CN104186345A - 一种川乌组织培养的快速繁殖方法 - Google Patents

一种川乌组织培养的快速繁殖方法 Download PDF

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CN104186345A CN201410463223.1A CN201410463223A CN104186345A CN 104186345 A CN104186345 A CN 104186345A CN 201410463223 A CN201410463223 A CN 201410463223A CN 104186345 A CN104186345 A CN 104186345A
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杨存
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Abstract

本发明研究了一种川乌组织培养的快速繁殖方法,包括川乌无菌芽的获得、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养等步骤,本发明方法所制备的川乌室外生根率高,操作简单易控,生长周期短,为川乌种质资源的开发利用提供基础。

Description

一种川乌组织培养的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及川乌组织培养的快繁方法,属于植物技术领域。
背景技术
川乌,正名为乌头(学名:Aconitum carmichaelii/Radix),别名:鹅儿花、铁花、五毒,毛茛科。多年生草本,生于山地草坡或灌丛中。栽培于平地肥沃的砂质土壤,主要栽培于四川。分布于长江中下游,北至秦岭和山东东部,南至广西北部。块根肉质黄色,呈纺锥形或卵形,外皮黑褐色,下部有许多须根。川乌的适应性很广,在海拔1700~3000m地区都可栽培,属喜温喜湿喜光一年生作物,具怕高温、干旱、怕涝等特性。喜温和湿润的环境,怕高温水涝;宜在土层深厚、肥沃疏松、地势略高的砂壤土上种植,忌连作。化学成分为总生物碱含量2、3%,酯1、0%,乌头碱0、3%。主要含乌头碱、中乌头碱、塔技乌头胺、杰斯乌头胺、苯甲酰乌头胺、苯甲酰中乌头胺和苯甲酰下乌头胺等。这类成分的分子结构中,因8位羟基的乙酰化和14位的羟基芳酰化,因而呈现强烈的毒性,是乌头中的主要毒性成分。辛、苦,热;有大毒。归心、肝、肾、脾经。祛风除湿,温经止痛。用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛。用于治疗风寒湿痹、关节疼痛等病症。一般炮制后内服。生川乌酊外用能刺激皮肤,继而产生麻木感,故外用作某些神经痛及风湿的镇痛剂,栽培技术主要是常规种植,组培技术应用于其繁殖可以缩短生长周期,为川乌种质资源的开发利用提供基础。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种川乌的快速繁殖方法,由该方法所制备的川乌生根率高,操作简单易控,生长周期短,为川乌种质资源的开发利用提供基础。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取川乌带芽茎段,流水冲洗1.5h,超净工作台上70%的酒精处理25s,0.1%的氯化汞处理18min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的川乌带芽茎段接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L培养基中进行腋芽的诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照1800lx,温度25℃,光照时间12h/d,诱导出来的腋芽放入培养基MS+6-BA0.3-0.5mg/L+NAA0.01-0.02mg/L进行增殖培养,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照3500lx,温度25℃,光照时间13h/d,苗高约3-4cm生长健壮的增殖瓶苗,带瓶移至室内自然温度条件下炼苗3d,避免目光直射,然后拧松瓶盖炼苗3d,之后揭开瓶盖再炼苗5d,用镊子小心将苗取出,洗净根部培养基,800倍的甲基拖布津消毒,凉干多余水分,用200-1000ppm生根粉处理,处理后栽植于腐殖土70%+蛭石30%的基质中进行生根培养。
采用本发明制备的川乌生根率高,周期短,产量大,污染小,利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取川乌带芽茎段,流水冲洗1.5h,超净工作台上70%的酒精处理25s,0.1%的氯化汞处理18min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的川乌带芽茎段接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L培养基中进行腋芽的诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照1800lx,温度25℃,光照时间12h/d,诱导出来的腋芽放入培养基MS+6-BA0.3-0.5mg/L+NAA0.01-0.02mg/L进行增殖培养,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照3500lx,温度25℃,光照时间13h/d,苗高约3-4cm生长健壮的增殖瓶苗,带瓶移至室内自然温度条件下炼苗3d,避免目光直射,然后拧松瓶盖炼苗3d,之后揭开瓶盖再炼苗5d,用镊子小心将苗取出,洗净根部培养基,800倍的甲基拖布津消毒,凉干多余水分,用200ppm生根粉处理,处理后栽植于腐殖土70%+蛭石30%的基质中进行生根培养,成活率90%。
实施例2
取川乌带芽茎段,流水冲洗1.5h,超净工作台上70%的酒精处理25s,0.1%的氯化汞处理18min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的川乌带芽茎段接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L培养基中进行腋芽的诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照1800lx,温度25℃,光照时间12h/d,诱导出来的腋芽放入培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L进行增殖培养,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照3500lx,温度25℃,光照时间13h/d,苗高约3-4cm生长健壮的增殖瓶苗,带瓶移至室内自然温度条件下炼苗3d,避免目光直射,然后拧松瓶盖炼苗3d,之后揭开瓶盖再炼苗5d,用镊子小心将苗取出,洗净根部培养基,800倍的甲基拖布津消毒,凉干多余水分,用1000ppm生根粉处理,处理后栽植于腐殖土70%+蛭石30%的基质中进行生根培养,生根率89%。
实施例3
取川乌带芽茎段,流水冲洗1.5h,超净工作台上70%的酒精处理25s,0.1%的氯化汞处理18min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的川乌带芽茎段接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L培养基中进行腋芽的诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照1800lx,温度25℃,光照时间12h/d,诱导出来的腋芽放入培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L进行增殖培养,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照3500lx,温度25℃,光照时间13h/d,苗高约3-4cm生长健壮的增殖瓶苗,带瓶移至室内自然温度条件下炼苗3d,避免目光直射,然后拧松瓶盖炼苗3d,之后揭开瓶盖再炼苗5d,用镊子小心将苗取出,洗净根部培养基,800倍的甲基拖布津消毒,凉干多余水分,用500ppm生根粉处理,处理后栽植于腐殖土70%+蛭石30%的基质中进行生根培养,生根率88%。

Claims (3)

1. 一种川乌组织培养的快速繁殖方法,包括川乌无菌芽的获得、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养,其主要步骤如下:
(1)取川乌带芽茎段,对其进行消毒处理;
(2)取步骤(1)消毒处理过的川乌带芽茎段接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L培养基中进行腋芽的诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照1800lx,温度25℃,光照时间12h/d;
(3)取步骤(2)诱导出来的腋芽放入培养基MS+6-BA0.3-0.5mg/L+NAA0.01-0.02mg/L进行增殖培养,附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L,pH5.86,光照3500lx,温度25℃,光照时间13h/d;
(4)取步骤(3)增殖后的芽苗进行室外炼苗移栽。
2. 按照权利要求1所述的一种川乌组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(1)中所述川乌无菌带芽茎段的获得为,取川乌带芽茎段,流水冲洗1.5h,超净工作台上70%的酒精处理25s,0.1%的氯化汞处理18min,无菌水冲洗5次。
3. 按照权利要求1所述的一种川乌组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(4)中川乌室外生根诱导的条件为:苗高约3-4cm生长健壮的增殖瓶苗,带瓶移至室内自然温度条件下炼苗3d,避免目光直射,然后拧松瓶盖炼苗3d,之后揭开瓶盖再炼苗5d,用镊子小心将苗取出,洗净根部培养基,800倍的甲基拖布津消毒,凉干多余水分,用200-1000ppm生根粉处理,处理后栽植于腐殖土70%+蛭石30%的基质中进行生根培养。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106560024A (zh) * 2016-08-04 2017-04-12 丽江十邦生物工程有限责任公司 附子的快速繁殖方法
CN107372125A (zh) * 2017-09-14 2017-11-24 河南科技学院 一种乌头花托愈伤组织诱导及分化不定芽方法

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