CN104081198A - 分离剂及其制造方法 - Google Patents

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Abstract

在本发明的一个实施方式中，在分离剂的表面导入由化学式[化学式1]表示的基团或由化学式[化学式2]

Description

分离剂及其制造方法
技术领域
本发明的一个实施方式涉及一种分离剂、分离剂的制造方法、管柱、液相色谱仪、分离方法、以及化合物。
背景技术
近些年，在哺乳类等高等动物体内，确认了存在各种对映异构体(enantiomer),并弄清了对映异构体分别担负重要的功能。在氨基酸中，L-氨基酸作为蛋白质的构成要素或营养源在体内大量存在，相对于此，作为对映异构体的D-氨基酸很多情况下在体内微量存在。因此，在对D氨基酸进行分析时，常常受到各种肽或氨基化合物的干扰。另外，对于用于解析力高的分析的质谱分析法，由于其在原理上不能进行对映异构体的分离，因此为了进行正确的定量分析，希望开发出解析力高的光学离析技术。
在非专利文献1中公开了一种方法，其使用SUMICHIRAL(注册商标)OA2500S的(住化分析中心公司制造)来对荧光衍生化的氨基酸进行光学离析。
在专利文献1中，公开了将反相柱和光学离析用管柱组合的二维HPLC。
然而，存在氨基酸的D构型和L构型的溶出顺序不一致、以及衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力低的问题。
<现有技术文献>
<专利文献>
专利文献1：(日本)特开2005－3558号公报
<非专利文献>
非专利文献1：“利用Pirkle改良管柱的D-氨基酸的测定法”，[在线]，株式会社住化分析中心，Technical News，TN257，[2012年1月28日检索]，互联网<URL:http://www.scas.co.jp/analysis/pdf/tn257.pdf>
发明内容
<本发明想要解决的课题>
鉴于上述现有技术中存在的问题，本发明的一个实施方式的目的在于提供一种分离剂以及可制造该分离剂的化合物，该分离剂能够使氨基酸的D构型和L构型的溶出顺序一致，并能够提高衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力。
<用于解决上述课题的手段>
在本发明的一个实施方式中，在分离剂中，在其表面导入由化学式
[化学式1]
表示的基团或由化学式
[化学式2]
表示的基团。
在本发明的一个实施方式中，在分离剂的制造方法中，具有使由化学式
[化学式3]
表示的化合物或由化学式
[化学式4]
表示的化合物、与表面上存在氨基的基材缩合的步骤。
在本发明的一个实施方式中，在化合物中，由化学式
[化学式5]
或化学式
[化学式6]
所表示。
<发明的效果>
根据本发明的一个实施方式，能够提供一种分离剂以及可制造该分离剂的化合物，该分离剂能够使氨基酸的D构型和L构型的溶出顺序一致，并能够提高衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力。
附图说明
图1是由化学式(3)表示的化合物的1HNMR谱。
图2是实施例1的氨基酸的色谱。
图3是比较例1的氨基酸的色谱。
图4是比较例2的氨基酸的色谱。
具体实施方式
下面参照附图对本发明的实施方式进行说明。
分离剂在其表面导入由化学式(1)表示的基团或由化学式(2)表示的基团。因此，可使氨基酸的D构型和L构型的溶出顺序一致，并可提高衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力。
作为分离剂的形态，并无特别限定，可举出填充剂、连续多孔材料等。
分离剂可通过使由化学式(3)表示的化合物或由化学式(4)表示的化合物、与表面上存在氨基的基材缩合来制造。
若使由化学式(3)表示的化合物或由化学式(4)表示的化合物、与表面上存在氨基的基材缩合，则会形成酰胺键。
在使由化学式(3)表示的化合物或由化学式(4)表示的化合物、与表面上存在氨基的基材缩合时，可以添加缩合剂。
作为缩合剂，并无特别限定，可举出4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-氯甲基吗啉等三嗪类缩合剂、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐等碳二亚胺类缩合剂等。
需要说明的是，可以在由化学式(3)表示的化合物或由化学式(4)表示的化合物生成羧酸卤化物后，使其与表面存在氨基的基材反应，制造分离剂。
作为表面存在氨基的基材的形态，并无特别限定，可举出颗粒、连续多孔材料等。
表面存在氨基的颗粒的平均粒径通常为1～200μm，优选1～5μm。
表面存在氨基的颗粒优选为多孔颗粒。
表面存在氨基的多孔颗粒的平均细孔径通常为1～50nm，优选8～30nm。
表面存在氨基的多孔颗粒的比表面积通常为50～800m2/g，优选100～600m2/g。
作为表面存在氨基的多孔颗粒的市售产品，可举出Mightysil NH2(TOSOH公司制造)等。
表面存在氨基的基材可通过对基材的表面导入氨基来制造。
作为构成可在表面导入氨基的基材的材料，并无特别限定，可举出二氧化硅、硅胶、活性炭、沸石、氧化铝、粘土矿物、聚苯乙烯、苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、硅酸化合物、聚甲基丙烯酸、聚羟基甲基丙烯酸酯、聚乙烯醇、纤维素、琼脂糖、糊精，xaton(キサトン)、羟基磷灰石、氧化锆等。
作为在基材的表面导入氨基的方法，并无特别限定，可举出对基材进行氮等离子体处理的方法、对基材进行氨等离子体处理的方法、使基材与表面处理剂反应的方法、对基材进行硅氧烷气相处理的方法等。
在对基材进行氮等离子体处理的方法中，通过在氮气气氛中，产生低温等离子体，从而向基材的表面导入氨基(例如参见Surface and Coatings Technology116-119(1999)802-807,Colloids and Surfaces A:Physicochem.Eng.Aspects195(2001)81-95,Macromol.Chem.Phys.200.989-996(1999))。
在对基材进行氨等离子体处理的方法中，通过在氨气气氛中，产生低温等离子体，从而向基材的表面导入氨基。
在使基材与表面处理剂反应的方法中，使用具有氨基的烷氧基硅烷、氯硅烷、硅氮烷等硅烷偶联剂，向表面存在可通过加水分解而生成硅烷醇基的基、硅烷醇基，衍生自半金属氧化物的羟基和/或衍生自金属氧化物的羟基的基材的表面导入氨基。
在对基材进行硅氧烷气相处理的方法中，使用1,3,5,7-四甲基环四聚二甲基硅氧烷，向基材的表面导入氢硅烷基后，通过使具有氨基的烯烃反应，从而向基材的表面导入氨基(例如参见(日本)特公平1-54379号公报、(日本)特公平1-54380号公报、(日本)特公平1-54381号公报)。
作为具有氨基的烯烃，并无特别限定，可举出具有乙烯基的胺、具有丙烯基的胺等。
需要说明的是，具有烯烃的氨基可以被氧基羰基(ボトキシカルボニル)、苄氧羰基等保护。
代替具有氨基的烯烃，也可使用具有环氧基等、例如通过与二胺反应从而可导入氨基的基的烯烃。
光学离析管柱具有上述分离剂，可以在管中填充填充剂，也可以在管中固定连续多孔材料。
作为构成管的材料，并无特别限定，可举出不锈钢、树脂、玻璃、石英等。
液相色谱仪具有上述光学离析管柱，优选还具有可分离氨基酸或氨基酸的衍生物的反相柱(例如参见专利文献1)。此时，通过在使用反相柱来分离氨基酸或氨基酸的衍生物后，使用光学离析管柱来对所分离的氨基酸或氨基酸的衍生物的D构型和L构型来进行分离，从而可对生物体试剂中的D-氨基酸及L-氨基酸的含量一起进行分析。
需要说明的是，可以在使用具有可分离氨基酸或氨基酸的衍生物的反相柱的液相色谱仪来分馏包含在生物试剂中的氨基酸或氨基酸的衍生物后，使用具有上述光学离析管柱的液相色谱仪，来对所分馏的氨基酸或氨基酸的衍生物的D构型和L构型进行分离。
另外，可以在使用固相提取法来提取生物试剂中包含的氨基酸或氨基酸的衍生物后，使用具有上述的光学离析管柱的液相色谱仪，来对所提取的氨基酸或氨基酸的衍生物的D构型和L构型进行分离。
作为氨基酸，只要具有不对称碳，就无特别限定，可举出丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸、酪氨酸等。
作为合成氨基酸的衍生物时所使用的试剂，并无特别限定，可举出4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑、邻苯二甲酸醛、苯基异硫氰酸酯、荧光胺、丹酰氯化物等。
需要说明的是，上述的分离剂、光学离析管柱以及液相色谱仪也可以适用于氨基酸及氨基酸的衍生物以外的对映异构体(enantiomer)或非对映异构体(diastereomer)。
<实施例>
(实施例1)
<由化学式(3)表示的化合物的生成>
将L-亮氨酸520mg、3,5-二硝基苯基异氰酸酯420mg、1M氢氧化钠水溶液5mL以及四氢呋喃1.5mL在室温下搅拌6小时后，加入1M氢氧化钠水溶液0.5mL。接着，用体积比3:1的乙酸乙酯/己烷混合溶剂6mL进行3次分离后，向水相加入3N盐酸1.5mL。此外，用乙酸乙酯10ml进行4次分离后，用饱和氯化钠水溶液5mL对油相进行1次分离。接着，向油相加入硫酸钠并使其干燥后，用蒸发器使其干燥。此外，加入乙基乙酸酯后2mL后，加入己烷并使其再结晶，得到粗晶体。接着，向粗晶体150mg加入甲醇200μL及0.1质量％的盐酸水溶液100μL后，用高速液相色谱仪的Gulliver(日本分光株式会社制造)进行分馏。此外，使用蒸发器，对所分馏的部分进行干燥。接着，用乙酸乙酯35mL进行2次分离后，用饱和氯化钠水溶液5mL对油相进行1次分离。接着，向油相内加入硫酸钠使其干燥后，用蒸发器使其干燥。此外，加入乙酸乙酯2mL后，加入己烷使其再结晶，得到无色针状结晶的由化学式(3)表示的化合物。
需要说明的是，对于由化学式(4)表示的化合物，除了代替L-亮氨酸使用D-亮氨酸以外，可与由化学式(3)表示的化合物同样地，进行合成。
<1HNMR>
使用Unity Plus 500(Varian公司制造)，对由化学式(3)表示的化合物的氘代甲醇中的1HNMR谱进行测定(参见图1)。
<化学纯度>
当使用图1中的1HNMR谱，对化学式(3)表示的化合物的化学纯度进行分析时，为大于等于99％。
<光学纯度>
当使用高速液相色谱仪NANOSPACE SI-2(资生堂公司制造)，对由化学式(3)表示的化合物的光学纯度进行分析时，为大于等于99.8％。需要说明的是，分析条件如下。
管柱：SUMICHIRAL(注册商标)OA-3200S(内径1.5mm，总长度250mm)
温度：25℃
流动相：柠檬酸的0.2mM甲醇溶液
流动相的流速：200μL/min
<表面存在氨基的多孔球形硅胶颗粒的制作>
使平均粒径为5μm、平均细孔径为12.5nm、比表面积为300m2/g的多孔球形硅胶颗粒10g分散于水15ml和2-丙醇15ml的混合溶剂中后，加入3-氨基丙基三甲氧基硅烷5g。接着，升温至85℃使其反应6小时后，过滤。此外，用甲醇及蒸馏水清洗过滤物后，使其干燥，得到表面上存在氨基的多孔球形硅胶颗粒。
<填充剂的制作>
在将由化学式(3)表示的化合物0.7g溶解于水30mL的溶液中，加入相对于由化学式(3)表示的化合物1.5摩尔当量的4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-氯甲基吗啉后，在室温下搅拌2小时。接着，加入表面上存在氨基的多孔球形硅胶颗粒1.25克后，使其在室温下反应一晚后，过滤。此外，用甲醇及氯仿清洗过滤物后，使其干燥，得到填充剂。
<管柱的制作>
在内径为1.5mm、长为250mm的不锈钢制的管内填充填充剂，制作管柱。
<精氨酸(Arg)的D构型和L-构型的分离>
添加精氨酸的质量比为1:4的D构型和L构型的混合物50pmol、pH为8.0的200mM的硼酸钠缓冲液(pH8.0)20μL、及40mM的4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑的无水乙腈溶液5μL后，在60℃下加热2分钟，进行荧光衍生化。接着，添加0.5％三氟乙酸水溶液95μL，得到测定试剂。
在高速液相色谱仪SI-2(资生堂公司制)上安装了管柱后，在以下条件下注入测定试剂2μL，分离精氨酸(Arg)的D构型和L构型。
温度：25℃
流动相：甲醇
流动相的流速：150μL/min
<组氨酸(His)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的0.25mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为97.5/2.5)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离组氨酸的D构型和L构型。
<脯氨酸(Pro)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的3mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为70/30)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离脯氨酸的D构型和L构型。
<丙氨酸(Ala)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离丙氨酸的D构型和L构型。
<缬氨酸(Val)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离缬氨酸的D构型和L构型。
<异体异亮氨酸(allo-lle)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离异体异亮氨酸的D构型和L构型。
<异亮氨酸(lle)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离异亮氨酸的D构型和L构型。
<亮氨酸(Leu)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离亮氨酸的D构型和L构型。
<天冬酰胺(Asn)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的2mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为80/20)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离天冬酰胺的D构型和L构型。
<谷氨酰胺(Gln)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的2mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为80/20)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离谷氨酰胺的质量比为1:4的D构型和L构型。
<丝氨酸(Ser)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1.5mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为85/15)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离丝氨酸的D构型和L构型。
<异体苏氨酸(allo-Thr)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离异体苏氨酸的D构型和L构型。
<苏氨酸(Thr)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的2mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为80/20)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离苏氨酸的D构型和L构型。
<甲硫氨酸(Met)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的3mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为70/30)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离甲硫氨酸的D构型和L构型。
<苯丙氨酸(Phe)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的5mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为50/50)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离苯丙氨酸的D构型和L构型。
<赖氨酸(Lys)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的5mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为50/50)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离赖氨酸的D构型和L构型。
<天冬氨酸(Asp)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的5mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为50/50)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离天冬氨酸的D构型和L构型。
<谷氨酸(Glu)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1.5mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为85/15)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离谷氨酸的D构型和L构型。
<半胱氨酸(Cys)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的5mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为50/50)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离半胱氨酸的D构型和L构型。
<酪氨酸(Tyr)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的3mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为70/30)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离酪氨酸的D构型和L构型。
<色氨酸(Trp)的D构型和L构型的分离>
除了代替甲醇使用柠檬酸的1mM甲醇/乙腈混合溶剂(体积比为90/10)溶液以外，与精氨酸的D构型和L构型同样，分离色氨酸的D构型和L构型。
图2中表示出氨基酸的色谱。
由图2可知在全部氨基酸中，D构型比L构型先溶出。
另外，由于在全部氨基酸中，峰谷比为大于等于2.0，对称系数小于4.0，因此可知衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力较高。
<峰谷比>
对于峰谷比，当设衍生自D构型的峰的基线起的高度为Hp、设衍生自D构型的峰与衍生自L构型的峰之间的高度的自最低点(峰的谷)的基线起的高度为Hv时，峰谷比根据式子
Hp/Hv
计算出(参见日本药店)。
<对称系数>
对于对称系数，当设峰的自基线起的高度的1/10的高度的峰的宽度为W、设用从峰的顶点向纪录纸的横轴引出的垂线将W分成两半时的峰的上升侧的距离为F时，对称系数根据式子
S＝W/(2×F)
计算出。
需要说明的是，在非正规医药品原料规格中，作为W，使用峰的自基线起的高度的1/20的高度的峰的宽度，由于在比较例2的精氨酸(Arg)中，峰的谷存在于比峰的自基线的高度的1/20的高度更高的位置上，因此作为W，使用峰的自基线其的高度的1/10的高度的峰的宽度。
(比较例1)
除了作为管柱使用SUMICHIRAL(注册商标)OA-2500S(SCAS公司制造)以外，与实施例1同样，分离氨基酸的质量比为1:4的D构型和L构型的混合物。需要说明的是，SUMICHIRAL(注册商标)OA-2500S(SCAS公司制造)的光学活性成分为(S)-1-萘烷甘氨酸。
图3表示出氨基酸的色谱。
由图3可知，脯氨酸(Pro)的L构型比D构型先溶出，相对于此，脯氨酸(Pro)以外的氨基酸的D构型比L构型先溶出。
另外，在所有氨基酸中，由于峰谷比为大于等于2.0，对称系数为小于4.0，因此可知衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力较高。
(比较例2)
除了作为管柱使用SUMICHIRAL(注册商标)OA-3100S(SCAS公司制造)以外，与实施例1同样，分离氨基酸的质量比为1:4的D构型和L构型的混合物。需要说明的是，SUMICHIRAL(注册商标)OA-3100S(SCAS公司制造)的光学活性成分为缬氨酸。
图4表示出氨基酸的色谱。
由图4可知，在所有氨基酸中，D构型比L构型先溶出。
另外，脯氨酸(Pro)峰谷比为1.6、色氨酸(Trp)的峰谷比为1.3，相对于此，脯氨酸(Pro)和色氨酸(Trp)以外的氨基酸的峰谷比为大于等于2.0。另一方面，精氨酸(Arg)的对称系数为5.9、组氨酸(His)的对称系数为4.0，相对于此，精氨酸(Arg)和组氨酸(His)以外的氨基酸的对称系数为小于4.0。因此可知，脯氨酸(Pro)、色氨酸(Trp)、精氨酸(Arg)及组氨酸(His)的衍生自D构型的峰和衍生自L构型的峰的解析力较低。
需要说明的是，在实施例1中，若代替由化学式(3)表示的化合物，使用由化学式(4)表示的化合物，制作填充剂，则在所有的氨基酸中，L构型比D构型先溶出。
本国际申请以2012年1月31日申请的日本专利申请2012-018838作为要求优先权的基础，本国际申请援引该日本专利申请2012-018838的全部内容。

Claims (7)

1.一种分离剂，其特征在于，在其表面导入由化学式
[化学式1]
表示的基团或由化学式
[化学式2]
表示的基团。
2.一种分离剂的制造方法，其特征在于，具有使由化学式
[化学式3]
表示的化合物或由化学式
[化学式4]
表示的化合物、与表面上存在氨基的基材缩合的步骤。
3.一种分离剂，其特征在于，利用根据权利要求2所述的分离剂的制造方法来制造所述分离剂。
4.一种管柱，其特征在于，具有根据权利要求1或3所述的分离剂。
5.一种液相色谱仪，其特征在于，具有根据权利要求4所述的管柱。
6.一种分离方法，其特征在于，具有使用根据权利要求4所述的管柱来分离对映异构体或非对映异构体的步骤。
7.一种化合物，其特征在于，由化学式
[化学式5]
或化学式
[化学式6]
所表示。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6193004B2 (ja) 2013-06-14 2017-09-06 株式会社日立ハイテクノロジーズ 吸着材及びそれを用いた分析システム
JP6296533B2 (ja) * 2013-09-03 2018-03-20 株式会社 資生堂 システイン及びシスチンの定量方法
US20200002322A1 (en) 2017-03-03 2020-01-02 Shiseido Company, Ltd. Novel compound, fluorescence derivatization reagent including said novel compound, method for optically resolving optical isomer of amino acid in which said novel compound is used, and fluorescence derivatized amino acid

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000074896A (ja) * 1998-08-31 2000-03-14 Sumika Chemical Analysis Service Ltd キラル固定相
CN1800192A (zh) * 2006-01-20 2006-07-12 中国农业大学 新型化学键合手性固定相及其制备方法和用途

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61268763A (ja) 1984-11-26 1986-11-28 Shiseido Co Ltd 処理粉体の製造方法
JPS63113082A (ja) 1985-07-29 1988-05-18 Shiseido Co Ltd 改質粉体
JP2703904B2 (ja) 1987-08-26 1998-01-26 日本電気株式会社 半導体集積回路測定用探針基板
JPS6454381A (en) 1987-08-26 1989-03-01 Fujikura Ltd Optical fiber magnetic field sensor
JPH06105286B2 (ja) 1987-08-26 1994-12-21 富士通株式会社 自動試験機能を有する電子回路パッケ−ジ
US5338529A (en) * 1992-04-27 1994-08-16 Research Corporation Technologies, Inc. Recognition and separation of carbon clusters
JP4291628B2 (ja) 2003-06-12 2009-07-08 株式会社資生堂 液体クロマトグラフ装置及び試料に含まれる光学異性体の分析方法
JP5116388B2 (ja) 2007-07-25 2013-01-09 株式会社アルバック クロマトグラフィー用キラル固定相の光学異性体分離能の評価方法および評価装置

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000074896A (ja) * 1998-08-31 2000-03-14 Sumika Chemical Analysis Service Ltd キラル固定相
CN1800192A (zh) * 2006-01-20 2006-07-12 中国农业大学 新型化学键合手性固定相及其制备方法和用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NAOBURMI OI等: "Direct separation of carboxylic acid enantiomers by high-performance liquid chromatography with amide and urea derivatives bonded to silica gel as chiral stationary phases", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
REGIS TECHNOLOGIES INC.: "《Chromatography Catalog》", 13 August 2011 *

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