CN104237445A - 一种五仙膏的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种五仙膏的质量检测方法，五仙膏的质量检测方法包括：陈皮的薄层色谱鉴别和麦冬的薄层色谱鉴别。本发明提供的一种五仙膏的质量检测方法，增加了陈皮、麦冬的薄层鉴别方法，该方法可以客观、全面、准确的评价五仙膏的质量，对控制生产过程的质量、保证产品的疗效有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种五仙膏的质量检测方法，属于中药质量检测领域。
背景技术
江苏七0七天然制药有限公司生产的五仙膏，中医药方，健脾开胃，滋肾清肝，益气生津，清利头目。用于胁胀脘痞，消化不良，耳鸣目眩，记忆衰退，口干津少，四肢无力等。
五仙膏的处方为人参 50g、白术 100g、茯苓 150g、菊花 100g、枸杞子 100g、地黄 200g、 麦冬 150g、陈皮 100g、葛根 100g、 蔓荆子 50g、六神曲 150g。五仙膏的制法以上十一味，加水煎煮三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩至相对密度为1.20（80℃）的清膏。另取清膏4倍量的蔗糖，加热溶化，滤过，与清膏合并，混匀，浓缩至规定的相对密度，即得。五仙膏性状为本品为黑褐色稠厚的半流体；味甜。而现有的质量标准中只有性状和检查项，无鉴别方法，不能很好的控制产品质量。
为了有效控制生产过程的质量、保证产品的疗效，需要研究设计出一种能准确检测五仙膏制剂中有效成分的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种五仙膏的质量检测方法，以提高五仙膏的质量控制标准，该方法简单、易操作，能够快速准确的鉴别中药五仙膏。
本发明的技术方案是这样的 ：一种五仙膏的质量检测方法，该方法的步骤如下：
1）陈皮的薄层色谱鉴别方法：
供试品溶液的制备：取五仙膏10g，加水30ml使溶解，加5mL饱和氯化钠溶液，再加乙酸乙酯20ml，超声处理2次，每次20分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
对照药材溶液的制备：取陈皮对照药材2g，加水30ml使溶解，加5mL饱和氯化钠溶液，再加乙酸乙酯20ml，超声处理2次，每次20分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作对照药材溶液；
对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg橙皮苷的溶液，作为对照品溶液；
薄层层析：吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为28∶10∶1的三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂，置波长365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，分别在与对照品色谱和对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；
2）麦冬的薄层色谱鉴别方法：
供试品溶液的制备：取五仙膏20g，加水20ml使溶解，加0.5%的HCl溶液20ml，加热回流，放冷，加三氯甲烷20ml振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备：另取麦冬对照药材2g 同供试品溶液的制备法制成对照药材溶液。
薄层层析：吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
所述陈皮的薄层色谱鉴别方法中薄层层析中使用的显色剂为1%三氯化铝乙醇溶液。
所述麦冬的薄层色谱鉴别方法中薄层层析中使用的显色剂为10%硫酸乙醇溶液。
所述加热回流的时间为30min。
有益效果
本发明的五仙膏的质量检测方法在于方法简单、准确，提高了五仙膏的质量控制标准，增加了陈皮和麦冬的薄层色谱鉴别方法，保证了本复方制剂较高的质量标准水平。
附图说明
图 1 是本发明中实施例2的五仙膏的陈皮的薄层色谱鉴别比较图。
图 2 是本发明中实施例3的五仙膏的麦冬的薄层色谱鉴别比较图。
具体实施方式
实施例1、五仙膏的制备
五仙膏的处方：人参 50g、白术 100g、茯苓 150g、菊花 100g、枸杞子 100g、地黄 200g、 麦冬 150g、陈皮 100g、葛根 100g、 蔓荆子 50g、六神曲 150g。
制法：以上十一味，加水煎煮三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩至相对密度为1.20（80℃）的清膏。另取清膏4倍量的蔗糖，加热溶化，滤过，与清膏合并，混匀，浓缩至规定的相对密度，即得。
实施例2、陈皮的薄层色谱鉴别
供试品溶液制备：取五仙膏5g，加水30ml使溶解，加5mL饱和氯化钠溶液，再加乙酸乙酯20ml，超声处理2次，每次20分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
取江苏七O七天然制药有限公司生产的3个不同批号的五仙膏，按照上述供试品溶液制备方法，分别制得3份供试品溶液。
对照药材溶液的制备：取陈皮对照药材2g，加水30ml使溶解，加5mL饱和氯化钠溶液，再加乙酸乙酯20ml，超声处理2次，每次20分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作对照药材溶液；
对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg橙皮苷的溶液，作为对照品溶液；
阴性对照液：取缺陈皮的阴性样品5g，用与供试品溶液相同的制备方法，分别制得陈皮阴性对照液。
薄层层析：照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B）试验吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（28∶10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视；附图1为本实施例中各个溶液的薄层色谱鉴别比较图。图中从左至右依次为：阴性对照液条带，陈皮对照药材溶液条带（中检所），橙皮苷对照品溶液条带，供试品溶液1条带，供试品溶液2条带，供试品溶液3条带；硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂生产)（供薄层层析用），其它试剂均为AR级。温度：23℃，湿度：56%。
从图1中可以清楚看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。试验说明，本实施例中展开剂的分离效果好，系统Rf值适中，特征斑点清晰、圆整，同时提取过程无污染。
实施例3、麦冬的薄层色谱鉴别：
供试品溶液的制备：取五仙膏20g，加水20ml使溶解，加0.5%的HCl溶液20ml，加热回流30min，放冷，加三氯甲烷20ml振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取江苏七O七天然制药有限公司生产的3个不同批号的五仙膏，按照上述供试品溶液制备方法，分别制得3份供试品溶液。
对照药材溶液的制备：另取麦冬对照药材2g ，加水20ml使溶解，加0.5%的HCl溶液20ml，加热回流30min，放冷，加三氯甲烷20ml振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。
阴性对照液：取缺麦冬的阴性样品5g，用与供试品溶液相同的制备方法，分别制得麦冬阴性对照液。
薄层层析：照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，附图2为本实施例中各个溶液的薄层色谱鉴别比较图。图中从左至右依次为：麦冬麦冬对照药材溶液条带（中检所），麦冬阴性对照液条带，供试品溶液1条带，供试品溶液2条带，供试品溶液3条带；硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂生产)（供薄层层析用），其它试剂均为AR级。温度：23℃，湿度：56%。
从图2中可以清楚看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，试验说明，本实施例中展开剂的分离效果好，展开系统Rf值为0.5，特征斑点清晰、圆整。
对照例1
本对照例供试品溶液的制备如下：取五仙膏5g，加甲醇10ml，加热回流20分钟，滤过，取续滤液5ml，浓缩至干，用甲醇2ml溶解残渣，作为供试品溶液。其它步骤（对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点显色不清楚，而阴性对照液无此斑点。
对照例2
本对照例供试品溶液的制备如下：取五仙膏5g，加甲醇20ml超声处理15分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣 加甲酵2ml，溶解作为供试品溶液。其它步骤（对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点显色不明显，而阴性对照液无此斑点。
对照例3
本对照例供试品溶液的制备如下：取五仙膏5g，加乙酸乙酯20ml， 30分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。其它步骤（对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点显色不明显，而阴性对照液无此斑点。
对照例4
本对照例中展开剂为乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）和二次展开剂为三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸-水（20∶10∶10∶1），其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.89，偏高，斑点显色不明显，而阴性对照液无此斑点。
对照例5
本对照例中展开剂乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）和二次展开剂甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸-水（20∶10∶10∶1），其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.76，偏高，斑点显色不明显，而阴性对照液无此斑点。
对照例6
本对照例中除了展开剂选用三氯甲烷与甲醇的体积比为9:1，其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.64，但是斑点显色不完整，而阴性对照液无此斑点。
对照例7
本对照例中除了展开剂选用正己烷-丙酮-乙酸乙酯按体积配比3∶1∶3，其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.68，但是斑点显色不完整，而阴性对照液无此斑点。
对照例8
本对照例供试品溶液的制备如下：取五仙膏5g，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。其它步骤（对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例3中都相同。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，背景颜色较深，斑点显色不清楚，而阴性对照液无此斑点。
对照例9
本对照例供试品溶液的制备如下：取五仙膏5g，加乙醇10ml，密塞，超声30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。其它步骤（对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例3中都相同。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，背景颜色较深，斑点显色不清楚而阴性对照液无此斑点。
对照例10
本对照例供试品溶液的制备如下：取五仙膏5g，加水30ml使溶解，再加入甲醇20ml提取，甲醇液蒸干，加入水饱和的正丁醇30ml超声30min，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。阴性与对照药材溶液同上述方法制得。参考2010版药典计有关资料，分别吸取上述三种溶液各10μl，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，展开剂为三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）的下层溶液。展开后在105℃加热至斑点显色清晰。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点显色不清楚，而阴性对照液无此斑点。与实施例2相比，可以看出实施例2中采用了水解方法，水解后药材、供试品斑点清晰，阴性无干扰。但是本对照例中不水解的话，由于复方中成分复杂，含皂苷类物质较多，干扰较大，鉴别结果差。
对照例11
本对照例中除了展开剂选用三氯甲烷-正已烷（15∶3），其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例3中都相同。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.3，但是斑点显色不完整，而阴性对照液无此斑点。
对照例12
本对照例中除了展开剂选用苯-丙酮（20∶1），其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例3中都相同。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.18，偏低，斑点显色不完整，而阴性对照液无此斑点。
对照例13
本对照例中除了展开剂选用丙酮-甲醇（15∶4），其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例3中都相同。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，展开系统Rf值为0.28，偏低，斑点显色不明显，而阴性对照液无此斑点。
对照例14
本对照例中除了显示剂选用10%硫酸乙醇溶液，其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例2中都相同。对五仙膏中的陈皮的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点显色不太明显，而阴性对照液无此斑点。
对照例15
本对照例中除了显示剂选用10%氢氧化钾硫酸溶液，其它步骤（供试品溶液、对照品溶液的制备、阴性对照液制备、薄层层析试验等）与实施例3中都相同。对五仙膏中的麦冬的薄层鉴别结果显示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点显色不明显，同时显色时间长，而阴性对照液无此斑点。
Claims (5)
1.一种五仙膏的质量检测方法，其特征在于五仙膏的质量检测方法如下：
1）陈皮的薄层色谱鉴别方法：
供试品溶液的制备：取五仙膏10g，加水30mL使溶解，加5mL饱和氯化钠溶液，再加乙酸乙酯20mL，超声处理2次，每次20分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；
对照药材溶液的制备：取陈皮对照药材2g，加水30mL使溶解，加5mL饱和氯化钠溶液，再加乙酸乙酯20mL，超声处理2次，每次20分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作对照药材溶液；
对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg橙皮苷的溶液，作为对照品溶液；
薄层层析：吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μL，对照品溶液2μL，分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为28∶10∶1的三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，分别在与对照品色谱和对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；
2）麦冬的薄层色谱鉴别方法：
供试品溶液的制备：取五仙膏20g，加水20mL使溶解，加0.5%的HCl溶液20mL，加热回流，放冷，加三氯甲烷20mL振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；
对照药材溶液的制备：另取麦冬对照药材2g 同供试品溶液的制备法制成对照药材溶液；
薄层层析：吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
2.根据权利要求1所述的一种五仙膏的质量检测方法，其特征在于：所述陈皮的薄层色谱鉴别方法中薄层层析中使用的显色剂为1%三氯化铝乙醇溶液。
3.根据权利要求1所述的一种五仙膏的质量检测方法，其特征在于：所述麦冬的薄层色谱鉴别方法中薄层层析中使用的显色剂为10%硫酸乙醇溶液。
4.根据权利要求1所述的一种五仙膏的质量检测方法，其特征在于：所述加热回流的时间为30min。
5.根据权利要求1所述的一种五仙膏的质量检测方法，其特征在于：所述紫外光灯为波长365nm紫外光灯。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20141224 |