CN104177505A - 一种分离和纯化多糖铁复合物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种分离和纯化多糖铁复合物的方法。该方法可有效纯化多糖铁复合物，有效去除其中杂质氯化物和重金属，进而提高多糖铁复合物的纯度和用药安全性；该法成本低廉、工艺简单、易于工业化生产。

Description

一种分离和纯化多糖铁复合物的方法

技术领域

本发明涉及一种分离和纯化多糖铁复合物的方法，该方法可使多糖铁复合物中氯化物和重金属的限度易于达到国家药品质量标准的要求，且该法成本低廉、工艺简单、易于工业化生产。

背景技术

多糖铁复合物是淀粉低聚糖与三价铁的复合物，用于治疗缺铁性贫血，目前由美国Schwarz pharma manufacturing inc.和Kremers Urban Pharmaceuticals Inc.进口上市，商品名Niferex（力蜚能）。多糖铁复合物中铁含量高达46％，以分子形式完整吸收，补铁效果好；且不含游离铁离子，对胃肠道副作用小，无恶心、腹痛、腹泻等副作用，是一种较好的补铁剂。

多糖铁复合物分子结构中包含中心铁核部分（三价铁的氧化物）、络合的低聚糖部分和吸附的氢氧化钠部分；其中，络合的低聚糖部分和吸附的氢氧化钠部分有助于多糖铁复合物的水溶性。多糖铁复合物的制备方法，最早由美国专利 (专利号：US3821192)报道，采用低聚糖浆、碱、高铁物制备多糖铁复合物，生成的多糖铁复合物经醇沉离心的方法分离纯化。在美国专利US 3821192基础上，我国专利（申请号：201010589023.2；200610007204.3）公开了一种制备多糖铁的的改进工艺，对工艺参数水铁比、铁糖比、反应温度、离心条件等进行了优化，最后的多糖铁产品经醇沉离心的方法分离纯化。

制备多糖铁复合物过程中，起始物料三价铁盐氯化铁中所含重金属往往富集到最后的多糖铁复合物中；另外，为了得到较高含铁量的多糖铁复合物，采用的工艺参数铁糖比高（固体三氯化铁和低聚糖质量比）、水铁比小，导致反应体系中存在大量的氯离子，这些氯离子往往与重金属阳离子之间存在离子键合力。因此多糖铁复合物产品中主要存在两类杂质：氯化物和重金属，各国药典对此均作出了明确的限度要求，我国食品药品监督管理局发布的标准规定：多糖铁中氯化物不得高于2%，重金属不得高于20 ppm。但是重复文献“醇沉离心”的分离纯化方法，本发明人发现，重金属和氯化物均不能达到上述限度要求；即使增加醇沉离心次数和体积，仍然很难使重金属和氯化物达到标准限度要求，同时还会降低多糖铁复合物产品中氢氧化钠的含量，进一步影响产品水溶液的pH值和产品的水溶性。这是因为经上述方法制备得到的多糖铁复合物在反应体系中以带电荷的胶体溶液形式存在，加入聚沉剂，如甲醇、乙醇等后析出沉淀，该沉淀由于电性效应吸附了较多量的氯化物和重金属，这导致多糖铁复合物的纯度难以达到标准要求。

美国专利10/853951公开了一种采用渗析、交叉流透析、电动迁移或柱层析分离纯化糖铁复合物的方法。该法尽管能很好的纯化糖铁复合物，使重金属和氯化物达到限度要求；但该方法工艺复杂，纯化周期长，成本高，不宜工业化生产应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种成本低廉、工艺简单、易于工业化生产的分离纯化多糖铁复合物的方法，以克服现有技术存在的纯化效果差或纯化成本高、周期长等问题。通过本发明提供的分离纯化方法，能使多糖铁复合物中的氯化物和重金属质量项易于达到药品质量标准中规定限度的要求。

本发明的技术构思如下：

醇沉离心法精致多糖铁复合物时，其胶体溶液的电性效应导致多糖铁复合物聚沉的沉淀吸附了较多量的氯化物和重金属。那么如果破坏其胶体溶液分散体系，让其不带电荷，析出的沉淀也就不再吸附离子，氯化物和重金属自然就能得到有效分离。发明人在实验过程中发现，纯化多糖铁复合物时，首先调节多糖铁复合物粗品水溶液的初始pH值至其等电点析出沉淀，让其不带电荷、也就不具备吸附其他带电荷离子的能力；分离收集该沉淀；然后将该沉淀回调至其初始pH值9-14，让其吸附氢氧根离子和钠离子，以补偿多糖铁复合物结构在等电点处失去的氢氧化钠部分，再运用醇沉离心的方法制得多糖铁复合物，此时所得产品较佳的实现了多糖铁复合物与氯化物和重金属的分离，同时又保留了结构中氢氧化钠部分，保证了本品优良的水溶性。

根据上述构思，本发明的技术方案如下：

（1）将多糖铁复合物粗品溶于水中，常温搅拌溶清，使成水溶液，测定pH值为9-14；

（2）用盐酸水溶液调pH至多糖铁复合物的等电点pH4.0-4.6，析出沉淀；

（3）采用常规分离方法分离该沉淀；

（4）将分离得到的沉淀加入水中，加入氢氧化钠水溶液调pH 9-14，常温搅拌溶清；

（5）冻干即得多糖铁复合物产品，或加入聚沉剂、析出沉淀、采用常规分离方法分离、干燥该沉淀即得多糖铁复合物产品。

术语等电点具有如下含义：在多糖铁复合物水溶液中，滴加盐酸水溶液，至某一pH时产生浑浊，此pH就称为该复合物的等电点；术语聚沉剂具有如下含义：使多糖铁复合物聚沉的物质，称为聚沉剂。

本发明的特征是步骤(1)和(4)中所用水量为使多糖铁复合物浓度为5-120mg/mL所需水量；步骤(3)和(5)中常规分离方法为离心、抽滤或压滤；步骤5中所用聚沉剂为C1-C8的醇类或酮类溶剂，其中优选甲醇、乙醇、丙醇或丙酮。

多糖铁复合物粗品的制备方法，在众多的文献中已有公开报道，本发明不再赘述。本领域一般的技术人员可参照US3821192的方法实施。

氯化物和重金属的测定方法参照中国药典2010版二部附录VIII A和VIII H第一法，依法测定。

采用本发明提供的技术方案分离纯化多糖铁复合物，能显著降低复合物中氯化物和重金属的含量，提高多糖铁复合物的质量，进一步提高其安全性。

以下通过参考例实施例继续对本发明进行说明，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或组合，均应包括在本发明的范围内。

具体实施例如下：

参考例1  多糖铁复合物的制备（参照US3821192）

玉米糖浆244.5g加入水455.5mL中，搅拌使成水溶液。加入75%的六水合三氯化铁水溶液535mL。加毕，滴加40%氢氧化钠水溶液，直至pH为11.5停止加入，控温小于80℃继续搅拌15min，然后升温至80℃至反应结束。加入等体积的甲醇，析出沉淀，离心收集沉淀，将此沉淀复用50%甲醇水溶液反复洗涤纯化，离心收集沉淀，60℃干燥，得多糖铁复合物。经测定：氯化物＞8%，重金属＞20ppm。

参考例2 醇沉离心法分离纯化多糖铁复合物

将上述多糖铁复合物粗品10g，加入纯化水1000mL中，常温搅拌溶清。加入聚沉剂甲醇1000mL析出沉淀，离心干燥得多糖铁复合物9.0g。经测定：氯化物＞6%，重金属＞20ppm。

实施例1  

将多糖铁复合物粗品10g，加入纯化水200mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。抽滤，滤饼加入水400mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至10-11，常温搅拌溶清。滴加聚沉剂乙醇直至沉淀析出完全，抽滤、滤饼干燥得多糖铁复合物9.5g。经测定：氯化物＜1%，重金属＜10ppm。

实施例2 

将多糖铁复合物粗品10g，加入饮用水1000mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。离心收集该沉淀。将此沉淀加入水200mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至9-10，常温搅拌溶清。滴加聚沉剂甲醇直至沉淀析出完全，压滤、干燥得多糖铁复合物9.0g。经测定：氯化物＜2%，重金属＜10ppm。

实施例3 

将多糖铁复合物粗品10g，加入饮用水100mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。抽滤，滤饼加入水500mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至12-13，常温搅拌溶清。滴加聚沉剂丙醇直至沉淀析出完全，抽滤、滤饼干燥得多糖铁复合物8.5g。经测定：氯化物＜1%，重金属＜10ppm。

实施例4 

将多糖铁复合物粗品10g，加入饮用水2000mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。离心收集该沉淀。将此沉淀加入水1000mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至13-14，常温搅拌溶清，冻干得多糖铁复合物9.5g。经测定：氯化物＜1%，重金属＜10ppm。

实施例5 

将多糖铁复合物粗品10g，加入饮用水600mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。抽滤，滤饼加入水800mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至11-12，常温搅拌溶清。滴加聚沉剂丙酮直至沉淀析出完全，抽滤、滤饼干燥得多糖铁复合物8.8g。经测定：氯化物＜1%，重金属＜10ppm。

实施例6

将多糖铁复合物粗品10g，加入饮用水800mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。抽滤，滤饼加入水1000mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至11-12，常温搅拌溶清。滴加聚沉剂正辛醇直至沉淀析出完全，抽滤、滤饼干燥得多糖铁复合物8.6g。经测定：氯化物＜2%，重金属＜10ppm。

实施例7

将多糖铁复合物粗品10g，加入饮用水500mL中，常温搅拌溶清。用盐酸水溶液调pH至其等电点4.0-4.6间，析出沉淀。抽滤，滤饼加入水600mL中，用氢氧化钠水溶液调pH至12-13，常温搅拌溶清。滴加聚沉剂丁酮直至沉淀析出完全，抽滤、滤饼干燥得多糖铁复合物9.0g。经测定：氯化物＜1%，重金属＜10ppm。

Claims (4)

1.一种多糖铁复合物分离纯化的方法，包括如下步骤：

（1）将多糖铁复合物粗品溶于水中，常温搅拌溶清，使成水溶液；

（2）用盐酸调pH至多糖铁复合物的等电点，析出沉淀；

（3）采用常规分离方法分离该沉淀；

（4）将分离得到的沉淀加入水中，加入氢氧化钠调pH 9-14，常温搅拌溶清；

（5）冻干即得多糖铁复合物产品，或加入聚沉剂、析出沉淀、采用常规分离方法分离、干燥该沉淀即得多糖铁复合物产品。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤（1）和（4）中所用水量为使多糖铁复合物浓度为5-120mg/mL所需水量。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤（3）和（5）中常规分离方法为离心、抽滤或压滤。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于所用聚沉剂为C1-C8的醇类或酮类溶剂，其中优选甲醇、乙醇、丙醇或丙酮。