物，随后在10℃至25℃下发酵约3天。将发酵液过滤以从固体中分离液体，并在55℃至60℃下加热。向滤液中加入高达10,000mL的纯净水以制备液体制剂。
发明的影响
如上所述，本发明的组合物包含柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(CoptisRhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)中的两种或多种的组合，由此在与胃溃疡或十二指肠溃疡引起的粘膜损伤相关的胃肠道疾病的治疗中具有对于本领域技术人员而言不可预见的显著作用。由于本发明的组合物由天然材料制备从而对人体不产生任何毒性并具有很少的复发危险因此它们是期望的。因此，本发明的组合物能用作预防或治疗由酒精、压力、吸烟、药物等引起的多种胃肠道疾病的药物或功能性保健食品。
Claims (8)
1.用于预防或治疗胃肠道疾病的组合物，所述组合物包含草药，所述草药由100重量份的柴胡(Bupleuri Radix)、10-30重量份的黄连(Coptis Rhizoma)和10-30重量份的甘草(Glycyrrhizae Radix)组成。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述柴胡(Bupleuri Radix)、黄连(Coptis Rhizoma)和甘草(Glycyrrhizae Radix)各自为粉末状草药本身、干草药粉末或溶剂的粗提取物，所述溶剂选自水、C1-C4醇及其组合。
3.如权利要求1所述的组合物，其中所述胃肠道疾病为由酒精、吸烟、压力、药物或其组合引起的胃或十二指肠的粘膜损伤。
4.如权利要求1所述的组合物，其中所述胃肠道疾病为胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、卓-艾综合征、反流性食管炎、术后溃疡或胃粘膜的糜烂、出血、发红或水肿。
5.药物，其包含权利要求1至4中任一权利要求所述的组合物和药物可接受的载体或添加剂。
6.如权利要求5所述的药物，其中所述药物为粉末剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、液体制剂、气雾剂、提取物、注射制剂、透皮制剂或栓剂的形式。
7.功能性保健食品，其包含权利要求1至4中任一权利要求所述的组合物和营养可接受的载体或添加剂。
8.如权利要求7所述的功能性保健食品，其中所述功能性保健食品为液体、悬浮液、粉末、颗粒、片、胶囊、丸、提取物、茶、果冻或饮料的形式。
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