CN104188955A

CN104188955A - 万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用

Info

Publication number: CN104188955A
Application number: CN201410466548.5A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2014-09-15
Filing date: 2014-09-15
Publication date: 2014-12-10

Abstract

本发明公开了一种万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用，通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察万寿菊素的抗肿瘤作用，结果表明万寿菊素对肺癌和结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。将万寿菊素与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。

Description

万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明属于医药领域，涉及万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

母菊主产于我国新疆北部和西部。生于河谷旷野、田边。北京和上海庭园有栽培，供观赏。欧洲、亚洲北部和西部也有分布。母菊味微苦、甘香，明目、退肝火，治疗失眠，降低血压，可增强活力、提神；增强记忆力、降低胆固醇；祛痰止咳，可有效缓解支气管炎及气喘，可舒缓头痛、偏头痛或感冒引起的肌肉痛，对中和胃酸、舒缓神经有帮助；可消除感冒所引起的肌肉痠痛，能镇定精神、纾缓情绪，提升睡眠质量，还可改善过敏的皮肤；有帮助睡眠、润泽肌肤、可治长期便秘、能消除紧张、眼睛疲劳、润肺、养生，并可治疗焦虑和紧张造成的消化不良，且对失眠、神经痛及月经痛、肠胃炎都有所助益、减轻头痛。母菊富含黄酮类活性成分，该成分具有抗氧化、抗血管增生、消炎、抗变应性、和抗病毒的功效。

万寿菊素，黄色针晶，来源于菊科植物母菊Matricaria chamomilla L.。万寿菊素具有对抗氧活性，在DPPH测试中能清除自由基形成,其IC50为9.0μg/mL；在细胞色素C还原作用测试中，其IC50为10.1μg/mL(阳性对照品gallic acid的IC50分别为3.7μg/mL和3.2μg/mL。万寿菊素还具有细胞毒活性，在MTT测试中降低堆心菊素诱导的细胞毒活性。本品1μM时，提高堆心菊素对人肺癌细胞株GLC4的IC50值(由单用堆心菊素时的100%提高至134.7±7.5%)。在200μM时，对GLC4(人型肺癌细胞株)和COLO320(人型结直肠癌细胞株)抑制率达67.8%和84.4%，IC50(μM)分别为160和147。

通过文献检索，国内尚未见万寿菊素用于制备抗肿瘤药物。

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，应用万寿菊素制备抗肿瘤药物。

本发明的技术方案如下：

本发明所述的万寿菊素，其制备方法包括以下步骤：

（1）取多头菊蒿地上部分粉碎，按固液体积比为5：1.5-2加入夹带剂，在压力22-35MPa，温度35-48℃条件下，通入液态CO₂萃取90-180min，在压力7-9MPa，温度30-35℃条件下解析，收集萃取液；

（2）将步骤（1）中得到的萃取液加硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液；

（3）将步骤（2）中得到的脱色液浓缩至相对密度为1.12，上中性氧化铝柱，用石油醚-乙酸乙酯洗脱纯化，得到万寿菊素粗品；

（4）粗品经过制备型高效液相色谱精制得到高纯度的万寿菊素。

所述步骤（1）中，夹带剂为甲醇或乙醇溶液。

所述步骤（2）中，硅藻土加入量为药材量的3-4.5%

所述步骤（3）中，石油醚-乙酸乙酯的体积比为3:14。

所述步骤（4）中，制备型高效液相色谱流动相为甲醇-乙腈-水，体积比为19:38:45。

万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用。

通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察万寿菊素的抗肿瘤作用，结果表明万寿菊素对GLC4肺癌和COLO结肠癌均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。

本发明的有益效果通过以下实验得到了验证：

实验方法：

1、受试提取物：万寿菊素提取物

（1）性状：结晶，味苦。

（2）规格：含万寿菊素≥90%。

（3）溶剂：乙醇或甲醇。

（4）储存条件：4℃，密封保存。

2、细胞株：肺癌细胞株GLC4、结肠癌细胞株COLO。

3、给药剂量和方法

万寿菊素组：10mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。

阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。

阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿嘧啶肌注给药，隔一天一次，共五天。

灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。

4、种植瘤模型的建立与给药

（1）皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2×10⁶细胞悬液，注射至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对模型动物存活率的影响。

（2）肺内种植瘤肺转移模型：取2×10⁶细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15天取肺，测量瘤重和肺转移数。

（3）给药方式：种植瘤细胞同时给药。

5、结果

结果如表1、表2和表3显示，万寿菊素组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的作用，可延长实验小鼠的生存期。

表1 万寿菊素对种植瘤的抑制作用（n=20， ±S）

表2 万寿菊素对肿瘤转移发生率的影响（n=20，%）

表3 万寿菊素对实验小鼠生存率的影响（n=20，%）

由表1、表2和表3可以看出，万寿菊素组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对照组基本相当，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。

本发明用于制备抗肿瘤药物时，将万寿菊素与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。

本发明用于制备抗肿瘤药物时，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

万寿菊素的制备

取500g多头菊蒿地上部分粗粉，置于萃取釜中，按固液体积比为5：2加入甲醇作为夹带剂，在压力22MPa，温度38℃条件下，通入液态CO2，CO2流量为4.5ml/g生药/min，萃取120min，在压力7MPa，温度32℃条件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液，浓缩至相对密度为1.12，上中性氧化铝柱（柱压为6bar，柱径高比为1:8），用石油醚-乙酸乙酯3:14洗脱纯化，得到万寿菊素粗品；以体积比19:38:45甲醇-乙腈-水为流动相，粗品用流动相溶解，注入制备型高效液相色谱仪，控制流速为20ml/min，收集目标流分，连续制备，冷冻干燥得高纯度的万寿菊素，经HPLC检测，纯度94.4%。

实施例2

片剂：万寿菊素40g，淀粉135g，鹅去氧胆酸盐25g，制粒，压片制成1000片。服用方法：成人一次1片，一日2次。

实施例3

胶囊：万寿菊素40g，淀粉135g，壳聚糖25g，混匀，制成1000粒。服用方法：成人一次1粒，一日2次。

Claims

1. 结构式如下所示的万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用。

2. 如权利要求1所述的万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，万寿菊素在肺癌药物中的应用。

3. 如权利要求1所述的万寿菊素在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，万寿菊素在结肠癌药物中的应用。