CN102059105B - 一种类寡肽手性固定相及其制备方法 - Google Patents
一种类寡肽手性固定相及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102059105B CN102059105B CN 201010572427 CN201010572427A CN102059105B CN 102059105 B CN102059105 B CN 102059105B CN 201010572427 CN201010572427 CN 201010572427 CN 201010572427 A CN201010572427 A CN 201010572427A CN 102059105 B CN102059105 B CN 102059105B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chiral
- oligopeptide
- stationary phase
- silica gel
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 title claims abstract description 52
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 35
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical group O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 24
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 24
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 21
- -1 secondary amine compound Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000006087 Silane Coupling Agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims abstract description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 13
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 8
- FRGPKMWIYVTFIQ-UHFFFAOYSA-N triethoxy(3-isocyanatopropyl)silane Chemical group CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN=C=O FRGPKMWIYVTFIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- RQEUFEKYXDPUSK-ZETCQYMHSA-N (1S)-1-phenylethanamine Chemical compound C[C@H](N)C1=CC=CC=C1 RQEUFEKYXDPUSK-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 6
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Substances [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N Chloroacetyl chloride Chemical compound ClCC(Cl)=O VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000005428 anthryl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C3C(*)=C([H])C([H])=C([H])C3=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 3
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 239000005457 ice water Substances 0.000 claims description 3
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 claims description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 2
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 claims description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical class [H]N([*:1])[*:2] 0.000 claims 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010043958 Peptoids Proteins 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- DVWQNBIUTWDZMW-UHFFFAOYSA-N 1-naphthalen-1-ylnaphthalen-2-ol Chemical class C1=CC=C2C(C3=C4C=CC=CC4=CC=C3O)=CC=CC2=C1 DVWQNBIUTWDZMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N Phenethylamine Chemical compound NCCC1=CC=CC=C1 BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005557 chiral recognition Methods 0.000 description 2
- 238000005034 decoration Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- CYJRNFFLTBEQSQ-UHFFFAOYSA-N 8-(3-methyl-1-benzothiophen-5-yl)-N-(4-methylsulfonylpyridin-3-yl)quinoxalin-6-amine Chemical compound CS(=O)(=O)C1=C(C=NC=C1)NC=1C=C2N=CC=NC2=C(C=1)C=1C=CC2=C(C(=CS2)C)C=1 CYJRNFFLTBEQSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 108010067454 caseinomacropeptide Proteins 0.000 description 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012069 chiral reagent Substances 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003821 enantio-separation Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940117803 phenethylamine Drugs 0.000 description 1
- 239000005648 plant growth regulator Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
本发明一种类寡肽手性固定相及其制备方法:类寡肽手性固定相由手性选择剂、连接臂和载体组成,手性选择剂通过涂覆或硅烷偶联剂共价键连接的方式固载到载体表面;连接臂为共价键的连接臂;载体为硅胶及色谱用填料;其制备方法包括以下步骤:①制备2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺;②制备2-(S-1-苯乙胺基)-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺;③制备仲胺化合物;④制备含三个手性单元的手性单体;⑤手性固定相CSP的制备;其积极效果是:制得的类寡肽手性固定相具有很好的稳定性能,具有应用于手性分析、质量控制和生产制备对映异构体的潜力,整个反应路线产率高,易操作,便于工业化应用。
Description
技术领域
本发明涉及化学中的手性固定相技术领域,具体地说,是一种类寡肽手性固定相及制备方法。
背景技术
手性是自然界普遍存在的现象。手性物质的对映体之间有许多相同的理化性质,如熔点、溶解度、发生相同类型的化学反应等等。但是,也有一些理化性同有极大的差异,如旋光性、气味、与手性物质相互作用产生不同的产物,特别是许多与生物体密切相关的生化反应均与物质的手性相关联,是因为生命活动的生化反应与有机物的手性具有相关性。手性化学药物的对映体在人体内的药理活性、代谢过程及毒性存在着显著的差异。广泛应用于农业的手性除草剂、杀虫剂和植物生长调节剂也同样表现出强烈的生物识别作用。因为作为生命活动重要基础的生物大分子,如蛋白质、多糖、核酸和酶等几乎全是手性的。美国食品与药品管理局(FDA)于1992年发布了手性药物指导原则,它要求所有在美国上市的消旋体类新药,生产者都必须提供报告,说明药物中所含的对映体各自的药理作用、毒性和临床效果。基于以上原因,获得对映纯的化合物对于化学、生物或是药学的应用目的是非常必要的。
手性物质的分离对人类的重大意义是绝对不可忽视的。拆分对映体常用的方法有化学法、酶法和色谱法。相对于前两者,色谱法因具有回收率和选择性高、重复性好、操作简单、成本较低等优点而被人们广泛接受。目前使用最为广泛、有效的手性分离方法为高效液相手性色谱法,其分离光学异构体的方法又分为间接的手性试剂衍生化法和直接的手性流动相添加剂法与手性固定相法,其中,后者的手性固定相法由于直接、快速、有效、简便、容量大的优点,更适合于制备级色谱。
由于蛋白质手性固定相作为一类重要的手性固定相具有较高的手性选择性,含有肽键的Pirkle型小分子手性固定相的制备引起了人们的极大关注。2005年,Tingyu Li课题组首次将多个L-脯氨酸分子通过肽键相互连接并对末端氨基加以保护,然后键合到功能化的硅胶表面,从而制成了一种新型的脯氨肽手性固定相。此类手性固定相的手性选择剂由于具有螺旋的二级结构,因而具有广泛、较高的手性分离能力。再经过一系列的优化,该固定相的手性分离能力甚至要比一些商品化的手性固定相还要好。2005年之后,又有人以其他手性氨基酸为手性源,采用类似的方法制成了一些氨基酸肽手性固定相,同样也都具有一定的手性识别能力。
近二十年来,一种N-取代的甘肽(又叫“类肽”化合物),常作为多肽与蛋白质的仿体用于生物与制药领域,但在手性固定相上的应用尚为空白。当N上取代基为α-手性基团时,该种“类肽”化合物被证明具有螺旋的二级结构。考虑到具有螺旋结构的寡肽可以用作很好的手性选择剂,所以,本发明采用新的方法合成了N上取代基为S-苯乙基的“类肽”化合物,并成功地将其用作手性固定相的手性选择剂,制成一种新型的类寡肽手性固定相。
发明内容
本发明的目的在于在上述现有研究的基础上,通过化学合成的方法将若干个胺单元相互连接起来并键合到载体表面,提供一种目前没有的类寡肽手性固定相;本发明的第二目的是,提供所述类寡肽手性固定相的制备方法。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:
一种类寡肽手性固定相,其特征是,由手性选择剂、连接臂和载体组成,所述的手性选择剂或是具有结构通式(Ⅰ) 的化合物,或是由胺化合物桥连一起制成的类寡肽化合物,通过涂覆或(硅烷偶联剂)共价键连接的方式固载到载体表面;所述的连接臂为共价键的连接臂;所述的载体为硅胶及色谱用填料;
——所述的结构通式(Ⅰ)为:
式中:
n为1~10的任一整数;
R1、R2、R3为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基,或为-CONR、-COOR,R为氢或脂肪烷烃基;
R1、R2所连的碳与R3所连的碳必须至少有一个为手性碳;
R1/R/R3还有一个或更多的手性中心。
所述的类寡肽化合物是首先由桥连试剂与胺制成的酰胺化合物,然后再与另一分子胺发生取代反应制成仲胺化合物,其中桥连试剂的结构如通式(Ⅱ)所示:
式中:
X为OH、Cl或Br中的任何一种;
Y为Cl、Br或I中的任何一种;
R3为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基的任何一种。
所述的连接臂为三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷。
所述的载体包括色谱用球形、无定形硅胶以及有机无机杂化硅胶。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:
一种类寡肽手性固定相的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)制备2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺
将(S)-1-苯乙胺、0.5~1.0倍当量无水碳酸钠溶于水与丙酮的混合溶剂中,冰水浴下滴加1~1.5倍当量的氯代乙酰氯的丙酮溶液;反应结束后,蒸除溶剂,残留物用稀盐酸溶液酸化后用乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂获得白色固体的酰胺产物2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺;
(2)制备2-(S-1-苯乙胺基)-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺
将步骤(1)获得的2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺溶于无水乙醇中,加入1~1.5倍当量的(S)-1-苯乙胺和0.5~1.0倍当量的K2CO3进行回流反应8~15小时;反应结束后蒸除溶剂,加水并用乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂获得仲胺产物粗产品,经色谱柱分离获得纯产品;
(3)制备仲胺化合物
以步骤(2)得到的仲胺产物为原料,按需要重复步骤(1)和步骤(2)的操作若干次,获得含不同手性单元个数的仲胺化合物;
(4)制备含多个手性单元的手性单体
将步骤(3)获得的仲胺化合物溶于无水二氯甲烷中,氮气保护下加入三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷,室温下反应过夜,旋干,用硅胶色谱柱分离得手性硅烷化单体;
(5)手性固定相CSP的制备
将步骤(4)获得的手性硅烷化单体与硅胶加入烧瓶中,在甲苯溶液中加热回流反应48~72小时;将获得的硅胶进行过滤,以甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇、丙酮依次洗涤,于50~60℃条件下真空干燥过夜,制成类寡肽手性固定相;
类寡肽手性固定相的化学合成路线为:
步骤(4)所述的三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷的加入量为仲胺化合物的1.5~3.0倍量,在无水无氧条件下操作;其中,反应过程中过量的三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷通过硅胶柱除去,以得到纯度较高的手性硅烷单体。
步骤(5)所述的硅胶为表面含有硅羟基的活化硅胶。
所述的硅胶以2.5~3.0M的盐酸水溶液为活化剂,活化时间为5~8个小时。
本发明的积极效果是:
(1)首次制备出了由若干手性苯乙胺桥连一起的类寡肽化合物作为手性选择剂,由三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷作为连接臂的适合高效液相色谱用的手性色谱填料;
(2)不同色谱模式的评价表明,制备的固定相具有良好的手性色谱能力,对联萘酚衍生物具有较高的手性识别能力,同时,对3-取代吲哚-2-酮、苯乙醇、氨基酸等一些衍生物也具有一定的手性分离能力,且该类手性固定的手性分离能力与手性选择剂所含手性中心的个数密切相关,最佳手性中心的个数为5或6个;
(3)制得的类寡肽手性固定相具有很好的稳定性能,具有应用于手性分析、质量控制和生产制备对映异构体的潜力,并且整个反应路线产率高,易操作,便于工业化应用。
附图说明
附图1为联萘酚在固定相CSP1-CSP5上的分离效果对比图;
附图2为甲磺酸联萘酚酯在CSP4固定相上的拆分谱图;
附图3为O,O’-二苯基氨基甲酰基联萘酚在CSP4固定相上的拆分谱图;
各附图中,横坐标为出峰时间,单位为分钟。
具体实施方式
以下提供本发明一种新型类寡肽手性固定相的制备方法的具体实施方式,提供5个实施例和一个应用实施例。但是,需要说明的是,本发明的实施不限于以下的实施例。
实施例1
一种类寡肽手性固定相的制备,其具体的制备步骤为:
(1)制备2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺
在250ml单口反应烧瓶中加入9.68g (S)-1-苯乙胺和4.24g无水碳酸钠,用50mL丙酮和50mL水进行溶解;于冰水浴下将反应液冷却至0℃,在搅拌状态下缓慢滴加9.04g氯乙酰氯的丙酮溶液20mL,约1小时后反应完成;减压蒸除溶剂,残留物用6M HCl酸化后用乙酸乙酯萃取,将无水硫酸钠干燥,减压蒸除溶剂后得到14.0g白色固体产物,收率为89%;1HNMR (CDCl3): δ1.54 (d, 3H), 4.06-4.09 (m, 2H), 5.14 (m, 1H), 6.81 (s, 1H), 7.31-7.36 (m, 5H).
(2)制备2-(S-1-苯乙胺基)-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺
称取13.9g步骤(1)的产物和8.5g (S)-1-苯乙胺溶于100ml无水乙醇中,加入4.86g碳酸钾,80℃温度下回流8小时,减压蒸除溶剂后加水,用乙酸乙酯萃取,将无水硫酸钠干燥,减压蒸除溶剂得到粗产品,再经色谱柱分离后得到15.9g纯产品,收率为80%;1HNMR (CDCl3): δ1.36 (d, 3H), 1.43 (d, 3H), 1.52 (m, 1H), 3.18 (m, 2H), 3.72 (q, 1H), 5.10 (m, 1H), 7.27-7.35 (m, 10H), 7.42 (d, 1H).
(3)制备仲胺化合物1
以步骤(2)的产物为原料,重复步骤(1)和步骤(2)的操作,可制得含三个手性单元的仲胺化合物1,两步的总收率为75%;
(4)制备含三个手性单元的手性单体6
将步骤(3)的产物仲胺化合物1(4.0g)溶于50ml无水二氯甲烷中,氮气保护下加入三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷,室温下反应过夜,旋干,用硅胶色谱柱分离获得5.3g手性硅烷化单体6,收率为85%;
(5)手性固定相CSP1的制备
将步骤(4)获得的手性硅烷化单体6与硅胶加入烧瓶中:称取4.0g活化好的5μ商品化硅胶(日本Fuji Silysia 化学公司产品),干燥除水,氮气保护下加入新蒸甲苯40mL、手性单体硅烷化试剂2.76g,整个反应体系加热回流反应48小时;所得的硅胶用砂芯漏斗进行过滤,以甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇、丙酮依次洗涤,于50℃真空干燥过夜,得4.6g 手性固定相CSP1;元素分析:C9.82,N1.59,H2.16%。以含氮量估算键合量约0.28mmol/g。
实施例2
一种类寡肽手性固定相的制备,其具体的制备步骤为:
(1)和(2)同实施例1;
(3)以仲胺化合物1为原料重复步骤(1)与步骤(2)制得含四个手性单元的仲胺化合物2;
(4)将步骤(3)的产物仲胺化合物2 按实施例1步骤(4)的方法获得手性硅烷化单体7;
(5)将步骤(4)获得的手性硅烷化单体7按实施例1步骤(5)的方法获得手性固定相CSP2;元素分析:C11.32,N1.64,H1.96%。以含氮量估算键合量约0.23mmol/g。
实施例3
一种类寡肽手性固定相的制备,其具体的制备步骤为:
(1)和(2)同实施例1;
(3)以仲胺化合物2为原料重复步骤(1)与步骤(2)制得含四个手性单元的仲胺化合物3;
(4)将步骤(3)的产物仲胺化合物3 按实施例1步骤(4)的方法获得手性硅烷化单体8;
(5)将步骤(4)获得的手性硅烷化单体8按实施例1步骤(5)的方法获得手性固定相CSP3;元素分析:C13.35,N1.82,H2.52%。以含氮量估算键合量约0.21mmol/g。
实施例4
一种类寡肽手性固定相的制备,其具体的制备步骤为:
(1)和(2)同实施例1;
(3)以仲胺化合物3为原料重复步骤(1)与步骤(2)制得含四个手性单元的仲胺化合物4;
(4)将步骤(3)的产物仲胺化合物4 按实施例1步骤(4)的方法获得手性硅烷化单体9;
(5)将步骤(4)获得的手性硅烷化单体9按实施例1步骤(5)的方法获得手性固定相CSP4;元素分析:C13.33,N1.77,H2.0%。以含氮量估算键合量约0.18mmol/g。
实施例5
一种类寡肽手性固定相的制备,其具体的制备步骤为:
(1)和(2)同实施例1;
(3)以仲胺化合物4为原料重复步骤(1)与步骤(2)制得含四个手性单元的仲胺化合物5;
(4)将步骤(3)的产物仲胺化合物5 按实施例1步骤(4)的方法获得手性硅烷化单体10;
(5)将步骤(4)获得的手性硅烷化单体10按实施例1步骤(5)的方法获得手性固定相CSP5;元素分析:C11.32,N1.41,H2.21%。以含氮量估算键合量约0.13mmol/g。
应用实施例
将实施例1-5中所制得的(硅胶材料)手性固定相CSP1~CSP5分别溶于适量的溶剂中,超声匀浆化,使用HPLC匀浆填充机将其填压至不锈钢的HPLC空柱中(4.6mm×150mm):于正相模式下,正己烷/异丙醇=9/1(V:V)作流动相,流速为0.8ml/min, 检测波长为220nm, 进样量为1μL,以消旋化合物 1′作分析底物,分别对此5种手性固定相进行手性分离评价,在同样的色谱操作条件下,再以CSP4作为固定相,对消旋底物2′-5′进行手性分离。k′1 = (t1-t0)/t0; k′2 = (t2-t0)/t0;α = k′2/k′1,其中,t1和t2分明是对映异构体的出峰时间,t0是死时间,以甲苯来测试死时间(参见附图1-3)。
消旋分析底物1′-5′的结构如下:
以联萘酚1′作分析底物,对5种手性固定相的评价结果如下:
(1)CSP1,保留因子(k′1): 6.51;选择因子(α):1.09;
(2)CSP2,保留因子(k′1): 6.67;选择因子(α):1.35;
(3)CSP3,保留因子(k′1): 9.65;选择因子(α):1.94;
(4)CSP4,保留因子(k′1):11.12;选择因子(α):1.90;
(5)CSP5,保留因子(k′1): 6.28;选择因子(α):1.71;
CSP1-CSP5对分析物1′的分离效果对比见附图1。
以CSP4作固定相,对消旋底物2′-5′的分离结果如下:
(1)分析物2′,保留因子(k′1): 11.44;选择因子(α):1.90;
(2)分析物3′,保留因子(k′1): 11.64;选择因子(α):1.99;
(3)分析物4′,保留因子(k′1): 4.32;选择因子(α):1.34;
(4)分析物5′,保留因子(k′1): 2.39;选择因子(α):1.08;
其中,CSP4对分析物2′、3′的分离效果分别见附图2和3。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围内。
Claims (1)
1.一种类寡肽手性固定相,其特征在于,由手性选择剂、连接臂和载体组成,所述的手性选择剂是具有结构通式(Ⅰ) 的化合物通过涂覆或硅烷偶联剂共价键连接的方式固载到载体表面;所述的连接臂为共价键的连接臂;所述的载体为硅胶及色谱用填料;
——所述的结构通式(Ⅰ)为:
式中:
n为1~10的任一整数;
R1、R2、R3为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、芳烷基、萘基或蒽基;
R1、R2所连的碳与R3所连的碳必须至少有一个为手性碳;
R1/R2/R3还有一个或更多的手性中心;
所述的连接臂为三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷。
2. 根据权利要求1所述的一种类寡肽手性固定相,其特征在于,所述的载体包括色谱用球形、无定形硅胶以及有机无机杂化硅胶。
3. 如权利要求1所述的一种类寡肽手性固定相的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺
将(S)-1-苯乙胺、0.5~1.0倍当量无水碳酸钠溶于水与丙酮的混合溶剂中,冰水浴下滴加1~1.5倍当量的氯代乙酰氯的丙酮溶液;反应结束后,蒸除溶剂,残留物用稀盐酸溶液酸化后用乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂获得白色固体的酰胺产物2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺;
(2)制备2-(S-1-苯乙胺基)-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺
将步骤(1)获得的2-氯-N-(S-1-苯乙基)乙酰胺溶于无水乙醇中,加入1~1.5倍当量的(S)-1-苯乙胺和0.5~1.0倍当量的K2CO3进行回流反应8~15小时;反应结束后蒸除溶剂,加水并用乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂获得仲胺产物粗产品,经色谱柱分离获得纯产品;
(3)制备仲胺化合物
以步骤(2)得到的仲胺产物为原料,按需要重复步骤(1)和步骤(2)的操作若干次,获得含不同手性单元个数的仲胺化合物;
(4)制备含多个手性单元的手性单体
将步骤(3)获得的仲胺化合物溶于无水二氯甲烷中,氮气保护下加入三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷,室温下反应过夜,旋干,用硅胶色谱柱分离得手性硅烷化单体;
(5)手性固定相CSP的制备
将步骤(4)获得的手性硅烷化单体与活化硅胶加入烧瓶中,在无水甲苯中加热回流反应48小时;将获得的硅胶进行过滤,以甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇、丙酮依次洗涤,于50~60℃条件下真空干燥过夜,制成类寡肽手性固定相;
类寡肽手性固定相的化学合成路线为:
4. 根据权利要求3所述的一种类寡肽手性固定相的制备方法,其特征在于,步骤(4)所述的三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷的加入量为仲胺化合物的1.5~3.0倍量,在无水条件下操作;其中,反应过程中过量的三乙氧基(3-异氰酸酯基丙基)硅烷通过硅胶柱除去,以得到纯度较高的手性硅烷化单体。
5. 根据权利要求3所述的一种类寡肽手性固定相的制备方法,其特征在于,步骤(5)所述的活化硅胶为表面含有硅羟基的活化硅胶。
6. 根据权利要求5所述的一种类寡肽手性固定相的制备方法,其特征在于,所述的活化硅胶是以2.5~3.0M的盐酸水溶液为活化剂,活化时间为5~8个小时处理得到。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010572427 CN102059105B (zh) | 2010-12-03 | 2010-12-03 | 一种类寡肽手性固定相及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010572427 CN102059105B (zh) | 2010-12-03 | 2010-12-03 | 一种类寡肽手性固定相及其制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102059105A CN102059105A (zh) | 2011-05-18 |
CN102059105B true CN102059105B (zh) | 2012-12-05 |
Family
ID=43994717
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201010572427 Expired - Fee Related CN102059105B (zh) | 2010-12-03 | 2010-12-03 | 一种类寡肽手性固定相及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102059105B (zh) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102553551B (zh) * | 2012-02-16 | 2014-08-20 | 华东理工大学 | 类寡肽手性选择剂及其制备方法 |
CN104148037A (zh) * | 2014-08-08 | 2014-11-19 | 华东理工大学 | 一种精氨酸键合型亲水色谱固定相及制备方法 |
CN114618461A (zh) * | 2020-12-11 | 2022-06-14 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种混合模式色谱固定相及其制备和应用 |
CN113150192B (zh) * | 2021-04-30 | 2022-04-12 | 华中科技大学 | 一种负载手性螺旋的芳香酰胺型树脂及其制备方法和应用 |
CN114904577A (zh) * | 2022-05-17 | 2022-08-16 | 哈尔滨工程大学 | 手性多孔交联寡肽聚合物不对称催化剂及其制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6313247B1 (en) * | 1996-06-05 | 2001-11-06 | Wolfgang Lindner | Cinchonan based chiral selectors for separation of stereoisomers |
CN101274270A (zh) * | 2007-03-30 | 2008-10-01 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种采用click chemistry反应制备键合型环糊精固定相的方法 |
CN101274271A (zh) * | 2007-03-30 | 2008-10-01 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种糖键合硅胶固定相及其制备方法 |
CN101306354A (zh) * | 2007-05-17 | 2008-11-19 | 华东理工大学 | 一种环糊精手性色谱固定相及其制备方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05139999A (ja) * | 1991-11-25 | 1993-06-08 | Sumika Bunseki Center:Kk | キラリテイ識別剤およびクロマトグラフイー用分離剤 |
-
2010
- 2010-12-03 CN CN 201010572427 patent/CN102059105B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6313247B1 (en) * | 1996-06-05 | 2001-11-06 | Wolfgang Lindner | Cinchonan based chiral selectors for separation of stereoisomers |
CN101274270A (zh) * | 2007-03-30 | 2008-10-01 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种采用click chemistry反应制备键合型环糊精固定相的方法 |
CN101274271A (zh) * | 2007-03-30 | 2008-10-01 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种糖键合硅胶固定相及其制备方法 |
CN101306354A (zh) * | 2007-05-17 | 2008-11-19 | 华东理工大学 | 一种环糊精手性色谱固定相及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JP特开平5-139999A 1993.06.08 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102059105A (zh) | 2011-05-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102059105B (zh) | 一种类寡肽手性固定相及其制备方法 | |
CN104289210B (zh) | 一种苯丙氨酸手性色谱柱固定相的制备方法 | |
US20090008329A1 (en) | Separating agent for enantiomeric isomers | |
EP0270095A2 (en) | Packing material for liquid chromatography | |
EP0469739B1 (en) | Stationary phase for enantiomeric resolution in liquid chromatography | |
JPH0476976B2 (zh) | ||
US7740758B2 (en) | Separating agent including polysaccharide derivative having a polycyclic structure | |
CN105504159B (zh) | 一种键合型手性氨基醇聚合物及其制备方法和应用 | |
CN102000553B (zh) | 一种酒石酸衍生物手性固定相的制备方法 | |
CN108484451A (zh) | 一种一锅法制备1,2-氨基醇类化合物的方法 | |
CN113893825A (zh) | 丙氨酸生物骨架多孔硅材料的合成方法 | |
CN113444040A (zh) | 一种可见光驱动下合成手性α-非天然氨基酸衍生物的方法 | |
JPH0693002A (ja) | セルロースのアルコキシ置換芳香族カルバメート誘導体より成る分離剤 | |
CN111992196B (zh) | 一种(r)-bionl衍生物csp填料及制备方法和应用 | |
WO1996033162A1 (en) | Compounds containing a substantially planar, fused ring system with at least 4 aromatic rings and their use as a chiral stationary phase in enantiomeric separation | |
WO2000063255A1 (fr) | Procede de production d'un derive de chitine | |
CN112191238B (zh) | 一种(s)-bionl衍生物csp填料及制备方法和应用 | |
JPH05148163A (ja) | 分離剤 | |
JP3059013B2 (ja) | 多糖のトリアルキルシリル置換芳香族カルバメート誘導体及び分離剤 | |
KR100516972B1 (ko) | 새로운 이중 연결가지를 가진 lc 용 키랄 크라운 에테르키랄 고정상 및 이들로 충진된 키랄 칼럼 | |
JPH06192168A (ja) | α−アリールプロピオン酸類の光学分割方法 | |
CN104667972B (zh) | 固体非均相手性催化剂的合成方法及其在立体选择性反应中的应用 | |
JP2685877B2 (ja) | 分離剤 | |
CN114835655A (zh) | 一种合成光学活性三氟甲基丙烯酸酯类化合物的方法 | |
JPS61191631A (ja) | 二価アルコ−ルの光学分割方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20121205 Termination date: 20161203 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |