CN104211592A

CN104211592A - 一种玉米亚油酸的提取方法及其应用

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Publication number: CN104211592A
Application number: CN201410445540.0A
Authority: CN
Inventors: 张金芳; 杨存
Original assignee: NANJING BIAOKE BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: NANJING BIAOKE BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2014-09-04
Filing date: 2014-09-04
Publication date: 2014-12-17

Abstract

本发明涉及一种玉米亚油酸的提取方法及其应用。其工艺步骤为：将玉米干燥、粉碎、过筛、用水浸泡完成后，装入索氏提取器中利用溶剂回流和虹吸原理对其进行醇提，最后采用蒸馏的方法得到精制玉米亚油酸样品。采用本发明制备玉米亚油酸，操作过程简单，成本消耗低，所得产品纯度高，易于实现工业化生产。本发明所述的玉米亚油酸尤其适合在制备抗肿瘤产品中的应用，所述的产品包括药品、保健品。

Description

一种玉米亚油酸的提取方法及其应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种玉米亚油酸的提取方法，以及所得玉米亚油酸在制备抗肿瘤产品中的应用。

背景技术

癌症是一大类恶性肿瘤的统称。癌细胞的特点是无限制、无止境地增生，使患者体内的营养物质被大量消耗；癌细胞释放出多种毒素，使人体产生一系列症状；癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖，导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。与之相对的有良性肿瘤，良性肿瘤则容易清除干净，一般不转移、不复发，对器官、组织只有挤压和阻塞作用，但癌症（恶性肿瘤）还可破坏组织、器官的结构和功能，引起坏死出血合并感染，患者最终由于器官功能衰竭而死亡。到了科学高速发展的今天，我们有理由相信癌症并非不治之症。致力于自然医学研究的医学专家们研究发现：负离子对抑制癌细胞转移有令人鼓舞的效果，重要的是利用自然因子负离子对癌症患者治疗对机体无任何损害，没有任何毒副作用。

癌症严重威胁着人类的生命，是当今世界上大多数国家的主要死因之一。据世界卫生组织统计，全世界每年死于癌症的患者约500万，因此癌症的治疗和预防任务十分艰巨。

玉米（学名：Zea mays），中国第一大粮食作物，在生物学范围，玉米是一种碳4植物，雌雄同柱的。主产区位于世界第三大玉米带——中国松辽平原玉米带。玉米总的种植面积约1249.35平方公里，亦称玉蜀黍、包谷(包谷棒）、苞米、棒子。粤语称为粟米，闽南语称作番麦。是一年生禾本科草本植物，是重要的粮食作物和重要的饲料来源，也是全世界总产量最高的粮食作物。中国种植玉米的时间较晚，由明代从麦加朝觐的穆斯林传入中国。

玉米中亚油酸的含量达到2%，是谷实类饲料中含量最高者，玉米的蛋白质含量约为8.6%左右，且氨基酸不平衡，赖氨酸、色氨酸和蛋氨酸的含量不足，矿物质约80%存在于胚部，钙含量很少，约0.02%；磷约含0.25%，但其中约有63%的磷以植酸磷的形式存在，单胃动物的利用率很低，其它矿物元素的含量也较低，脂溶性维生素中维生素E较多，约为20mg/kg，黄玉米中含有较多的胡萝卜素，维生素D和K几乎没有。黄玉米中所含叶黄素平均为22mg/kg，这是黄玉米的特点之一，它对蛋黄、胫、爪等部位着色有重要意义。

现代研究证实，玉米中含有丰富的不饱和脂肪酸，尤其是亚油酸的含量高达60%以上，它和玉米胚芽中的维生素E协同作用，可降低血液胆固醇浓度并防止其沉积于血管壁。因此，玉米对冠心病、动脉粥样硬化、高脂血症及高血压等都有一定的预防和治疗作用。维生素E还可促进人体细胞分裂，延缓衰老。玉米中还含有一种长寿因子----谷胱甘肽，它在硒的参与下，生成谷光甘肽氧化酶，具有恢复青春，延缓衰老的功能。玉米中含的硒和镁有防癌抗癌作用，硒能加速体内过氧化物的分解，使恶性肿瘤得不到分子氧的供应而受到抑制。镁一方面也能抑制癌细胞的发展，另一方面能促使体内废物排出体外，这对防癌也有重要意义。其含有的谷氨酸有一定健脑功能。

德国营养保健协会的一项研究表明，在所有主食中，玉米的营养价值和保健作用是最高的。可预防心脏病和癌症，在这项持续一年的研究中，专家们对玉米、稻米、小麦等多种主食，进行了营养价值和保健作用的各项指标对比。结果发现，玉米中的维生素含量非常高，为稻米、小麦的5—10倍。同时，玉米中含有大量的营养保健物质也让专家们感到惊喜。除了含有碳水化合物、蛋白质、脂肪、胡萝卜素外，玉米中还含有异麦芽低聚糖、核黄素、维生素等营养物质。这些物质对预防心脏病、癌症等疾病有很大的好处。

研究还显示，特种玉米的营养价值要高于普通玉米。比如，甜玉米的蛋白质、植物油及维生素含量就比普通玉米高1—2倍；“生命元素”硒的含量则高8—10倍；其所含有的17种氨基酸中，有13种高于普通玉米。此外，鲜玉米的水分、活性物、维生素等各种营养成分也比老熟玉米高很多，因为在贮存过程中，玉米的营养物质含量会快速下降。负责这项研究的德国著名营养学家拉赫曼教授指出，在当今被证实的最有效的50多种营养保健物质中，玉米含有钙、谷胱甘肽、维生素、镁、硒、维生素E和脂肪酸。经测定，每100克玉米能提供近300毫克的钙，几乎与乳制品中所含的钙差不多。丰富的钙可起到降血压的功效。如果每天摄入1克钙，6周后血压能降低9%。此外，玉米中所含的胡萝卜素，被人体吸收后能转化为维生素A，它具有防癌作用；植物纤维素能加速致癌物质和其他毒物的排出；天然维生素E则有促进细胞分裂、延缓衰老、降低血清胆固醇、防止皮肤病变的功能，还能减轻动脉硬化和脑功能衰退。研究人员指出，玉米含有的黄体素、玉米黄质可以对抗眼睛老化。此外，多吃玉米还能抑制抗癌药物对人体的副作用，刺激大脑细胞，增强人的脑力和记忆力。

采用高科技生物工程技术，对玉米进行淀粉糖深加工，提炼出玉米的营养物质-----高能寡糖。异麦芽低聚糖是高能寡糖里最优异的品种，它是淀粉糖的深加工产品，加工工艺是在高温高压下通过脱色、离子交换、浓缩而成的。一是提供人体所需养料；二是帮助人体内有益菌快速繁殖，增强抵抗力。尤其对肠道菌群健康有帮助。

玉米是粗粮中的保健佳品，对人体的健康颇为有利：玉米中的维生素B6、烟酸等成分，具有刺激胃肠蠕动、加速粪便排泄的特性，可防治便秘、胃病、肠炎、肠癌等。玉米富含维生素C、异麦芽低聚糖等，有长寿、美容作用。玉米胚尖所含的营养物质有增强人体新陈代谢、调整神经系统功能。能起到使皮肤细嫩光滑，抑制、延缓皱纹产生作用。玉米有调中开胃及降血脂、降低血清胆固醇的功效。中美洲印第安人不易患高血压与他们主要食用玉米有关。

亚油酸，一种脂肪酸，分子式： C₁₈H₃₂O₂，分子量： 280.44，分子结构式：CH3（CH2）4CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH，学名顺，顺-9，12-十八（碳）二烯酸。亚油酸与其他脂肪酸一起，以甘油酯的形式存在于动植物油脂中。

亚油酸是人体不能合成，或是合成的量远不能满足需要的脂肪酸，叫做必需脂肪酸。亚油酸是公认的一种必需脂肪酸。由于亚油酸能降低血液胆固醇，预防动脉粥样硬化而倍受重视。研究发现，胆固醇必须与亚油酸结合后，才能在体内进行正常的运转和代谢。如果缺乏亚油酸，胆固醇就会与一些饱和脂肪酸结合，发生代谢障碍，在血管壁上沉积下来，逐步形成动脉粥样硬化，引发心脑血管疾病。亚油酸具有降低血脂、软化血管、降低血压、促进微循环的作用，可预防或减少心血管病的发病率，特别是对高血压、高血脂、心绞痛、冠心病、动脉粥样硬化、老年性肥胖症等的防治极为有利，能起到防止人体血清胆固醇在血管壁的沉积，有“血管清道夫”的美誉，具有防治动脉粥样硬化及心血管疾病的保健效果。

尽管玉米在人类食品方面已获得广泛应用，但有关玉米在抗肿瘤药物中的应用很少见报道。

发明内容

本发明的目的是为了公开一种玉米亚油酸的提取方法以及亚油酸在抗肿瘤产品中的应用，从而使得玉米的应用得到了进一步的扩大。

为实现上述目的，玉米亚油酸的提取方法采用以下技术方案：

（1）将玉米粒放在温度为80-100℃的烘箱中干燥2-4h，粉碎，过20-40目筛；

（2）称取一定量的玉米粉末置于提取器中，加水浸泡1-2h，过滤，滤渣备用；

（3）将步骤（2）所得的滤渣装入索氏提取器中利用溶剂回流和虹吸的原理对其进行醇提，得到玉米亚油酸粗提液；

（4）醇提结束后，采用蒸馏的方法将所得的玉米亚油酸粗提液进行蒸馏，得到精制玉米亚油酸。

步骤（2）中所述的玉米粉末与水的固液比为1：3-10。

步骤（3）中所述的醇为乙醇，滤渣与乙醇的料液比为1：5-10。

步骤（3）中所述的索氏提取的温度为75-80℃，采用水浴加热。

步骤（3）中所述的索氏提取过程为先将样品回流提取1-2次，最后将其浸泡在溶剂中20-24h，再继续抽提。

步骤（4）中所述的蒸馏温度为110-120℃。

本发明的另一目的在于提供一种玉米亚油酸在抗肿瘤产品中的应用。

本发明制备的玉米亚油酸的药理活性通过以下药理实验得到了验证。

选用人大肠癌（HT-29）细胞系对数期细胞，用0.3%的胰蛋白酶分解细胞后，用含10%胎牛血清的1640培养液中配成单个细胞悬浮液，接种到96孔培养板中，每孔200μL，置37℃，5%CO₂的条件下培养48小时，倒置显微镜下观察。（2）设置实验组和对照组，实验组换新的含不同浓度玉米亚油酸培养基（玉米亚油酸提取物的浓度为1.71、0.76、0.41、0.08、0.0020mg/ml），对照组则换含等体积溶剂的培养基，每组设3组平行孔，置37℃，5%CO₂的条件下培养2~4天，离心（1000转，5min），弃去上清液。（3）每孔加入100μL新鲜配置的含0.15mg/ml MTT的无血清培养基。37℃继续培养3h。小心弃去上清液，并加入200μLDMSO，用微型超声振荡器混匀后，在酶标仪上以实验波长为570nm测定光密度值。并计算不同药剂量对肿瘤细胞的抑制率。结果见表一。

肿瘤细胞抑制率=（1-OD实验/OD对照）*100%

表一：玉米亚油酸对人大肠癌（HT-29）细胞的影响

玉米亚油酸的浓度（mg/ml）	抑制率（%）
		1.71	76.03
0.76	78.21
		0.41	72.41
0.08	47.23
		0.0020	6.85

由表一数据可知：玉米亚油酸提取物对人大肠癌（HT-29）细胞系有明显的生长抑制作用，其可在看肿瘤产品中得到应用。

本发明所制备的玉米亚油酸活性成分与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂或辅剂结合，制成适合人或动物适合的剂型。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

玉米亚油酸的提取

将玉米粒放在温度为80℃的烘箱中干燥2h，用粉碎机粉碎，过20目筛。称取20克玉米粉末与提取器中，加入60毫升的蒸馏水浸泡1h，过滤，将所得滤渣装入索氏提取器中，随即加入100毫升的乙醇，在温度为75℃的水浴的条件下，利用溶剂回流和虹吸的原理对其进行醇提。在索氏提取器中先将样品回流1次，停止加热和，将其浸泡在乙醇中20h后再继续抽提，直到看见索氏提取器中提取器里面的液体颜色较淡时，停止加热，收集玉米亚油酸粗提液。醇提结束后，在温度为110℃的条件下采用蒸馏的方式对玉米亚油酸粗提液进行纯化，即得亚油酸液体。经检测所得样品中亚油酸的含量为94.13%，亚油酸的提取率为59.14%。

实施例2：

玉米亚油酸的提取

将玉米粒放在温度为90℃的烘箱中干燥3h，用粉碎机粉碎，过40目筛。称取20克玉米粉末与提取器中，加入100毫升的蒸馏水浸泡1.5h，过滤，将所得滤渣装入索氏提取器中，随即加入120毫升的乙醇，在温度为77℃的水浴的条件下，利用溶剂回流和虹吸的原理对其进行醇提。在索氏提取器中先将样品回流2次，停止加热和，将其浸泡在乙醇中22h后再继续抽提，直到看见索氏提取器中提取器里面的液体颜色较淡时，停止加热，收集玉米亚油酸粗提液。醇提结束后，在温度为115℃的条件下采用蒸馏的方式对玉米亚油酸粗提液进行纯化，即得亚油酸液体。经检测所得样品中亚油酸的含量为94.73%，亚油酸的提取率为59.18%。

实施例3：

玉米亚油酸的提取

将玉米粒放在温度为100℃的烘箱中干燥4h，用粉碎机粉碎，过40目筛。称取20克玉米粉末与提取器中，加入200毫升的蒸馏水浸泡2h，过滤，将所得滤渣装入索氏提取器中，随即加入200毫升的乙醇，在温度为80℃的水浴的条件下，利用溶剂回流和虹吸的原理对其进行醇提。在索氏提取器中先将样品回流2次，停止加热和，将其浸泡在乙醇中24h后再继续抽提，直到看见索氏提取器中提取器里面的液体颜色较淡时，停止加热，收集玉米亚油酸粗提液。醇提结束后，在温度为120℃的条件下采用蒸馏的方式对玉米亚油酸粗提液进行纯化，即得亚油酸液体。经检测所得样品中亚油酸的含量为95.23%，亚油酸的提取率为60.14%。

实施例4：

玉米亚油酸制成冻干粉针剂

在通过上述方法制得的玉米亚油酸活性成分中加入甘露醇、葡萄糖作为支撑剂，制成冻干粉针剂。

Claims

1. 一种玉米亚油酸的提取方法，其特征在于通过如下步骤制备：

（4）醇提结束后，采用蒸馏的方法将所得的亚油酸粗提液进行蒸馏，得到精制玉米亚油酸。

2. 根据权利要求1所述的一种玉米亚油酸的提取方法，其特征在于：步骤（2）中所述的玉米粉末与水的固液比为1：3-10。

3. 根据权利要求1所述的一种玉米亚油酸的提取方法，其特征在于：步骤（3）中所述的醇为乙醇，滤渣与乙醇的料液比为1：5-10。

4. 根据权利要求1所述的一种玉米亚油酸的提取方法，其特征在于：步骤（3）中所述的索氏提取的温度为75-80℃，为水浴加热。

5. 根据权利要求1所述的一种玉米亚油酸的提取方法，其特征在于：步骤（3）中所述的索氏提取过程为先将样品回流提取1-2次，最后将其浸泡在溶剂中20-24h，再继续抽提。

6. 根据权利要求1所述的一种玉米亚油酸的提取方法，其特征在于：步骤（4）中所述的蒸馏温度为110-120℃。

7. 根据权利要求1~6所述方法制备的玉米亚油酸提取物在制备抗肿瘤产品中的应用。

8. 根据权利要求7所述的抗肿瘤产品包括药品、保健品。