CN104231100A - 一种云芝多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种云芝多糖的提取方法。该方法包括以下步骤：先对样品进行预处理包括漂洗、烘干及粉碎，再将样品加入碳酸钠溶液进行超声提取，并先后经微孔滤膜及超孔滤膜过滤，然后将滤液进行两次离心，将沉淀加碳酸钠溶液进行浸提，离心并浓缩制得浓缩浆，最后将浓缩浆干燥至含水量为3%~8%。本发明对云芝进行超声提取可使多糖提取率达到最高，同时可大大节省操作时间，提高了提取效率，在云芝多糖在提取过程中，采用2%~5%的碳酸钠溶液作为溶剂，提取效果好，且溶剂廉价，安全无害，经济环保，且本发明先对样品进行粉碎过筛，在超声提取后先后两次过滤，避免了有关杂质对提取过程的干扰。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种云芝多糖的提取方法。
背景技术
云芝(Coriolusversicolor)又称为采绒革盖菌、千层蘑、彩云革盖菌等, 隶属真菌门、担子菌亚门、多孔菌科、革盖菌属。云芝味甘、 淡, 性微寒, 有健脾利湿, 止咳平喘, 清热解毒,抗肿瘤的功效。云芝多糖是云芝的主要有效成分，能激活免设细胞、提高机体免疫功能，抗肿瘤、降血脂及抗菌，是安全有效的人或动物的免疫增强剂，可作为保健食品的添加剂。
目前云芝多糖的提取方法主要包括水浸提法、酸或碱提法等，两者对云芝多糖的最高得率相差不大，但后者可对环境造成严重污染，而前者在生产工艺及生产成本等方面具有较大的优势。但目前的水浸提法提取过程需花费5~10h，浸提液用量大，耗能大，且云芝多糖的得率仅为7.81%左右。因此，急需寻求一种能获得高产率高含量的云芝多糖的提取方法。
发明内容
本发明的目的就是针对上述现有技术中存在的缺陷提供一种能获得高产率高含量的云芝多糖的提取方法。
本发明的技术方案如下：
一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成粉状，待用；
（2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂5-10g，加入溶剂10~20ml超声提取，先进行微孔滤膜过滤，收集滤液，再将滤液进行超孔滤膜过滤，收集超滤后的滤液；
（3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入10~20ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再加70%~80%的乙醇10~20ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液20~50ml浸提0.5~1h，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆；
（4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为3%~8%。
优选的，所述的云芝粉末为可过40目的粗粉。
步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在80~85℃水浴20~30min后抽干。
优选的，步骤（2）中所述的溶剂为2%~5%的碳酸钠溶液。
优选的，步骤（2）中所述的超声提取时间为45~55min。
步骤（2）中微孔滤膜孔径为0.05~1um，微孔滤膜过滤时的进压为2~6bar,出压为0~5bar。
步骤（2）中超滤选择截留分子量为800~1000Da的超滤膜，操作温度为38~40℃；进压为1~8bar，出压为1~3bar。
优选的，步骤（3）中所述的浸提时操作温度为60℃~70℃。
优选的，步骤（3）中的离心速度为4000~5000r/min，离心温度为4℃。
优选的，步骤（3）中所述的浓缩为在40~80℃条件下、真空度-0.08 ~ -0.085Mpa浓缩到固形物含量为30%~70%的的浓缩浆。
本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：
1. 研究显示，在室温下先将云芝粗粉浸泡4h左右后采用常规方法和超声提取多糖提取率相似，均可达到最高。因此，本发明先对样品进行超声提取，不仅能达到较高的多糖提取率，同时可大大节省操作时间，提高了提取效率。
2. 本发明中在云芝多糖在提取过程中，采用2%~5%的碳酸钠溶液作为溶剂，提取效果好，且溶剂廉价，安全无害，经济环保。
3.本发明先对样品进行粉碎过筛，在超声提取后先后两次过滤，避免了有关杂质对提取过程的干扰。
具体实施方式
本发明通过以下具体实施例更详细的说明本发明，可以使本专业技术人员更全面的了解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成40目的粗粉，待用；
（2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂5g，加入2%的碳酸钠溶液10ml超声提取45min，先采用0.05um的微孔滤膜过滤，进压为2bar,出压为0bar，收集滤液，再将滤液采用截留分子量为800Da的超滤膜进行超孔滤膜过滤，操作温度为38℃，进压为1bar，出压为1bar，收集超滤后的滤液；
（3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入10ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再加70%的乙醇10ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液20ml浸提0.5h，操作温度为60℃℃，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆；
（4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为3%。
步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在80℃水浴20min后抽干。
步骤（3）中的离心速度为4000r/min，离心温度为4℃。
步骤（3）中所述的浓缩为在40℃条件下、真空度-0.08 Mpa浓缩到固形物含量为30%的的浓缩浆。
实施例2
一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成40目的粗粉，待用；
（2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂10g，加入5%的碳酸钠溶液20ml超声提取55min，先采用1um的微孔滤膜过滤，进压为6bar,出压为5bar，收集滤液，再将滤液采用截留分子量为1000Da的超滤膜进行超孔滤膜过滤，操作温度为40℃，进压为8bar，出压为3bar，收集超滤后的滤液；
（3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入20ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再加80%的乙醇20ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液50ml浸提1h，操作温度为70℃，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆；
（4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为8%。
步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在85℃水浴30min后抽干。
步骤（3）中的离心速度为5000r/min，离心温度为4℃。
步骤（3）中所述的浓缩为在80℃条件下、真空度 -0.085Mpa浓缩到固形物含量为70%的的浓缩浆。
实施例3
一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤：
（1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成40目的粗粉，待用；
（2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂8g，加入4%的碳酸钠溶液15ml超声提取50min，先采用0.05~1um的微孔滤膜过滤，进压为4bar,出压3bar，收集滤液，再将滤液采用截留分子量为900Da的超滤膜进行超孔滤膜过滤，操作温度为39℃，进压为5bar，出压为2bar，收集超滤后的滤液；
（3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入15ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再加75%的乙醇15ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液30ml浸提0.5h，操作温度为65℃，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆；
（4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为6%。
步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在82℃水浴25min后抽干。
步骤（3）中的离心速度为4500r/min，离心温度为4℃。
步骤（3）中所述的浓缩为在60℃条件下、真空度-0.08 Mpa浓缩到固形物含量为50%的的浓缩浆。
以上所述实施例只是本发明的较佳实例，并非来限制本发明实施范围，故凡依本发明申请专利范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均应包括本发明专利申请范围内。
Claims (10)
1.一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成粉状，待用；
（2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂5-10g，加入溶剂10~20ml超声提取，先进行微孔滤膜过滤，收集滤液，再将滤液进行超孔滤膜过滤，收集超滤后的滤液；
（3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入10~20ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再加70%~80%的乙醇10~20ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液20~50ml浸提0.5~1h，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆；
（4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为3%~8%。
2.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的云芝粉末为可过40目的粗粉。
3.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在80~85℃水浴20~30min后抽干。
4.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中所述的溶剂为2%~5%的碳酸钠溶液。
5.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中所述的超声提取时间为45~55min。
6.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中微孔滤膜孔径为0.05~1um，微孔滤膜过滤时的进压为2~6bar,出压为0~5bar。
7.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中超滤选择截留分子量为800~1000Da的超滤膜，操作温度为38~40℃；进压为1~8bar，出压为1~3bar。
8.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中所述的浸提时操作温度为60℃~70℃。
9.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中的离心速度为4000~5000r/min，离心温度为4℃。
10.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中所述的浓缩为在40~80℃条件下、真空度-0.08 ~ -0.085Mpa浓缩到固形物含量为30%~70%的的浓缩浆。
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|---|---|---|---|---|
| CN104473284A (zh) * | 2014-12-31 | 2015-04-01 | 华南师范大学 | 一种云芝多糖功能饮料及其制备方法与应用 |
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| CN105248834A (zh) * | 2015-10-19 | 2016-01-20 | 长沙理工大学 | 一种从莲子磨皮粉中分步提取蛋白质、淀粉的方法 |
| CN109043491A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-12-21 | 广西秀美壮乡能源环保有限公司 | 一种云芝饮片的制备方法 |
| CN110950974A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-04-03 | 吉林大学珠海学院 | 一种云芝提取物的制备方法 |
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