CN104068219A - 一种畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液及其制备方法和应用 - Google Patents
一种畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，由活性成分、乳化剂、助乳化剂和溶剂组成，所述的活性成分按重量份具体包括：脂溶性维生素：8.3～21份；水溶性维生素：45.5～67.3份；氨基酸：1.1～10.2份；免疫多糖：110～170份；抗氧化剂：0.5～1.5份；防腐剂3～8份。本发明旨在提供一种乳化剂用量减小，使用方便，具有提高畜禽免疫能力、抗病能力和营养吸收双重功效、加工过程低损耗、储存过程性质稳定的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液以及制备该畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法和应用。
Description
技术领域
本发明涉及动物饲料添加剂领域，特别是一种畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，及其制备方法和应用。
背景技术
目前规模化养殖领域基本上使用全价饲料，饲料经过高温制粒处理，饲料原料中的天然维生素成分基本被破坏殆尽，因此在养殖过程中必须在饲料中同时添加其生长发育所必须的维生素、氨基酸等成分。为了能将不同性质的维生素和氨基酸一次性投料给饲养的畜禽，往往将该添加剂制备成为颗粒形状加入到饲料中，这种添加剂生产方法涉及到高温高压和复杂的外界环境，对添加剂中的维生素和氨基酸影响很大。
为了改变这一现状，科技工作人员发现采用O/W型纳米微乳液可以得到克服上述缺点的添加剂，纳米微乳液具有乳液体系稳定、透明、增容性强的优点，在实际使用过程中，我们发现市售的纳米微乳液具有乳化剂添加量大，微乳液仅单一的补充维生素和氨基酸，动物的吸收效率不高，加工储存过程容易氧化变质的问题。
发明内容
本发明提供一种乳化剂用量减小，具有防疫抗病和营养吸收双重功效、加工储存过程无损耗的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液以及制备该畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法。
本发明提供的技术方案为：一种畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，由活性成分、乳化剂、助乳化剂和溶剂组成，所述的活性成分按重量份具体包括：脂溶性维生素：8.3～21份；水溶性维生素：45.5～67.3份；氨基酸：1.1～10.2份；免疫多糖：110～170份；抗氧化剂：0.5～1.5份；防腐剂：3～8份。
在上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液中，所述的免疫多糖具体包括：果寡糖：100～150份，糖萜素：10～20份；所述的脂溶性维生素具体包括：浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：1.5～8份；浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：6～10份；浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：：0.8～3份；所述的水溶性维生素具体包括：亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)：2～4份；维生素Ｂ1：2～2.5份，维生素Ｂ2：2～4份，维生素Ｂ6：4～6份，叶酸：0.3～0.6份，维生素Ｂ12：0.008～0.012份，泛酸钙：10～15份，烟酰胺：25～35份，D-生物素：0.1～0.2份；所述的氨基酸具体包括：羟基蛋氨酸：1～10份，赖氨酸：0.1～0.2份，天冬氨酸0.01-0.02份，谷氨酰胺0.01-0.02份。
优选地，果寡糖：105～140份；糖萜素：11～18份；浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：1.8～7.2份，浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：8～9.5份，浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：1.2～2.8份；亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)：2.5～3.9份，维生素Ｂ1：2.1～2.4份，维生素Ｂ2：2.5～3.5份，维生素Ｂ6：4.5～5.5份，叶酸：0.4～0.55份，维生素Ｂ12：0.009～0.011份，泛酸钙：11～14.5份，烟酰胺：27～33份，D-生物素：0.11～0.19份；羟基蛋氨酸：1～9份，赖氨酸：0.1～0.18份，天冬氨酸0.012～0.019份，谷氨酰胺0.012～0.019份。
更优选地，果寡糖：120～135份；糖萜素：14～17份；浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：2.2～6.5份，浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：9～9.3份，浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：1.8～2.6份；亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)：3～3.5份，维生素Ｂ1：2.1～2.3份，维生素Ｂ2：2.8～3.3份，维生素Ｂ6：4.8～5.3份，叶酸：0.45～0.52份，维生素Ｂ12：0.009～0.010份，泛酸钙：12～14份，烟酰胺：28～32份，D-生物素：0.12～0.18份；羟基蛋氨酸：2～8份，赖氨酸：0.13～0.17份，天冬氨酸0.014～0.017份，谷氨酰胺0.014～0.017份。
在所述上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液中，所述的抗氧化剂包括油溶性抗氧化剂和水溶性抗氧化剂，所述的油溶性抗氧化剂为丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯中的一种或多种组合，所述的水溶性抗氧化剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或水杨酸钠中的一种或多种组合，所述的乳化剂按重量份具体包括：聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：11～28份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：11～28份，脂肪醇聚氧乙烯醚：3～7份；所述的助乳化剂为：乙醇4～10份，所述的溶剂为去离子水，所述的去离子水按重量份为：802.7～649份。所述的防腐剂为苯甲酸钠、丁酸钠、柠檬酸钠中的一种或多种组合。
优选地，所述的油溶性抗氧化剂为：0.3～0.7份；所述的水溶性抗氧化剂的用量为：0.2～0.8份；聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：15～26份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：15～26份；脂肪醇聚氧乙烯醚：3～6.5份；乙醇5～9份；去离子水：796～625份；所述的防腐剂为：4～7份。
更优选地，所述的油溶性抗氧化剂为：0.4～0.6份；水溶性抗氧化剂：0.3～0.6份；聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：17.5～24.5份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：17.5～24.5份；脂肪醇聚氧乙烯醚：4～6.2份；乙醇6～8份；去离子水：802.7～649份；所述的防腐剂为：4.5～6.5份。
本发明还提供一种上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：称取上述的重量份的脂溶性维生素、乳化剂、助乳化剂和油溶性抗氧化剂并混合均匀，得到油相；
步骤2：称取上述的重量份的水溶性维生素、去离子、免疫多糖、水溶性抗氧化剂和防腐剂并混合均匀，得到水相；
步骤3：将步骤1制备的油相和步骤2得到的水相进行混合后加入上述的重量份的氨基酸，并混合均匀，得到混合相；
步骤4：对步骤3得到的混合相进行真空乳化，得到纳米微乳液，所述的真空乳化的温度为20℃～60℃；所述的真空乳化的真空度为：0.04～0.06Mpa；所述的真空乳化的时间为20～30min；
步骤5：对步骤4得到的纳米微乳液进行检测、分装。
检测标准：
1.卫生指标：应符合GB13078要求，其中总砷(以As计)≤10mg/L；铅(以Pb计)≤30mg/L，氟(以F计)≤1000mg/L；
2.PH值：应为4.0-5.5；
3.含量测定：维生素A乙酸酯150～800万IU/L(GB/T17817)，DL-ɑ-生育酚乙酸酯≥5g/L(GB/T17812)，维生素Ｄ380～300万IU/L(GB/T17818)。
在上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法中，所述的真空乳化的温度为20℃～60℃；所述的真空乳化的真空度为：0.04～0.06Mpa；所述的真空乳化的时间为20～30min。
在上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法中，所述的步骤4还包括子步骤1；
所述的子步骤1为：将所述步骤4得到的纳米微乳液通过微孔滤膜进行超滤操作。
在上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法中，所述的免疫多糖具体包括：果寡糖：100～150份；糖萜素：10～20份；所述的脂溶性维生素具体包括：浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：1.5～8份；浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：6～10份；浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：0.8～3份；所述的水溶性维生素具体包括：亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)：2～4份，维生素Ｂ1：2～2.5份；维生素Ｂ2：2～4份；维生素Ｂ6：4～6份；叶酸：0.3～0.6份；维生素Ｂ12：0.008～0.012份；泛酸钙：10～15份；烟酰胺：25～35份；D-生物素：0.1～0.2份；所述的氨基酸具体包括：羟基蛋氨酸：1～10份；赖氨酸：0.1～0.2份，天冬氨酸0.01-0.02份，谷氨酰胺0.010-0.02份；所述的乳化剂按重量份具体包括：聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：11～28份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：11～28份；所述的助乳化剂为：脂肪醇聚氧乙烯醚：3～7份；所述的去离子水按重量份为：802.7～649份。
优选地：果寡糖：105～140份；糖萜素：11～18份；浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：1.8～7.2份，浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：8～9.5份，浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：1.2～2.8份；亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)：2.5～3.9份，维生素Ｂ1：2.1～2.4份，维生素Ｂ2：2.5～3.5份，维生素Ｂ6：4.5～5.5份，叶酸：0.4～0.55份，维生素Ｂ12：0.009～0.011份，泛酸钙：11～14.5份，烟酰胺：27～33份，D-生物素：0.11～0.19份；羟基蛋氨酸：1～9份，赖氨酸：0.1～0.18份，天冬氨酸0.012-0.019份，谷氨酰胺0.012-0.019份；所述的油溶性抗氧化剂为：0.3～0.7份；所述的水溶性抗氧化剂的用量为：0.2～0.8份；聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：15～26份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：15～26份；脂肪醇聚氧乙烯醚：3～6.5份；去离子水：802.7～649份。
更优选地：果寡糖：120～135份；糖萜素：14～17份；浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：2.2～6.5份，浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：9～9.3份，浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：1.8～2.6份；亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)：3～3.5份，维生素Ｂ1：2.1～2.3份，维生素Ｂ2：2.8～3.3份，维生素Ｂ6：4.8～5.3份，叶酸：0.45～0.52份，维生素Ｂ12：0.009～0.010份，泛酸钙：12～14份，烟酰胺：28～32份，D-生物素：0.12～0.18份；羟基蛋氨酸：2～8份，赖氨酸：0.13～0.17份，天冬氨酸0.014-0.017份，谷氨酰胺0.014-0.017份，所述的油溶性抗氧化剂为：0.4～0.6份；水溶性抗氧化剂：0.3～0.6份；聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：17.5～24.5份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：17.5～24.5份；脂肪醇聚氧乙烯醚：4～6.2份；去离子水：802.7～649份。
在上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法中，所述的抗氧化剂包括油溶性抗氧化剂和水溶性抗氧化剂，所述的油溶性抗氧化剂为丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯中的一种或多种组合，所述的水溶性抗氧化剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或水杨酸钠中的一种或多种组合，所述的乳化剂按重量份具体包括：聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：11～28份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：11～28份，,脂肪醇聚氧乙烯醚：3～7份；所述的助乳化剂为：乙醇4～10份，所述的溶剂为去离子水，所述的去离子水按重量份为：791～628份，所述的防腐剂为苯甲酸钠、丁酸钠、柠檬酸钠中的一种或多种组合。
优选地，所述的油溶性抗氧化剂为：0.3～0.7份；所述的水溶性抗氧化剂的用量为：0.2～0.8份；聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：15～26份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：15～26份；脂肪醇聚氧乙烯醚：3～6.5份；乙醇5～9份；去离子水：802.7～649份。；所述的防腐剂为：4～7份。
更优选地，所述的油溶性抗氧化剂为：0.4～0.6份；水溶性抗氧化剂：0.3～0.6份；聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：17.5～24.5份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：17.5～24.5份；脂肪醇聚氧乙烯醚：4～6.2份；乙醇6～8份；去离子水：802.7～649份。；所述的防腐剂为：4.5～6.5份。
本发明还提供一种上述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液在畜禽养殖中的应用，所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液添加在畜禽的饮用水中或添加在畜禽的日粮中，所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液与畜禽的饮用水的比例为：2～4立方米的畜禽的饮用水添加1000ml所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液；所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液与畜禽的日粮的比例为：1000-2000kg的畜禽的日粮中添加1000ml所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液。
与现有技术相比，本发明所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液采用水溶性维生素、脂溶性维生素、氨基酸和免疫多糖的结合，一方面达到营养补充和抗病防疫的作用，另一方面，免疫多糖可以为肠道内的有益菌提供营养，促进有益菌的生长，抑制有害菌，同时氨基酸主动提供肠道膜修复所需要的营养，与免疫多糖促进细菌生长的功效双重作用，提高肠道对水溶性/脂溶性维生素的吸收效果，提高动物进食量，使动物日增重量增加。
更进一步地，本发明采用了复合乳化剂和助乳化剂，其中，聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯的亲水性基团为20个聚氧乙烯，聚氧乙烯40氢化蓖麻油的亲水基团为40个聚氧乙烯，脂肪醇聚氧乙烯醚的亲水基团为15-16个聚氧乙烯基团，助乳剂为乙醇，四者相互互配降低了胶团的刚性，并且其亲水基团的聚合度逐渐降低，不同聚合度的亲水基团相互作用，降低了乳化剂的用量，提高了微乳液的稳定性，液滴粒径为20-50nm，提高了增溶效果，使活性成分更容易被肠道所吸收。
本发明还提供该纳米微乳液的制备方法，其采用油溶性还原剂和水溶性还原剂、去离子水和真空乳化手段的综合作用，降低溶液中的氧气含量，降低加工过程和储存过程环境对活性物质的影响。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
称取17kg聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯，聚氧乙烯40氢化蓖麻油17kg，脂肪醇聚氧乙烯醚4.7kg，加入到配料釜中进行搅拌，边搅拌边加入浓度为100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂2.1kg，浓度为92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂9.3kg，浓度为100万IU/g维生素Ｄ3油剂1.5kg，并补加丁基羟基茴香醚0.7kg，充分搅拌，加入乙醇5.5kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的油相。
在另一配料釜中注入去离子水736kg，边搅拌边加入亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)3.5kg，维生素Ｂ12.3kg，维生素Ｂ23kg，维生素Ｂ65kg，叶酸0.5kg，维生素Ｂ1210g，泛酸钙13kg，烟酰胺30kg，D-生物素0.17kg，果寡糖110kg，糖萜素12kg，亚硫酸钠0.6kg，苯甲酸钠4kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的水相。
将上述油相和水相注入真空乳化机中，并加入羟基蛋氨酸5kg，赖氨酸0.15kg，天冬氨酸15g，谷氨酰胺16g，设置真空乳化机的真空度为0.05MPa，乳化温度为35℃，启动真空乳化机，开始高速搅拌，约20～30min后油水混合相成为均一透明的微乳液，不断降低真空乳化机的搅拌速度，直至速度为0。
将微乳液抽至微孔膜过滤器中进行过滤，检测，分装。
检测标准：
1.卫生指标：应符合GB13078要求，其中总砷(以As计)≤10mg/L；铅(以Pb计)≤30mg/L，氟(以F计)≤1000mg/L；
2.PH值：应为4.0-5.5；
3.含量测定：维生素A乙酸酯150～800万IU/L(GB/T17817)，DL-ɑ-生育酚乙酸酯≥5g/L(GB/T17812)，维生素Ｄ380～300万IU/L(GB/T17818)。
实施例2
与实施例1的配方大体相同，除了果寡糖变为120kg，糖萜素变为15kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同。
实施例3
与实施例1的配方大体相同，除了果寡糖变为130kg，糖萜素变为15kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同，得到样品1。
实施例4
与实施例1的配方大体相同，除了果寡糖变为140kg，糖萜素变为17kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同。
实施例5
与实施例1的配方大体相同，除了果寡糖变为145kg，糖萜素变为19kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同。
实施例6
与实施例1的配方大体相同，除了聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯变为20kg，聚氧乙烯40氢化蓖麻油变为14kg，脂肪醇聚氧乙烯醚变为5.5kg，乙醇变为7kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同。
实施例7
与实施例1的配方大体相同，除了聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯变为14kg，聚氧乙烯40氢化蓖麻油变为25kg，脂肪醇聚氧乙烯醚变为6kg，乙醇变为9kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同。
实施例8
与实施例1的配方大体相同，除了聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯变为25kg，聚氧乙烯40氢化蓖麻油变为20kg，脂肪醇聚氧乙烯醚变为7kg，乙醇变为5kg，其他组分并未变化，制备方法与实施例1相同。
实施例9
称取17kg聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯，聚氧乙烯40氢化蓖麻油17kg，脂肪醇聚氧乙烯醚4.7kg，加入到配料釜中进行搅拌，边搅拌边加入浓度为100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂1.6kg，浓度为92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂6.5kg，浓度为100万IU/g维生素Ｄ3油剂1kg，并补加没食子酸丙酯1.2kg，充分搅拌，加入乙醇5.5kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的油相。
在另一配料釜中注入去离子水736kg，边搅拌边加入亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)2.45kg,维生素Ｂ12.1kg，维生素Ｂ22.2kg，维生素Ｂ65.8kg，叶酸0.42kg，维生素Ｂ129g，泛酸钙14.5kg，烟酰胺33kg，D-生物素0.12kg，果寡糖110kg，糖萜素12kg，亚硫酸钠0.6kg，苯甲酸钠4kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的水相。
将上述油相和水相注入真空乳化机中，并加入羟基蛋氨酸5kg，赖氨酸0.15kg，设置真空乳化机的真空度为0.05MPa，乳化温度为35℃，启动真空乳化机，开始高速搅拌，约20～30min后油水混合相成为均一透明的微乳液，不断降低真空乳化机的搅拌速度，直至速度为0。
将微乳液抽至微孔膜过滤器中进行过滤，检测，分装。
检测标准：
1.卫生指标：应符合GB13078要求，其中总砷(以As计)≤10mg/L；铅(以Pb计)≤30mg/L，氟(以F计)≤1000mg/L；
2.PH值：应为4.0-5.5；
3.含量测定：维生素A乙酸酯150～800万IU/L(GB/T17817)，DL-ɑ-生育酚乙酸酯≥5g/L(GB/T17812)，维生素Ｄ380～300万IU/L(GB/T17818)。
实施例10
称取17kg聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯，聚氧乙烯40氢化蓖麻油17kg，脂肪醇聚氧乙烯醚4.7kg，乙醇5.5kg加入到配料釜中进行搅拌，边搅拌边加入浓度为100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂2.5kg，浓度为92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂7.9kg，浓度为100万IU/g维生素Ｄ3油剂1.8kg，并补加二丁基羟基甲苯0.7kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的油相。
在另一配料釜中注入去离子水736kg，边搅拌边加入亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)3.1kg,维生素Ｂ12.4kg，维生素Ｂ22.6kg，维生素Ｂ65.4kg，叶酸0.32kg，维生素Ｂ129g，泛酸钙11kg，烟酰胺26kg，D-生物素0.12kg，果寡糖110kg，糖萜素12kg，亚硫酸钠0.6kg，柠檬酸钠7kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的水相。
将上述油相和水相注入真空乳化机中，并加入羟基蛋氨酸5kg，赖氨酸0.15kg，设置真空乳化机的真空度为0.05MPa，乳化温度为35℃，启动真空乳化机，开始高速搅拌，约20～30min后油水混合相成为均一透明的微乳液，不断降低真空乳化机的搅拌速度，直至速度为0。
将微乳液抽至微孔膜过滤器中进行过滤，检测，分装。
检测标准：
1.卫生指标：应符合GB13078要求，其中总砷(以As计)≤10mg/L；铅(以Pb计)≤30mg/L，氟(以F计)≤1000mg/L；
2.PH值：应为4.0-5.5；
3.含量测定：维生素A乙酸酯150～800万IU/L(GB/T17817)，DL-ɑ-生育酚乙酸酯≥5g/L(GB/T17812)，维生素Ｄ380～300万IU/L(GB/T17818)。
对比例1
称取17kg聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯，聚氧乙烯40氢化蓖麻油17kg，加入到配料釜中进行搅拌，边搅拌边加入浓度为100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂2.1kg，浓度为92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂9.3kg，浓度为100万IU/g维生素Ｄ3油剂1.5kg，并补加丁基羟基茴香醚0.7kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的油相。
在另一配料釜中注入去离子水736kg，边搅拌边加入亚硫酸氢钠甲萘醌(K3)3.5kg,维生素Ｂ12.3kg，维生素Ｂ23kg，维生素Ｂ65kg，叶酸0.5kg，维生素Ｂ1210g，泛酸钙13kg，烟酰胺30kg，D-生物素0.17kg，亚硫酸钠0.6kg，苯甲酸钠5kg，无水葡萄糖145kg，充分搅拌，直至形成均匀稳定的水相。
将上述油相和水相注入真空乳化机中，并加入天冬氨酸15g，谷氨酰胺16g，设置真空乳化机的真空度为0.05MPa，乳化温度为35℃，启动真空乳化机，开始高速搅拌，约20～30min后油水混合相成为均一透明的微乳液，不断降低真空乳化机的搅拌速度，直至速度为0。
将微乳液抽至微孔膜过滤器中进行过滤，检测，分装，得到对比样1。
检测标准：
1.卫生指标：应符合GB13078要求，其中总砷(以As计)≤10mg/L；铅(以Pb计)≤30mg/L，氟(以F计)≤1000mg/L；
2.PH值：应为4.0-5.5；
3.含量测定：维生素A乙酸酯150～800万IU/L(GB/T17817)，DL-ɑ-生育酚乙酸酯≥5g/L(GB/T17812)，维生素Ｄ380～300万IU/L(GB/T17818)。
动物饲养实施例1
畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液对肉鸡生长性能比较试验。
1、材料与方法
(1)材料
取上述实施例3的样品1和对比例1的对比样1作为本实施例的试验材料。
(2)方案设计
取900只1日龄的温氏快大黄羽肉鸡统一饲养一周后，分成3组，每组3个重复，每个重复100只，分实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、空白对照组，并称取体重；实验Ⅰ组通过饮水使用实施例3畜禽用纳米维生素免疫多糖微乳液样品1，实验Ⅱ组通过饮水使用对比样1，空白对照组不用任何饲料添加剂。实验Ⅰ组饲喂样品1，隔周连续饲喂样品1七天；实验Ⅱ组饲喂对比样1，隔周连续饲喂对比样1七天；空白对照组饲喂正常小鸡颗粒料。1ml样品1兑2L饮用水，1ml对比样1兑2L饮用水，对照组用日常饮用水；实验组和空白对照组均采用笼养，自由采食饮水，颗粒饲料三组相同，记录肉鸡每日采食量，定期进行免疫和清扫鸡舍，每周称量一次体重，饲养周期为35天。颗粒饲料的具体配方为玉米55.3％，豆粕36％，磷酸氢钙1.8％，石粉1％，脂肪油1.4％，鱼粉2.5％，预混料2％。
(3)测试方法
在第35日18时停止供应颗粒饲料，饮水保持正常供应，次日8时称重。
2、结果与数据
表一
| 项目 | 实验Ⅰ组 | 实验Ⅱ | 空白对照组 |
| 初始平均体重g/只 | 101.5 | 100.6 | 101.2 |
| 第35天平均体重g/只 | 1214.5 | 1108.2 | 1006.3 |
| 平均日增重g/天 | 31.8 | 28.79 | 25.86 |
| 平均日采食量g/天 | 67.2 | 66.4 | 64.70 |
| 料肉比 | 2.11：1 | 2.31：1 | 2.5：1 |
试验结果表明：
采用本发明所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液添加到肉鸡日常饮水中，可以比普通复合维生素微乳液更显著的提高黄羽肉鸡的日增重和出栏重量，降低料肉比。
动物饲养实施例2
畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液对肉鸡抗鼠伤寒沙门氏菌影响比较试验。
1、材料和方法
(1)材料
取上述实施例3的样品1和对比例1的对比样1作为本实施例的试验材料。
(2)方案设计
取900只1日龄的温氏快大黄羽肉鸡，分为三组，每组3个重复，每个重复100只，分实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、空白对照组，实验Ⅰ组饲喂样品1，每隔一周饲喂7天；实验Ⅱ组饲喂对比样1，每隔一周饲喂7天；空白对照组不添加任何饲料添加剂。1ml样品1兑2L饮用水，1ml对比样1兑2L饮用水；实验组和空白对照组均采用笼养，自由采食饮水，颗粒饲料三组相同，定期进行免疫和清扫鸡舍，饲养周期为21天。颗粒饲料的具体配方为玉米55.3％，豆粕36％，磷酸氢钙1.8％，石粉1％，脂肪油1.4％，鱼粉2.5％，预混料2％。
在第16天对比组和实验组的每只肉鸡均经口滴入10单位的鼠伤寒沙门氏菌，后分别于第17日、第18日、第19日、第20日，每天从每组中抽取4只肉鸡，颈部错位致死后10min内，取靠盲肠壁的内容物0.2g，放到含有1.8g灭菌的蛋白胨水中，在混合器上充分混合，按比例稀释50，100,1000,10000倍后，涂于亮绿培养基上，在37℃的环境下培养18～24小时。菌落数量采用平板菌落数计数法进行统计，沙门氏菌菌落采用三糖铁斜面基进行生化鉴定，检测盲肠中鼠伤寒沙门氏菌的数量。
2、结果和数据
表二
| 菌落数 | 实验Ⅰ组 | 实验Ⅱ组 | 空白对照组 |
| 第17日 | 13.42 | 14.24 | 18.36 |
| 第18日 | 4.10 | 8.82 | 17.63 |
| 第19日 | 2 | 7.36 | 16.72 |
| 第20日 | 阴性 | 6.04 | 14.33 |
试验结果表明：
本发明的所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液添加到肉鸡日常饮食中，可以比普通复合维生素微乳液更显著有效的提高肉鸡的免疫力和抗病能力。
动物饲养实施例3
畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液和普通复合维生素微乳液对蛋鸡产蛋率影响的比较试验。
1、材料与方法
(1)材料
取上述实施例3的样品1和对比例1的对比样1作为本实施例的试验材料。
(2)方案设计
取900只30周龄温氏快大黄羽蛋鸡，经一周喂养后，分为3组，每组3个重复，每个重复100只，分实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、空白对照组，实验Ⅰ组饲喂样品1，每隔一周饲喂7天；实验Ⅱ组饲喂对比样1，每隔一周饲喂7天；空白对照组不添加任何饲料添加剂。1ml样品1兑2L饮用水，1ml对比样1兑2L饮用水。饲养期间，实验组和空白对照组采用定时投料，投料量相同，记录实验组和空白对照组的蛋鸡采食量，定期进行免疫和清扫鸡舍，饲养周期为50天，在周期内，每周记录一次蛋鸡的产蛋数量及平均蛋重。所投颗粒料的具体配方为玉米60％，鱼粉2％，豆粕26.4％，磷酸氢钙1.3％，石粉9％，食盐0.3％，预混料1％。
2、结果与数据
表三
试验结果表明：
本发明的所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液添加到肉鸡日常饮食中，可以比普通复合维生素微乳液更显著有效的提高蛋鸡的产蛋率及平均蛋重。
动物饲养实施例4
畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液和普通复合维生素微乳液对仔猪生长性能比较试验。
1、材料与方法
(1)材料
取上述实施例3的样品1和对比例1的对比样1作为本实施例的试验材料。
(2)方案设计
试验对象是来源一致，同胎次，产仔时间相近，产仔数相同，性别比例相近，断奶窝重、体重相近的杜大长三元断奶仔猪，按配对试验原则将其分成实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和空白对照组共3组，每组3个重复，每个重复20头，共180只。实验Ⅰ组初始头均重(8.21±1.25)kg，实验Ⅱ组初始头均重(8.12±1.25)kg，空白对照组初始头均重(8.18±1.25)kg，实验Ⅰ组饲喂样品1，每隔一周饲喂7天；实验Ⅱ组饲喂对比样1，每隔一周饲喂7天；空白对照组不额外添加任何饲料添加剂。1ml样品1兑2L饮用水，1ml对比样1兑2L饮用水，让仔猪自由饮用，饲喂周期为50天。实验组和空白对照组每天均投喂四次颗粒料，期间定期清扫猪舍，并按防疫程序注射疫苗。颗粒料的具体配方为玉米54％、细米糠5.94％、优质鱼粉5％、豆粕31％、磷酸氢钙1.2％、石粉0.7％、盐0.16％、预混料2.0％。
2、结果与数据
表四
| 实验Ⅰ组kg | 实验Ⅱ组kg | 空白对照组kg |
| 初始平均体重 | 8.21 | 8.12 | 8.18 |
| 50天后平均体重 | 42.18 | 38.76 | 35.27 |
| 日均采食量 | 0.97 | 0.94 | 0.91 |
| 日均增肉量 | 0.68 | 0.61 | 0.54 |
| 料肉比 | 1.43：1 | 1.54：1 | 1.69：1 |
试验结果表明：三组仔猪初始平均体重差异不显著，试验结束时实验Ⅰ组比实验Ⅱ组的仔猪生长性能明显改善，进食稳定，食欲旺盛，个体不易受外界影响，性情温顺，日增重提高11.15％，料肉比下降7.69％，空白对照组仔猪在饲养周期内容易受到外界干扰，对外界的声音较为敏感，多动，日增重均比实验组低，而料肉比比实验组高。因此，复合维生素免疫多糖纳米微乳液比普通复合维生素微乳液更能改善仔猪生长性能，提高日增重，降低料肉比。
动物饲养实施例5
畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液和普通复合维生素微乳液对增强仔猪免疫能力比较试验。
1、材料与方法
(1)材料
取上述实施例3的样品1和对比例1的对比样1作为本实施例的试验材料。
(2)方案设计
试验对象是来源一致，同胎次，产仔时间相近，产仔数相同，性别比例相近，断奶窝重、体重相近的杜大长三元断奶仔猪，按配对试验原则将其分成实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和空白对照组共3组，每组3个重复，每个重复20头，共180头。实验Ⅰ组初始头均重(8.21±1.25)kg，实验Ⅱ组初始头均重(8.12±1.25)kg，空白对照组初始头均重(8.18±1.25)kg，实验Ⅰ组饲喂样品1，每隔一周饲喂7天；实验Ⅱ组饲喂对比样1，每隔一周饲喂7天；空白对照组不额外添加任何饲料添加剂。1ml样品1兑2L饮用水，1ml对比样1兑2L饮用水，让仔猪自由饮用，饲喂周期为90天。实验组和空白对照组每天均投喂四次颗粒料，期间定期清扫猪舍，并按防疫程序注射疫苗。颗粒料的具体配方为玉米54％、细米糠5.94％、优质鱼粉5％、豆粕31％、磷酸氢钙1.2％、石粉0.7％、盐0.16％、预混料2.0％。
90天内记录对照组和实验组的腹泻发生次数及平均日增重。
2、结果与数据
表五
| 实验Ⅰ组 | 实验Ⅱ组 | 空白对照组 | |
| 腹泻发生率 | 9.26％ | 25.15％ | 35.25％ |
| 死亡率 | 1％ | 4％ | 8％ |
| 日增重g/天 | 591 | 515 | 487 |
试验结果表明：
长期饲喂本发明的所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，可以有效的提高猪的免疫功能和抗病能力，同时增强肠胃消化能力及对营养的吸收率。
通过上述的试验数据可以看出，本发明所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液通过采用新型的乳化体系，合适的维生素和氨基酸的种类和配比，加入免疫多糖，协同增强了畜禽的免疫能力，使畜禽对饲料吸收率更高，缩短生长周期。
以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (21)
1.一种畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，由活性成分、乳化剂、助乳化剂和溶剂组成，其特征在于，所述的活性成分按重量份具体包括：脂溶性维生素：8.3～21份；水溶性维生素：45.5～67.3份；氨基酸：1.1～10.2份；免疫多糖：110～170份；抗氧化剂：0.5～1.5份，防腐剂3～8份。
2.根据权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的免疫多糖具体包括：果寡糖：100～150份；糖萜素：10～20份。
3.根据权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的脂溶性维生素具体包括：浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：1.5～8份；浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：6～10份；浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：0.8～3份。
4.根据权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的水溶性维生素具体包括：亚硫酸氢钠甲萘醌：2～4份；维生素Ｂ1：2～2.5份；维生素Ｂ 2：2～4份；维生素Ｂ6：4～6份；叶酸：0.3～0.6份；维生素Ｂ12：0.008～0.012份；泛酸钙：10～15份；烟酰胺：25～35份；D-生物素：0.1～0.2份。
5.根据权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的氨基酸具体包括：羟基蛋氨酸：1～10份；赖氨酸：0.1～0.2份，天冬氨酸0.01-0.02份，谷氨酰胺0.01-0.02份。
6.根据权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的抗氧化剂包括油溶性抗氧化剂和水溶性抗氧化剂，所述的油溶性抗氧化剂为丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯中的一种或多种组合，所述的水溶性抗氧化剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或水杨酸钠中的一种或多种组合。
7.根据权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的防腐剂为苯甲酸钠、丁酸钠、柠檬酸钠中的一种或多种组合。
8.根据权利要求1～7任一所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的乳化剂按重量份具体包括：聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：11～28份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：11～28份，脂肪醇聚氧乙烯醚：3～7份；所述的助乳化剂为：乙醇4～10份。
9.根据权利要求8所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液，其特征在于，所述的溶剂为去离子水，所述的去离子水按重量份为：802.7～649份。
10.一种如权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特 征在于，包括以下步骤：
步骤1：称取一定重量份的的重量份的脂溶性维生素、乳化剂、助乳化剂和油溶性抗氧化剂并混合均匀，得到油相；
步骤2：称取一定重量份的水溶性维生素、去离子水、免疫多糖、水溶性抗氧化剂和防腐剂并混合均匀，得到水相；
步骤3：将步骤1制备的油相和步骤2得到的水相进行混合后加入一定重量份的氨基酸，并混合均匀，得到混合相；
步骤4：对步骤3得到的混合相进行真空乳化，得到纳米微乳液；
步骤5：对步骤4得到的纳米微乳液进行检测、分装。
11.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的真空乳化的温度为20℃～60℃；所述的真空乳化的真空度为：0.04～0.06Mpa；所述的真空乳化的时间为20～30min。
12.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的步骤4还包括子步骤1；
所述的子步骤1为：将所述步骤4得到的纳米微乳液通过微孔滤膜进行超滤操作。
13.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的免疫多糖具体包括：果寡糖：100～150份；糖萜素：10～20份。
14.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的脂溶性维生素具体包括：浓度不低于100万IU/g的维生素A乙酸酯油剂：1.5～8份；浓度不低于92％的DL-ɑ-生育酚乙酸酯油剂：6～10份；浓度不低于100万IU/g的维生素Ｄ3油剂：0.8～3份。
15.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的水溶性维生素具体包括：亚硫酸氢钠甲萘醌：2～4份，维生素Ｂ1：2～2.5份；维生素Ｂ2：2～4份；维生素Ｂ6：4～6份；叶酸：0.3～0.6份；维生素Ｂ12：0.008～0.012份；泛酸钙：10～15份；烟酰胺：25～35份；D-生物素：0.1～0.2份。
16.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的氨基酸具体包括：羟基蛋氨酸：1～10份；赖氨酸：0.1～0.2份，天冬氨酸0.01-0.02份，谷氨酰胺0.01-0.02份。
17.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征 在于，所述的乳化剂按重量份具体包括：聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯：11～28份；聚氧乙烯40氢化蓖麻油：11～28份，脂肪醇聚氧乙烯醚：3～7份；所述的助乳化剂为：乙醇4～10份。
18.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的去离子水按重量份为：802.7～649份。
19.根据权利要求10所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的防腐剂为苯甲酸钠、丁酸钠、柠檬酸钠中的一种或多种组合，防腐剂3～8份。
20.根据权利要求10～19任一所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液的制备方法，其特征在于，所述的抗氧化剂包括油溶性抗氧化剂和水溶性抗氧化剂，所述的油溶性抗氧化剂为丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯中的一种或多种组合，所述的水溶性抗氧化剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或水杨酸钠中的一种或多种组合。
21.一种如权利要求1所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液在畜禽养殖中的应用，其特征在于，所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液添加在畜禽的饮用水中或添加在畜禽的日粮中，所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液与畜禽的饮用水的比例为：2～4立方米的畜禽的饮用水添加1000ml所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液；所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液与畜禽的日粮的比例为：1000-2000kg的畜禽的日粮中添加1000ml所述的畜禽用复合维生素免疫多糖纳米微乳液。
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