CN104116838A - 用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物,按质量份由以下原料的有效组分组成:独活8份-8.5份、川续断、杜仲、华阴细辛、防风、秦艽、川芎、当归、白芍、牛膝、茯苓、肉桂心、党参、熟地黄、黄芪各6份-6.5份。本发明还公开一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,包括以下步骤:称量药品;洗晒药品;浓缩;干燥;配制成混悬液,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。本中草药组合物不仅对缓解病人疾苦,控制病情进展,阻止骨关节破坏,改善患者的生活质量具有重要的意义,同时为临床治疗类风湿关节炎治疗提供客观实验依据,并为进一步研究开发中药6类新药奠定工作基础,一定程度地推动中医理论客观化发展。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物,本发明还涉及一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法。
背景技术
类风湿关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎症及关节周围组织慢性炎症病变为主要病理表现的慢性全身自身免疫性疾病。
目前针对类风湿关节炎的治疗,使用西药只能止痛,不能治痛,长期服用易产生依赖性和毒副作用,关节炎患者刚开始的时候都会使用这种方法治疗关节炎,但是这种方法治疗关节炎度对人体的肾脏影响太大。
中医对于类风湿关节炎病理病机的认识已经有几千年之久,治疗经验丰富,但是组分若控制不好,其治疗效果并不好。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物,可以治疗和预防类风湿关节炎。
本发明的另一目的是提供一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法。
本发明所采用的第一技术方案是,一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物,按照质量份由以下原料的有效组分组成:独活8份-8.5份、川续断6份-6.5份、杜仲6份-6.5份、华阴细辛6份-6.5份、防风6份-6.5份、秦艽6份-6.5份、川芎6份-6.5份、当归6份-6.5份、白芍6份-6.5份、牛膝6份-6.5份、茯苓6份-6.5份、肉桂心6份-6.5份、党参6份-6.5份;熟地黄6份-6.5份、黄芪6份-6.5份。
本发明所采用的第二技术方案是,一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,具体按照以下步骤实施:
步骤1、称量药品;
按照质量份分别称取独活8份-8.5份、川续断6份-6.5份、杜仲6份-6.5份、华阴细辛6份-6.5份、防风6份-6.5份、秦艽6份-6.5份、川芎6份-6.5份、当归6份-6.5份、白芍6份-6.5份、牛膝6份-6.5份、茯苓6份-6.5份、肉桂心6份-6.5份、党参6份-6.5份;熟地黄6份-6.5份、黄芪6份-6.5份;
步骤2、洗晒药品;
称取水,使用称量好的水将步骤1称量好的诸药浸泡;加热煎煮2次,得到煎煮液;
步骤3、浓缩;
将步骤2获得的两次煎煮液混合,水浴浓缩成膏;
步骤4、干燥;
将步骤3获得的药膏放在干燥箱中烘干成粉末,其中每克粉末含生药3.52克;
步骤5、将中药粉末加蒸馏水配制成混悬液,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。
本发明的特点还在于,
步骤2中水的质量为步骤1中称取的中草药的总量的3倍,所述浸泡时间为0.4-1小时;第一次煎煮2-3小时,第二次煎煮1-2小时。
步骤3中的浓缩时间为80-85℃。
干燥温度为60-70℃。
中草药组合物的质量浓度为20%。
本发明的有益效果是:三痹颗粒通过调节血清及关节病变关节趋化因子及其受体的表达,改善滑膜炎症与增生、减轻软骨的破坏程度。明确其发挥抗炎的作用环节,充分发挥中药复方制剂多靶点及协同作用的特点,使失衡的趋化因子及其受体恢复。通过进一步研发,以期寻到无毒高效、具有明确治疗类风湿性关节作用的中药制剂。本中草药组合物不仅对缓解病人疾苦,控制病情进展,阻止骨关节破坏,改善患者的生活质量具有重要的意义,同时为临床治疗类风湿关节炎治疗提供客观实验依据,并为进一步研究开发中药6类新药奠定工作基础,一定程度地推动中医理论客观化发展。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明提供了一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物,按质量份由以下原料的有效组分组成:
独活8份-8.5份、川续断6份-6.5份、杜仲6份-6.5份、华阴细辛6份-6.5份、防风6份-6.5份、秦艽6份-6.5份、川芎6份-6.5份、当归6份-6.5份、白芍6份-6.5份、牛膝6份-6.5份、茯苓6份-6.5份、肉桂心6份-6.5份、党参6份-6.5份、熟地黄6份-6.5份、黄芪6份-6.5份。
一、各原料在本药物中的功能及功能主治:
独活:辛散苦燥而气香性温,功善祛风除湿、痛痹止痛;
川芎味辛性温,能活血行气、祛风止痛,气善走窜而无阴凝粘滞之态,虽入血分,又能去一切风,调一切气;
秦艽苦辛、微寒,能祛风湿、清湿热、止痹痛;
方中熟地黄、当归、白芍、川芎乃四物汤,以其补血活血,是谓治风先治血,血行风自灭之意;
党参、黄芪、茯苓、甘草补中气,健脾胃,祛邪先扶正,正气旺则邪气不可干;
独活、秦艽、防风驱风湿,止痹痛为治痹证之要药;
杜仲、续断、牛膝壮筋骨,补肝肾;
少佐肉桂心以温补肾阳;华阴细辛温经通络以除寒邪;
本发明各组分比例均来源于临床常用剂量,在该剂量范围内应用于患者,可一定程度缓解患者临床症状,改善滑膜炎症与增生、减轻软骨的破坏程度,并且不会给患者带来毒副作用。如果药物大于这个范围,对药物的安全性指标未进行观察,尤其是肝肾毒性。在预实验中发现,随着药物剂量的减小,会直接影响患者的临床疗效。故采用上述药物比例。
二、临床实例
李某某,女性,59岁,患类风湿关节炎10年,长期服用非甾体类抗炎药对症治疗,症状有一定程度缓解,但由于长期服用对胃粘膜造成一定影响,不能继续服用。经中医辨证分析后,给与上述中药治疗,连续服用30天,患者骨关节疼痛明显缓解,晨僵程度有所改善,持续时间相对缩短,但对活动受限程度无明显改善。患者X无明显变化。
本发明还提供一种治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,具体按照以下步骤实施:
步骤1、称量药品;
按照质量份分别称取独活8份-8.5份、川续断6份-6.5份、杜仲6份-6.5份、华阴细辛6份-6.5份、防风6份-6.5份、秦艽6份-6.5份、川芎6份-6.5份、当归6份-6.5份、白芍6份-6.5份、牛膝6份-6.5份、茯苓6份-6.5份、肉桂心6份-6.5份、党参6份-6.5份;熟地黄6份-6.5份、黄芪6份-6.5份;
步骤2、洗晒药品;
称取水,其中水的质量为步骤1中称取的中草药的总量的3倍,使用称量好的水将步骤1称量好的诸药浸泡0.4-1小时;加热煎煮2次,第一次煎2-3小时,第二次煎1-2小时,得到煎煮液;
步骤3、浓缩
将步骤2获得的两次煎煮液混合,80-85℃水浴浓缩成膏;
步骤4、干燥
将步骤3获得的药膏放在60-70℃干燥箱中烘干成粉末,其中每克粉末含生药3.52克;
步骤5、将中药粉末加蒸馏水配制成混悬液,质量浓度为20%,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。
实施例1
按照质量份分别称取独活8.5份、川续断6份、杜仲6.5份、华阴细辛6份、防风6.5份、秦艽6份、川芎6.5份、当归6份、白芍6.5份、牛膝6份、茯苓6.5份、肉桂心6份、党参6.5份;熟地黄6份、黄芪6.5份;称取水,其中水的质量为上述称取的中草药的总量的3倍,使用称量好的水将上述称量好的诸药浸泡0.4小时;加热煎煮2次,第一次煎2小时,第二次煎2小时,得到煎煮液;将两次煎煮液混合,80℃水浴浓缩成膏;将药膏放在70℃干燥箱中烘干成粉末,其中每克粉末含生药3.52克;将中药粉末加蒸馏水配制成混悬液,质量浓度为20%,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。
实施例2
按照质量份分别称取独活8份、川续断6.5份、杜仲6份、华阴细辛6.5份、防风6份、秦艽6.5份、川芎6份、当归6.5份、白芍6份、牛膝6.5份、茯苓6份、肉桂心6.5份、党参6份;熟地黄6.5份、黄芪6份;称取水,其中水的质量为上述称取的中草药的总量的3倍,使用称量好的水将上述称量好的诸药浸泡0.4小时;加热煎煮2次,第一次煎3小时,第二次煎1小时,得到煎煮液;将两次煎煮液混合,85℃水浴浓缩成膏;将药膏放在60℃干燥箱中烘干成粉末,其中每克粉末含生药3.52克;将中药粉末加蒸馏水配制成混悬液,质量浓度为20%,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。
实施例3
按照质量份分别称取独活8.2份、川续断6.1份、杜仲6.2份、华阴细辛6.3份、防风6.4份、秦艽6.4份、川芎6.3份、当归6.4份、白芍6.2份、牛膝6.1份、茯苓6.1份、肉桂心6.3份、党参6.3;熟地黄6.4份、黄芪6.2份;称取水,其中水的质量为上述称取的中草药的总量的3倍,使用称量好的水将上述称量好的诸药浸泡0.6小时;加热煎煮2次,第一次煎2.5小时,第二次煎1.5小时,得到煎煮液;将两次煎煮液混合,82℃水浴浓缩成膏;将药膏放在65℃干燥箱中烘干成粉末,其中每克粉末含生药3.52克;将中药粉末加蒸馏水配制成混悬液,质量浓度为20%,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。
以下从原理方面说明本发明中草药组分的有益效果所在:
为了揭示本发明中草药组分治疗类风湿关节炎的药效,做了以下实验:使用本发明的中草药组分对胶原诱导性关节炎模型大鼠血清CCL2的影响。
1、实验材料
1.1、动物:Wistar大鼠100只,雌雄各半,6-8周龄,体重(180±20)g,由解放军总医院动物中心提供,在通风、温度及湿度适宜的动物室内常规饲养。
1.2、药物与试剂
本发明中草药组分;试剂:免疫级牛II型胶原(美国CHONDREX公司);弗氏完全佐剂(美国Sigma公司);CCL2放免分析试剂盒(南京建成生物工程研究所);注射用卡介苗(上海生物制品研究所)。
1.3、仪器
GMJ型全自动放免计数仪(江苏省医疗电子研究所);CR21型低温高速离心机(日本日立公司);足容积测量仪
2、实验方法
2.1CIA大鼠模型制备:
将10mg牛II型胶原与5ml冰醋酸溶液混匀,加入含有1mg/ml卡介苗的弗氏完全佐剂,使卡介苗浓度为3.5mg/ml,等体积混合含有CII的冰醋酸与弗氏完全佐剂(CFA),研磨至乳白色黏稠液体,胶原浓度为1g·L-1。第1天在Wistar大鼠尾根部、背部3点皮内注射,总量0.3mL。第21天时用浓度为1mg/ml的II型胶原乳剂按上述方法和剂量再次重复免疫。
2.2实验分组与给药
CIA鼠成模率达85%,将模型制备成功的68只大鼠随机分为模型对照组,中草药组分高剂量组、中草药组分中剂量组,中草药组分低剂量组,每组17只,另取同批次大鼠20只为空白对照组。中草药组分各剂量组于初次免疫14天灌胃给药,高剂量组给予11.9g/kg/d,中剂量组给予5.95g/kg/d,低剂量组给予2.98g/kg/d,模型组和空白对照组灌服同体积的生理盐水。连续灌服20天,至免疫后35天处死大鼠,抽取静脉血备检,
2.3观察指标
2.3.1足踝关节肿胀度的测定
使用自制的关节容积测量器,在免疫前及免疫后每周,测量大鼠双踝关节以下全足容积。以容积的变化作为大鼠足肿胀情况的观察指标。
2.3.2关节炎指数(AI)
全身病变按大鼠多发性关节炎全身病变5级评分记录法进行评分,0分:无红肿;1分:小趾关节红斑或轻度肿胀;2分:趾关节和趾跖关节中度肿胀;3分:踝关节以下的足爪肿胀;4级:包括踝关节在内全部足爪肿胀。每周1次对关节炎症进行评分。关节炎指数积分6~8分以上者,可认为关节炎表现严重。
2.3.3ELISA法测定CCL2含量
实验第35天,末次给药后2h,收集标本。球后静脉丛取血2m1,静置30min后,4℃3500rpm离心15min,分离血清,置冰箱中以供放免指标检测,全自动酶标仪读取CCL2的浓度,标本均行复孔检测,均值为终浓度。实验具体步骤按说明书步骤进行。
2.3.4统计方法
采用SPSS12.0统计软件,所有数据以均值x±s表示,若方差齐性,多组间比较采用单因素方差分析,多组间两两比较采用q检验,如不满足方差齐性,则采用秩和检验方法。检验水准为P<0.05。
3、实验结果
3.1中草药组分对CIA大鼠关节肿胀程度的影响,结果见表1。
表1结果显示,与空白对照组相比,模型对照组、中草药组分高、中、低剂量组与初次免疫II型胶原后2-5周大鼠足容积明显增高,有统计学意义(P<0.05),提示CIA模型复制成功;与模型对照组比较,中草药组分高、中、低剂量组分别于第3、4、5周开时明显抑制足容积,有统计学意义(P<0.05),与中草药组分低剂量组比较,高剂量组第5周时足容积有下降趋势,有统计学意义(P<0.05)。
表1中草药组分对CIA大鼠足容积的影响
注:*P<0.05vsControl组;#P<0.05vsCIA模型组;★P<0.05vs中草药组分小剂量组
3.2中草药组分对CIA大鼠关节炎指数的影响,结果见表2。
初次免疫II型胶原后2周,关节炎指数积分无明显差异,各组大鼠CIA关节炎症形成,于第4周时关节炎指数达到高峰,四肢出现关节炎症表现,之后出现下降趋势。药物干预后,与同时间点模型组比较,中草药组分各剂量组关节炎症评分明显下降,有统计学意义(P<0.05)。与中草药组分中剂量组比较,高剂量组第5周时AI有下降趋势,有统计学意义(P<0.05)。
表2中草药组分对CIA大鼠足容积的影响
注:*P<0.05vs同时间点CIA模型组;#P<0.05vs中草药组分中剂量组
3.3中草药组分对CIA大鼠血清CCL2的影响,结果见表3。
与空白对照组比较,造模后第2w和第5w模型组及中草药组分各剂量组大鼠血清的CCL2含量明显升高,有统计学意义(P<0.05)。在实验的第5w,中草药组分各剂量组CCL2含量与空白对照组差异不明显(P﹥0.05),中、高剂量组大鼠血清CCL2含量明显低于模型组大鼠,有统计学意义(P<0.05)。结果见表3。
表3中草药组分对CCL2的影响(pg/ml)
注:*P<0.05vsControl组;#P<0.05vs同时间点CIA模型组
4、讨论
趋化因子是一类可诱导的、分泌型的促炎小分子细胞因子,趋根据其N-端半胱氨酸的数量及相邻位置,趋化因子被分为CC、CXC、CX3C和C四个亚族,CCL2是CC亚族趋化因子成员之一,主要趋化、吸引单个核细胞(单核细胞、T和B淋巴细胞)进入炎症部位。在类风湿关节炎患者的关节滑液和滑膜细胞中,有大量CCL2表达。编码有CCL2趋化因子的DNA疫苗来能阻止佐剂诱导关节炎,甚至在疾病发生后再注射仍然有效。Gong等发现MCP-1的拮抗剂能阻止模型小鼠RA的发生,明显减轻关节炎的小鼠关节肿胀程度及血管翳形成。相反,用MCP-1能加重关节炎症状。
本发明采用牛II型胶原和CFA混合皮下注射免疫大鼠建立类风湿关节炎模型。免疫2周后对模型大鼠进行评估,80只大鼠先后有68只大鼠成模,出现较明显的关节炎体征,随着免疫炎症的进展,足容积于2-5周时大鼠明显增高,关节炎指数评分4周时达到高峰,之后出现下降趋势。CIA模型建立后,采用中草药组分进行干预治疗,关节肿胀程度于第3周开始下降,关节炎指数明显下降,且与剂量高低有一定的相关。提示中草药组分在减轻CIA大鼠关节肿胀程度上具有较好的疗效。与既往的研究相吻合。
本发明发现,模型组大鼠血清CCL2含量于初次免疫II型胶原后2、5周明显增高,结果提示,趋化因子CCL2参与了胶原诱导性关节炎发病过程。应用中草药组分治疗后,高、中剂量组大鼠血清CCL2含量较模型组整体趋势明显下降,该作用随着治疗剂量增加而明显加强。由此推断,中草药组分可能通过抑制CCL2环节的表达,减轻关节肿胀,抑制炎症进展。
Claims (6)
1.一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物,其特征在于,按照质量份由以下原料的有效组分组成:独活8份-8.5份、川续断6份-6.5份、杜仲6份-6.5份、华阴细辛6份-6.5份、防风6份-6.5份、秦艽6份-6.5份、川芎6份-6.5份、当归6份-6.5份、白芍6份-6.5份、牛膝6份-6.5份、茯苓6份-6.5份、肉桂心6份-6.5份、党参6份-6.5份;熟地黄6份-6.5份、黄芪6份-6.5份。
2.一种用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,其特征在于,具体按照以下步骤实施:
步骤1、称量药品;
按照质量份分别称取独活8份-8.5份、川续断6份-6.5份、杜仲6份-6.5份、华阴细辛6份-6.5份、防风6份-6.5份、秦艽6份-6.5份、川芎6份-6.5份、当归6份-6.5份、白芍6份-6.5份、牛膝6份-6.5份、茯苓6份-6.5份、肉桂心6份-6.5份、党参6份-6.5份;熟地黄6份-6.5份、黄芪6份-6.5份;
步骤2、洗晒药品;
称取水,使用称量好的水将步骤1称量好的诸药浸泡;加热煎煮2次,得到煎煮液;
步骤3、浓缩;
将步骤2获得的两次煎煮液混合,水浴浓缩成膏;
步骤4、干燥;
将步骤3获得的药膏放在干燥箱中烘干成粉末,其中每克粉末含生药3.52克;
步骤5、将中药粉末加蒸馏水配制成混悬液,得到治疗类风湿关节炎的中草药组合物。
3.根据权利要求2所述的用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,其特征在于,所述步骤2中水的质量为步骤1中称取的中草药的总量的3倍,所述浸泡时间为0.4-1小时;第一次煎煮2-3小时,第二次煎煮1-2小时。
4.根据权利要求2所述的用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,其特征在于,所述步骤3中的浓缩时间为80-85℃。
5.根据权利要求2所述的用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,其特征在于,所述干燥温度为60-70℃。
6.根据权利要求2所述的用于治疗类风湿关节炎的中草药组合物的制备方法,其特征在于,所述中草药组合物的质量浓度为20%。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20141029 |