CN104198607B - 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 - Google Patents
一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104198607B CN104198607B CN201410456542.XA CN201410456542A CN104198607B CN 104198607 B CN104198607 B CN 104198607B CN 201410456542 A CN201410456542 A CN 201410456542A CN 104198607 B CN104198607 B CN 104198607B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sample
- solution
- sevoflurane
- volatile anesthetic
- concentration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本方法公开了一种自动顶空气相色谱法测定挥发性麻醉药浓度的方法。该方法适用于挥发性麻醉药，例如甲氧氟烷、安氟烷、异氟烷、七氟烷和地氟烷在样品中的浓度测定。样品可以为含有待测物的溶液，也可以为含有待测物的离体生物学样品，如血液、尿液、组织液中。该方法简便、快速、准确，适用于实验室样品测定分析，也适用临床监测大量样品结果测定。
Description
技术领域
本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种用自动顶空气相色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法。
背景技术
挥发性麻醉药与一般静脉麻醉药最后目的完全一样，但在吸入途径给药时，首先必须在麻醉环路系统内达到一定浓度以后，经过肺以浓度分压差吸收入血中，再经循环系统分布至周围组织，到达中枢神经系统发挥其麻醉作用，所以说测定血液中挥发性麻醉药如甲氧氟烷、安氟烷、异氟烷、七氟烷和地氟烷等的血药浓度是非常关键的指标。
刘进、刘明政等(二次平衡法测定吸入麻醉药液/气分配系数.《中华麻醉药学杂志》，1996，16(12)：604～607.)公开了一种用注射器顶空二次平衡法测定吸入麻醉药浓度的方法。该方法首先需配制及校正麻醉药标准气如异氟烷标准气，过程包括1、用注射器抽取血液5～7ml；2、在37℃恒温水浴条件下振摇水浴1小时使异氟烷在血、气两相中达到第一次平衡(共约2.5小时)；3、在37℃恒温水浴条件下振摇水浴使异氟烷在血、气两相中达到第二次平衡(1～1.5小时)；4、通过气相色谱仪测定两次平衡的气相中的异氟烷浓度，记录两次平衡前后注射器内气相和液相的体积；5、计算血中异氟烷浓度。
该法测量准确，同时可计算出麻醉药的液/气分配系数，但样品前处理过程耗时较长，两次平衡时间累计3.5小时，完全测定一个样品需时4小时，测定效率低，且在实际运用过程中，血制样品无法在注射器内长久储存，血液变性后会对测定的结果有影响，故该方法不适合进行大批量样品的测定处理，所以无法满足临床监测快速测定和批量处理的需要。
发明内容
本发明提供了一种用自动顶空气相色谱法测定挥发性麻醉药浓度的方法。该方法克服了现有技术中标准品制备及样品处理繁琐、测定时间长、存储不便的缺点，提供了一种简便，快速，高效，准确，且能广泛处理大批样品的挥发性麻醉药浓度测定的方法及在临床监测中的应用。
本发明的目的是提供一种用自动顶空气相色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法。
具体地说，本发明提供了一种测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法，其采用自动顶空气相色谱法对包含挥发性麻醉药的样品进行检测，这里，所述的样品为包含挥发性麻醉药的溶液，可选自含有挥发性麻醉药的有机溶剂和/或无机溶剂的溶液，或者离体的生物学样品，例如血液、尿液或组织液。
在本发明的实施方案中，所述的挥发性麻醉药选自甲氧氟烷、安氟烷、异氟烷、七氟烷或地氟烷。
在本发明的实施方案中，所述的自动顶空气相色谱法包括采用自动顶空进样器进样。
在本发明的优选实施方案中，本发明提供了一种测定样品中挥发性麻醉药浓度方法，其采用自动顶空气相色谱法，包括如下步骤：
(1)色谱条件与系统适用性试验
实验仪器为Agilent6890N气相色谱仪；色谱柱为极性毛细管柱，采用升序升温；进样口温度为100～200℃，检测器为氢火焰离子化检测器(FID)，检查温度200～300℃；载气为氮气、氢气或氦气；待测挥发性麻醉药的色谱峰与杂质峰分离度大于2.5；自动顶空进样，85℃保温30min，定量环与传输线温度90～150℃，进样量0.5～1ml；
(2)标准曲线溶液的制备
取挥发性麻醉药适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成储备液，并用储备液稀释成6～10份不同浓度溶液作为标准曲线溶液，分别取0.5～1ml置顶空瓶，封瓶即得；
(3)供试品溶液的制备取待测溶液0.5～1ml置顶空瓶，封瓶即得；
(4)测定分别取标准曲线溶液与供试品溶液，用自动顶空进样器注入气相色谱仪测定、计算，即得。
在本发明的实施方案中，其中，步骤(1)中色谱柱为极性毛细管柱，优选DB-WAX等以聚乙二醇为填充柱的毛细管柱。
在本发明的实施方案中，其中，步骤(1)中优选进样口温度为100～200℃，检测器为氢火焰离子化检测器(FID)，检测器温度200～300℃；采用升序升温；优选起始40～60℃维持2～10min，以5～10℃/min速度升至150～200℃，维持2～10min。
在本发明的实施方案中，其中，步骤(1)中优选的载气为氮气，流速为1.0～3.0ml/min，分流比为1∶1～1∶100。
在本发明的实施方案中，其中，步骤(2)中溶剂优选为水或含有体积比为10～100％的N，N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜的水溶液。
在本发明的实施方案中，其中，步骤(4)中优选的顶空预热条件为70～90℃保温20～30min。
本发明提供的检测方法，用自动顶空气相色谱法测定含有挥发性麻醉药样品的标准值和测量值(即标准曲线和样品曲线)，计算出样品中挥发性麻醉药浓度，及该方法在临床监测和实验室分析中的应用
本发明的有益技术效果：
本发明为挥发性麻醉药的浓度测定提供了简便、快速，准确的通用方法。
1、极大简化了样品处理过程，仅需在试验中抽取0.5～1ml血液或其他液体样品至顶空瓶中压盖密封即可。
2、标准曲线由配制挥发性麻醉药标准气该成较易稀释配制的标准液，结果同样精确。
3、极大缩短了样品检测时间，如用注射器二次平衡做一个样品最低需耗时3小时，且一天同时测定样品受水浴箱限制不可能批量进行，而用自动顶空进样一天可测定30～40个样品，且完全自动测定无需手动进样。
4、使用顶空自动进样，可以避免生物样品带入的杂质对分析造成干扰，减少对色谱柱及进样口的污染从而确保分析结果的准确无误。
5、经稳定性考察，挥发性麻醉药如异氟烷能在顶空瓶中可保存7天之久，储存方便，结果见表1。
表1异氟烷样品常温25℃条件下15天留样稳定性考察
表1结果表明加入异氟烷的临床全血样品，在7天常温25℃条件下异氟烷样品稳定性 良好，15天略微降低，但依然有90％以上保持稳定。因此临床取样时只需及时将样品加入顶空瓶中压盖密封保存，可明显延长样品待测时间。
本发明提供的检测方法为挥发性麻醉药的临床监测提供了新的技术手段。
附图说明
图1标准曲线、回归方程和相关系数
以挥发性麻醉药异氟烷峰面积(Y轴)对浓度(X轴)线性回归，绘制标准曲线，得出回归方程，相关系数大于0.995，符合《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》。
图2人全血中异氟烷气相色谱分析图谱
精密量取1ml人体全血，定量加入已知浓度的异氟烷，进行气相色谱分析，结果显示异氟烷保留时间为7.199分钟，与血液中其它杂质峰分离良好，响应灵敏。用外标法通过图1所示回归方程计算出样品中异氟烷浓度。
具体实施方式
结合具体实例对本发明做进一步的阐述，但不对其有任何限制。实施例1血液中挥发性麻醉药浓度的测定
(1)色谱条件Agilent6890N气相色谱仪，DB-WAX毛细管色谱柱，进样口温度160℃，载气为高纯氮，柱流量为2ml/min。程序升温，起始60℃维持2min，以10℃/min速度升至200℃，维持2min，共运行18min。检测器为火焰离子化检测器(FID)，检测器温度为300℃。自动顶空进样，85℃保温30min，定量环温度90℃，传输线温度120℃，进样量1ml。(色谱条件一样)
(2)标准储备液配制取七氟烷对照品适量，用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解并稀释，制成每1ml含约14mg的溶液，作为标准储备液；临用时现配。
(3)样品处理与测定用七氟烷标准储备液倍比稀释9次，各取100μl分别加至已加入1ml水的顶空瓶中压盖密封，即为七氟烷标准曲线溶液。以七氟烷峰面积对浓度线性回归(加权回归)，得出回归方程。精密量取待测血样1ml至顶空瓶中压盖密封，平行6份，测得的样品七氟烷峰面积通过回归方程计算出样品中七氟烷的浓度。
实验结果见表2
表2
实施例2用自动顶空进样法与注射器顶空二次平衡法测定同一全血样品的异氟烷浓度。
实验操作
取两份空白全血各20ml，分别加入一定量异氟烷对照品，待常温25℃平衡一天后，得到含异氟烷的血样1和血样2，抽取血样1，2使用注射器二次平衡法，测定异氟烷浓度；另取血样1，2各1ml加入到顶空瓶中压盖密封，用本法测定异氟烷浓度。
实验结果
表3自动顶空进样法与注射器顶空二次平衡法测定同一全血样品的异氟烷浓度
(其中准确度为自动顶空进样法测定值/注射器顶空二次平衡法测定值)
表3结果显示自动顶空进样法与注射器顶空二次平衡法测定同一全血样品的异氟烷浓度几乎一致，准确度较高。
实施例3DMF水溶液中挥发性麻醉药浓度的测定
取挥发性麻醉药适量，精密称定，加入DMF水溶液溶解并稀释制成储备液，并用储备液倍比稀释成6～10份不同浓度溶液作为待测溶液，分别取0.5～1ml置顶空瓶，封瓶；在实施例1色谱条件下测定不同浓度样品的峰面积进行比较。以挥发性麻醉药异氟烷峰面积(Y轴)对浓度(X轴)线性回归，绘制标准曲线，得出回归方程
Y＝1.5969X+4.1027 R2＝0.9994结果说明线性良好，符合《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》。见图1。
Claims (3)
1.一种样品中挥发性麻醉药浓度的测定方法，其特征在于：采用自动顶空气相色谱法对包含挥发性麻醉药的样品进行检测，所述的样品为包含挥发性麻醉药的溶液，选自含有挥发性麻醉药的有机溶剂和/或无机溶剂的溶液，或者离体的生物学样品；挥发性麻醉药选自甲氧氟烷、安氟烷、异氟烷、七氟烷或地氟烷；
包括如下步骤：
(1)色谱条件与系统适用性试验
检测仪为Agilent6890N气相色谱仪；色谱柱为DB-WAX聚乙二醇毛细管柱，采用程序升温；进样口温度为100～200℃，载气为氮气、氢气或氦气；待测挥发性麻醉药的色谱峰与杂质峰分离度应大于2.5；自动顶空进样；流速为1.0～3.0mL/min，分流比为1∶1～1∶100；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度200～300℃；采用升序升温；起始40～60℃维持2～10min，以5～10℃/min速度升至150～200℃，维持2～10min
(2)标准曲线溶液的制备
取挥发性麻醉药适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成储备液，并用储备液稀释成6～10份不同浓度溶液作为标准曲线溶液，分别取0.5～1mL置顶空瓶，封瓶即得；溶剂选自水或含有体积比为10～100％N，N-二甲基甲酰胺或者二甲基亚砜的水溶液；
(3)供试品溶液的制备
取待测溶液0.5～1mL置顶空瓶，封瓶即得；
(4)测定
分别取标准曲线溶液与供试品溶液，用自动顶空进样器注入气相色谱仪测定、计算，即得；顶空预热方式为70～90℃，保温20～30min。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：所述离体的生物学样品为血液、尿液或组织液。
3.一种血液样品中七氟烷浓度的测定方法，其特征在于：
(1)色谱条件：Agilent6890N气相色谱仪，DB-WAX毛细管色谱柱，进样口温度160℃，载气为高纯氮，柱流量为2mL/min；程序升温，起始60℃维持2min，以10℃/min速度升至200℃，维持2min，共运行18min；检测器为火焰离子化检测器，检测器温度为300℃，自动顶空进样，85℃保温30min，定量环温度90℃，传输线温度120℃，进样量1mL；
(2)标准储备液配制
取七氟烷对照品适量，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀释，制成每1mL含14mg的溶液，作为标准储备液；
(3)样品处理与测定
用七氟烷标准储备液倍比稀释9次，各取100μl分别加至已加入1mL水的顶空瓶中压盖密封，即为七氟烷标准曲线溶液；以七氟烷峰面积对浓度线性回归，得出回归方程；精密量取待测血样1mL至顶空瓶中压盖密封，平行6份，测得的样品七氟烷峰面积通过回归方程计算出样品中七氟烷的浓度。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2010106005655A CN102175780A (zh) | 2010-12-16 | 2010-12-16 | 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2010106005655A Division CN102175780A (zh) | 2010-12-16 | 2010-12-16 | 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104198607A CN104198607A (zh) | 2014-12-10 |
| CN104198607B true CN104198607B (zh) | 2015-09-09 |
Family
ID=44518986
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410456542.XA Active CN104198607B (zh) | 2010-12-16 | 2010-12-16 | 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 |
| CN2010106005655A Pending CN102175780A (zh) | 2010-12-16 | 2010-12-16 | 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2010106005655A Pending CN102175780A (zh) | 2010-12-16 | 2010-12-16 | 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (2) | CN104198607B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109470807B (zh) * | 2018-11-07 | 2021-01-26 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种麻醉废气七氟烷人体吸收因子的检测方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR814927A (fr) * | 1936-03-17 | 1937-07-02 | Perfectionnements aux poupées ou aux automates à deux pieds | |
| DE4317139A1 (de) * | 1993-05-21 | 1994-11-24 | Volker Prof Dr Schurig | Verfahren zur präparativen gaschromatographischen Enantiomerentrennung von Inhalationsanästhektika (Enfluran) an Cyclodextrinderivaten in Polysiloxanlösung |
| JP2865554B2 (ja) * | 1994-04-08 | 1999-03-08 | セントラル硝子株式会社 | フルオロメチル−１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロイソプロピルエーテルのガスクロマトグラフ分析 |
| CZ2006444A3 (cs) * | 2004-01-05 | 2007-02-07 | Halocarbon Products Corporation | Chromatografický postup analýzy sevofluranu behemprípravy a konecného sevofluranu |
| CN101393196B (zh) * | 2008-10-17 | 2013-06-05 | 复旦大学附属华山医院 | 一种同时测定人血浆中多种局部麻醉药物浓度的方法 |
-
2010
- 2010-12-16 CN CN201410456542.XA patent/CN104198607B/zh active Active
- 2010-12-16 CN CN2010106005655A patent/CN102175780A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104198607A (zh) | 2014-12-10 |
| CN102175780A (zh) | 2011-09-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grossherr et al. | Propofol concentration in exhaled air and arterial plasma in mechanically ventilated patients undergoing cardiac surgery | |
| CN102288696B (zh) | 一种测定百草枯血药浓度的方法 | |
| CN101144802A (zh) | 莪术油的分析方法 | |
| CN103901123A (zh) | 一种检测热毒宁注射液中高分子物质的方法 | |
| Lockwood et al. | Effect of temperature on the solubility of desflurane, sevoflurane, enflurane and halothane in blood. | |
| CN104198607B (zh) | 一种色谱法测定样品中挥发性麻醉药浓度的方法 | |
| CN105929045A (zh) | 一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法 | |
| CN106198819B (zh) | 顶空气相色谱法测定西格列汀原料药中残留溶剂的方法 | |
| CN104502491B (zh) | 一种顶空进样测定原料药奥芬达唑溶剂残留的方法 | |
| Maurer et al. | Validation of liquid and gaseous calibration techniques for quantification of propofol in breath with sorbent tube Thermal Desorption System GC–MS | |
| CN106018625A (zh) | 一种艾条中桉油精检测方法 | |
| Butler et al. | Gas chromatography as a method for estimating concentrations of volatile anaesthetics in blood | |
| CN106124682A (zh) | 一种刺五加注射液的成分检验方法 | |
| CN105158348A (zh) | 利用气相色谱法对莪术油中五种有效成分测定的方法 | |
| Bourdeaux et al. | Simple assay of plasma sevoflurane and its metabolite hexafluoroisopropanol by headspace GC–MS | |
| CN108398497A (zh) | 一种三(壬基酚)亚磷酸酯的高效液相色谱检测方法 | |
| Ali et al. | Determination of the transplacental transfer of paclitaxel and antipyrine by high performance liquid chromatography coupled with photodiode array detector | |
| CN104965031B (zh) | 复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量测定方法 | |
| CN105628807B (zh) | 一种1‑Boc‑4‑氨基哌啶的质量检测方法 | |
| CN103512961B (zh) | 一种测定生物样品中游离分析物的方法及测定药物蛋白结合率的方法 | |
| CN107271586A (zh) | 一种利伐沙班中间体中残留溶剂残留量的分析方法 | |
| CN102478551B (zh) | 一种测定土荆芥挥发油中有效成分含量的方法 | |
| CN102590369B (zh) | 一种红花注射液中大分子物质的检测方法 | |
| CN105445396A (zh) | 一种制剂中乙醇残留量检测方法 | |
| CN105403635B (zh) | 丙二醇中残留溶剂三氯乙烯的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |