CN104058946B - 具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用 - Google Patents

具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN104058946B
CN104058946B CN201410307818.8A CN201410307818A CN104058946B CN 104058946 B CN104058946 B CN 104058946B CN 201410307818 A CN201410307818 A CN 201410307818A CN 104058946 B CN104058946 B CN 104058946B
Authority
CN
China
Prior art keywords
emodin
metal complex
transition metal
rheum emodin
tumor activity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410307818.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104058946A (zh
Inventor
谭君
王伯初
杨李
祝连彩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing University
Chongqing University of Education
Original Assignee
Chongqing University
Chongqing University of Education
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing University, Chongqing University of Education filed Critical Chongqing University
Priority to CN201410307818.8A priority Critical patent/CN104058946B/zh
Publication of CN104058946A publication Critical patent/CN104058946A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104058946B publication Critical patent/CN104058946B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C50/00—Quinones
    • C07C50/26—Quinones containing groups having oxygen atoms singly bound to carbon atoms
    • C07C50/34—Quinones containing groups having oxygen atoms singly bound to carbon atoms the quinoid structure being part of a condensed ring system having three rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C46/00—Preparation of quinones

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开一种具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物及其制备方法。本发明的大黄素过渡金属配合物，其化学式为M(II)(Emodin)2(H2O)2(Emodin＝1,3,8‑三羟基‑6‑甲基‑9,10‑蒽；M＝Mn、Cr、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Mg、Ca、Pb)，是由大黄素和过渡金属为原料，经过加热回流反应后过滤、洗涤、干燥等步骤制备而成，配合物分子结构稳定，合成方法简单。大黄素过渡金属配合物对HepG2、Hela、MCF‑7、MDA‑MB‑231、F10‑B16等肿瘤细胞增殖具有很强的抑制能力，优于临床广泛应用的顺铂药物。大黄素过渡金属配合物作为抗肿瘤药物将具有极大的应用潜力。

Description

具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其 应用
技术领域
本发明涉及抗肿瘤新型小分子化合物领域，具体涉及一种新型大黄素过渡金属配合物、制备方法和应用。
背景技术
近年来，癌症成为了继心脏病之后，世界第二高致死率的疾病，因此，癌症的治疗显得刻不容缓。在癌症治疗方法中，化学治疗法是一种重要的手段，可解决手术治疗和放射治疗无法解决的恶性肿瘤远程转移问题(Kostova I.Curr.Med.Chem.2006,13,1085-1107)。化疗药中的代表药物为顺铂，可用于治疗多种实体肿瘤，是目前全球销量最高的抗癌药物之一，但随着顺铂耳毒性、肾毒性、神经毒性以及获得耐药性等毒副作用的发现，使顺铂的临床用药受到限制(Goren MP,et al.Cancer Chemother.Pharmacol.1986,18,69-73；Alberts DS and Noel JK.Anti-cancer drugs,1995,6,369-383；Hamers F etal.Euro.J.Cancer Clin.Oncol.1991,27,372-376)。因此，研制新的具有抗肿瘤活性的金属配合物引起了人们的重视。大黄素(Emodin)，1,3,8-三羟基-6-甲基-9,10-蒽醌，为蓼科植物虎杖、大黄根及根茎的活性成分，主要用于治疗肝炎、骨髓炎，并具有抗菌、消炎、抗病毒、免疫抑制、血管舒张和利尿作用(Ding Y et al.Eur.J.Pharmacol.2008,590,377-386；Huang HC.Eur.J.Pharmacol.1991,205,289-94)。大黄素本身作为酪氨酸抑制剂，具有较弱的抗癌活性(Zhang L Oncogene,1998,16,2855-63)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用大黄素作为配体与过渡金属配合物合成一系列具有较高抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用。
本发明的一种具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物，其化学式为M(II)(Emodin)2·2H2O(Emodin＝1,3,8-三羟基-6-甲基-9,10-蒽醌；1,3,8-Trihydroxy-6-methyl-9,10-anthraquinone；M＝Mn、Cr、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Mg、Ca、Pb)
其结构式如通式(1)所示：
其中，M为Mn、Cr、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Mg、Ca、Pb二价金属离子中的一种。
本发明还公开一种具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物的制备方法，包括以下步骤：
a.以大黄素Emodin为起始原料，将大黄素Emodin与过渡金属无机盐以物质的量之比为1.5～2.5:1，在60℃下加热回流3～5小时；
b.用体积比为NH3·H2O：CH3OH溶液＝1:1调节反应溶液pH值至6～7，继续回流1～3小时，抽滤后再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，干燥得固体物质。
进一步，步骤a中，以大黄素Emodin为起始原料，将大黄素Emodin与过渡金属无机盐以物质的量之比为2:1，在60℃下加热回流4小时；
进一步，步骤b中，用体积比为NH3·H2O：CH3OH溶液＝1:1调节反应溶液pH值至6～7，继续回流3小时；
进一步，所述金属盐是二价锰、铬、铁、钴、镍、铜、锌、镁、钙、铅的氯化物、硫酸盐、醋酸盐、硝酸盐中的一种。
本发明还公开一种具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属在制备抗肿瘤活性药物中的应用。
本发明的一种抗肿瘤药物，含有权利要求1所述的大黄素过渡金属配合物作为有效成分以及药学上可接受的辅助剂。
本发明的有益效果：本发明的具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物，基于大黄素与金属离子具有良好的络合作用，并且具有化学稳定性好的特点，选其为配体，与过渡金属离子络合合成了大黄素过渡金属配合物。该金属配合物具有很好的热稳定性和化学稳定性。本发明所述的大黄素过渡金属配合物在体外对肝癌细胞HepG2，宫颈癌细胞Hela，乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231，以及黑色素瘤细胞F10-B16五种肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用，其IC50值比顺铂更低。该配合物可使肿瘤细胞生长周期停滞于G1期，使处于S期细胞数减少，降低了肿瘤细胞的繁殖能力，使早期凋亡细胞数增多，从而对肿瘤细胞产生了凋亡作用。所以大黄素过渡金属配合物可以作为新型的抗肿瘤药物。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的大黄素过渡金属配合物分子结构稳定，合成方法简单。两分子大黄素和一分子过渡金属的络合是蒽醌的平面共轭体系增加，更有利于配合物插入DNA碱基对，抑制DNA的复制。该配合物对HepG2、Hela、MCF-7、MDA-MB-231和F10-B16细胞增殖的抑制能力明显优于临床广泛应用的顺铂药物，且对正常细胞增殖的抑制比顺铂更低。大黄素过渡金属配合物作为抗肿瘤药物将具有极大的应用潜力。
附图说明
图1为大黄素过渡金属配合物抑制5种不同癌细胞增殖能力的IC50值；
图2为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞形态影响；
不同浓度Zn(II)(Emodin)2(H2O)2处理HepG2细胞48小时后，用倒置显微镜观察(×200)。A：0μmol/L；B：20μmol/L；C：40μmol/L；D：80μmol/L.
图3为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对MCF-7细胞形态影响；
不同浓度Zn(II)(Emodin)2(H2O)2处理MCF-7细胞48小时后，用倒置显微镜观察(×200)。A：0μmol/L；B：20μmol/L；C：40μmol/L；D：80μmol/L.
图4为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对MDA-MB-231细胞形态影响；
不同浓度Zn(II)(Emodin)2(H2O)2处理MDA-MB-231细胞48小时后，用倒置显微镜观察(×200)。A：0μmol/L；B：20μmol/L；C：40μmol/L；D：80μmol/L.
图5为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对Hela细胞形态影响。
不同浓度Zn(II)(Emodin)2(H2O)2处理Hela细胞48小时后，用倒置显微镜观察(×200)。A：0μmol/L；B：20μmol/L；C：40μmol/L；D：80μmol/L.
图6为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对F10-B16细胞形态影响。
不同浓度Zn(II)(Emodin)2(H2O)2处理F10-B16细胞48小时后，用倒置显微镜观察(×200)。A：0μmol/L；B：20μmol/L；C：40μmol/L；D：80μmol/L.
图7为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞生长周期的影响。
图8为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对Hela细胞生长周期的影响。
图9为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对MCF-7细胞生长周期的影响。
图10为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对F10-B16细胞生长周期的影响。
图11为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞的流式细胞术分析图谱及对四种肿瘤细胞的早期凋亡细胞百分率
图12为Co(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞的流式细胞术分析图谱及对四种肿瘤细胞的早期凋亡细胞百分率
图13为Cu(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞的流式细胞术分析图谱及对四种肿瘤细胞的早期凋亡细胞百分率
图14为Ni(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞的流式细胞术分析图谱及对四种肿瘤细胞的早期凋亡细胞百分率
图15为Mn(II)(Emodin)2(H2O)2对Hep G2细胞的流式细胞术分析图谱及对四种肿瘤细胞的早期凋亡细胞百分率
图16为在DNA-EB复合体系中加入大黄素Emodin及其五种金属配合物对DNA-EB复合体系荧光强度的影响。
图17为大黄素Emodin及其五种金属配合物对DNA–EB复合体系的淬灭常数曲线。
具体实施方式
实施例一
Zn(II)(Emodin)2(H2O)2的合成：
精确称取2mmol大黄素Emodin和1mmol的ZnCl2，分别加入适量甲醇溶解，两者混合反应，在60℃下加热回流4小时，用NH3·H2O：CH3OH溶液(V:V＝1:1)调节反应溶液pH值至6–7，此时溶液浑浊，有红棕色沉淀生成，继续回流3h，抽滤，再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，最后真空干燥24h(产率75％)。
产品鉴定数据：
1)元素分析：结果如下表1所示
表1
元素 实验值/％ 理论值/％
C 56.08±0.65 56.34
H 3.47±0.34 3.44
N 0.17±0.05 0
Zn 10.15±0.27 10.17
2)1H-NMR(DMSO-d6)：2.49、6.81、7.32、7.38、7.66、11.65、12.23ppm
3)13C-NMR：21.43、107.79、108.69、108.76、113.15、120.33、123.98、132.59、134.88、148.11、160.91、166.36、165.47、181.03、193.52ppm
4)IR(KBR)：3436、1617、1267、1223、1171、585cm-1
实施例二
Co(II)(Emodin)2(H2O)2的合成：
精确称取2mmol大黄素Emodin和1mmol的CoCl2·2H2O，分别加入适量甲醇溶解，两者混合反应，在60℃下加热回流4小时，用NH3·H2O：CH3OH溶液(V:V＝1:1)调节反应溶液pH值至5–6，此时溶液浑浊，有红棕色沉淀生成，继续回流3h，抽滤，再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，最后真空干燥24h(产率74％)。
产品鉴定数据：
1)元素分析：结果如下表2所示
表2
元素 实验值/％ 理论值/％
C 56.78±0.39 56.87
H 3.55±0.34 3.48
N 0.13±0.08 0
Co 9.45±0.33 9.32
2)1H-NMR(DMSO-d6)：2.36、6.45、6.92、6.96、7.43、11.89、12.44ppm
3)13C-NMR：21.46、107.80、108.87、108.96、113.50、120.37、124.18、132.50、134.88、148.03、160.65、166.54、165.51、181.00、192.12ppm
4)IR(KBR)：3436、1617、1268、1223、1173、586cm-1
实施例三
Cu(II)(Emodin)2(H2O)2的合成：
精确称取2mmol大黄素Emodin和1mmol的CuCl2·2H2O，分别加入适量甲醇溶解，两者混合反应，在60℃下加热回流4小时，用NH3·H2O：CH3OH溶液(V:V＝1:1)调节反应溶液pH值至5–6，此时溶液浑浊，有红棕色沉淀生成，继续回流3h，抽滤，再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，最后真空干燥24h(产率74％)。
产品鉴定数据：
1)元素分析：结果如下表3所示
表3
元素 实验值/％ 理论值/％
C 56.28±0.55 56.43
H 3.57±0.43 3.45
N 0.12±0.02 0
Cu 9.97±0.27 10.03
2)1H-NMR(DMSO-d6)：2.35、6.20、6.78、6.89、7.29、12.16、12.65ppm
3)13C-NMR：21.45、107.74、108.67、108.68、113.44、120.41、123.88、132.44、134.98、148.12、160.51、166.14、165.48、181.02、193.55ppm
4)IR(KBR)：3413、1615、1286、1223、1172、539cm-1
实施例四
Ni(II)(Emodin)2(H2O)2的合成：
精确称取2mmol大黄素Emodin和1mmol的NiCl2·6H2O，分别加入适量甲醇溶解，两者混合反应，在60℃下加热回流4小时，用NH3·H2O：CH3OH溶液(V:V＝1:1)调节反应溶液pH值至5–6，此时溶液浑浊，有红棕色沉淀生成，继续回流3h，抽滤，再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，最后真空干燥24h(产率74％)。
产品鉴定数据：
1)元素分析：结果如下表4所示
表4
元素 实验值/％ 理论值/％
C 55.87±0.24 56.69
H 3.33±0.41 3.46
N 0.24±0.07 0
Ni 9.19±0.30 9.32
2)1H-NMR(DMSO-d6)：2.34、6.22、6.81、6.89、7.27、12.13、12.62ppm
3)13C-NMR：21.43、107.79、108.69、108.73、113.14、120.32、123.99、132.57、134.46、148.15、160.45、166.24、165.91、181.01、194.16ppm
4)IR(KBR)：3437、1619、1269、1218、1166、534cm-1
实施例五
Mn(II)(Emodin)2(H2O)2的合成：
精确称取2mmol大黄素Emodin和1mmol的MnCl2·4H2O，分别加入适量甲醇溶解，两者混合反应，在60℃下加热回流4小时，用NH3·H2O：CH3OH溶液(V:V＝1:1)调节反应溶液pH值至5–6，此时溶液浑浊，有红棕色沉淀生成，继续回流3h，抽滤，再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，最后真空干燥24h(产率74％)。
产品鉴定数据：
1)元素分析：结果如下表5所示
表5
元素 实验值/％ 理论值/％
C 56.87±0.65 57.23
H 3.53±0.37 3.50
N 0.44±0.03 0
Mn 8.75±0.27 8.74
2)1H-NMR(DMSO-d6)：2.34、6.23、6.79、6.86、7.29、12.09、12.57ppm
3)13C-NMR：21.44、107.81、108.66、108.78、113.25、120.33、123.99、132.55、134.86、148.10、161.11、166.38、165.47、181.04、194.02ppm
4)IR(KBR)：3427、1618、1271、1215、1162、529cm-1
实施例六
大黄素金属配合物合成条件的优化
将大黄素Emodin与过渡金属无机盐以不同的物质的量之比为1.5:1，2:1，2.5:1，在60℃下加热回流3，4，5小时；然后用体积比为NH3·H2O:CH3OH溶液＝0.8～1:1调节反应溶液pH值至6～7，继续回流2，3，4小时，抽滤后再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，干燥得固体物质。
以Zn(II)(Emodin)2(H2O)2合成为例，设置三因素三水平正交试验，见下表6。
表6
实验安排与实验结果见下表7
表7
根据实验结果，比较各因素水平值可知，大黄素过渡金属配合物合成最佳条件组合为A2B2C3，即大黄素和金属盐物质的量之比为2:1，加热回流时间1为4h，加热回流时间2为3h。
实施例七
MTT体外细胞毒性分析实验
取对数生长期的五种人肿瘤细胞(肝癌Hep G2、宫颈癌HeLa、乳腺癌MCF–7和MDA–MB–231以及黑色素瘤F10–B16)，胰酶-EDTA消化分离，用含10％新生小牛血清的RPMI-1640培养液调整细胞密度为4.0×104个/mL，每孔150μL加入96孔培养板内，置于培养箱37℃，5％CO2培养24h。按血清饥饿方法将细胞进行同步化处理，设空白组、正常对照组和加药实验组(空白组除不加细胞和药物外，正常对照组不加药物外其余均与加药实验组同样处理)，每孔加入一定浓度梯度的药物，每个浓度梯度设4个复孔，以大黄素和顺铂作为阳性对照组，分别培养24h、48h、72h，培养终止前4h加入MTT(5mg·L-1)每孔20μL，37℃孵育。终止时弃上清后每孔加入150μL二甲基亚砜，振荡混匀10min，使结晶物充分溶解后，在酶标仪(波长490nm)上测各孔的吸光度值(OD)值，重复3次，计算细胞生长抑制率，根据抑制率计算出药物对肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50。结果如下表8和附图1：
表8
从表8和附图1可以看出，五种大黄素金属配合物对肿瘤细胞Hep G2，HeLa，MCF–7，F10–B16和MDA–MB–231的生长有明显的抑制作用，且抗肿瘤细胞增殖能力优于大黄素和顺铂，具有潜在的抗癌药用价值。
实施例八
大黄素过渡金属配合物对肿瘤细胞生长形态的影响
胰酶消化对数生长期的贴壁肿瘤细胞F10–B16、Hep G2、MCF–7和HeLa，用RPMI–1640完全培养液调整细胞密度，制成5.0×106个·mL-1的单细胞悬液，MDA–MB–231细胞用DMEM高糖完全培养基处理。将细胞悬液接种于24孔板中，每孔1mL，于37℃，5％CO2饱和湿度条件下，静置培养。24h后，将培养液小心吸出，用PBS清洗后，然后设置空白对照组和加药实验组，空白组中使用完全培养基正常培养，而加药实验组中分别加入含大黄素金属配合物的完全培养液，并调整配合物浓度为20，40，80μmol/L，置于37℃，5％CO2饱和湿度培养箱中共同培养。48h后，在倒置显微镜(200×)下观察肿瘤细胞形态，并拍照。结果见附图2～附图6。由图可以看出，加入大黄素金属配合物后，随着药物浓度及作用时间的增加，贴壁细胞随之减少，悬浮细胞数量随之增多，细胞发生收缩、体积变小的现象，细胞膜出现了多个突起，变圆、变亮细胞也随浓度和时间的增加而增多。作用48h后，80μmol/L作用浓度下的肿瘤细胞基本悬浮于培养液中，而空白对照组中的细胞生长正常，无悬浮细胞产生。
实施例九
流式细胞术检测大黄素过渡金属配合物对肿瘤细胞生长周期的影响以及对肿瘤细胞的诱导凋亡作用
胰酶消化对数生长期的贴壁肿瘤细胞F10–B16、Hep G2、MCF–7和HeLa，用RPMI–1640完全培养液调整细胞密度为5.0×105个·mL-1，接种于6孔板中，每孔3mL，于37℃，5％CO2饱和湿度条件下培养。24h后，将培养液小心吸出，用PBS清洗后，设空白对照组和加药实验组，空白对照组加入不含药物的等量完全培养液，实验组加入含大黄素金属配合物的完全培养基，使配合物终浓度为20，40，80μmol/L，细胞培养24h。然后，用0.25％胰酶(不含EDTA)消化贴壁生长细胞，用PBS(pH7.4)缓冲液轻柔吹打细胞，并收集于EP管中，1000rpm离心10min，再用PBS洗二次，转入2mL EP管中。
(1)转速为1000rpm，离心5min，弃PBS后，加入4℃预冷的70％乙醇，混匀后于4℃固定。12h后。离心弃固定液，加入PBS重悬，加入RNA酶A孵育30min后，900rpm离心5min弃去上层清液，加入200μL PBS，摇匀后加入5μL PI染液，避光放置30min。用流式细胞仪检测细胞周期分布。结果见附图7～附图10。结果表明，大黄素金属配合物作用于肿瘤细胞后，处于S期的细胞数量随浓度增加而大幅降低，而G1期细胞所占百分比随之增多，G2期细胞数量无较大变化。因此大黄素金属配合物可使肿瘤细胞被阻滞于G1期，阻止细胞生长周期由G1期向S期和G2期移行，使生长周期延长，降低了肿瘤细胞的增殖速率，而且S期细胞的减少，也使肿瘤细胞的增殖能力降低，抑制肿瘤细胞生长。
(2)转速为1000rpm，离心5min后，弃PBS液，加入400μL Annexin V结合液重悬细胞后，加入5μL Annexin V–FITC染色液，轻轻混匀后于4℃避光条件下孵育15min，再加入10μLPI染色液，轻轻混匀后于4℃避光条件下孵育5min。立即检测细胞凋亡情况，结果见附图11～附图15。结果表明，五种大黄素金属配合物都引起了癌细胞凋亡现象的产生，随着金属配合物加药浓度的增加，四种肿瘤细胞中的早期凋亡细胞百分率随之增加，表现为浓度依赖性。
五种大黄素金属配合物对肿瘤细胞生长周期的影响以及诱导凋亡的结果，说明配合物均可使肿瘤细胞生长周期被阻滞于G1期，延长细胞周期，减慢肿瘤细胞的生长速度，同时对肿瘤细胞还产生凋亡作用，有成为潜在抗肿瘤药物的可能。
实施例十
金属配合物对DNA-EB复合体系荧光光谱的影响
将CT–DNA溶于适量缓冲液中，定容至50.0mL，制成浓度为1.1×10-5mol/L的溶液，并加入适量EB溶液，使CDNA/CEB＝20，避光反应2h后，在Ex＝500nm，Em＝530–700nm，Ex，Emslit＝10nm，PMT Voltage：700V的实验条件下，测定DNA–EB混合溶液的荧光强度F0，然后向溶液中分别加入浓度为4.0×10-3mol/L的大黄素及浓度为2.0×10-5mol/L大黄素金属配合物溶液(5μL/次)，测定Emodin及五种金属配合物溶液的加入对DNA–EB复合体系荧光光谱图的影响，并记录荧光强度F。结果见附图16，大黄素及其五种金属配合物可产生于EB类似的与DNA结合的方式，可竞争性地将EB从复合体系中置换出来，使复合体系的荧光强度降低。因此大黄素及其五种金属配合物以插入的方式与DNA结合。
根据经典动态淬灭Stern–Volmer方程：
F0/F＝1+Kq[Q]
当温度一定时，未加入淬灭剂时溶液的荧光强度F0与加入淬灭剂时溶液的荧光强度F的比值F0/F与淬灭剂浓度[Q]呈线性关系，以两者作图，得一条截距为1，斜率为Stern–Volmer动态淬灭常数Kq的直线。结果见附图17。可以看出，大黄素金属配合物与CT–DNA的结合能力均强于Emodin本身，而且配合物之间在结合力方面也存在差异，结合力强弱顺序为Zn(II)(Emodin)2(H2O)2>Ni(II)(Emodin)2(H2O)2>Cu(II)(Emodin)2(H2O)2>Co(II)(Emodin)2(H2O)2>Mn(II)(Emodin)2(H2O)2>大黄素。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (7)

1.一种具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物，其特征在于：其结构式如通式(1)所示：
其中，M为Mn、Co、Ni、Cu、Zn二价金属离子中的一种。
2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
a.以大黄素Emodin为起始原料，将大黄素Emodin与过渡金属无机盐以物质的量之比为1.5～2.5:1，在60℃下加热回流3～5小时；
b.用体积比为NH3·H2O：CH3OH溶液＝1:1调节反应溶液pH值至6～7，继续回流1～3小时，抽滤后再分别用乙酸乙酯、甲醇洗涤沉淀，干燥得固体物质。
3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物的制备方法，其特征在于：步骤a中，以大黄素Emodin为起始原料，将大黄素Emodin与过渡金属无机盐以物质的量之比为2:1，在60℃下加热回流4小时。
4.根据权利要求3所述的具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物的制备方法，其特征在于：步骤b中，用体积比为NH3·H2O：CH3OH溶液＝1:1调节反应溶液pH值至6～7，继续回流3小时。
5.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物的制备方法，其特征在于：所述金属盐是二价锰、钴、镍、铜、锌的氯化物、硫酸盐、醋酸盐、硝酸盐中的一种。
6.一种权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属在制备抗肿瘤活性药物中的应用。
7.一种抗肿瘤药物，其特征在于：含有权利要求1所述的大黄素过渡金属配合物作为有效成分以及药学上可接受的辅助剂。
CN201410307818.8A 2014-06-30 2014-06-30 具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用 Expired - Fee Related CN104058946B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410307818.8A CN104058946B (zh) 2014-06-30 2014-06-30 具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410307818.8A CN104058946B (zh) 2014-06-30 2014-06-30 具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104058946A CN104058946A (zh) 2014-09-24
CN104058946B true CN104058946B (zh) 2017-02-08

Family

ID=51546920

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410307818.8A Expired - Fee Related CN104058946B (zh) 2014-06-30 2014-06-30 具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104058946B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111494226B (zh) * 2020-04-29 2021-09-24 广州中医药大学(广州中医药研究院) 一种铜@大黄蒽醌金属有机框架复合物及其应用
CN114105752A (zh) * 2021-11-03 2022-03-01 黑龙江中医药大学 一种cyp1b1抑制剂及其应用
CN115850062B (zh) * 2022-12-08 2024-08-09 哈尔滨商业大学 大黄酸-镨配合物及其合成方法与应用

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1233612C (zh) * 2003-12-05 2005-12-28 中山大学 羟基蒽醌类衍生物及其在制备抗癌药物中的应用
JP2011522822A (ja) * 2008-06-06 2011-08-04 バイオノボ・インコーポレーテッド エストロゲン受容体β媒介性病状の治療のためのダイオウ（Ｒｈｅｕｍｐａｌｍａｔｕｍ）由来のアントラキノンおよび類似体
GB0817528D0 (en) * 2008-09-24 2008-10-29 Syntavit As Process
CN102249941A (zh) * 2011-05-24 2011-11-23 福州大学 一种具有抗癌活性的单羟基二正癸基大黄素季铵盐
CN102614158A (zh) * 2012-03-13 2012-08-01 福州大学 一种具有抗癌活性的大黄素衍生物及其制备方法
CN102746173A (zh) * 2012-06-25 2012-10-24 河南大学 大黄素衍生物及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN104058946A (zh) 2014-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104058946B (zh) 具有抗肿瘤活性的大黄素过渡金属配合物、制备方法及其应用
CN108358973A (zh) 萘酰亚胺四价铂类化合物、制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN107400146A (zh) 一种抗肿瘤金属铱(ⅲ)配合物及其制备方法和应用
CN102286047A (zh) 2’-脱氧-2’-氟-4’-三氮唑取代-β-D胞苷类似物、其制备方法及其应用
CN108774270A (zh) 靶向于人肺癌耐药细胞的索拉非尼抗肿瘤铂(ii)配合物及其制备方法与应用
CN107629089A (zh) 高活性的他克林‑铂(ii)配合物及其合成方法和应用
CN104910196B (zh) 一种手性四核铜基有机金属框架及其制备方法和应用
CN102397398A (zh) 一种逆转肿瘤多药耐药的中药组合物及其制备方法和应用
CN102688493A (zh) 含有白藜芦醇及白藜芦醇类衍生物和Bc1-2抑制剂的药物组合物及其应用
CN102688489B (zh) 含有雷公藤甲素及雷公藤甲素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物及其应用
CN105399794B (zh) 罗汉果三萜皂甙及其盐和其制备方法、应用及包含该罗汉果三萜皂甙及其盐的药物组合物
CN101747353A (zh) N′-(3-硝基苯甲酰基)-n-水杨酰肼合铜配合物及其制法与用途
CN102688228B (zh) 含有芹菜素及芹菜素类衍生物和冬凌草甲素及冬凌草甲素类衍生物的药物组合物及其应用
CN108690090A (zh) 一种钌的Schiff碱配合物的制备方法及其抗肿瘤的应用
CN103463643B (zh) 人血清白蛋白-钌无机药物复合物的制备及其应用
CN108383880A (zh) 靶向于卵巢癌耐药株的香豆素-铂(ii)配合物及其合成方法与应用
CN107312023B (zh) 吡啶-苯并咪唑基多核配合物的合成方法及应用
CN103919850B (zh) 一种药物组合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN107501303A (zh) 一种布洛芬与喹啉‑8‑甲醛席夫碱构筑的铜(ii)配合物及其合成方法和应用
CN109705158B (zh) 一种独立双中心Ag配合物及其制备方法和抗癌活性评价
CN108017608A (zh) 一类黄酮衍生物及其制备方法和用途
CN103463641B (zh) 人血清白蛋白-钌无机药物复合物的制备及其应用
CN102688490B (zh) 含有吴茱萸碱及吴茱萸碱类衍生物和Bc1-2抑制剂的药物组合物及其应用
CN109053816A (zh) 一种钌的Schiff碱配合物的制备方法及其抗肿瘤的应用
CN105147844B (zh) 一种具有抗胃癌作用的组合物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20170208

Termination date: 20180630

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee