CN104215683A - 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备 - Google Patents

一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备 Download PDF

Info

Publication number
CN104215683A
CN104215683A CN201410455561.0A CN201410455561A CN104215683A CN 104215683 A CN104215683 A CN 104215683A CN 201410455561 A CN201410455561 A CN 201410455561A CN 104215683 A CN104215683 A CN 104215683A
Authority
CN
China
Prior art keywords
blood sample
sample kit
quantitative analysis
preparation
detection
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410455561.0A
Other languages
English (en)
Inventor
成晓亮
郑可嘉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenzhen Institute of quality Medicine Research Co Ltd
Original Assignee
WUHAN QUALITY LIFE TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by WUHAN QUALITY LIFE TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical WUHAN QUALITY LIFE TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201410455561.0A priority Critical patent/CN104215683A/zh
Publication of CN104215683A publication Critical patent/CN104215683A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒的制备，将血液样本放置室温，充分解冻；加入-20度同等体积的混合溶液-基本裂解液，在50度水浴中反应5分钟；离心；收集上清液；基本裂解液为QL3，QL3物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸，此试剂盒制备方法简单、成本较低。

Description

一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备
技术领域
本技术属于分析化学应用领域，具体涉及表面激光解析质谱领域。
背景技术
表面激光解析质谱是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱，其中以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)为最重要的实例，此项发明获得过诺贝尔化学奖。主要由两部分组成：基质辅助激光解吸电离离子源(MALDI)和飞行时间质量分析器(TOF)。MALDI的原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量传递给生物分子，在电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子，而使生物分子电离的过程。因此它是一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比，检测离子。MALDI-TOF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点，为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段。
然而，以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱为首的所有基于表面激光解析的质谱都需要将样品制备在特制靶板上面，其操作是将样品分散在基质分子中并形成晶体。当用激光照射晶体时，基质从激光中吸收能量，样品解吸附，基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离，电离的样品在电场作用下飞过真空的飞行管，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即通过离子的质量电荷之比(M/Z)与离子的飞行时间成正比来分析离子，并测得样品分子的分子量。焦点问题就在于通用的基质分子的分子量在1000-3000da,造成了过量的背景质谱峰。这就决定了所有此类基于表面激光解析的质谱分析只能适用于大分子检测，比如蛋白质，长链多肽，核酸，高分子材料等等，而不能应用于小分子检测(分子量小于1000da)，或者说基于表面激光解析的质谱分析的高灵敏度/高通量等独特的优势无法施展在小分子分析检测上面.而分子量小于1000da的小分子却是对人类最重要的最具应用价值的一类化学产品，例如95％以上的药物小分子，所有的氨基酸，维生素等等和人类生活健康相关的化学物质。
目前现有技术针对小分子检测和筛选还停留在光谱法检测，例如荧光发光检测或者衍生出可以荧光检测的底物，但此类检测要求目标小分子分子结构具有光活性集团，另一弊端就是往往光度法灵敏度较低，检测不到微量的小分子浓度。液相质谱(LC-MS)及气相质谱(GC-MS)的已经开始应用在小分子的检测和高通量筛选。但需要消耗大量的人力和溶剂耗材，而且一个样品从制备到质谱分析再到出结果需要相当长一个过程，根据要求不同，分析一个样品从样品制备到拿到结果需要30-60分钟，远远不能满足现代生物医药发展的高通量筛选要求。
发明内容
发明目的：找到一种制备方法简单、成本较低的样品制备方法，节省开支与时间。
技术方案：一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒，由同等体积的样品与基本裂解液QL3组成，QL3物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸。
一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒的制备，将血液样本放置室温，充分解冻；加入-20度同等体积的混合溶液-基本裂解液；收集上清液；加入基本裂解液QL3经沉淀蛋白，离心后收集上清液；QL3物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸。
优选方案为：QL3物质组成及体积比为：100％乙氰、5％甲酸。
有益效果：1、制备方法简单；2、成本较低。
附图说明
图1检测到异搏定(维拉帕米片)Verapamil的质谱图；
具体实施方式
血液样品制备试剂盒基本裂解液QL3及样品制备方法
将血液样本(单个离心管，96孔多孔板，384孔多孔板)放置室温10分钟，充分解冻。加入-20度同等体积的混合溶液-基本裂解液QL3(QL2物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸)，作用5分钟，并在50度水浴中作用5分钟。3000rmp离心10分钟后，收集上清液。
如图1所示为在血样中检测到异搏定(维拉帕米片)Verapamil的质谱图，我们同时使用MALDI和ESI质谱，并不能检测到该分子。我们的灵敏度已经达到纳摩尔级别。同时通量可达到每日9000个样品的分析处理能力。

Claims (3)

1.一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒，其特征在于，由同等体积的样品与基本裂解液QL3组成，QL3物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸。
2.一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒的制备，其特征在于，将血液样本放置室温，充分解冻；加入-20度同等体积的混合溶液-基本裂解液；收集上清液；加入基本裂解液QL3经沉淀蛋白，离心后收集上清液；QL3物质组成及体积比为：80-100％乙氰，1-7％甲酸。
3.根据权利要求1所述的应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒的制备，其特征在于，QL3物质组成及体积比为：100％乙氰、5％甲酸。
CN201410455561.0A 2014-09-09 2014-09-09 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备 Pending CN104215683A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410455561.0A CN104215683A (zh) 2014-09-09 2014-09-09 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410455561.0A CN104215683A (zh) 2014-09-09 2014-09-09 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104215683A true CN104215683A (zh) 2014-12-17

Family

ID=52097398

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410455561.0A Pending CN104215683A (zh) 2014-09-09 2014-09-09 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104215683A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130236977A1 (en) * 2010-05-24 2013-09-12 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for plasma peptide analysis
CN103616450A (zh) * 2013-11-29 2014-03-05 湖州市中心医院 一种肺癌患者血清特异性代谢产物谱及其建立方法
CN103940918A (zh) * 2013-01-23 2014-07-23 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 一种同时检测动物血浆中青蒿琥酯及二氢青蒿素含量的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130236977A1 (en) * 2010-05-24 2013-09-12 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for plasma peptide analysis
CN103940918A (zh) * 2013-01-23 2014-07-23 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 一种同时检测动物血浆中青蒿琥酯及二氢青蒿素含量的方法
CN103616450A (zh) * 2013-11-29 2014-03-05 湖州市中心医院 一种肺癌患者血清特异性代谢产物谱及其建立方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MARIA ZELLNER 等: "Quantitative validation of different protein precipitation methods in proteome analysis of blood platelets", 《ELECTROPHORESIS》 *
李建旺 等: "药代研究中MAS法、蛋白沉淀法和固相萃取等前处理方法的比较", 《质谱学报》 *
王增仙: "高效液相色谱-质谱法测定血浆中槲皮素及其主要代谢产物", 《中成药》 *
赵龙山 等: "酸化沉淀蛋白-超快速液相色谱-串联质谱法测定肝损伤大鼠血浆中的头孢呋辛", 《色谱》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zhou et al. Strategies for large-scale targeted metabolomics quantification by liquid chromatography-mass spectrometry
Bennett et al. Contrast-enhanced differential mobility-desorption electrospray ionization-mass spectrometry imaging of biological tissues
CN109085278B (zh) 液相色谱串联质谱法同时检测多种氨基酸的试剂盒及其应用
Thomas et al. Dried blood spots (DBS) for doping control analysis
JP2022517161A (ja) マイクロバイオータ関連代謝物の検出および定量のための質量分析検定法
Qureshi et al. Determination of carbohydrates in medicinal plants‐comparison between TLC, mf‐MELDI‐MS and GC‐MS
CN102680565B (zh) 同位素稀释电喷雾萃取电离串联质谱快速检测尿肌酐的分析方法
WO2014152502A1 (en) Method for determining derivatized analytes in a separated biological fluid
Pan et al. Comparison of different calibration approaches for chloramphenicol quantification in chicken muscle by ultra-high pressure liquid chromatography tandem mass spectrometry
CN110044998B (zh) 通过质谱法定量他莫昔芬及其代谢物
CN104833761B (zh) 一种快速分析样品中的糖类化合物的方法
CN105092733B (zh) Lc‑ms测试物中不挥发性缓冲盐含量的降低方法和装置
Kunimura et al. Trace Determination of Cyanocobalamin (Vitamin B12) by Analyzing Cobalt Using a Portable Total-Reflection X-ray Fluorescence Spectrometer
CN104215683A (zh) 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选血液样品试剂盒及其制备
CN101210928B (zh) 用功能糖芯片及飞行质谱仪分析糖结合蛋白的方法
CN112051343B (zh) 一种测定抗生素残留的方法
CN104297329B (zh) 一种应用于脂肪酸分子定性定量分析检测和高通量筛选增强试剂盒及其制备
CN104237425A (zh) 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选常规水容易样品试剂盒及其制备
CN104215684A (zh) 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选细胞培养液样品试剂盒及其制备
CN104297330A (zh) 一种应用于三聚氰胺分子定性定量分析检测和高通量筛选增强试剂盒及其制备
CN104215685B (zh) 一种应用于污染物小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强试剂盒及其制备
CN104215682B (zh) 一种应用于氨基酸分子定性定量分析检测和高通量筛选试剂盒及其制备
CN104237367A (zh) 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选微生物培养液样品试剂盒及其制备
CN104297331A (zh) 一种应用于胆碱及脂类分子定性定量分析检测和高通量筛选增强试剂盒及其制备
Jones et al. Metabolite profiling by direct analysis in real-time mass spectrometry

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20160928

Address after: KELONG street 518054 Shenzhen Road, Guangdong province Nanshan District Guangdong No. 5 Xunmei Technology Plaza Building 3 13A

Applicant after: Shenzhen Institute of quality Medicine Research Co Ltd

Address before: 430040 Hubei city in Wuhan Province seven road Dongxihu Strait City two building 1 303 venture

Applicant before: WUHAN QUALITY LIFE TECHNOLOGY CO., LTD.

RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20141217

RJ01 Rejection of invention patent application after publication